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液态芯片技术筛选胸腔积液细胞因子诊断结核性胸膜炎的价值研究

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天津医药 2023年

作者：杜凤娇杜博平贾红彦邢爱英李自慧朱传智李华首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所结核二科耐药结核病研究北京市重点实验室

目的应用液态芯片技术筛选结核性胸膜炎（plTB）胸腔积液结核特异性细胞因子建立诊断模型，并探讨其应用价值。方法纳入plTB患者（plTB组）86例，其中确诊plTB组41例，临床诊断plTB组45例；其他胸腔积液患者（对照组）42例。采用液相... 详细信息

目的应用液态芯片技术筛选结核性胸膜炎（plTB）胸腔积液结核特异性细胞因子建立诊断模型，并探讨其应用价值。方法纳入plTB患者（plTB组）86例，其中确诊plTB组41例，临床诊断plTB组45例；其他胸腔积液患者（对照组）42例。采用液相芯片技术分析胸腔积液17个细胞因子：白细胞介素（IL）-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-10、γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)、IL-15、IL-17F、IL-27、肿瘤坏死因子（TNF）-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎症蛋白-3a(MIP-3α)、巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）、β-干扰素（IFN-β）的表达量。筛选确诊plTB组和对照组组间差异因子，并在确诊plTB患者中绘制受试者工作特征（ROC）曲线，将AUC>0.850且特异度>80%的IP-10、IL-27和MCP-1联合诊断plTB，并同胸腔积液腺苷酸脱氨酶（ADA）检测、***比较，评估诊断效能。结果确诊plTB组IL-2、IL-6、IP-10、IL-27、TNF-α和MCP-1水平均高于对照组（P0.05），三因子联合诊断plTB的敏感度为87.2%，特异度为81.0%。plTB组中，***的敏感度为81.4%,IP-10、IL-27和MCP-1三因子联合检测和***的敏感度均高于ADA检测的敏感度54.7%(P液态芯片技术对胸腔积液IP-10、IL-27和MCP-1联合检测，可为plTB诊断提供帮助。

关键词：结核胸腔积液胸膜炎白细胞介素-27 液态芯片技术 γ-干扰素诱导蛋白10 单核细胞趋化蛋白-1

液态芯片技术分析RA患者血清免疫复合物对滑膜细胞分泌细胞因子的影响

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临床检验杂志 2011年第8期29卷 561-563页

作者：高德玉王凯刘阳夏海萍严孝岭虞伟李晓军南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院临床中心实验科南京210002

目的用液态芯片技术研究类风湿关节炎(RA)患者血清免疫复合物(IC)对关节成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌细胞因子的影响。方法用聚乙二醇(PEG)沉淀法分别提取10份抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)阳性的RA患者及健康人对照血清IC,间接ELISA法测定IC中A... 详细信息

目的用液态芯片技术研究类风湿关节炎(RA)患者血清免疫复合物(IC)对关节成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌细胞因子的影响。方法用聚乙二醇(PEG)沉淀法分别提取10份抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)阳性的RA患者及健康人对照血清IC,间接ELISA法测定IC中ACCP特异性IC水平。体外培养RA患者关节FLS,分别用RA患者ACCP-IC阳性IC(ACCP+-IC)、ACCP-IC阴性IC(ACCP--IC)及健康人对照血清IC(C-IC)刺激FLS,培养24 h后,用液态芯片技术检测不同来源IC刺激对FLS分泌IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、GM-CSF、EGF、VEGF等11种细胞因子水平的影响。结果 10份RA患者血清中提取的IC,包括ACCP+-IC 6份和ACCP--IC 4份,刺激FLS 24 h后,可诱导细胞分泌大量IL-6、IL-8和GM-CSF;其中ACCP+-IC组刺激FLS分泌GM-CSF和IL-8水平均显著高于ACCP--IC组。3组刺激物组刺激分泌IL-1β、IL-2、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、EGF、VEGF等其他8种细胞因子含量均无显著性差异。结论 ACCP+-IC具备更强的促FLS分泌GM-CSF、IL-6和IL-8的活性。

