检索结果-南通市图书馆

p38对放线菌酮经线粒体途径诱导hl-60细胞死亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 2006年第6期27卷 398-402页

作者：梁佩燕曾耀英王通邢飞跃肇静娴江逊狄静芳暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632

目的研究 p38对放线菌酮(CHX)经线粒体途径诱导 hl-60细胞死亡的影响。方法利用 p38持异性阻断剂 SB203580(SB)阻断 hl-60细胞 p38途径,分别设对照组、单纯 SB 组、CHX组和 CHX 联合 SB 组;于处理6,9,12,18,24 h 利用碘化丙锭(PI)染色... 详细信息

目的研究 p38对放线菌酮(CHX)经线粒体途径诱导 hl-60细胞死亡的影响。方法利用 p38持异性阻断剂 SB203580(SB)阻断 hl-60细胞 p38途径,分别设对照组、单纯 SB 组、CHX组和 CHX 联合 SB 组;于处理6,9,12,18,24 h 利用碘化丙锭(PI)染色流式细胞术检测亚二倍体峰细胞比率;于处理6和18 h 进行膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)/PI 双标流式细胞术测定凋亡和坏死细胞比率;于处理18 h 利用 JC-1染色流式细胞术分析,通过对 FL2的划分比较不同处理时间高 JC-1集合体量细胞比率;测定细胞 JC-1集合体(FL2)和 JC-1单体(FL1)平均荧光强度,并计算线粒体膜电势(△Ψ_m,FL2/FL1)。结果在 CHX 处理6 h hl-60细胞亚二倍体峰细胞比率显著高于对照组,在此过程中阻断 p38途径则在处理9 h 开始亚二倍体峰细胞比率显著高于 CHX 组。处理18 h 凋亡细胞比率:CHX组[(27.9±0.52)%]和 CHX 联合 SB 组[(28.54±1.38)%]均显著高于对照组[(2.45±0.65)%](P0.05)。处理18 h 坏死细胞比率:CHX 组和 CHX 联合 SB 组均显著高于对照组(P细胞比率均显著低于对照组(P细胞比率显著低于 CHX 组(Phl-60细胞凋亡和线粒体去极化,在该过程中阻断 p38途径可使线粒体的去极化作用增强,本模型中 p38途径可能与 hl-60细胞的坏死密切相关。

关键词：放线菌酮细胞系,hl-60 细胞凋亡膜电位,线粒体有丝分裂素激活蛋白激酶类

蟾蜍灵诱导hl-60细胞凋亡过程中对Bcl-2、Survivin、Smac/DIABLO表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 2006年第1期27卷 21-24页

作者：田昕罗颖刘云鹏侯科佐金波张敬东王甦中国医科大学附属第一医院肿瘤内科沈阳110001

目的研究蟾蜍灵在诱导hl-60细胞凋亡过程中,对线粒体凋亡途径相关基因Bcl-2、 Bax、Survivin及Smac/DIABLO表达的影响。方法采用锥虫蓝拒染法检测细胞存活情况,细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析Bcl-2、Bax、Sma... 详细信息

目的研究蟾蜍灵在诱导hl-60细胞凋亡过程中,对线粒体凋亡途径相关基因Bcl-2、 Bax、Survivin及Smac/DIABLO表达的影响。方法采用锥虫蓝拒染法检测细胞存活情况,细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot分析Bcl-2、Bax、Smac/DIABLO、Survivin及caspase-3蛋白表达,RT-PCR检测Survivin mRNA表达。结果蟾蜍灵抑制hl-60细胞增殖,24,48及72 h的IC50 值分别为25．8,8．0及2．1 nmoL/L。蟾蜍灵大于50．0 nmol/L时可明显诱导hl-60细胞凋亡。50．0 nmol/L蟾蜍灵作用6,12,24及48 h,Bcl-2蛋白表达分别下调至作用前的88．6％,53．3％,19．2％及 9．5％,而Bax蛋白表达无明显变化,Bcl-2/Bax比值由2．0分别降至1．7,1．1,0．4及0．2。Survivin蛋白表达分别下调至作用前的75．2％,54．8％,37．5％及20．3％;Survivin mRNA表达在作用6,12和24 h 后分别下调至作用前的85．7％,39．4％和12．5％,在作用48 h后几乎检测不到。50．0 nmol/L蟾蜍灵作用12,24及48 h,线粒体部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别下调至作用前的77．5％,21．2％及 15．3％,而胞浆部分的Smac/DIABLO蛋白表达分别上调至作用前的1．4,2．0．及3．5倍。蟾蜍灵作用 8-48 h可检测到caspase-3的活化亚基。结论蟾蜍灵诱导的hl-60细胞凋亡与Bcl-2及Survivin表达下调、线粒体释放Smac/DIABLO及caspase-3活化有关。

