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疟疾疫苗

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生物制品快讯 2003年第8期 1-5页

作者：陈锦荣江丽君

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疟疾疫苗

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国际医学寄生虫病杂志 1997年第6期24卷 265-266页

作者：刘俊燕

作者针对SPf66疟疾疫苗在泰国的实验结果及《柳叶刀》杂志关于疟疾疫苗的评论发表了自己的看法,认为不能放弃疟疾疫苗的研究,而应该予以支持。美国医学会的评论认为疟疾疫苗是可行的,已取得许多有希望的进展,这包括逐步认识到天然获得... 详细信息

作者针对SPf66疟疾疫苗在泰国的实验结果及《柳叶刀》杂志关于疟疾疫苗的评论发表了自己的看法,认为不能放弃疟疾疫苗的研究,而应该予以支持。美国医学会的评论认为疟疾疫苗是可行的,已取得许多有希望的进展,这包括逐步认识到天然获得性免疫的决定性因素,体液免疫及细胞免疫的作用,寄

关键词：疟疾疫苗疟疾流行哥伦比亚南美洲

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疟疾疫苗

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生物技术通讯 2001年第4期12卷 285-289页

作者：王衣祥曹诚马清钧北京大学口腔医学院口外研究室军事医学科学院生物工程研究所

疟疾是世界上分布和流行最广的寄生虫性疾病之一 ,世界上有 2 0亿人口生活在疫区。每年全球大约有 5亿人口患病 ,其中 5 0 %是由恶性疟原虫引起的 ,每年死于疟疾的人口约 10 0万～ 30 0万。尽管疟原虫的生物学研究仍不甚明晰 ,疟疾疫苗... 详细信息

疟疾是世界上分布和流行最广的寄生虫性疾病之一 ,世界上有 2 0亿人口生活在疫区。每年全球大约有 5亿人口患病 ,其中 5 0 %是由恶性疟原虫引起的 ,每年死于疟疾的人口约 10 0万～ 30 0万。尽管疟原虫的生物学研究仍不甚明晰 ,疟疾疫苗的研究在最近的 30年中仍取得了明显的成果。针对疟原虫的生活各周期的主要保护性抗原 ,科研人员已研制了一系列的疟疾侯选疫苗 ,如CSP疟疾疫苗、MSP1疟疾疫苗、pfs2 5疟疾疫苗和SPf6 6多期多抗原合成疟疾疫苗等。目前疟疾疫苗主要历经减毒疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗三种形式。因为在疟原虫生活周期不同阶段存在着不同的侯选抗原 ,依此又可将疟疾侯选疫苗按其起作用时期分为红细胞前期疫苗、红细胞内期疫苗、配子期疫苗和多期多抗原疫苗。但到目前为止 ,仍未开发出十分理想的疟疾疫苗。由于疟原虫生活史复杂、抗原多且免疫原性弱 ,单独应用疟疾疫苗难以取得很好的预防效果 ,所以必须配合以佐剂来增强其免疫效果。然而不同的佐剂对不同疟疾侯选疫苗的免疫增强效果有着明显差异 ,因此佐剂的选择是疫苗成功与否的关键因素之一。另外 ,宿主的遗传性限制也影响着疫苗的保护效果。

关键词：疟疾疫苗免疫效果佐剂遗传性限制疟原虫抗原

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疟疾疫苗

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国际医学寄生虫病杂志 1991年第1期 31-31页

作者：王大坤

近年来,疟疾合成肽疫苗已在灵长类动物或人类中试用,但在不同实验室所获结果不尽相同。对此,一些学者提出了解释或异议。Patarroyo等人和Collins等人在猴所获的试验结果就互相矛盾,前者用合成肽免疫获得具保护性的结果,后者则否。对此矛

关键词：疟疾疫苗保护力合成肤

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红前期疟疾疫苗研发进展

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微生物学免疫学进展 2024年第5期 71-76页

作者：冯晓琳陈勇兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室甘肃省疫苗技术创新中心

疟疾(malaria)是疟原虫感染所致的传染病，主要流行于热带和亚热带地区。疟疾严重危害了人类的生命安全，亟需有效的疟疾疫苗作为防控手段。目前红前期多种候选疫苗已被探索，包括亚单位疫苗、全孢子体疫苗、病毒载体疫苗和mRNA疫苗。... 详细信息

疟疾(malaria)是疟原虫感染所致的传染病，主要流行于热带和亚热带地区。疟疾严重危害了人类的生命安全，亟需有效的疟疾疫苗作为防控手段。目前红前期多种候选疫苗已被探索，包括亚单位疫苗、全孢子体疫苗、病毒载体疫苗和mRNA疫苗。其中以恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)红前期环子孢子蛋白(circumsporozoite protein, CSP)为抗原研制的亚单位疫苗RTS,S/AS01和R21/Matrix-M已获WHO批准。这两款疫苗接种后均可降低疟疾的患病率和死亡率。同时，基于mRNA的新型冠状病毒疫苗已取得成功，这重新引起了研究者对mRNA疫苗平台的兴趣。mRNA疟疾疫苗成为疟疾疫苗开发的新途径。现就CSP的生物学特性及红前期疟疾疫苗研究现状作一概述。

