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利用三维根端牙乳头干细胞聚合体和牙本质基质片段再生复杂牙髓组织的研究

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利用三维根端牙乳头干细胞聚合体和牙本质基质片段再生复杂牙髓组...

作者：那思家佳木斯大学

学位级别：硕士

牙髓是一种软的结缔组织并具有形成牙本质和维持牙本质的生物学和生理学活性的功能。当牙髓组织感染时,由于血供的不足很难通过机体本身消除感染。临床上常采用根管治疗去除整个牙髓,消毒并充填根管,从而达到去除感染的目的。然而,这些... 详细信息

牙髓是一种软的结缔组织并具有形成牙本质和维持牙本质的生物学和生理学活性的功能。当牙髓组织感染时,由于血供的不足很难通过机体本身消除感染。临床上常采用根管治疗去除整个牙髓,消毒并充填根管,从而达到去除感染的目的。然而,这些牙齿失去了营养、修复、防御等功能,影响了牙齿的长期存活率。因此,活髓治疗牙髓炎成为了理想的策略。牙髓牙本质复合体再生已成为国内国际口腔医学研究的热点。近年来,利用干细胞和组织工程技术在各个领域的成功运行为实现含牙髓组织再生提供了借鉴。种子细胞、诱导微环境和生物支架材料是运用组织工程构建器官及组织再生的三大要素。目前已经有一些牙髓组织再生的报道,但接近于正常牙根长度的、完整的、具有继续矿化能力的牙髓牙本质复合体的再生仍然没有实现。其根本原因在于缺乏理想的种子细胞、诱导微环境及生物支架材料。基于上述研究背景,本课题1)探索理想的种子细胞;2)新颖的三维干细胞聚合体的构建;3)进行牙髓牙本质复合体再生。所取得的主要研究结果如下: 1、理想的种子细胞的筛选为了评估最佳的种子细胞是否能进行牙髓牙本质复合体再生,我们利用茜红染色。油红O染色、免疫细胞化学染色技术（ICC）、流式细胞术（FCM）从形态学、蛋白及CD分子表型检测牙源性干细胞多向分化潜能进行研究,利用单克隆扩增技术及甲苯胺蓝染色对这些细胞克隆形成能力进行检测,利用MTT及FCM对牙髓干细胞（DPSCs）、根端牙乳头干细胞（SCAP）增值能力进行分析。结果发现:根端牙乳头干细胞具有更高的增值能力和多向分化能力。因此,SCAP可以作为种子细胞有助于牙髓牙本质复合体的成功再生。 2、新颖三维无支架材料干细胞聚合体的构建为了获得适合理想的无支架材料的细胞聚合体,我们对常用的细胞膜片、细胞聚合体进行对比、改进,并进行组织学观察、免疫组织化学观察、扫面电镜观察及RT-PCR检测。结果发现:细胞聚合体内含有大量的细胞外基质、足够的细胞量,其表面细胞伸张充分,细胞连接紧密,此外基因水平发现细胞聚合体较细胞膜片的成牙/成骨能力更强。本研究结果充分说明细胞聚合体更适合牙髓牙本质复合体的再生。3、牙髓牙本质复合体再生本实验室郭维华博士对乙二胺四乙酸（EDTA）梯度脱矿处理的牙本质基质进行了系统的检测发现其不仅具有支撑细胞的作用,还能提供一个诱导成牙本质微环境,并利用处理过的牙本质基质片段成功诱导牙囊细胞成为具有继续矿化能力的成牙本质细胞,完整的牙髓。因此,我们应用处理后的牙根结合SCAP细胞聚合体移植入裸鼠皮下,六周后取材,脱矿。HE和Masson三色观察、免疫组织化学染色。研究结果显示根管管壁有一层新形成的、厚度均匀的牙本质并且其表面排列着一层极性变化的、对牙本质涎蛋白（DSP）、骨涎蛋白（BSP）、碱性磷酸酶（ALP）、人线粒体表达呈阳性成牙本质细胞层,以及血管化的固有牙髓。

关键词：牙本质基质根端牙乳头干细胞细胞膜片细胞聚合体牙髓牙本质复合体

乳牙牙髓间充质细胞聚合体用于年轻恒牙全脱位后延迟再植的临床转化应用研究

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乳牙牙髓间充质细胞聚合体用于年轻恒牙全脱位后延迟再植的临床转...

