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硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞粘附以及整合素β_1基因表达的机制研究

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中国药理学通报 2007年第12期23卷 1552-1555页

作者：徐远义黄允宁王炜马竟先董俭达曹相枚赵琳柳勇高宏宁夏医学院病理学教研室宁夏回族自治区人民医院消化外科宁夏银川750004

目的通过观察人胃癌MKN1细胞的粘附过程和测定整合素β1cDNA的表达水平,研究硫酸右旋糖苷(dextransulfate,DS)对人胃癌MKN1细胞粘附的抑制作用的机制。方法分别在培养液中加入DS或PBS对MKN1细胞进行培养,用荧光免疫细胞染色法和共聚焦... 详细信息

目的通过观察人胃癌MKN1细胞的粘附过程和测定整合素β1cDNA的表达水平,研究硫酸右旋糖苷(dextransulfate,DS)对人胃癌MKN1细胞粘附的抑制作用的机制。方法分别在培养液中加入DS或PBS对MKN1细胞进行培养,用荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜对固定细胞和活细胞在培养盘上的贴壁过程及形态变化进行观察,用RT-PCR测定整合素β1的cDNA表达。结果MKN1细胞通过变形,形成伪足粘附到培养盘,并与其他细胞接触形成单细胞层。免疫染色可见整合素β1在细胞膜上有强烈的表达,并且形成整合素集落。DS抑制整合素β1的表达并使已经形成的整合素集落区域减少;使MKN1细胞的伪足缩短,表现出维持圆形的倾向。在使用DS培养4h后仍有部分细胞处于游离状态,分别收集游离细胞和贴璧细胞,用RT-PCR测定整合素β1的cDNA表达。实验组贴壁细胞和游离细胞内整合素β1的cDNA的表达水平分别减少到对照组细胞的74%和38%。结论DS对人胃癌细胞MKN1粘附过程的抑制与整合素β1表达的减弱有关。

关键词：硫酸右旋糖苷人胃癌整合素β1

硫酸右旋糖苷通过抑制M2型巨噬细胞极化以减弱M2型巨噬细胞对HGC-27胃癌细胞侵袭和迁移的促进作用

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肿瘤 2021年第10期41卷 657-669页

作者：郭嘉欣李梦琪赵媛陶月佳李冰徐远义黄允宁宁夏医科大学基础医学院病理学系宁夏回族自治区银川750000 长治医学院基础医学部病理生理学教研室山西长治046013 宁夏回族自治区人民医院胃肠外科宁夏回族自治区银川750000

目的:探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对M2型巨噬细胞极化以及M2型巨噬细胞促进胃癌细胞侵袭和迁移的影响,观察M2型巨噬细胞在胃癌组织中的浸润情况并评估其临床意义。方法:采用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)、白... 详细信息

目的:探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对M2型巨噬细胞极化以及M2型巨噬细胞促进胃癌细胞侵袭和迁移的影响,观察M2型巨噬细胞在胃癌组织中的浸润情况并评估其临床意义。方法:采用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)和IL-13体外诱导人单核细胞THP-1极化为巨噬细胞(M0和M2型),并应用免疫细胞荧光及蛋白质印迹法进行验证。在巨噬细胞诱导和极化过程中加入DS,采用蛋白质印迹法检测DS对M2型巨噬细胞标志物CD206和CD163蛋白表达的影响,Transwell小室迁移实验检测DS对巨噬细胞趋化募集能力的影响。建立巨噬细胞与HGC-27胃癌细胞共培养模型,将HGC-27胃癌细胞与经DS处理或未处理的巨噬细胞(M0和M2型)进行共培养,然后分别采用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测HGC-27胃癌细胞的迁移和侵袭能力,应用蛋白质印迹法检测侵袭和迁移相关蛋白的表达情况。采用免疫组织化学法检测人胃癌组织中M2型巨噬细胞的浸润情况,并分析浸润程度与临床病理特征之间的关系。结果:采用PMA、IL-4和IL-13成功诱导THP-1细胞极化为M0和M2型巨噬细胞。DS可以抑制M2型巨噬细胞的极化过程,下调M2型巨噬细胞中CD206和CD163蛋白的表达水平(P<0.001和P<0.05),以及抑制M2型巨噬细胞的趋化募集能力(P<0.001)。M2型巨噬细胞可以促进HGC-27胃癌细胞的迁移和侵袭能力,并且上调HGC-27胃癌细胞中N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达水平(P<0.05或P<0.001)。DS干预M2型巨噬细胞的极化过程后,可以明显减弱M2型巨噬细胞对HGC-27胃癌细胞侵袭和迁移的促进作用(P<0.01或P<0.001)。人胃癌组织中M2型巨噬细胞的浸润程度高于正常胃黏膜组织(P<0.01),并且M2型巨噬细胞的浸润程度与胃癌的分化程度和分期相关(P均<0.05)。结论:DS能够抑制M2型巨噬细胞的极化,减弱其对胃癌细胞趋化募集的应答能力,抑制M2型巨噬细胞对胃癌细胞侵袭和迁移能力以及侵袭和迁移相关蛋白表达的促进能力。

