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东北传统腌渍蔬菜中产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及其生物特性研究

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中国食品学报 2023年第12期23卷 61-69页

作者：吕欣然李叙波佟鑫瑶白凤翎励建荣檀茜倩崔方超俞张富沈荣虎渤海大学食品科学与工程学院、生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心、辽宁省食品安全重点实验室辽宁锦州121013 杭州萧山农业发展有限公司杭州311215

采用薄层层析色谱法结合Berthelot比色法,从东北传统腌渍蔬菜中筛选产γ-氨基丁酸(GABA)乳酸菌。采用生理生化测定及16S r RNA测序鉴定乳酸菌。通过主成分分析法对其耐酸、耐胆盐、抗氧化、抑菌性及产酸速率等生物特性进行综合评价,筛... 详细信息

采用薄层层析色谱法结合Berthelot比色法,从东北传统腌渍蔬菜中筛选产γ-氨基丁酸(GABA)乳酸菌。采用生理生化测定及16S r RNA测序鉴定乳酸菌。通过主成分分析法对其耐酸、耐胆盐、抗氧化、抑菌性及产酸速率等生物特性进行综合评价,筛选具有良好生物特性的乳酸菌。结果表明:从源于传统腌渍蔬菜的40株乳酸菌中获得5株典型产GABA乳酸菌菌株,经鉴定1株为坎氏魏斯氏菌HJL2,另4株均为植物乳杆菌,分别是菌株PJ-7、HJG1-3、L-9、L-11。其中,分离自发酵萝卜的植物乳杆菌PJ-7合成GABA的能力较好,产量达0.48 mg/mL。5株乳酸菌的耐酸、耐胆盐、抗氧化等生物特性存在显著性差异,通过主成分分析确定植物乳杆菌PJ-7的生物特性综合评分位列第一。植物乳杆菌PJ-7优良的GABA合成能力以及良好的生物特性可为研发富含GABA的腌渍蔬菜提供理论参考。

关键词：乳酸菌 γ-氨基丁酸生物特性筛选

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皇竹草的生物特性与化学组成

中国造纸 2003年第5期22卷 1-4页

作者：张辉黄德裕李忠正南京林业大学化学工程学院江苏南京210037 江苏省造纸学会江苏南京210004

首次从制浆造纸角度对皇竹草(Ponnisetumhydridum,英文名HybridGiantNapier)生物学特性、纤维形态及其化学组成进行了分析,其主要化学组分为:灰分3.77%,克拉森木素20.82%,综纤维素78.15%和戊聚糖19.50%。其纤维形态特征为:纤维长度1260... 详细信息

首次从制浆造纸角度对皇竹草(Ponnisetumhydridum,英文名HybridGiantNapier)生物学特性、纤维形态及其化学组成进行了分析,其主要化学组分为:灰分3.77%,克拉森木素20.82%,综纤维素78.15%和戊聚糖19.50%。其纤维形态特征为:纤维长度1260μm,长宽比113;表皮区、中间区和内圈区的壁腔比分别为0.36、0.27和0.25。研究结果表明,皇竹草是一种较具潜力、可利用的良好造纸原料。

关键词：皇竹草生物特性化学组成造纸原料纤维形态

单核增生性李斯特菌hly缺失菌株的构建及生物特性的初步鉴定

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食品科学 2017年第16期38卷 17-22页

作者：谢曼曼刘武康丁承超董庆利陈国薇曾海娟郭亮刘箐上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093

为研究单核增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)hly基因对毒力的影响,利用同源重组原理,使用穿梭载体,构建单核细胞增生性李斯特菌野生菌株EGD-e的hly基因缺失菌株EGD-eΔhly。细菌活性实验证明缺失菌株生长状态与亲本无差异,但E... 详细信息

为研究单核增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)hly基因对毒力的影响,利用同源重组原理,使用穿梭载体,构建单核细胞增生性李斯特菌野生菌株EGD-e的hly基因缺失菌株EGD-eΔhly。细菌活性实验证明缺失菌株生长状态与亲本无差异,但EGD-eΔhly丧失溶血活性,细胞侵袭能力降低约90%,在10~7 cells/m L腹腔注射条件下不表现动物毒性。在转录水平上EGD-eΔhly的毒力基因inl C、prf A的表达量分别下降了81%和76%,act A、plc B的表达量分别提高了2.7倍和1.8倍。hly缺失菌株的成功构建及生物特性的初步研究结果为研究Lm致病机理提供依据。

关键词：单核增生性李斯特菌 hly基因同源重组生物特性

氧浓度、活性氧和鼠骨髓造血干细胞生物特性三者之间关系的研究

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中国实验血液学杂志 2016年第1期24卷 205-210页