作者：王玉睿第四军医大学

学位级别：硕士

牙齿全脱位后实施延迟再植术预后极差,通常情况下,牙髓组织坏死,牙周组织被吸收,牙齿发生根骨粘连。再生医学近年来逐渐兴起,科学家们已通过组织工程的方法在动物模型上分别成功再生出牙髓组织与牙周组织。然而对于完全脱位牙,如何实现... 详细信息

牙齿全脱位后实施延迟再植术预后极差,通常情况下,牙髓组织坏死,牙周组织被吸收,牙齿发生根骨粘连。再生医学近年来逐渐兴起,科学家们已通过组织工程的方法在动物模型上分别成功再生出牙髓组织与牙周组织。然而对于完全脱位牙,如何实现牙髓与牙周组织的同时再生与重建尚未见研究及报道。乳牙牙髓干细胞(SHED)是一种幼稚的间充质干细胞,具有良好的增殖能力与多向分化潜能,是牙齿组织再生优良的种子细胞。前期实验中,我们在裸鼠移植实验及小型猪牙髓坏死模型上,利用SHED聚合体已经获得了与生理牙髓组织结构相似的再生牙髓组织。目前牙周组织再生多用PDLSC作为种子细胞,有研究显示在再植牙动物模型上,利用PDLSC膜片包裹牙根表面后再植可以实现牙周组织的再生。而SHED具有比PDLSC更强大的分化潜能,在特定微环境诱导下可以分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、神经元样细胞、肝细胞、成牙本质细胞,但目前尚未见SHED用于牙周组织再生的报道。本研究拟通过乳牙牙髓干细胞及其聚合体的生物学性能检测和动物模型实验明确其用于牙髓-牙周组织联合再生的可行性,进而开展临床前瞻性试验,探讨乳牙牙髓间充质细胞聚合体应用于年轻恒牙全脱位后延迟再植的效果,以期为儿童牙体牙髓疾病治疗提供新的治疗理念和策略,并为SHED的临床应用提供理论依据和实验基础。第一部分乳牙牙髓干细胞及其聚合体生物学性能的实验研究目的:检测人类乳牙牙髓干细胞及其聚合体的生物学性能。方法:分离并培养shed,检测其分子表面标记、克隆形成能力、增殖能力、成骨与成脂分化能力;制作shed聚合体,通过he、masson染色检测其生物学性能。结果:shed阳性表达间充质细胞表面标志stro-1、cd90、cd105、cd146,而阴性表达造血系来源标志物cd34、cd45。shed有较强的克隆形成能力、增殖能力、成骨与成脂分化能力。制备的shed聚合体he染色显示含有较多的未分化细胞以及丰富的细胞外基质;masson染色可见交联呈网状结构的胶原纤维。结论:shed及其聚合体具有良好的生物学性能,是牙齿组织再生理想的种子细胞。第二部分自体乳牙牙髓干细胞聚合体用于牙髓牙周联合再生的动物学实验目的:首次将自体乳牙牙髓干细胞聚合体应用于比格犬全脱位牙再植治疗,探讨牙髓牙周组织联合再生的可行性。方法:分离并培养比格犬乳牙牙髓干细胞,制作细胞聚合体;建立比格犬牙全脱位模型,设置实验组即再生组、阴性对照即常规处理组;再生组将自体乳牙牙髓干细胞聚合体植入脱位牙根管内并包裹牙根表面,常规处理组进行常规牙根表面处理后根管充填氢氧化钙制剂,然后将两组牙齿再植固定1个月;6个月后取材,进行micro-ct扫描,最后脱矿完成后进行组织学检查。结果:micro-ct扫描结果显示,实验组根管壁、牙根表面光滑无吸收,牙周膜腔与硬骨板清晰;对照组根管内显示大量的高密度钙化影像,牙根与牙槽骨分界不清,部分区域出现替代性吸收和炎性吸收,根端有不规则钙化物。he染色结果显示实验组根管内壁成牙本质细胞排列整齐,毛细血管分布均匀,牙骨质表面含有牙骨质细胞,牙根表面胶原纤维均匀排列;对照组牙根表面可见炎性组织、陷窝以及替代性吸收,根尖端出现钙化结节与炎性肉芽组织混杂结构。结论:自体乳牙牙髓干细胞聚合体可以在动物模型上实现牙髓与牙周组织的重建,再生的组织具有正常的组织学形态,其中包含牙髓-牙本质复合体、新生细胞性牙骨质和牙周胶原纤维束等结构。第三部分乳牙牙髓间充质细胞聚合体用于全脱位年轻恒牙延迟再植的初步临床试验目的:首次将SHED聚合体应用于临床年轻恒牙全脱位后延迟再植的病例,探讨其牙髓牙周联合再生的效果。方法:按照纳入标准及排除标准选择合适的病例,初诊时,两组病例均常规清理患牙牙根并向根管内充填氢氧化钙制剂,然后复位固定。实验组取患儿乳牙牙髓,分离并培养SHED,制作细胞聚合体;对照组患儿不做该项处理。1月后患儿复诊,取出实验组患牙,清理根管,将SHED聚合体植入根管内并包裹牙根表面,再植固定;对照组患儿不做该项处理。术后1年内定期复查,分别拍摄口内照片、X线片、CBCT,并进行多普勒血流检测、牙髓电活力测试、牙周检查等。结果:实验组临床检查牙冠颜色微黄透明,有光泽,多普勒血流测试结果、牙髓电活力测试结果、龈袋深度、松动度均与正常牙齿无明显差异,患牙与邻牙高度相近;影像学结果显示根管壁增厚,牙周膜腔与硬骨板清晰。对照组牙齿呈灰黄色,无光泽,多普勒血流测试结果为阴性,牙髓电活力测试结果为阴性,松动度逐渐丧失,龈袋深度与正常牙齿相同,牙齿逐渐低于合平面;影像学结果显示根管内高密度影像,牙根可见根骨粘连。结论:SHED聚合体应用于临床脱位牙延迟再植可以重建患牙的形态结构并恢复其生理功能。