关键词：类风湿关节炎液态芯片技术瓜氨酸化抗原细胞因子免疫复合物抗环瓜氨酸肽抗体

液态芯片技术在急性下呼吸道病毒感染检测中的应用及临床特征分析

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液态芯片技术在急性下呼吸道病毒感染检测中的应用及临床特征分析

作者：黄文森福建医科大学

学位级别：硕士

目的:应用液态芯片技术检测急性下呼吸道感染病毒病原体,评价液态芯片技术的临床应用价值,分析病毒的病原学分布,并收集病例的临床信息,分析急性下呼吸道病毒感染的流行病学及临床特征,以期指导临床诊断与治疗。方法:收集福建省立医院... 详细信息

目的:应用液态芯片技术检测急性下呼吸道感染病毒病原体,评价液态芯片技术的临床应用价值,分析病毒的病原学分布,并收集病例的临床信息,分析急性下呼吸道病毒感染的流行病学及临床特征,以期指导临床诊断与治疗。方法:收集福建省立医院呼吸科2015年1月到2016年5月呼吸科下呼吸道感染的住院病例327例,以液态芯片技术检测12种呼吸道病毒,回顾分析病毒感染的病原学分布,以RT-PCR技术为“金标准”进行比较,对液态芯片技术的检测结果进行评价。根据金标准的检测结果,将病原明确的病例分为病毒组与细菌组,收集病例的临床信息,使用卡方检验、共线性分析及多因素logistics分析等方法,分析急性下呼吸道病毒感染与细菌感染的临床特征差异。结论:应用液态芯片技术检测327份患者的痰/肺泡灌洗液(BALF)标本,共检出126例(38.5%)阳性,其中100例(79.4%)为单一病毒感染,其它的均为2种病毒混合感染,以甲型流感病毒(Flu-A)混合巨细胞病毒(HCMV)感染为主。本次研究共检出152株病毒,以甲型流感病毒(Flu-A)(43.4%)和巨细胞病毒(HCMV)(40.8%)为主,以RT-PCR技术为“金标准”评价液态芯片技术,两种检测方法在各种病毒的检出结果及总检出率比较无显著差异(P>0.05),灵敏度为69.6%,特异度为98.3%,Kappa值为0.641,尚且可认为2种技术的检测结果具有较高的一致性。同时比较病毒组与细菌组的临床特征,发现发病到就诊时间较短、具有一种以上基础疾病、发热(≥37.3℃)特别是体温大于38.5℃、无痰/白痰和白细胞计数不升高,是病毒感染较细菌感染有差异的临床特征。结论:液态芯片技术可同时检测12种呼吸道病毒,与RT-PCR检测结果具有较高的一致性,可作为临床筛查病毒感染的工具。急性下呼吸道病毒感染以单一感染为主,甲型流感病毒(Flu-A)和巨细胞病毒(HCMV)检出率较高。发病到就诊时间较短、具有一种以上基础疾病、发热(≥37.3℃)特别是体温大于38.5℃、无痰/白痰和白细胞计数不升高,是病毒感染较细菌感染有差异的临床特征,可作为临床诊断与治疗的参考。

关键词：急性下呼吸道感染病毒液态芯片技术 RT-PCR 临床特征 logistic多因素分析

多重PCR检测方法和液态芯片技术在呼吸道病毒检测中的应用研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2014年第4期28卷 302-304页

作者：张万菊管文采田棣何静刘祎徐磊钱方兴俞慧菊李扬揭志军胡芸文上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心 201508 上海市长宁区中心医院上海交通大学医学院附属新华医院同济大学附属东方医院