关键词：疟疾疫苗红前期疫苗环子孢子蛋白亚单位疫苗全孢子体疫苗病毒载体疫苗 mRNA疫苗

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疟疾疫苗的研究策略(英文)

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华中师范大学学报（自然科学版） 2002年第1期36卷 96-102页

作者：陈思礼 SMOOKER Peter SPITHILL Terry 杨其仁陈思祗陈思义吴风娇华中师范大学生命科学学院武汉430079 Department of Molecular Parasitology Monash University Clayton 3168 Australia 湖北省阳新县潘桥医院湖北阳新435242

从疟原虫的不同发育时期、不同的疫苗成份和宿主的遗传基因限制性等方面 ,深入研究抗疟疾疫苗 .作用于红细胞前期的疟疾疫苗主要是抑制疟疾的临床发作 ,控制疟疾的传播 ;作用于红细胞期的疟疾疫苗诱导宿主体液免疫系统 ,产生特异性抗体 ... 详细信息

从疟原虫的不同发育时期、不同的疫苗成份和宿主的遗传基因限制性等方面 ,深入研究抗疟疾疫苗 .作用于红细胞前期的疟疾疫苗主要是抑制疟疾的临床发作 ,控制疟疾的传播 ;作用于红细胞期的疟疾疫苗诱导宿主体液免疫系统 ,产生特异性抗体 ,抑制疟原虫侵入和感染红细胞 ,达到减少疟原虫虫荷 ,降低疟疾的发病率和死亡率 .作用于疟原虫有性生殖时期 ,控制疟疾传播的疟疾疫苗 ,其意义在于控制一个地区疟原虫的感染率和疟疾发病率 ,但对已感染疟原虫个体的免疫保护作用意义不大 .在设计疟疾疫苗的过程中 ,必须克服不同个体的遗传基因限制性问题 .由于疟原虫生活史的复杂性 ,同时也必须考虑到疟原虫不同发育阶段抗原成份的复杂性 .

关键词：疟疾疫苗红细胞前期红细胞期研究策略疟原虫免疫保护作用感染率

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不同佐剂对随机组合多表位恶性疟疾疫苗M. RCAg-1的免疫原性及体外抑虫率影响的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第12期31卷 1117-1123页

作者：王健蔺亚辉孙成金李莉莉陈祥鹏李军王恒张振龙北京生物制品研究所第四研究室 100024 北京协和医学院基础学院病原生物学系

目的研究弗氏佐剂及3种人用佐剂[Al（OH）3、Montanide ISA720、Montanide ISA51]对重组多表位蛋白***-1（malaria random constructed antigen-1）在BALB/c小鼠及新西兰大白兔体内产生免疫效果的影响.方法以弗氏佐剂、Al（ OH）3佐剂... 详细信息

目的研究弗氏佐剂及3种人用佐剂[Al（OH）3、Montanide ISA720、Montanide ISA51]对重组多表位蛋白***-1（malaria random constructed antigen-1）在BALB/c小鼠及新西兰大白兔体内产生免疫效果的影响.方法以弗氏佐剂、Al（ OH）3佐剂、Montanide ISA720以及MontanideISA51佐剂分别与***-1蛋白进行配伍,分别免疫BALB/c小鼠及新西兰白兔；采用ELISA法检测***-1蛋白及其所组成各个表位特异的血清IgG含量；间接荧光免疫试验分析不同配伍组免疫血清对天然疟原虫抗原的识别；酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测特异性鼠T淋巴细胞的活化；另借助生物传感器评价抗原与不同佐剂配伍组血清的亲和力,并用体外生长抑制试验（GIA）对恶性疟原虫的体外生长的影响进行评价.结果不同佐剂可诱发不同水平的抗体滴度,Montanide ISA51佐剂配伍组的效果与弗氏佐剂组最为接近,并可使蛋白包含的11个表位肽能都较好诱发出特异性抗体,可有效激发以IFN-γ为主的细胞免疫应答,而且Montanide ISA51佐剂组免疫产生的抗体和***-1蛋白质的亲和力高于其他两种佐剂；而Montanide ISA720佐剂和Al（OH）3佐剂免疫组不能诱发小鼠产生显著的IFN-γ反应（P＞0.05）.Montanide ISA51配伍蛋白质免疫产生的IgG在浓度为2mg/ml时对3D7和Dd2的抑制率分别为60%和100%,Al（OH）3佐剂组免疫兔血清IgG体外抑虫率较低（10%左右）,而Montanide ISA720佐剂免疫组血清不能有效抑制疟原虫生长.结论通过比较3种人用佐剂和弗氏佐剂对BALB/c小鼠和新西兰兔的免疫辅助效能显示,Montanide ISA51佐剂能很好的辅助***-1蛋白疫苗诱发动物体内的体液免疫和细胞免疫应答,可做为疫苗的候选佐剂之一.