关键词：蟾蜍灵基因,bcl-2 基因,surivivin 基因,Smac/DIABLO 细胞系,hl-60 细胞凋亡

X连锁凋亡抑制蛋白在hl-60细胞耐药中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 2006年第1期27卷 1-5页

作者：王晓芳王椿秦尤文颜式可高彦荣上海市第一人民医院血液科 200080

目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在纤维连接蛋白(Fn)黏附介导的hl-60细胞耐药中的作用。方法用Fn包被培养板,以牛血清白蛋白(BSA)包被培养板作为对照。通过CCK-8 实验检测Fn黏附对柔红霉素(DNR)敏感性的影响,流式细胞仪检测hl-60细胞内... 详细信息

目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在纤维连接蛋白(Fn)黏附介导的hl-60细胞耐药中的作用。方法用Fn包被培养板,以牛血清白蛋白(BSA)包被培养板作为对照。通过CCK-8 实验检测Fn黏附对柔红霉素(DNR)敏感性的影响,流式细胞仪检测hl-60细胞内DNR浓度的变化, RT-PCR、Western blot检测XIAP、bcl-2、MRP和mdr1基因mRNA和蛋白表达变化。将XIAP反义寡核苷酸通过脂质体法转染Fn黏附培养的hl-60细胞,计算DNR对hl-60细胞的IC50值。结果 hl-60 细胞与Fn黏附后,对DNR的敏感性下降,Fn组IC50值为0．526μmol/L,明显高于BSA组(0．132 μmol/L)和悬浮培养组(0．123μmol/L)(P细胞内的DNR浓度与BSA组和悬浮培养组比较差异无统计学意义(P>0．05)。XIAP反义寡核苷酸可使Fn黏附介导的耐药hl-60细胞XIAP表达明显下调, 对DNR的敏感性增加。结论 XIAP可能参与了Fn黏附介导的hl-60细胞耐药,应用XIAP反义寡核苷酸能够逆转Fn黏附介导的hl-60细胞耐药。

关键词：细胞凋亡抑制蛋白纤连蛋白类细胞系,hl-60 细胞粘附抗药性,多药

慢病毒介导的RNA干扰HMGA2基因表达对hl-60细胞增殖及细胞周期素B2、A2表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 2012年第6期33卷 448-452页

作者：刘文丹谭丽熊喜峰梁叶萍谭获广州医学院第一附属医院海印院区肿瘤血液中心 510230 广东省泌尿外科重点实验室广州医学院组织学与胚胎学教研室

目的探讨慢病毒介导的RNA干扰沉默高迁移率族蛋白A2（HMGA2）基因表达对人急性白血病细胞系hl-60细胞增殖及细胞周期素（cyclin）B2、cyclinA2表达的影响。方法制备表达HMGA2基因短发夹RNA（shRNA）的重组慢病毒载体，转染hl-60细胞。... 详细信息