目的评估澳大利亚维多利亚感染性疾病参比实验室（The Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory,VIDRL）的呼吸道病毒多重PCR检测方法和Luminex公司多指标同步分析液态芯片技术-呼吸道病毒检测试剂盒（xTAG RVP）,应用于... 详细信息

目的评估澳大利亚维多利亚感染性疾病参比实验室（The Victorian Infectious Diseases Reference Laboratory,VIDRL）的呼吸道病毒多重PCR检测方法和Luminex公司多指标同步分析液态芯片技术-呼吸道病毒检测试剂盒（xTAG RVP）,应用于多种常见呼吸道病毒检测的优势和缺点,为更好地、有针对性地选择合适技术进行临床实验诊断或公共卫生应急检测提供依据.方法使用VIDRL的呼吸道病毒多重PCR检测方法和Luminex公司xTAG RVP试剂盒对198份临床流感样症状患者的咽拭子标本进行常见呼吸道病毒的核酸检测.结果 198份临床标本经VIDRL多重PCR方法和xTAG RVP方法检测,阳性率分别为38.89％和45.45％,符合率为72.22％.单一病毒的符合率为87.88％～100％.结论 xTAG RVP方法与VIDRL多重PCR方法相比,两者在常见呼吸道病毒检测中的特异性和敏感性相近,xTAG RVP方法具有明显的快速和高通量的优势.

关键词：聚合酶链反应液态芯片技术

液态芯片技术在β地中海贫血基因检测中的应用研究

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热带医学杂志 2007年第7期7卷 642-644页

作者：张松邹汉良罗史科朱平安梁汉章赵毅深圳市盐田区人民医院深圳518081

目的探讨液态芯片技术在检测β地中海贫血基因突变常见类型的应用价值。方法采用液态芯片技术,使用Luminex100多功能悬浮点阵检测仪及Lumi2 nex Data Collector Version1.7数据收集软件检测并通过突变标本与正常标本的荧光强度比值(Muta... 详细信息

目的探讨液态芯片技术在检测β地中海贫血基因突变常见类型的应用价值。方法采用液态芯片技术,使用Luminex100多功能悬浮点阵检测仪及Lumi2 nex Data Collector Version1.7数据收集软件检测并通过突变标本与正常标本的荧光强度比值(Mutan/Normal)分析100份正常人标本及68份PCR反向杂交技术确认的β地中海贫血基因突变标本。结果100份正常标本检测结果正常。68份β地贫基因突变检测结果为密码子CD41/42(TCTT)突变37例(54.41%),IVS2-654(C→T)突变杂合12例(17.65%),-28(A→G)突变10例(14.71%),-17(A→T)突变5例(7.35%),CD71/72(+A)2例(2.94%),-29(A→G)突变杂合1例(1.47%)。密码子71/72(+A)复合IVS2-654(C→T)突变杂合1例,-28(A→G)复合密码子CD41/42-TCTT突变2例,单位点突变β地贫病人为95.59%(65/68),多位点突变为4.41%(3/68)。7种突变杂合类型与常用方法PCR-RDB检测结果为100%符合率。结论液态芯片技术能准确区分β地贫基因突变杂合复合突变,可提供快速、敏感的临床β地贫基因突变检测技术平台。

关键词：液态芯片技术 β地中海贫血基因分析

多重荧光定量PCR和液态芯片技术对下呼吸道病毒检测的应用比较

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临床检验杂志 2016年第7期34卷 544-547页

作者：伊洁徐英春窦亚玲中国医学科学院北京协和医院检验科北京100730

目的比较荷兰Patho Finder公司多重荧光定量PCR技术(Respi Finder 2SMART试剂盒,简称Respi Finder检测)和加拿大Luminex公司液态芯片技术(呼吸道病毒检测试剂盒,简称x TAG RVP)对下呼吸道标本病毒检测的结果。方法收集2015年1至12月于... 详细信息