关键词：乳牙牙髓干细胞细胞聚合体牙髓再生牙周再生

脱落乳牙牙髓干细胞聚合体用于牙髓再生的实验研究

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脱落乳牙牙髓干细胞聚合体用于牙髓再生的实验研究

作者：郭皓第四军医大学

学位级别：硕士

牙髓再生是现今研究的热点,最主要的研究方法是基于组织工程原理,利用间充质干细胞结合生物支架材料进行异位和原位的组织重建。目前实验研究多数为前瞻性的组织学和动物模型探索,但至今尚未实现具有完整组织形态结构和良好生理功能的... 详细信息

牙髓再生是现今研究的热点,最主要的研究方法是基于组织工程原理,利用间充质干细胞结合生物支架材料进行异位和原位的组织重建。目前实验研究多数为前瞻性的组织学和动物模型探索,但至今尚未实现具有完整组织形态结构和良好生理功能的牙髓再生。此外由于间充质干细胞的应用方式和生物支架的材料性能存在伦理学限制和生物安全性验证,要进行临床试验应用仍需进一步深入研究。要真正实现具有生理功能性牙髓再生的临床应用,种子细胞的来源、支架材料的选择以及有效的诱导微环境是亟待解决的关键问题。脱落乳牙牙髓干细胞(SHED)是源于脱落器官的一类处于发育早期的牙源性干细胞,具有良好的生物学性能,包括较高的增殖能力、更为广泛的多向分化能力、以及良好的免疫调控能力;并且其临床来源也更为广泛,便于自体的组织再生应用。此外近年来出现的细胞聚合体(aggregate)是一种先进的组织工程学技术,其不但可以保持干细胞活性,拥有良好性能的生物支架-自分泌的细胞间基质,而且富含细胞生长和分化所需的诱导因子。本研究拟通过乳牙牙髓干细胞聚合体的生物学性能检测、牙髓牙本质复合体组织再生实验,明确其用于全牙根牙髓再生的可行性,进而利用动物模型的治疗实验,探讨乳牙牙髓干细胞聚合体治疗年轻恒牙牙髓坏死的效果,以期为儿童牙体牙髓疾病治疗提供新的治疗理念和策略,并为临床试验应用提供理论依据和实验基础。第一部分脱落乳牙牙髓干细胞聚合体生物学性能的实验研究目的:明确脱落乳牙牙髓干细胞及其聚合体的生物学性能。方法:分离和培养人类脱落乳牙的牙髓干细胞与恒牙牙髓干细胞(dpsc),检测并比较两者分子表面标记、克隆形成能力、增殖水平以及多向分化能力;进而诱导制备shed细胞聚合体,通过组织学、免疫组织化学方法检测其生物学性能。结果:脱落乳牙牙髓干细胞与牙髓干细胞均能够阳性表达间充质来源的表面标志stro-1,cd90和cd146,而造血系来源标志物cd34为阴性。shed细胞在克隆形成能力、增殖水平、成骨成脂分化能力方面均高于dpsc。