目的探讨慢病毒介导的RNA干扰沉默高迁移率族蛋白A2（HMGA2）基因表达对人急性白血病细胞系hl-60细胞增殖及细胞周期素（cyclin）B2、cyclinA2表达的影响。方法制备表达HMGA2基因短发夹RNA（shRNA）的重组慢病毒载体，转染hl-60细胞。通过半定量RT—PCR和West—elTlblot检测特异性shRNA转染后hl-60细胞HMGA2基因表达；CCK-8法检测细胞增殖抑制率；软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖能力；流式细胞术（FCM）检测细胞周期；RT—PCR及Westernblot检测cyclinB2、cyclinA2mRNA和蛋白表达水平。结果RT—PCR和测序证实，成功构建了表达HMGA2shRNA的重组慢病毒载体；RT—PCR和Westernblot证实经嘌呤霉素筛选出的阳性克隆转染的hl-60细胞HMGA2mRNA和蛋白表达水平与空载体组相比明显受抑，抑制率分别达（80．66±7．98）％和（76．35±12．72）％；CCK-8比色结果显示，HMGA2表达受到稳定干扰的hl-60细胞增殖活力明显受到抑制，细胞增殖曲线低平，缺乏指数增殖特征。FCM检测显示，与对照组相比，转染特异性shRNA的hl-60细胞出现了明显的G2／M期阻滞，G2／M期细胞分别为（13．90±4．07）％和（30．00±5．78）％（P〈0．05）。HMGA2特异性shRNA转染的hl-60细胞cyclinB2mRNA和蛋白表达与未转染细胞相比，抑制率分别为（67．55±7．69）％和（51．77±4．81）％（P〈0．01）。而cyclinA2的表达无明显改变。结论HMGA2基因沉默可下调cyclinB2表达，从而使细胞出现明显的增殖抑制和G2／M期阻滞。

关键词：基因,HMGA2 RNA干扰细胞增殖细胞系,hl-60

hTERT反义寡核苷酸对hl-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 2006年第6期27卷 386-389页

作者：孙玲王峰孙慧乐晓萍葛秀峰刘林湘张钦宪郑州大学第一附属医院血液内科 450052 郑州大学医学院分子细胞生物学研究中心

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对 hl-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用。方法用流式细胞术检测 hTERT ASODN 转染 hl-60细胞72 h 后细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞 DNA 梯带;将转染及未转染寡核苷酸... 详细信息

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)对 hl-60细胞致瘤性的影响及其诱导凋亡作用。方法用流式细胞术检测 hTERT ASODN 转染 hl-60细胞72 h 后细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞 DNA 梯带;将转染及未转染寡核苷酸的 hl-60细胞分别接种BALB/c 裸鼠,观察成瘤情况,切片观察移植瘤组织形态;另取10只 BALB/c 裸鼠,改进成瘤方法使其均匀成瘤后分成两组,在瘤体局部分别注射 ASODN、磷酸盐缓冲液(PBS),经7d 治疗后测量瘤体并切片观察其细胞形态变化,采用 TUNEL 方法检测细胞凋亡。结果 hTERT ASODN 作用于 hl-60细胞72 h 后,流式细胞术检测出早期凋亡峰,琼脂糖凝胶电泳显示 DNA 梯形条带,SODN 组及空白对照组未检测出凋亡峰及 DNA 梯形条带 ASODN 转染的 hl-60细胞组 BALB/c 裸鼠接种后第16～17天成瘤,5只中2只成瘤,未转染组在第12～13天成瘤,5只中4只成瘤,成瘤后 ASODN 治疗组瘤组织间质及血管较少,PBS 治疗对照组瘤组织间质发达,血管丰富。成瘤后 ASODN 治疗前肿瘤体积为(100.9±24.6)mm^3,治疗后肿瘤与 PBS 对照组比较,生长明显减缓[瘤体积分别为(422.7±326.4)mm^3和(786.4±357.6)mm^3](P细胞呈现凋亡形态,PBS 治疗组则少见凋亡细胞 TUNEL 检测显示,ASODN 治疗组瘤组织中阳性细胞数较 PBS 治疗组明显增多(Phl-60细胞凋亡并降低其在 BALB/c 裸鼠体内的致瘤性,抑制移植瘤增长速度。