关键词： M.RCAg-1 佐剂疟疾疫苗

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随机组合多表位恶性疟疾疫苗***-1蛋白的纯化及鉴定

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中国生物制品学杂志 2011年第12期24卷 1391-1395,1399页

作者：王健孙成金李莉莉陈祥鹏李军王恒张振龙北京生物制品研究所第四研究室北京100024 北京协和医学院基础学院病原生物学系北京100005

目的纯化随机组合多表位恶性疟疾疫苗***-1蛋白,并进行各项鉴定。方法对BL21(DE3)-***-1/pDS-ex工程菌发酵产物进行纯化,对纯化的***-1蛋白进行各种理化性质鉴定;采用Western blot法检测其反应原性;以不同剂量的***-1蛋白免疫BALB/c小... 详细信息

目的纯化随机组合多表位恶性疟疾疫苗***-1蛋白,并进行各项鉴定。方法对BL21(DE3)-***-1/pDS-ex工程菌发酵产物进行纯化,对纯化的***-1蛋白进行各种理化性质鉴定;采用Western blot法检测其反应原性;以不同剂量的***-1蛋白免疫BALB/c小鼠及新西兰大白兔,采用间接ELISA法检测小鼠血清抗体效价;间接荧光免疫法(IFA)分析免疫血清对天然疟原虫抗原的识别;酶联免疫斑点试验检测特异性鼠T淋巴细胞的活化及细胞因子的分泌;体外生长抑制试验检测免疫兔血清对恶性疟原虫生长的影响。结果 ***-1蛋白表达量约为菌体总蛋白的30%,浓度为1.5 mg/ml,纯度可达95%左右,等电点为5.0;内毒素残留量均小于2.5 EU/mg,宿主蛋白残留量为0.08%,N-末端氨基酸序列正确;可与相应鼠单抗特异性结合;免疫小鼠血清抗体水平随着免疫次数和免疫剂量的增加而升高,20及30μg剂量组在末次免疫后,血清抗体滴度均可达1∶1 031 707;各免疫组小鼠血清均能识别恶性疟原虫天然抗原,且呈抗原剂量依赖性;10、20和30μg剂量组能刺激相应特异性脾淋巴细胞显著增殖(P疫苗蛋白,具有较好的开发前景。

关键词： M.RCAg-1蛋白多表位蛋白疟疾疫苗

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疟疾疫苗:抗原虫还是抗疾病?

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国际免疫学杂志 1990年第2期13卷 89-90页

作者： J·H·L·Playfair ,刘尔翔

由于疟疾是世界健康的重要问题,人们以前所未有的热情期待疟疾疫苗早日出现。文献已报告过在志愿者试用三种疫苗,二个是基因重组的,另一个是多个合成多肽的,但均未实现完全的免疫保护。这些都是针对疟原虫的,二个对子孢子,一个对红内期... 详细信息

由于疟疾是世界健康的重要问题,人们以前所未有的热情期待疟疾疫苗早日出现。文献已报告过在志愿者试用三种疫苗,二个是基因重组的,另一个是多个合成多肽的,但均未实现完全的免疫保护。这些都是针对疟原虫的,二个对子孢子,一个对红内期。应考虑是否有其他的途径。50年前,Sinton 认为对疟疾的免疫,可分为两部分:一是抗寄生虫的,一是抗毒性作用的。在流行区,人们发现了3～5岁

关键词：疟疾疫苗疟原虫抗原疾病

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重组疟疾疫苗PfCP-2.9单克隆抗体的特性分析

重组疟疾疫苗PfCP-2.9单克隆抗体的特性分析

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作者：吴媛第二军医大学

学位级别：硕士

疟疾是世界上分布和流行最广、危害最为严重的寄生虫性传染病之一,世界上有20亿人口生活在疫区。由于疟原虫抗药性以及蚊媒抗杀虫剂抗性的产生和扩散,这给疟疾防治带来了很大的困难。尽管疟疾疫苗研制也面临疟原虫生活史复杂和抗原变异... 详细信息