关键词：胃肿瘤硫酸右旋糖苷 M2型巨噬细胞极化细胞运动

硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞HIF-1α和整合素β1表达及其相关性

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临床与实验病理学杂志 2016年第1期32卷 53-57页

作者：金秀王潇飞王红红董俭达徐远义宁夏医科大学基础医学院病理学系银川750001 宁夏自治区人民医院病理科银川750021

目的培养人胃癌细胞株BGC-823,探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulphate,DS)对人胃癌细胞整合素β1(Integrinβ1)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)的表达及其相关性。方法培养BGC-823细胞,分别在培养液中加入DS和磷... 详细信息

目的培养人胃癌细胞株BGC-823,探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulphate,DS)对人胃癌细胞整合素β1(Integrinβ1)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)的表达及其相关性。方法培养BGC-823细胞,分别在培养液中加入DS和磷酸缓冲液(phosphate buffered saline,PBS),低氧培养不同时间,应用免疫细胞化学、RT-PCR法检测细胞中HIF-1α、Integrinβ1的表达,并分析二者的相关性。结果实验组HIF-1α、Integrinβ1的表达水平明显低于对照组,且HIF-1α和Integrinβ1表达呈正相关。结论 DS可以抑制人胃癌细胞的黏附过程,减弱HIF-1α、Integrinβ1的表达。DS可能通过抑制HIF-1α降低Integrinβ1的表达,有利于抑制人胃癌细胞的腹腔种植转移。

关键词：硫酸右旋糖苷人胃癌细胞整合素β1 HIF-1α 腹腔种植转移

硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞中HIF-1α、VEGF表达

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临床与实验病理学杂志 2016年第9期32卷 1024-1027页

作者：王潇飞金秀王红红黄允宁徐远义宁夏医科大学基础医学院病理学系银川750001 宁夏人民医院病理科银川750021 宁夏人民医院胃肠外科银川750021

目的探讨硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对人胃癌细胞(BGC-823)低氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的抑制作用。方法将人胃癌BGC-823细胞分为对照组与实验组,在低氧条件下经不同时间培养后采用免疫细胞化学法及Western blot法检测HIF-1α、VEGF的表达水平。结果低氧条件下人胃癌BGC-823细胞中HIF-1α、VEGF的表达呈上升趋势,应用DS后实验组HIF-1α、VEGF的表达明显少于对照组,在12、24 h较为明显(P<0.001)。结论 DS可抑制人胃癌细胞中HIF-1α和VEGF的表达,并可能通过抑制其表达影响胃癌腹腔种植转移。

关键词：硫酸右旋糖苷人胃癌细胞 HIF-1α VEGF

硫酸右旋糖苷抑制人胃癌细胞增殖、迁移及相关因子表达的作用

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实用医学杂志 2019年第7期35卷 1057-1063页