关键词：细胞系,hl-60 基因,hTERT 寡核苷酸类,反义细胞凋亡小鼠,BALB/c

细胞分化剂Ⅱ诱导hl-60细胞的分化及其机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤研究与临床 2013年第6期25卷 361-364页

作者：金国荣林秀梅许艳丽刘巍巍周昕唐燕申煌煊中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室广州510060 广州医科大学附属广州市第一人民医院血液内科

目的探讨细胞分化剂II（CDA-Ⅱ）对人类急性早幼粒细胞白血病细胞株hl-60分化的影响及其机制。方法CDA-Ⅱ作用hl-60后，采用瑞特染色法观察细胞的形态变化；流式细胞术检测CD11b阳性细胞比例；用表达谱芯片检测差异表达基因。结果瑞特... 详细信息

目的探讨细胞分化剂II（CDA-Ⅱ）对人类急性早幼粒细胞白血病细胞株hl-60分化的影响及其机制。方法CDA-Ⅱ作用hl-60后，采用瑞特染色法观察细胞的形态变化；流式细胞术检测CD11b阳性细胞比例；用表达谱芯片检测差异表达基因。结果瑞特染色显示CDA-Ⅱ可诱导hl-60细胞向髓系成熟阶段分化，且呈时间依赖性。hl-60细胞经CDA-Ⅱ处理后CD11b阳性表达率呈时间、浓度依赖性增高。CDA-Ⅱ可引起hl-60细胞基因表达变化，其中表达变化相差2倍以上的基因有113条上调基因及140条下调基因。上调基因主要参与矿物质吸收、补体与凝血系统等6条通路；下调基因主要参与嘧啶代谢、RNA聚合酶、嘌呤代谢等9条通路。结论CDA-Ⅱ可诱导hl-60细胞基因表达变化及细胞分化，CDA-Ⅱ具有用于诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病的可行性。

关键词：细胞分化剂Ⅱ 细胞系,hl-60 细胞分化基因表达谱

一氧化氮供体诱导hl-60细胞凋亡过程中活性氧自由基和抗氧化能力的变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江检验医学 2005年第1期 27-30,49页

作者：周永列吕亚萍邱莲女王文松浙江省人民医院浙江工业大学药学院

目的研究外源性一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)诱导hl-60细胞凋亡过程中活性氧自由基和抗氧化能力的变化。方法将hl-60细胞与SNP在体外培养,用MTT法观察:NO对细胞的抑制作用;用透射电镜和光镜观察细胞结构改变,用DNA 凝胶电泳、细胞DNA含... 详细信息

目的研究外源性一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)诱导hl-60细胞凋亡过程中活性氧自由基和抗氧化能力的变化。方法将hl-60细胞与SNP在体外培养,用MTT法观察:NO对细胞的抑制作用;用透射电镜和光镜观察细胞结构改变,用DNA 凝胶电泳、细胞DNA含量、DNA片段原位末端标记、Annexin-V/PI法等分析细胞凋亡;用双氢罗丹明123(DHR)标记、流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS),并同时测定细胞内谷胱甘肽(GSH)和3种抗氧化酶的活性。结果SNP能抑制hl-60细胞生长, 典型的细胞形态改变、DNA片端化、亚二倍体峰比例增加、DNA末端标记、Annexin-V+/PI-表达增加等证实NO能诱导白血病细胞凋亡,且两者之间有明显的量效和时效关系。在此过程中,细胞内ROS水平增加,细胞内谷胱甘肽和过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)降低。ROS和CAT、GST、GPX的含量与SNP两者之间也有明显的量效关系。结论细胞内活性氧自由基和抗氧化能力平衡的改变在外源性一氧化氮供体诱导hl-60细胞凋亡中发挥了重要作用。

关键词：一氧化氮细胞凋亡细胞系,hl-60 活性氧过氧化氢酶谷胱甘肽S转移酶谷胱甘肽过氧化物酶