作者：任思婳和予馨马怡然金晶纯康丹中国医科大学附属第一医院输血科辽宁沈阳110001

目的:模似人外周血干细胞移植(peripheral blood stem cell transplantation,PBSCT)中PBHSC所经历的氧环境,探讨氧浓度和活性氧对骨髓HSC生物特性的影响。方法:采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)测定、体外扩增实验、定向分化实... 详细信息

目的:模似人外周血干细胞移植(peripheral blood stem cell transplantation,PBSCT)中PBHSC所经历的氧环境,探讨氧浓度和活性氧对骨髓HSC生物特性的影响。方法:采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)测定、体外扩增实验、定向分化实验、细胞迁徙实验、亚致死量射线辐照NOD/SCID小鼠CFU-S和归巢黏附分子表达测定以研究氧浓度及活性氧对小鼠骨髓造血干细胞生物学特性的影响及三者之间的关系。结果:氧浓度低于常氧,特别是乏氧的氧环境能降低ROS的产生扩增更多Lin^-c-kit^+Sca-1^+BM HSC,更有利于各系集落(BFU-E、CFUGM、CFU-Mix)的生长,更多地表达归巢黏附分子(CXCR4、CD44、VLA4、VLA5、P-selectin),因而更好地维持了HSC的迁徙能力,并明显促进亚致死量射线辐照NOD/SCID小鼠移植后的脾集落(CFU-S)生长;而暴露于常氧、不恒定且氧浓度变化剧烈的氧环境中的BM HSC能产生较高水平的活性氧,上述特征和功能指标都较低。结论:PBSCT中BM HSC的ROS水平与周围氧环境中氧浓度高低及稳定性密切相关,高浓度氧产生高水平的ROS高水平的ROS不利于BM HSC生物学特性的保持。在PBHSCT移植前后和体外扩中有目的地应用抗氧化剂和在恒定的浓度较低的氧环境下培养可能对BM HSC移植更有益。

关键词：活性氧氧浓度骨髓造血干细胞生物特性

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胁迫生长条件下副溶血性弧菌的生物特性分析

食品科学 2018年第6期39卷 177-182页

作者：高璐欧阳敏张辉饶胜其尹永祺杨振泉沈明君扬州大学食品科学与工程学院江苏扬州225127 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014 江苏省人兽共患病重点实验室江苏扬州225127 扬州朝天歌农牧科技有限公司江苏扬州225000

为了解副溶血性弧菌在不同环境应激条件下的生长情况,以副溶血性弧菌标准菌株(Vibrio parahaemolyticus,CICC21617)为研究对象,使其在低盐度(0.9 g/100 m L NaCl)、低pH值(pH 5.0)和高温(50℃)条件下适应性传代培养后,通过测定菌株生存... 详细信息

为了解副溶血性弧菌在不同环境应激条件下的生长情况,以副溶血性弧菌标准菌株(Vibrio parahaemolyticus,CICC21617)为研究对象,使其在低盐度(0.9 g/100 m L NaCl)、低pH值(pH 5.0)和高温(50℃)条件下适应性传代培养后,通过测定菌株生存能力、生物被膜生成能力、溶血素活力和胞外蛋白酶产量等指标分析胁迫条件下副溶血性弧菌的生物特性。结果显示,经过胁迫传代的菌株较原始菌株,其生存能力和生物被膜生成能力有所增强,而溶血素活力和胞外蛋白酶产量却明显下降,外膜蛋白的种类和表达量亦有所不同。结果说明副溶血性弧菌可能是通过改变自身生物学特性来适应外界的不利生存环境,且菌株经应激适应后对逆境生存环境的耐受性明显增强。

关键词：副溶血性弧菌胁迫生长生物特性

UL56基因下游3513bp对鸭肠炎病毒生物特性的影响

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中国农业科学 2019年第23期52卷 4390-4397页

作者：毛娅卿张兵王团结侯力丹黄小洁刘丹赵俊杰李启红王乐元李俊平杨承槐中国兽医药品监察所

【目的】鸭肠炎病毒(duck enteritis virus, DEV)属于疱疹病毒,能感染鸭、鹅等雁形目禽类,可引起产蛋下降及高死亡率,已报道了多株DEV的全基因组序列,DEV基因组大,长度约158—162 kb。与疫苗株相比,DEV疫苗检验用参考强毒株基因组UL区5... 详细信息