目的比较荷兰Patho Finder公司多重荧光定量PCR技术(Respi Finder 2SMART试剂盒,简称Respi Finder检测)和加拿大Luminex公司液态芯片技术(呼吸道病毒检测试剂盒,简称x TAG RVP)对下呼吸道标本病毒检测的结果。方法收集2015年1至12月于北京协和医院疑似病毒性肺炎住院患者100例下呼吸道标本,分别利用Respi Finder和x TAG RVP检测试剂进行常见呼吸道病毒核酸检测,并全部进行PCR及测序分析,比较两种方法的敏感性和特异性。结果 100份下呼吸道标本经Respi Finder和x TAG RVP方法检测,阳性率分别为60.0%和51.0%,混合感染率均为8.0%。两种方法结果一致率为80.0%。以PCR及测序结果为准,经Respi Finder和x TAG RVP方法检测的敏感性分别为97.9%和94.3%,特异性分别为74.5%和97.9%,阳性预测值分别为78.3%和98.0%,阴性预测值分别为95.0%和93.9%,两法检测特异性及阳性预测值差异有统计学意义(P<0.05)。结论与Respi Finder方法相比,x TAG RVP对常见呼吸道病毒检测的特异性较好,敏感性相当,对呼吸道病毒的检测性能优于Respi Finder检测。

关键词：多重荧光定量PCR Respi Finder 液态芯片技术 xTAG RVP 呼吸道病毒

Treg/Th17细胞对结核的诊断价值及高通量检测结核免疫分子谱的应用

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Treg/Th17细胞对结核的诊断价值及高通量检测结核免疫分子谱的应用

作者：章明徐第三军医大学

学位级别：硕士

背景结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的一种传染性疾病。目前结核病的疫情仍然十分严峻,早期、快速诊断对于结核病的治疗和控制传播都有极其重要的意义。机体抵抗结核杆菌的免疫机制主要包括体液免疫和细... 详细信息