制备的shed细胞聚合体厚度适中、质地坚韧;he染色观察shed细胞聚合体含有较多的未分化细胞以及丰富的细胞外基质;masson染色可见交联呈网状结构的胶原纤维。结论:乳牙牙髓干细胞及其聚合体具有良好的生物学性能,是一类理想的种子细胞和适宜的牙髓再生应用方式。第二部分乳牙牙髓干细胞聚合体构建牙髓牙本质复合体的实验研究目的:探索shed细胞聚合体用于组织工程构建牙髓-牙本质复合体的实验方法。方法:收集正畸拔除牙齿,根管清理并制备全长牙根组织支架;实验组根管内植入shed细胞聚合体,对照组根管内充填氢氧化钙糊剂,而后移植裸鼠皮下孵育,术后3月组织学取材;获取根管内的再生组织,细胞分离并培养,对其表面分子标记、克隆形成能力、增殖水平以及成骨成脂分化能力检测并与shed细胞进行对比;同时取材组织脱矿后利用he、免疫组化染色等方法评估异位再生情况。结果:组织学检查发现实验组的再生组织几乎充盈整个根管,类似正常牙髓组织,免疫组化染色可见组织中dspp、cd31、nestin均为阳性表达,也证明其具有继发性牙本质、成牙本质细胞层、血管及神经组织结构;再生组织细胞具有与shed细胞相同的表面分子标记,同时其克隆形成能力、增殖水平以及多向分化能力均与shed细胞相似;免疫荧光染色显示再生组织的大部分血管及神经源于shed细胞分化而来;而对照组根管内可见钙化团块及肉芽结缔组织的混杂结构。结论:shed细胞聚合体在牙根管内微环境中可以异位再生形成正常形态的牙髓-牙本质复合体结构。第三部分乳牙牙髓干细胞聚合体用于牙髓再生的动物学实验目的:利用动物实验模型检测小型猪(mini-pig)乳牙牙髓干细胞(SPED)细胞聚合体进行原位牙髓再生的应用效果。方法:分离和培养Mini-Pig的乳牙牙髓干细胞,检测和分析其细胞生物学行为,进而诱导制备SPED细胞聚合体;建立年轻恒牙牙髓坏死的实验动物模型,设置SPED聚合体再生组、传统根尖诱导成形治疗组和正常牙髓对照组;术后4月进行受试牙齿牙髓活力反应测试,而后常规组织学取材,利用HE、免疫组化、免疫荧光染色等方法观察牙髓再生和牙根尖形成情况。结果:放射学检查显示SPED聚合体再生组牙根继续发育,并且对机械刺激出现牙髓疼痛反应;组织学HE染色检测发现再生组受试牙齿牙根继续发育并形成正常的根尖形态,此外全长根管内可见类牙髓结构的再生组织;免疫组化和荧光染色可见组织中CD31、Nestin、CGRP、TRPV1、TRPM8表达阳性细胞的规则分布,与正常牙髓对照组类似;而传统根尖诱导成形治疗组仅在根端形成不规则圆钝的根尖结构,根管内未见牙髓组织形成。结论:SPED聚合体可以实现全长牙根的原位牙髓再生,再生组织不仅具有正常形态结构,而且具有牙本质形成、牙髓感觉、诱导牙根尖成