作者：杨媛媛王文莙王潇飞曹相玫黄允宁马艳梅徐远义宁夏医科大学基础医学院病理学系银川750004 宁夏回族自治区人民医院胃肠外科银川750001

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌细胞(BGC-823)增殖、侵袭与迁移能力的作用及其可能的分子机制。方法模拟胃癌缺氧微环境,在低氧条件下培养人胃癌细胞(BGC-823),设立对照组与实验组,分别予以磷酸缓冲盐溶液(PBS)与DS处理,采用平板克... 详细信息

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌细胞(BGC-823)增殖、侵袭与迁移能力的作用及其可能的分子机制。方法模拟胃癌缺氧微环境,在低氧条件下培养人胃癌细胞(BGC-823),设立对照组与实验组,分别予以磷酸缓冲盐溶液(PBS)与DS处理,采用平板克隆形成实验观察DS对细胞增殖能力的影响;Transwell侵袭与Transwell迁移实验分别观察DS对细胞侵袭与迁移能力的影响;免疫细胞荧光、Western Blot与Q-PCR实验检测经低氧条件培养不同时间(2、8、12、24 h)后细胞中转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)的表达水平。结果克隆形成实验结果显示,实验组与对照组相比细胞克隆形成数量明显减少(P <0.05);Transwell侵袭与迁移实验结果显示,实验组与对照组相比侵袭与迁移的细胞数量均明显减少(P <0.05);免疫细胞荧光、Western Blot与Q-PCR实验结果显示,不同时间点实验组Nrf2、HO-1的表达水平比对照组明显降低(P <0.05)。结论 DS能够抑制人胃癌细胞(BGC-823)增殖、侵袭与迁移的能力,其机制可能与下调Nrf2、HO-1的表达水平有关。

关键词：硫酸右旋糖苷人胃癌细胞增殖侵袭迁移 Nrf2/HO-1I

硫酸右旋糖苷通过下调血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体2表达和M2型巨噬细胞浸润抑制胃癌血管生成的研究

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实用医学杂志 2020年第17期36卷 2365-2370页

作者：郭嘉欣李梦琪尚静焦龙杏侯绍章徐远义黄允宁宁夏医科大学基础医学院病理学系银川750000 宁夏回族自治区人民医院胃肠外科银川750000

目的研究硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对裸鼠腹腔胃癌转移瘤中M2型巨噬细胞、血管生成和血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的影响。方法取34例人胃癌及12例癌旁组织标本,采用免疫组织化学及免疫荧光双染检测... 详细信息

目的研究硫酸右旋糖苷(dextran sulfate,DS)对裸鼠腹腔胃癌转移瘤中M2型巨噬细胞、血管生成和血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的影响。方法取34例人胃癌及12例癌旁组织标本,采用免疫组织化学及免疫荧光双染检测胃癌及癌旁组织中CD163(M2型巨噬细胞标记物)及CD34(代表微血管密度MVD)的表达;构建裸鼠胃癌腹腔种植转移模型DS组和对照组,14 d后观察裸鼠腹腔成瘤情况,采用免疫组织化学检测两组转移瘤CD163、CD34的表达,Western blot检测两组转移瘤CD163、VEGF和VEGFR2的表达。结果人胃癌组织免疫组化及免疫荧光结果显示,胃癌组织中M2型巨噬细胞浸润数量和微血管密度(MVD)显著高于癌旁组织(P硫酸右旋糖苷通过减少裸鼠转移瘤中M2型巨噬细胞浸润和VEGF、VEGFR2的表达抑制血管生成,进而抑制胃癌细胞腹腔种植转移。

关键词：硫酸右旋糖苷血管生成 M2型巨噬细胞胃癌腹腔种植转移 VEGF/VEGFR2

硫酸右旋糖苷对人胃癌MKN1细胞的形态学影响

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临床与实验病理学杂志 2008年第6期24卷 704-706页

作者：徐远义黄允宁赵琳柳勇高宏宁夏医学院病理教研室银川750004 宁夏回族自治区人民医院消化外科银川750004

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌MKN1细胞株的形态学影响。方法用位相差显微镜、荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜观察固定细胞和活细胞在培养盘上的附着过程及形态变化。结果MKN1细胞通过变形,形成伪足黏附到培养盘,并与其他细胞接... 详细信息