背景结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的一种传染性疾病。目前结核病的疫情仍然十分严峻,早期、快速诊断对于结核病的治疗和控制传播都有极其重要的意义。机体抵抗结核杆菌的免疫机制主要包括体液免疫和细胞免疫,因此结核病的诊断也主要从体液免疫和细胞免疫两个方面入手。体液免疫诊断主要是检测患者体液中结核杆菌抗原、抗体以及免疫过程中产生的各种免疫分子;而细胞免疫诊断则是通过检测细胞免疫功能进行疾病的诊断,它包括T细胞的数量、功能及其产物如细胞因子等的检测。目前结核病的实验室诊断主要有痰涂片抗酸染色法、细菌培养法、结核杆菌PCR扩增法以及γ干扰素释放试验(IGRAs)等。其中痰涂片检查阳性率低;痰培养需时又太长;PCR扩增法技术要求较高;IGRAs可一定程度上弥补上述不足,具有较高的灵敏度和特异性,但仍不能满足临床需要,不能区分结核潜伏期、活动期,对结核病不同病程的诊断也十分困难。由于不同结核感染人群存在不同免疫分子谱,采用高通量检测方法同时检测体液免疫和细胞免疫的多个结核免疫标志物,可有效提升结核诊断阳性率,并有可能通过对结核病不同病程时免疫分子谱的表达研究,了解结核杆菌感染活动期、潜伏感染期的抗原结构、功能及表达情况,发现新的诊断分子标志物。目的本研究旨在通过流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测结核感染后不同病程患者体内细胞免疫中起重要作用的调节性T细胞(Regulatory cell,Treg)和TH17细胞,构建以液态芯片技术(Luminex)为平台的多种结核免疫分子(EGF、FGF-2、Eotaxin、TGF-α、G-CSF、Fit-3L、GM-CSF、Fractalkine、IFN-α2、IFNγ、GRO、IL-10、MCP-3、IL-12P40、MDC、IL-12P70、IL-13、IL-15、sCD40L、IL-17A、IL-1RA、IL-1α、IL-9、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IP-10、MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、TNF-α、TNF-β、VEGF)同时检测的高通量检测技术,并分析不同病程结核免疫分子谱表达情况,确定结核病的不同感染阶段特有的生物学标志物,为临床对结核患者的诊断、免疫功能和预后评估提供科学依据。方法1.分别采集结核感染活动期(66例)、潜伏感染期(57例)以及健康对照人群(58例)外周静脉抗凝全血,通过流式细胞术检测不同阶段患者外周血中treg细胞和th17细胞的表达水平,同时通过elisa法检测血浆中细胞因子il-10和il-17的表达情况,分析这两类t淋巴细胞亚群在结核病不同病程中的表达情况及用于区分结核感染不同病程的可能性。并用roc曲线验证各指标用于区分结核活动性感染和潜伏性感染的诊断效益。2.分别采集结核感染活动期(50例)、潜伏感染期(49例)以及健康对照人群(50例)外周静脉抗凝全血,通过液态芯片技术同时检测38种(egf、fgf-2、eotaxin、tgf-α、g-csf、fit-3l、gm-csf、fractalkine、ifn-α2、ifnγ、gro、il-10、mcp-3、il-12p40、mdc、il-12p70、il-13、il-15、scd40l、il-17a、il-1ra、il-1α、il-9、il-1β、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、ip-10、mcp-1、mip-1α、mip-1β、tnf-α、tnf-β、vegf)与结核感染相关的免疫标志物,分析结核杆菌感染不同状态下免疫标志物的表达情况,了解结核杆菌感染活动期、潜伏感染期的抗原结构、功能及表达情况,从而提高结核感染诊断的阳性率和发现新的诊断分子标志物。并用roc曲线验证各指标用于区分结核活动性感染和潜伏性感染的诊断效益。结果1.结核活动期组treg细胞和th17细胞的比例明显高于结核潜伏期组和正常对照组(treg细胞:9.61±2.26%vs6.31±1.44%和9.61±2.26%vs4.16±1.01%p0.05)。结核活动期组il-10和il-17的表达量明显高于结核潜伏期组和正常对照组(p<0.05),结核潜伏期组il-10的表达量明显高于正常对照组(p<0.05),但结核潜伏期组il-17

关键词： Treg细胞 Th17细胞流式细胞术液态芯片技术高通量检测结核免疫分子谱

雷帕霉素对改良的EAM小鼠调节性T细胞及其相关细胞因子影响的研究

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雷帕霉素对改良的EAM小鼠调节性T细胞及其相关细胞因子影响的研究

作者：康娟第四军医大学

学位级别：硕士

人类特发性炎性肌病(IIM)是一组异质性的骨骼肌炎性疾病,以肌肉无力和炎细胞浸润肌纤维表现为特征。既往研究表明它是一组自身免疫性疾病,然而,由于该病的确切病因和发病机制知道甚少,并且糖皮质激素和免疫抑制剂的治疗虽有部分疗效,但... 详细信息