关键词：乳牙牙髓干细胞细胞聚合体牙本质牙髓复合体牙髓再生

Let-7a调控BMMSCs细胞聚合体修复颌骨缺损的初步研究

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Let-7a调控BMMSCs细胞聚合体修复颌骨缺损的初步研究

作者：陈萌重庆医科大学

学位级别：硕士

研究背景:肿瘤、外伤、感染、先天畸形等多种原因都可以导致颌骨缺损(Jaw defect),不仅对患者咀嚼、言语等功能造成不良影响,也有损颜面部美观,给患者心理以及社会适应造成障碍,目前临床上修复颌骨缺损主要的方式为骨移植,但效果欠佳、... 详细信息

研究背景:肿瘤、外伤、感染、先天畸形等多种原因都可以导致颌骨缺损(Jaw defect),不仅对患者咀嚼、言语等功能造成不良影响,也有损颜面部美观,给患者心理以及社会适应造成障碍,目前临床上修复颌骨缺损主要的方式为骨移植,但效果欠佳、骨量供不应求且副作用大。因此寻求更佳的修复方式迫在眉睫。Let-7a是micro RNA let-7家族中的一员,目前已得到广泛研究,研究显示其可调控BMMSCs的免疫调节功能,但国内外暂无其在调控干细胞成骨分化的报导。研究目的:本实验旨在探索let-7a是否可调控BMMSCs细胞聚合体的成骨分化并参与大鼠颌骨缺损后的修复作用。研究方法:***的培养和鉴定及细胞聚合体培养:BMMSCs从SD大鼠的骨髓腔中分离,在完全培养基中密度长至80-90%后传代,P3-P5细胞用于鉴定以及后续实验;鉴定包括流式鉴定细胞表面抗原、增殖能力、成脂成骨分化鉴定;细胞聚合体在加入维生素C完全培养基中培养7天后获得,进行大体及HE染色观察。***-7a对于BMMSCs细胞聚合体体外成骨分化能力的影响:分为三组(mi、in和nc),分别将一定浓度的let-7a mimic、inhibitor和negative control转染BMMSCs细胞聚合体,进行成骨诱导然后进行体外成骨分化的检测,如实时定量RT-PCR、Western blot检测成骨相关基因和蛋白表达、通过ALP染色和活性检测早期成骨分化情况,茜素红染色观察成骨分化晚期矿化结节的形成情况。***-7a对BMMSCs细胞聚合体裸鼠皮下异位成骨的调控作用:分为三组(mi、in和nc),将BMMSCs培养成细胞聚合体,同法2进行细胞转染,然后将聚合体与HA-TCP结合移植入裸鼠皮下,4w后取材固定,脱钙、切片进行HE染色后观察。***-7a调控BMMSCs细胞聚合体参与大鼠颌骨缺损修复:分为四组(mi、in、nc和blank control),将BMMSCs培养成细胞聚合体,同法2进行细胞转染,然后将聚合体与HA-TCP结合制成移植物备用。建立大鼠颌骨缺损模型,将移植物植入缺损区,其中blank control组不移植。在1w、4w、6w分别取材固定,进行micro-CT扫描后脱钙、切片染色后观察。研究结果:1.成功提取并完成BMMSCs的培养及鉴定;2.成功培养BMMSCs细胞聚合体;***-7a mimic、inhibitor和negative control转染BMMSCs聚合体后,组间比较Fas m RNA以及蛋白表达量,mi组最低、in组最高;组间比较let-7a的表达量,mi组较其他两组显著上升。提示转染成功且有效。4.