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌MKN1细胞株的形态学影响。方法用位相差显微镜、荧光免疫细胞染色法和共聚焦显微镜观察固定细胞和活细胞在培养盘上的附着过程及形态变化。结果MKN1细胞通过变形,形成伪足黏附到培养盘,并与其他细胞接触形成单细胞层。DS抑制了MKN1细胞的黏附,培养48h后仍有部分细胞处于游离状态。结论DS阻止人胃癌细胞株MKN1的黏附过程。

关键词：胃肿瘤硫酸右旋糖苷形态学

硫酸右旋糖苷调节HIF-1α的表达对人胃癌细胞腹膜种植转移的影响

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实用医学杂志 2016年第22期32卷 3665-3668页

作者：高文卫王娟金秀王潇飞黄宁波黄允宁徐远义宁夏医科大学基础医学院银川市750004 宁夏自治区人民医院银川市750021

目的:探讨硫酸右旋糖苷(DS)通过调节HIF-1α(hypoxia induced factor,HIF-1α)的蛋白表达而抑制人胃癌细胞腹膜转移的相关机制。方法:(1)体外实验:培养BGC-823细胞,分别在培养液中加入DS和PBS,低氧培养不同时间,用免疫细胞化学和WB检测H... 详细信息

目的:探讨硫酸右旋糖苷(DS)通过调节HIF-1α(hypoxia induced factor,HIF-1α)的蛋白表达而抑制人胃癌细胞腹膜转移的相关机制。方法:(1)体外实验:培养BGC-823细胞,分别在培养液中加入DS和PBS,低氧培养不同时间,用免疫细胞化学和WB检测HIF-1α表达。(2)动物实验:构建胃癌腹膜转移模型,实验组与对照组分别注射DS和PBS。剖腹观察癌细胞在腹膜上种植转移情况;应用免疫组化和WB方法检测HIF-1α表达。结果:(1)体外实验:免疫细胞化学和WB结果显示实验组HIF-1α表达明显低于对照组。(2)动物实验:实验组瘤结节数明显少于对照组,免疫组化和WB结果显示实验组HIF-1α的蛋白表达明显低于对照组。结论:硫酸右旋糖苷可以调节人胃癌细胞HIF-1α的蛋白表达,其可能会通过下调HIF-1α的表达从而抑制人胃癌细胞大网膜种植转移。

关键词：人胃癌细胞硫酸右旋糖苷 HIF-1a 腹膜转移

硫酸右旋糖苷对人胃癌细胞腹腔种植转移和整合素β1表达的影响

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诊断病理学杂志 2014年第4期21卷 224-227页

作者：王娟赵雪艳荣小伟徐远义宁夏医科大学病理教研室银川750004

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌细胞腹腔种植转移整合素β1表达的影响。方法培养BGC-823细胞,构建裸鼠动物模型。将90只裸鼠,随机分为对照组(40只)与实验组(50只),对照组与实验组裸鼠在注射肿瘤细胞同时分别注射生理盐水与硫酸右旋... 详细信息

目的探讨硫酸右旋糖苷(DS)对人胃癌细胞腹腔种植转移整合素β1表达的影响。方法培养BGC-823细胞,构建裸鼠动物模型。将90只裸鼠,随机分为对照组(40只)与实验组(50只),对照组与实验组裸鼠在注射肿瘤细胞同时分别注射生理盐水与硫酸右旋糖苷。裸鼠剖腹行HE染色,观察癌结节的腹腔种植数量;应用免疫组化和RT-PCR方法检测整合素β1mRNA和蛋白表达。结果剖腹观察的瘤结节数经HE染色证实,实验组明显少于对照组的瘤结节数(P硫酸右旋糖苷可能通过下调整合素β1的表达抑制人胃癌细胞的腹腔种植转移,预防性使用大分子硫酸右旋糖苷能够抑制胃癌细胞的腹腔种植转移。

关键词：硫酸右旋糖苷整合素β1 腹腔种植胃癌 Integrin beta 1