人类特发性炎性肌病(IIM)是一组异质性的骨骼肌炎性疾病,以肌肉无力和炎细胞浸润肌纤维表现为特征。既往研究表明它是一组自身免疫性疾病,然而,由于该病的确切病因和发病机制知道甚少,并且糖皮质激素和免疫抑制剂的治疗虽有部分疗效,但有很多副作用。为解决这个问题,建立一个理想的实验性自身免疫性肌炎(EAM)动物模型一直被探索着。在以往的研究中应用肌溶浆、部分提纯的的骨骼肌肌球蛋白、C-蛋白、C-蛋白的第二片段(SC2)、转基因鼠诱导EAM动物模型,都存在不同程度的方法复杂、耗时、肌炎轻、重复性差和低成功等缺点。因此,在本研究中,我们对传统方法进行改良,通过增加肌球蛋白的量和百日咳毒素(PT)的接种次数,成功建立了省时、重复性好的EAM动物模型。 IIM是一种自身免疫性疾病。而调节性T细胞(Treg)在免疫抑制中起重要作用,提高其数量和功能可避免自身免疫性疾病的发生。以往研究表明糖皮质激素和雷帕霉素(Rapa)等能增加Treg数量,并且甲泼尼龙琥珀酸钠(下文简称甲强龙)治疗IIM有效,因此,以甲强龙治疗为对照,评估雷帕霉素的疗效。目的: 建立一种省时、高效、可重复的实验性自身免疫性肌炎动物模型,为研究人类IIM提供实验工具。评估雷帕霉素对EAM疗效及其对Treg的影响,初步了解EAM的发病机制,为人类IIM提供新的治疗策略。方法: 实验一:豚鼠的肌浆球蛋白分别用两种方法诱导EAM动物模型,比较其建模效果。48只BALB/c小鼠被随机分为3组,传统模型组、改良模型组和辅剂对照组,各组16只。传统模型组:CFA+1mg肌球蛋白,免疫4次,PT注射1次;改良模型组:CFA+1.5mg肌球蛋白,免疫2次,PT注射2次;辅剂对照组:CFA+生理盐水,免疫2次,PT注射1次。在最后一次免疫后10天,比较组间在肌力、脾脏外观、肌酸激酶、肌电图、病理和免疫组织化学方面的差异。实验二:20只BALB/c小鼠被随机分为4组:正常组、EAM组(改良模型组)、甲强龙干预组,雷帕霉素干预组,各组5只。正常组:未进行任何处理。模型组:按改良模型组的方法建立模型,在最后一次免疫后10天,观测。甲强龙和雷帕霉素干预组:按模型组方法建立动物模型,在最后一次免疫后10天,开始分别给予甲强龙和雷帕霉素,连续腹腔注射14天,干预结束次日,进行以下方面的观测:肌力、脾脏外观、病理和免疫组织化学染色、血清细胞因子、流式细胞术(FCM)测定脾脏淋巴细胞中Foxp3的表达及肌肉和脾脏中Foxp3的mRNA水平。结果: 实验一:三组肌力均下降,传统组、改良组和对照组肌力分别是55.05±7.27S、22.81±9.28S、98.16±13.79S;(三组间P≤0.01);传统组、改良组和对照组肌酸激酶分别是2526.77±930.22u/L、2618.19±640.35 u/L、1161.69±267.98 u/L,(两模型组间P>0.05,模型与对照组P≤0.01);肌电图的测量,模型组比对照组明显的持续时间短,振幅低,(未做统计学处理);传统组、改良组和对照组组织学得分分别是:2.45±0.73、2.51±0.61、0.47±0.31,(两模型组间P>0.05,模型与对照组P≤0.01);模型组免疫组织化学染色显示MHC-I过表达在一些纤维中但不弥散,CD8+T细胞主要位于肌内膜,部分浸润非坏死的肌纤维,尽管有大量的CD4+T细胞在肌内膜,相对少量的CD4+T细胞浸润肌纤维,这些发现仅存在于模型组,而对照组没发现。实验二:正常、EAM、甲强龙和雷帕霉素干预组肌力分别是>30min、20.50±2.27 S、88.13±4.77 S、102.20±7.83S,(组间P≤0.01);正常组脾脏体积小、光滑红润;模型组脾脏明显增大并有粘连,而干预组脾脏则介于正常与模型组之间;正常、EAM、甲强龙和雷帕霉素干预组组织学得分分别是0、2.22±0.12、1.72±0.16和1.28±0.19,(组间P≤0.05);FCM检测脾细胞Treg表达比例分别是正常组3.7±0.34%、模型组12.52±1.71%、甲强龙组5.65±0.83%、雷帕霉素7.08±0.56%;液态芯片技术检测血清细胞因子TGF-B1和IL-10分别是正常组1046.75±82.01和4.58±0.93、模型组2087.00±74.27和15.36±0.50、甲强龙组2238.50±134.29和.2.82±0.33、雷帕霉素组2501.75±329.11和2.39±0.32(正常组与甲强龙组P>0.05;甲强龙与雷帕霉素组P>0.05);肌肉和脾脏中Foxp3的mRNA水平分别是正常组2.76±0.47和94.94±7.13、模型组0.38±0.10和16.44±2.19、甲强龙组2.46±0.36和100