转染后组间比较成骨相关基因表达,mi组OCN、OPG、RUNX2的m RNA水平显著上升,OSX、RUNX2蛋白水平显著上升;组间比较ALP染色和活性以及茜素红S染色,发现mi组ALP染色最深及活性最高,in染色最浅,活性最低,提示let-7a可促进体外早期成骨;mi组茜素红染色矿化结节最多,in组矿化结节最少。提示let-7a可促进体外晚期成骨。5.转染后组间比较细胞外基质相关基因表达,mi组Col-1、Fibronectin、Laminin m RNA表达显著上升,mi组Col-1蛋白表达显著增加,integrinβ1蛋白表达对比in组显著增加,提示let-7a促进胞外基质相关基因及蛋白表达水平表达;HE染色组间对比无显著差异,提示let-7a对BMMSCs细胞聚合体胞外基质无显著影响。***-7a转染BMMSCs聚合体后植入裸鼠皮下,HE染色组间对比,见mi组骨细胞及骨陷窝最多,新生类骨质形成最多,in组效果最少,差异显著;***-7a处理BMMSCs聚合体后修复大鼠颌骨缺损,Micro-CT和HE染色组间对比,mi组较其他三组修复完成度最高,在6w时基本完成修复,nc组其次,in组仅高于未植入移植物的blank control组,差异显著。研究结论:Let-7a可以促进BMMSCs细胞聚合体体内、外成骨,对细胞聚合体胞外基质相关基因在基因和蛋白水平有一定促进作用,并可以提升原位修复大鼠颌骨缺损的效果,但具体分子机制尚待进一步研究。

关键词： let-7a BMMSCs 成骨分化细胞聚合体颌骨缺损

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脱落乳牙牙髓干细胞聚合体再生牙髓实验研究

中国实用口腔科杂志 2016年第12期9卷 719-724页

作者：张宇郭皓何小宁轩昆李蓓军事口腔医学国家重点实验室第四军医大学口腔医学院组织工程研发中心陕西西安710032 兰州军区西安军职以上退休干部休养所陕西西安710061

目的利用动物实验模型证明使用小型猪脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from minipig exfoliated deciduous teeth,SPED)聚合体进行原位牙髓再生的可行性。方法分离和培养SPED,检测和分析其细胞生物学行为,进而诱导制备SPED聚合体;建立年... 详细信息

目的利用动物实验模型证明使用小型猪脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from minipig exfoliated deciduous teeth,SPED)聚合体进行原位牙髓再生的可行性。方法分离和培养SPED,检测和分析其细胞生物学行为,进而诱导制备SPED聚合体;建立年轻恒牙牙髓坏死的小型猪动物模型,设置SPED聚合体再生组和传统根尖诱导成形治疗组;术后4个月进行常规组织学取材,利用HE、免疫荧光染色等方法观察牙髓再生和牙根尖形成情况。结果 SPED聚合体再生组受试牙齿组织学HE染色检测发现,牙根继续发育并形成正常的根尖形态,此外全长根管内可见类牙髓结构的再生组织,免疫荧光染色可见组织中CGRP、TRPV1、TRPM8表达阳性细胞的规则分布;而传统根尖诱导成形治疗组受试牙齿仅在根管内形成不规则的钙化组织,未见牙髓组织形成。结论 SPED聚合体在小型猪体内可以实现牙髓再生,同时再生牙髓具有正常组织学形态,而且具有牙本质形成和诱导根尖形成的生理功能。

