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梅岭霉素发酵过程参数相关分析和优化

中国抗生素杂志 2004年第1期29卷 1-3,43页

作者：庄英萍陈斌晏秋鸿储炬郭美锦张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心(上海) 上海200237

对新型微生物农药梅岭霉素的发酵过程进行研究。通过对发酵过程表征细胞代谢和工程特性的特征参数:氧消耗速率、二氧化碳生成速率、呼吸商、氧传递系数等进行实时在线检测,并利用参数相关分析的方法,对原有工艺不断调整,实现了梅岭霉素... 详细信息

对新型微生物农药梅岭霉素的发酵过程进行研究。通过对发酵过程表征细胞代谢和工程特性的特征参数:氧消耗速率、二氧化碳生成速率、呼吸商、氧传递系数等进行实时在线检测,并利用参数相关分析的方法,对原有工艺不断调整,实现了梅岭霉素发酵过程的初步优化,使发酵效价从原来的150u/ml提高到520u/ml。

关键词：梅岭霉素参数检测相关分析发酵优化

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梅岭霉素的分离纯化

中国医药工业杂志 2005年第5期36卷 268-271页

作者：郑华淦庄英萍郭美锦储炬张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心上海200237 江西农业大学生物工程系

利用南昌霉素在较低pH介质中加热时易降解而梅岭霉素较稳定的性质,结合溶剂萃取法除去杂质,纯化梅岭霉素。经全波长扫描、HPLC和质谱分析等,推测梅岭霉素同系物的分子结构。

关键词：梅岭霉素南昌霉素间系物纯化萃取

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中心组合设计优化梅岭霉素发酵培养基

高技术通讯 2002年第12期12卷 29-33页

作者：陈斌庄英萍郭美锦储炬张嗣良西北大学化工系西安710069 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

应用中心组合设计对梅岭霉素发酵培养基进行优化。通过部分因子实验对发酵培养基进行评估 ,确认玉米粉、淀粉和酵母粉是影响梅岭霉素发酵水平的关键因子 ,通过快速登高法搜索关键组分的适宜浓度范围。在此基础上 ,采用中心组合设计方法 ... 详细信息

应用中心组合设计对梅岭霉素发酵培养基进行优化。通过部分因子实验对发酵培养基进行评估 ,确认玉米粉、淀粉和酵母粉是影响梅岭霉素发酵水平的关键因子 ,通过快速登高法搜索关键组分的适宜浓度范围。在此基础上 ,采用中心组合设计方法 ,基关键因子的数学模型 ,确定关键组分的最佳浓度与优化后的培养基并进行实验验证。经上述优化过程 ,梅岭霉素发酵单位从 5 1 3μg/ml提高至 2 31 8μg/ml。

关键词：梅岭霉素中心组合设计优化抗生素发酵培养基

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梅岭霉素高产菌株链霉素抗性基因突变株筛选

微生物学通报 2002年第6期29卷 33-37页

作者：涂国全刘姝黎循航江西农业大学生物工程系南昌330045

通过链霉素对梅岭霉素 (Meilingmycin)产生菌南昌链霉菌NS 41 80菌株孢子致死浓度的测定 ,采用诱变剂EMS 4种不同剂量对菌株孢子进行诱变处理 ,然后涂布在含链霉素致死浓度的高氏平板上 ,获得了大量的链霉素抗性基因 (str)突变株。并... 详细信息

通过链霉素对梅岭霉素 (Meilingmycin)产生菌南昌链霉菌NS 41 80菌株孢子致死浓度的测定 ,采用诱变剂EMS 4种不同剂量对菌株孢子进行诱变处理 ,然后涂布在含链霉素致死浓度的高氏平板上 ,获得了大量的链霉素抗性基因 (str)突变株。并进一步筛选到梅岭霉素高产菌株 80 5 1 1 2 2 1 ,在摇瓶条件下 ,只产梅岭霉素不产南昌霉素 ,梅岭霉素活性单位达 1 ,52 1 μg/mL,比NS 41 80的摇瓶发酵单位 855μg/mL提高了 77 9% ,该菌株连续传 6代进行摇瓶发酵 ,其F2 代和F3 代发酵单位稳定 ,F4代至F6 代随着代数增加 ,梅岭霉素发酵单位急速下降。通过EMS诱变剂量分别与抗药性突变率和str突变株产梅岭霉素产量的产势统计分析表明 ,菌株抗药性突变与产量突变密切相关。产量突变的EMS剂量高于str突变剂量 ,从而建立了梅岭霉素产生菌链霉素抗性基因突变筛选方法。

关键词：南昌链霉菌杀虫抗生素梅岭霉素高产菌株链霉素抗性基因突变株筛选

侧链前体3,3-二甲基丙烯酸对梅岭霉素生物合成的影响

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中国抗生素杂志 2005年第10期30卷 581-585页

作者：王平庄英萍储炬张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

研究梅岭霉素发酵过程中添加其主要组分M B 1所拥有的侧链前体-3,3-二甲基丙烯酸,使M B 1效价及其在总组分中的比例得到大幅度提高,达到提高产量并控制组分的目的。本文还对侧链前体的添加方式、添加时间以及添加浓度进行了优化。结果显... 详细信息

研究梅岭霉素发酵过程中添加其主要组分M B 1所拥有的侧链前体-3,3-二甲基丙烯酸,使M B 1效价及其在总组分中的比例得到大幅度提高,达到提高产量并控制组分的目的。本文还对侧链前体的添加方式、添加时间以及添加浓度进行了优化。结果显示,0h时添加6mm ol/L的侧链前体其产量最高,M B 1效价比对照高出43%,其在总组分中的比例达到了52.7%。