关键词：特发性肌炎实验性自身免疫性肌炎调节性T细胞甲强龙雷帕霉素流式细胞术液态芯片技术

联合检测IFN-γ、IP-10对结核性胸腔积液的诊断价值

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联合检测IFN-γ、IP-10对结核性胸腔积液的诊断价值

作者：刘佳庆天津医科大学

学位级别：硕士

目的：渗出性胸腔积液在临床上以结核性和恶性胸腔积液最为多见,两者治疗和预后迥然不同,故正确鉴别非常重要。寻找一种合适的无创的并且灵敏度、特异性、准确性均较高的检测指标是获得早期,准确诊断的必需。γ-干扰素(Interferon-γ, ... 详细信息

目的：渗出性胸腔积液在临床上以结核性和恶性胸腔积液最为多见,两者治疗和预后迥然不同,故正确鉴别非常重要。寻找一种合适的无创的并且灵敏度、特异性、准确性均较高的检测指标是获得早期,准确诊断的必需。γ-干扰素(Interferon-γ, IFN-γ)和IFN-γ诱导蛋白10(Interferon-γ inducible protein10,IP-10)是目前公认的鉴别诊断结核性胸腔积液和恶性胸腔积液有价值的指标。IFN-γ的测定主要是通过IFN-γ释放试验(IFN-γ release assays, IGRAs),不受卡介苗(bacillus Calmette-Guerin, BCG)和非结核分枝杆菌的影响,与传统结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test, TST)相比具有更高的灵敏度和特异性,但费用昂贵,操作复杂,步骤繁琐。而近几年采用的液态芯片技术是多功能、多指标的并行分析系统,集编码微球、激光技术、流式细胞、数字信号处理等技术于一体,具有高通量、高效率的特点,自动化程度高,操作简单,结果准确,节省时间。因此本研究欲探讨液态芯片技术联合检测IFN-γ和IP-10对结核性胸腔积液的诊断价值,通过与经典的结核感染T细胞检测(T-cell spot of tuberculosis test, ***)方法对比,验证其诊断的准确度及临床上的应用价值及优劣势。方法：渗出性胸腔积液患者共90例,包括结核组(结核性胸腔积液)52例、对照组(除结核性胸腔积液外的其它胸腔积液)38例。临床正规治疗前抽取胸腔积液50m1,用***方法测定其中释放IFN-γ的结核感染T细胞数量,同时,利用液态芯片技术测定胸腔积液中IFN-γ和IP-10水平,经Binary Logistic逐步回归得到预测因子P作为联合检测的参数与***方法比较临床诊断价值的差异。结果： ***、IFN-γ、IP-10及联合诊断四者诊断结核性胸腔积液的敏感性分别为90.38%、90.38%、94.23%、98.08%;特异性分别为84.21%、92.11%、94.74,97.37%;阳性似然比分别为5.72、11.45、17.90、37.27;阴性似然比分别为0.11、0.10、0.061、0.020;ROC曲线下面积(area under roc curve, AUC)分别为0.938、0.965、0.962、0.995。联合诊断法与***比较,两者阳性率的差异没有统计学意义(P>0.05),诊断一致性良好(KAPPA=0.703);两者AUC比较P=0.0459液态芯片技术联合检测IFN-γ和IP-10诊断结核性胸腔积液,准确度高,操作简单、报告时限短,可以满足辅助临床诊断结核性胸腔积液的需要,应该推荐临床推广应用。

关键词：液态芯片技术 IFN-γ IP-10 结核感染T细胞检测结核性胸腔积液