疟疾是世界上分布和流行最广、危害最为严重的寄生虫性传染病之一,世界上有20亿人口生活在疫区。由于疟原虫抗药性以及蚊媒抗杀虫剂抗性的产生和扩散,这给疟疾防治带来了很大的困难。尽管疟疾疫苗研制也面临疟原虫生活史复杂和抗原变异等困难,但研制有效的疟疾疫苗仍是人们期望能用于控制疟疾的潜在新途径。恶性疟原虫主要裂殖子表面抗原1(MSP1)19kD C-末端区域(MSP1-19)与裂殖子顶端膜抗原1的第三功能域(AMA-1(III))均是裂殖子入侵红细胞时被酶解的片段,在裂殖子入侵过程中发挥重要作用,已成为疟原虫红内期疫苗的两个重要候选抗原。本实验室将MSP1-19和AMA-1(III)两个抗原通过一段链接区序列(由28个氨基酸残基组成的多肽,定名为P28)进行融合,形成融合抗原,即PfCP-2.9融合蛋白。该融合抗原作为疟疾疫苗候选抗原已完成2个临床试验。与国外同类疫苗相比,此种PfCP-2.9重组疟疾疫苗已显示出明显的优点:①高免疫原性和强抑制疟原虫生长的效力。与两个抗原成分相比,抗体滴度分别增加22和47倍;融合抗原免疫原性增强使其免疫血清在15%浓度时能完全抑制疟原虫生长,而单个抗原免疫或将两个抗原混合后免疫,其免疫血清在15%浓度时对疟原虫生长无明显抑制作用;②不同地区疟疾病人血清对PfCP-2.9融合抗原的免疫反应性比单抗原成分明显增强;③在毕氏酵母分泌表达系统中,PfCP-2.9融合抗原表达产量达到2.6克/升,比单抗原在同一系统中表达产量高约20倍,且可溶性和稳定性明显提高。本实验室在前期研究中采用PfCP-2.9重组蛋白制备了一组单克隆抗体,主要用于PfCP-2.9疫苗免疫保护作用的机制探讨,包括PfCP-2.9融合抗原的表位鉴定,通过与PfCP-2.9疫苗接种者免疫血清的竞争ELISA试验,分析该疫苗的一些重要表位在人体是否得到有效递呈,产生免疫应答等。这些研究预期结果将部分阐明PfCP-2.9融合抗原疫苗的免疫保护作用机制,并为融合抗原疫苗的设计提供依据和信息。本研究对21株PfCP-2.9融合抗原单克隆抗体的特性进行分析。通过杂交瘤细胞的培养和BALB/c小鼠腹腔注射制备一定量的单克隆抗体,在此基础上开展以下的研究并取得结果如下:(1)单抗与融合蛋白的反应性:用ELISA检测21株单抗,结果为阳性反应的18株,另外3株为阴性;用Western blot方法检测结果:同样为18株阳性;(2)单克隆抗体识别表位构象分析:将PfCP-2.9抗原用尿素进行彻底变性,再用单抗与变性和未变性PfCP-2.9蛋白进行Western blot反应,结果显示其中6株可以识别变性和未变性蛋白,表明这些单抗识别的是线性表位;而剩下的12株单抗不识别变性后的PfCP-2.9融合抗原,表明这些单抗识别的是构象表位;(3)单抗识别区域的分析:以本实验室制备的MSP1-19和美国NIH提供的AMA-1标准品为抗原,用Western blot的方法对18株单抗的特异性识别区域进行检测,结果为识别MSP1-19的单抗共5株,而识别AMA-1的单抗有8株,剩余的5株单抗既不识别MSP1-19,也不识别AMA-1,但识别PfCP-2.9融合蛋白;(4)表位竞争性分析:以PfCP-2.9为抗原,用竞争ELISA方法先后用过量未标记单抗和HRP标记单抗与之反应,结果有4对单抗出现相互竞争,提示这4对单抗可能识别同一表位或者是识别的表位在构象上或者在识别序列上存在相互影响;(5)单克隆抗体与疟原虫天然蛋白反应性:以处于成熟裂殖体期的恶性疟原虫(FCC1/HN株)为抗原,以血涂片的形式用间接免疫荧光方法(IFA)对单克隆抗体的生物学活性进行测定。结果显示:有8株单抗能够不同程度的与疟原虫天然虫体反应。(6)单抗体外抑制疟原虫生长的效力分析:在红细胞压积到2%,起始原虫率为0.5%的体系中,采用LDH方法分别测定各单抗抑制疟原虫生长的效力。结果表明:当单抗终浓度为0.5mg/ml时,有6株单抗不同程度抑制疟原虫生长。本研究对PfCP-2.9重组蛋白的一组单克隆抗体的特性进行了初步分析。本研究的结果为开展PfCP-2.9疟疾疫苗免疫保护作用机制研究提供重要信息和基础,继而为设计和完善融合抗原疟疾疫苗提供依据。

关键词：恶性疟原虫疟疾疫苗单克隆抗体表位

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