【目的】鸭肠炎病毒(duck enteritis virus, DEV)属于疱疹病毒,能感染鸭、鹅等雁形目禽类,可引起产蛋下降及高死亡率,已报道了多株DEV的全基因组序列,DEV基因组大,长度约158—162 kb。与疫苗株相比,DEV疫苗检验用参考强毒株基因组UL区5′端连续插入3 513 bp(2 716—6 228位核苷酸)导致UL56基因移框突变。目前关于DEV基因功能、致病机理等报道较少。本研究通过构建了重组病毒,以研究连续3 513 bp插入对DEV生物特性的影响;【方法】以提取的DEV基因组DNA为模板,分别扩增UL56基因上下游两端同源臂UL56-u、UL56-d。将两同源臂片段克隆到pMD18T-Simple载体,获得重组质粒pT-UL56ud。将重组质粒pT-UL56ud用Mlu I酶切,电泳回收去磷酸化后,将红色荧光蛋白(RFP)表达盒插入到pT-UL56ud中,获得重组质粒pT-UL56-RFP。DEV接种鸭胚成纤维细胞(DEF)(MOI=0.1),吸附1—2 h后,按Lipofectamine 2000说明书转染高纯质粒pT-UL56-RFP,通过同源重组的方法,以红色荧光蛋白(RFP)基因为报告基因,构建了缺失DEV UL56下游3 513bp的重组病毒DEV△3513及其回复株DEVΔ3513(R)。将重组病毒及其亲本病毒分别接种25 cm2的细胞瓶中(MOI=0.01),测量其病毒含量,绘制一步生长曲线;将重组病毒及其亲本病毒分别作适当稀释,接种已长成单层DEF,加入M199营养琼脂糖覆盖,培养5—7 d,随机选取20个蚀斑,测量蚀斑面积;将重组病毒、回复株及其亲本病毒分别以105.0TCID50肌肉注射6周龄易感麻鸭进行致病性试验,观察10 d,每天记录发病死亡情况。试验结束后剖检所有存活鸭。对全部动物取肝脏组织,固定于4%多聚甲醛溶液,按常规程序制备病理切片并进行H.E染色;将重组病毒及鸭瘟商品化活疫苗株(CVCC AV1222)分别以103.0TCID50肌肉注射6周龄易感麻鸭进行免疫原性试验,在免疫后14 d,腿部肌肉注射接种DEV强毒(CVCC AV1221),每只103.0MLD。观察10 d,每天记录发病死亡情况。【结果】通过同源重组的方法,获得携带RFP的重组病毒DEV△3513-RFP、缺失DEV UL56下游3 513 bp的重组病毒DEV△3513及其回复株DEVΔ3513(R)。重组病毒DEVΔ3513、DEVΔ3513(R)及其亲本毒均在接种DEF后72 h,病毒含量达到峰值(106.2-6.5TCID50/0.1 mL),病毒含量无明显差异;均能在DEF细胞中形成清晰蚀斑,大小无明显差异;DEVΔ3513对6周龄易感麻鸭毒力明显减弱,未出现任何临床症状和死亡;DEVΔ3513以103.0TCID50/只免疫麻鸭,能抵抗DEV强毒株的攻击;【结论】成功构建了缺失UL56基因下游3 513 bp的重组病毒,首次证实UL56基因下游3 513 bp对DEV在细胞中的复制是非必需的;缺失UL56基因下游3 513 bp后病毒仍保留良好的免疫原性;UL56基因下游3 513 bp是DEV的一个毒力决定因子。

关键词：鸭肠炎病毒 UL56基因下游3513 bp 重组病毒生物特性

新型生物可降解支架材料生物特性及在损伤胆道修复中的应用

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中国组织工程研究 2016年第30期20卷 4434-4441页

作者：马利锋李涛张立超刘国超王建龙河北医科大学附属第二医院胆道微创外科河北省石家庄市050000

背景:多种原因会导致胆道损伤的出现,损伤后的修复重建难度较大。支架置入是一种常用的方法,但以往大多使用金属或者塑料支架,容易导致一定不良反应的出现。目的:探讨新型生物可降解支架材料的生物特性及其在胆道损伤中的修复效果。方法... 详细信息

背景:多种原因会导致胆道损伤的出现,损伤后的修复重建难度较大。支架置入是一种常用的方法,但以往大多使用金属或者塑料支架,容易导致一定不良反应的出现。目的:探讨新型生物可降解支架材料的生物特性及其在胆道损伤中的修复效果。方法:利用人新鲜胆汁检测新型生物可降解支架材料生物特性,观察其在不同时间的降解情况。纳入巴马小型猪30只,随机分为观察组和对照组,每组15只,均制备胆道损伤模型。对照组实施胆管间断缝合修复,观察组实施新型生物可降解支架联合大网膜修复治疗。观察支架的生物学性能,对比观察2组动物不同时间肝酶及血总胆红素检测水平,苏木精-伊红染色、Masson染色结果以及α-平滑肌肌动蛋白免疫组化检测结果。结果与结论:(1)术前及术后1,3,6个月对2组的肝酶及血总胆红素进行检测,不同时间组间及组内比较差异均无显著性意义(P均>0.05);(2)苏木精-伊红染色和Masson染色观察结果发现,术后不同时间观察组的吻合口炎性反应与纤维增生程度均轻于对照组;(3)术后1,3个月,2组α-平滑肌肌动蛋白阳性评分均呈现出不断增加的情况,术后3个月均达到最大值,之后开始下降。且术后3,6个月,观察组的α-平滑肌肌动蛋白阳性评分均显著低于对照组(P生物可降解支架材料具有良好的生物特性,应用于胆道损伤中可以获得理想的修复效果。

