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吉林农业大学学报 2018年第2期40卷 209-212页

作者：耿洪伟付昊雨石洪宇刘倩含张大伟刘松财张英吉林大学动物科学学院长春130062 吉林大学化学学院长春130062

采用超声辅助热水法提取红松松子壳多糖(PPSP),分离纯化得到两种主要成分PPSP2-2和PPSP3-1。通过高效液相色谱法检测所含单糖种类及比例,PPSP2-2单糖组成及其摩尔比为Man∶Rha∶GlcA∶GalA∶Glc∶Gal∶Xyl∶Ara∶Fuc=7.2∶12.2∶3.6∶1... 详细信息

采用超声辅助热水法提取红松松子壳多糖(PPSP),分离纯化得到两种主要成分PPSP2-2和PPSP3-1。通过高效液相色谱法检测所含单糖种类及比例,PPSP2-2单糖组成及其摩尔比为Man∶Rha∶GlcA∶GalA∶Glc∶Gal∶Xyl∶Ara∶Fuc=7.2∶12.2∶3.6∶11.8∶11.0∶20.2∶10.5∶18.4∶5.1;PPSP3-1单糖组成及其摩尔比为Man∶Rha∶GlcA∶GalA∶Glc∶Gal∶Xyl∶Ara∶Fuc=4.6∶5.6∶2.9∶44.9∶23.8∶9.1∶2.5∶5.2∶1.3。通过红外检测法确定PPSP2-2是以吡喃糖的酸性糖形式存在,结构中存在α构型糖苷键,确定PPSP3-1是酸性糖,并且存在吡喃糖。

关键词：红松松子壳多糖单糖组成单糖结构高效液相色谱红外光谱

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红松松子壳多糖的分离纯化、结构表征及其抗氧化活性研究

红松松子壳多糖的分离纯化、结构表征及其抗氧化活性研究

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作者：付昊雨吉林大学

学位级别：硕士

多糖又称多聚糖,由10个以上单糖通过糖苷键连接而成,广泛存在于生物体中,在生命活动中具有重要作用。多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化和抗菌等生物活性。红松松子壳多糖(Pinuskoraiensis Pinon Shell Polysaccharides,PPSP)是从中国东... 详细信息

多糖又称多聚糖,由10个以上单糖通过糖苷键连接而成,广泛存在于生物体中,在生命活动中具有重要作用。多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化和抗菌等生物活性。红松松子壳多糖(Pinuskoraiensis Pinon Shell Polysaccharides,PPSP)是从中国东北地区经济型林木红松松子壳废弃物中提取而来,因其具有较强的抗病毒、抗肿瘤等生物活性而备受关注。本研究首先通过超声辅助热水浸提法提取PPSP,将纯化后的PPSP-b采用离子交换层析和葡聚糖凝胶层析法进行分离,然后通过紫外可见光分光光度计和化学方法检测PPSP及其主要多糖组分PPSP2-2和PPSP3-1的理化性质。本实验中,超声辅助热水浸提法提取PPSP条件:提取温度为80℃,浸提时间为40 min,浸提次数为2次,固液比为1:3。结果表明,在此条件下多糖提取率为2.37±0.23%,糖含量为25.78%;PPSP经过木瓜蛋白酶结合Sevag法脱蛋白,蛋白去除率为90.87%,多糖保留率为76.41%;PPSP-b经过DEAE-52离子交换层析后分离得到PPSP1、PPSP2和PPSP3,因PPSP1含量低,本实验将PPSP2和PPSP3进一步经过葡聚糖凝胶层析分别得到PPSP2-1、PPSP2-2和PPSP3-1、PPSP3-2,又因PPSP2-1和PPSP3-2含量较少,最终将PPSP2-2和PPSP3-1作为主要研究对象。理化性质的检测结果表明,PPSP、PPSP2-2、PPSP3-1均以多糖成分为主。然后本研究对PPSP2-2和PPSP3-1的一级结构和空间结构进行测定,刚果红实验结果表明,PPSP2-2分子内存在三股螺旋构象,而PPSP3-1分子内不存在三股螺旋构象;高效液相色谱图分析表明,PPSP2-2单糖组成及其摩尔比为Man:Rha:Glc A:Gal A:Glc:Gal:Xyl:Ara:Fuc=7.3:12.1:3.6:11.8:11.0:20.2:10.5:18.4:5.1;PPSP3-1单糖组成及其摩尔比为Man:Rha:Glc A:Gal A:Glc:Gal:Xyl:Ara:Fuc=4.6:5.6:2.9:44.9:23.8:9.1:2.5:5.2:1.3,PPSP2-2和PPSP3-1分子量分布相对均一,且分子量都较小,分别为1.89×103 Da、2.84×103Da;红外光谱结果显示,PPSP2-2和PPSP3-1均是酸性多糖,且都含有吡喃糖。最后,本研究对PPSP对小鼠抗氧化活性的影响进行检测,以不同剂量PPSP对小鼠连续灌胃21 d,检测小鼠肝脏和血清中的超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果表明,在灌胃不同剂量的PPSP后,小鼠的抗氧化作用均有所提高,且呈现出一定的剂量效应。与对照组相比,PPSP高剂量组(400mg/(kg·d))能极显著提高小鼠血清和肝脏中的SOD、CAT和GSH-Px活性(P多糖组分,其中PPSP2-2和PPSP3-1是其主要组成部分,PPSP2-2主要由Gal、Ara、Rha、Gal A、Glc、Xyl单糖组成,分子量为1.89×103 Da;PPSP3-1主要由Gal A、Glc、Gal等单糖组成,分子量为2.84×103Da;通过红外检测,PPSP2-2和PPSP3-1是含有吡喃糖的酸性多糖。PPSP具有体内抗氧化生物活性,且呈现出剂量效应。

关键词：红松松子壳多糖分离纯化抗氧化高效液相

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