关键词：人脱落乳牙牙髓干细胞细胞聚合体牙髓再生

脱落乳牙牙髓干细胞与脐带间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤疗效比较

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实用口腔医学杂志 2019年第2期35卷 185-190页

作者：刘露张青翟启明刘安琪刘文佳金钫军事口腔医学国家重点实验室口腔疾病国家临床医学研究中心陕西省口腔疾病临床医学研究中心第四军医大学口腔医院正畸科西安710032 第四军医大学口腔医院口腔组织病理学教研室西安710032

目的:比较脱落乳牙牙髓干细胞(SHEDs)、脐带间充质干细胞(UCMSCs) 2种细胞聚合体治疗大鼠脊髓损伤的疗效。方法:制备SHEDs、UCMSCs细胞聚合体,比较其增殖能力、神经营养因子表达。取SD大鼠40只,其中8只去除T8-9椎体为假手术组(SHAM组);... 详细信息

目的:比较脱落乳牙牙髓干细胞(SHEDs)、脐带间充质干细胞(UCMSCs) 2种细胞聚合体治疗大鼠脊髓损伤的疗效。方法:制备SHEDs、UCMSCs细胞聚合体,比较其增殖能力、神经营养因子表达。取SD大鼠40只,其中8只去除T8-9椎体为假手术组(SHAM组); 32只建立大鼠脊髓全横断模型,随机分为阴性对照组(无治疗, SCI only组,n=8), SHEDs治疗组(n=12)和UCMSCs治疗组(n=12)。损伤后即刻治疗;每周用BBB评分法评定运动功能; 8周后取损伤区脊髓做HE染色观察修复情况。结果:SHEDs与UCMSCs比较,增殖较快(P聚合体可作为治疗大鼠脊髓损伤的新的有效疗法。

关键词：脱落乳牙牙髓干细胞(SHEDs) 脐带间充质干细胞(UCMSCs) 细胞聚合体脊髓损伤神经生长因子 BBB评分

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组织特异性间充质干细胞的牙周再生对比

口腔生物医学 2015年第3期6卷 150-154页

作者：朱斌赵喜聪李楠金岩第四军医大学组织工程与再生中心军事口腔医学国家重点实验室陕西西安710032 西藏军区总医院口腔科西藏拉萨850007

目的:对比不同特异性组织来源的间充质干细胞的牙周再生能力。方法:体外培养人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,h PDLSCs),人颌骨来源的骨髓间充质干细胞(human jaw-derived bone marrow-derived mesenchymal stem cells,h JBMMSCs)和人髂骨来源的骨髓间充质干细胞(human iliac-derived BMMSCs,h IBMMSCs),成骨诱导后进行成骨指标检测。间接共培养JBMMSCs/IBMMSCs与PDLSCs,通过RT-PCR检测成骨相关基因,观察组织特异性来源的细胞间交互作用。构建JBMMSCs/IBMMSCs+PDLSCs细胞聚合体(cell aggregates,CAs),检测成骨基因表达以及裸鼠皮下8 w异位牙周再生能力。结果:经成骨诱导,h JBMMSCs的成骨相关指标表达均显著高于h IBMMSCs和h PDLSCs(P细胞,是更合适牙周组织再生的种子细胞。

关键词：牙周再生颌骨骨髓间充质干细胞髂骨骨髓间充质干细胞牙周膜干细胞细胞聚合体再生微环境