关键词：胆道支架免疫化学组织工程生物材料材料相容性胆道损伤可降解材料生物特性肝酶血总胆红素修复

马立克病病毒1型LZ1309株的分离鉴定与生物特性分析

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中国兽医科学 2015年第5期45卷 490-496页

作者：李慧敏罗琼刘郁夫郭凯赵兵温良海陈瑞爱华南农业大学兽医学院广东广州510642 广东大华农动物保健品股份有限公司分子免疫学实验室广东广州510642

从免疫马立克病(MD)HVT和CVI988疫苗的甘肃某规模化鸡场采集MD阳性病鸡抗凝全血,分离淋巴细胞,接种于鸡胚成纤维细胞,分离出1株马立克病病毒(MDV)。病毒蚀斑纯化后经PCR和间接免疫荧光鉴定,该毒株为MDV1型毒株,命名为LZ1309株。PCR扩增... 详细信息

从免疫马立克病(MD)HVT和CVI988疫苗的甘肃某规模化鸡场采集MD阳性病鸡抗凝全血,分离淋巴细胞,接种于鸡胚成纤维细胞,分离出1株马立克病病毒(MDV)。病毒蚀斑纯化后经PCR和间接免疫荧光鉴定,该毒株为MDV1型毒株,命名为LZ1309株。PCR扩增并测序致瘤基因meq。核苷酸同源性分析结果显示,与国内分离株LS株的同源性最高(99.9%),与CVI988株的同源性最低(98.8%)。氨基酸序列分析显示,氨基酸突变位点符合国内强毒株的特征。为掌握LZ1309株的致病力,进行了LZ1309株攻毒试验。结果显示,LZ1309株攻毒组鸡的死亡率为13.3%,攻毒组鸡体重显著降低,肝、脾、腺胃乳头和心脏均出现肿瘤结节,胸腺和法氏囊严重萎缩。PCR检测攻毒鸡的器官组织,均能扩增到MDV1型强毒株meq基因的特异性条带。本研究成功分离鉴定出1株MDV强毒株,此结果为研究国内MDV毒力演化、致病机理和疫苗研发奠定了重要基础。

关键词：马立克病病毒分离鉴定生物特性致病性

单增李斯特菌(EGDe)sigB基因缺失株的构建及其生物特性的初步鉴定

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现代食品科技 2017年第9期33卷 102-108页

作者：陈国薇刘武康丁承超谢曼曼郭亮董庆利刘箐上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093

单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种人畜共患的食源性致病菌,在感染过程中可以穿越人体肠道屏障、胎盘屏障及血脑屏障,进而引发肠胃炎、脑膜炎及孕妇流产等疾病。Sigma B(sigB)基因编码产生的sigma B因子是许多... 详细信息

单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种人畜共患的食源性致病菌,在感染过程中可以穿越人体肠道屏障、胎盘屏障及血脑屏障,进而引发肠胃炎、脑膜炎及孕妇流产等疾病。Sigma B(sigB)基因编码产生的sigma B因子是许多革兰氏阳性菌对环境胁迫产生应答反应的主要调控因子,并且直接或间接的调控Lm中相关重要毒力基因如prf A、inl A等的表达。本文通过同源重组技术将Lm野生菌株EGDe的sigB基因敲除,并且对缺失菌株的生长曲线,inl A、inl B、prf A等13种Lm的毒力基因表达水平及对肠道上皮细胞Caco-2的侵袭进行了研究。实验表明,EGDe-ΔsigB基因缺失菌株生长速度与EGDe基本一致;sigB基因的缺失造成inl A和inl B基因表达水平的大幅度下调,但act A和plc A等毒力基因却上调4~5倍,说明sigB基因对于单核增生性李斯特菌的一些毒力基因表达影响比较大;Caco-2细胞的侵袭实验显示EGDe-ΔsigB基因的缺失对Caco-2细胞侵袭能力的下降。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌 sigB 生物特性细胞侵袭