关键词：梅岭霉素 3,3-二甲基丙烯酸侧链前体

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南昌链霉菌生物合成梅岭霉素种子制备优化

中国抗生素杂志 2003年第11期28卷 641-644页

作者：陈斌庄英萍郭美锦储炬张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心西北大学化学工程系西安710069

以参数相关理论为指导,优化南昌链霉菌生物合成梅岭霉素种子制备工艺。结果表明,培养20～35h后,pH7.30～7.50,总糖10%,溶磷<100μg/ml,菌丝分化启动有利于提高梅岭霉素的发酵效价。

以参数相关理论为指导,优化南昌链霉菌生物合成梅岭霉素种子制备工艺。结果表明,培养20～35h后,pH7.30～7.50,总糖10%,溶磷梅岭霉素的发酵效价。

关键词：梅岭霉素种子优化参数相关

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高效液相色谱法同时检测南昌霉素和梅岭霉素

色谱 2002年第1期20卷 43-45页

作者：孙宇晖周秀芬涂国全邓子新上海交通大学生命科学技术学院BioX生命科学研究中心上海200030 江西农业大学生物工程系生物技术研究开发中心江西南昌330045

采用高效液相色谱法同时分离测定聚醚类抗生素南昌霉素和十六元大环内酯类抗生素梅岭霉素。色谱柱为WatersXTerraTM RP18柱 (3 9mmi.d .× 15 0mm ,5 μm) ,流动相为乙腈水溶液 ,流速为 0 8mL/min ,其梯度洗脱程序为 5 7% (体积分数 ,... 详细信息

采用高效液相色谱法同时分离测定聚醚类抗生素南昌霉素和十六元大环内酯类抗生素梅岭霉素。色谱柱为WatersXTerraTM RP18柱 (3 9mmi.d .× 15 0mm ,5 μm) ,流动相为乙腈水溶液 ,流速为 0 8mL/min ,其梯度洗脱程序为 5 7% (体积分数 ,下同 )乙腈 (30min)→ 70 %乙腈 (2min)→ 80 %乙腈 (2min)→ 90 %乙腈 (16min)。检测波长为 2 34nm ,柱温 2 5℃。该法测定的灵敏度好 ,加标回收率高 ,可用于南昌链霉菌发酵液中南昌霉素和梅岭霉素的定量测定。此法具有灵敏、准确、快速的特点。

关键词：高效液相色谱法南昌霉素梅岭霉素分析抗生素南昌链霉菌发酵液

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铵离子对梅岭霉素生物合成的调控效应

微生物学报 2005年第3期45卷 405-409页

作者：王平庄英萍储炬张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

通过考察不同浓度的硫酸铵对梅岭霉素生物合成的影响,证实在低浓度下,硫酸铵可以促进梅岭霉素的生物合成,当其浓度大于5mmol L时,菌丝生长和产物合成均受到抑制,而耗糖速率却随着铵离子的浓度增大而增大。在此基础上,进一步测定了与梅... 详细信息

通过考察不同浓度的硫酸铵对梅岭霉素生物合成的影响,证实在低浓度下,硫酸铵可以促进梅岭霉素的生物合成,当其浓度大于5mmol L时,菌丝生长和产物合成均受到抑制,而耗糖速率却随着铵离子的浓度增大而增大。在此基础上,进一步测定了与梅岭霉素生物合成和糖代谢过程密切相关的6种酶的活性变化,结果表明较高浓度的铵离子对6_磷酸葡萄糖脱氢酶、柠檬酸合成酶、琥珀酸脱氢酶以及脂肪酸合成酶的活性均表现出一定的促进作用,而对缬氨酸脱氢酶和甲基丙二酰CoA羧基转移酶的活性进行抑制,由此产生的结果一方面是HMP途径和TCA循环得到了加强,促进了菌体的初级代谢,另一方面则是梅岭霉素生物合成所需前体的来源受到限制。

关键词：梅岭霉素铵离子生物合成酶活性

梅岭霉素产生菌抗药性突变标志诱变筛选模型的初步研究

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Virologica Sinica 2000年第S1期21卷 208-214页

作者：涂国全刘姝黎循航江西农业大学生物工程系南昌330045

本文通过梅岭霉素 (Meilingmycin)产生菌南昌链霉菌NS 4 1 80菌株孢子对 6种抗生素敏感性测定 ,采用诱变剂EMS四种不同诱变剂量对菌株孢子进行诱变处理 ,诱变处理的孢子涂布在含致死浓度链霉素的高氏平板上。然后从抗药性突变标志菌株... 详细信息

本文通过梅岭霉素 (Meilingmycin)产生菌南昌链霉菌NS 4 1 80菌株孢子对 6种抗生素敏感性测定 ,采用诱变剂EMS四种不同诱变剂量对菌株孢子进行诱变处理 ,诱变处理的孢子涂布在含致死浓度链霉素的高氏平板上。然后从抗药性突变标志菌株中进一步筛选梅岭霉素高产菌株。在 150 0多个抗药性突变株中通过初筛获得了比诱变出发菌株的产素能力提高 50 %以上菌株。通过诱变剂量分别与抗药性突变率和突变株产素产量的变势统计分析表明 ,菌株抗药性突变与产素突变密切相关 ,产素突变的EMS诱变剂量高于抗药性突变诱变剂量 ,在 0 .0 3mol/LEMS剂量作用下 ,菌株致死率为 99.4 3% ,抗药性突变率为 0 .0 4 4 0 % ,建立了梅岭霉素产生菌抗药性突变标志诱变推理性筛选模型。为南昌链霉菌高产菌种选育研究作了有益的尝试 ,并有助于其它链霉菌属的抗生素产生菌育种研究。

关键词：梅岭霉素菌种选育抗药性突变标志筛选模型