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核糖核酸酶特殊生物学功能及药理作用研究新进展

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生物医学工程学杂志 2001年第3期18卷 456-460页

作者：张颖李伟军苏志国中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京100080

核糖核酸酶作为一种模型蛋白被普遍用于分子生物学研究。近年来的一系列研究表明 ,核糖核酸酶及其结构类似物具有许多重要的生物学功能 ,如控制肿瘤血管生成 ,杀灭肿瘤细胞及抑制病毒 (包括 HIV- 1病毒 )的复制等 ,引起人们的广泛关注... 详细信息

核糖核酸酶作为一种模型蛋白被普遍用于分子生物学研究。近年来的一系列研究表明 ,核糖核酸酶及其结构类似物具有许多重要的生物学功能 ,如控制肿瘤血管生成 ,杀灭肿瘤细胞及抑制病毒 (包括 HIV- 1病毒 )的复制等 ,引起人们的广泛关注。核糖核酸酶家族大多具有裂解 RNA的活性 ,因此可与抗体连接构成具有显著的靶向性及人源化的免疫毒素 ,被用来杀伤癌细胞及其它异常增殖细胞。

关键词：核糖核酸酶细胞毒性免疫毒素分子生物学药理作用

核糖核酸酶含量测定作为乳腺肿瘤标志物的探索

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中国肿瘤临床 1994年第8期21卷 582-584页

作者：赵勇蔡方陈松旺西安医科大学第一附属医院外科西安市710061 西安医科大学病理教研室西安医科大学第二附属医院肿瘤外科

以204例正常人,91例良性乳腺疾病患者为对照组,测定和分析了45例恶性乳腺肿瘤患者和32例乳腺癌癌前病变(22例乳腺囊性增生,10例乳腺导管上皮不典型增生)患者血清、尿液核糖核酸酶(RNase)含量及其部分乳腺癌患者术前后RNase含量的变化.... 详细信息

以204例正常人,91例良性乳腺疾病患者为对照组,测定和分析了45例恶性乳腺肿瘤患者和32例乳腺癌癌前病变(22例乳腺囊性增生,10例乳腺导管上皮不典型增生)患者血清、尿液核糖核酸酶(RNase)含量及其部分乳腺癌患者术前后RNase含量的变化.结果表明:恶性肿瘤组RNase水平明显高于对照组,癌前病变组亦明显高于对照组,乳腺癌术后RNase含量较术前明显降低.提示RNase是乳腺肿瘤的良好标志物,测定RNase水平对乳腺癌早期诊断、鉴别诊断以及确定乳腺癌高发人群确有一定意义,同时可作为估计疗效的一项良好指标.

关键词：核糖核酸酶乳腺癌乳腺肿瘤癌前病变标志物

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谷胱甘肽键合柱对变性核糖核酸酶的复性研究

高等学校化学学报 2012年第5期33卷 925-930页

作者：柯从玉孟祖超西安石油大学化学化工学院西安710065

将氧化还原型谷胱甘肽(GSH/GSSG)共价键合到色谱固定相上,实现了对变性核糖核酸酶(RNase)的复性.实验发现,谷胱甘肽键合柱具有典型的弱阳离子交换性质,在离子交换(IEC)模式下能够对4种标准蛋白进行基线分离,且具有较高的柱效.当蛋白浓度... 详细信息

将氧化还原型谷胱甘肽(GSH/GSSG)共价键合到色谱固定相上,实现了对变性核糖核酸酶(RNase)的复性.实验发现,谷胱甘肽键合柱具有典型的弱阳离子交换性质,在离子交换(IEC)模式下能够对4种标准蛋白进行基线分离,且具有较高的柱效.当蛋白浓度为5 mg/mL,流速为0.2 mL/min时,在流动相中不加GSH/GSSG的条件下,GSH/GSSG柱对变性核糖核酸酶的活性回收率可达(39.5±3.8)%,而普通IEC柱对变性核糖核酸酶的活性回收率几乎为0,说明其对变性蛋白二硫键的正确对接具有明显的促进作用;在收集液中加入GSH/GSSG后,其活性回收率可达到(81.5±4.3)%.本文结果对蛋白折叠液相色谱法的发展及降低蛋白复性成本具有一定的应用价值.

关键词：蛋白折叠核糖核酸酶离子交换色谱谷胱甘肽键合柱

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重金属离子对牛胰核糖核酸酶的作用机理

光谱学与光谱分析 2002年第4期22卷 651-654页

作者：洪法水王雪峰苏国兴潘新法沈颂东苏州大学生命科学院生物科学系江苏苏州215006

通过在核糖核酸酶介质中加入Ce3 +,Cd2 +,Pb2 +,研究其对核糖核酸酶活性影响的作用机理。结果表明低浓度重金属离子对酶活性有激活作用 ,高浓度则严重抑制酶活性。荧光滴定表明在一个RNase分子上结合一个Ce3 +、或三个Cd2 +、或三个Pb2... 详细信息

通过在核糖核酸酶介质中加入Ce3 +,Cd2 +,Pb2 +,研究其对核糖核酸酶活性影响的作用机理。结果表明低浓度重金属离子对酶活性有激活作用 ,高浓度则严重抑制酶活性。荧光滴定表明在一个RNase分子上结合一个Ce3 +、或三个Cd2 +、或三个Pb2 +,因而导致了酶的构象改变。

关键词：重金属离子牛胰核糖核酸酶作用机理酶活性结合位点重金属污染核酸代谢生理效应

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苦瓜核糖核酸酶的分离纯化与性质分析

中国食品学报 2017年第1期17卷 148-153页

作者：林岱吴文峰柯李晶周建武饶平凡浙江工商大学食品与生物工程学院杭州310018 福州大学生物工程研究所福州350002

目的:分离纯化苦瓜核糖核酸酶,并进行酶学性质及生物学性质研究,为其生物活性蛋白研究提供依据。方法:采用乙醇沉降、C_(18)反相高效液相色谱、Tricine-SDS-PAGE和等电聚焦等方法分离纯化与鉴定,以酵母tRNA为底物测定核糖核酸酶酶活性... 详细信息

目的:分离纯化苦瓜核糖核酸酶,并进行酶学性质及生物学性质研究,为其生物活性蛋白研究提供依据。方法:采用乙醇沉降、C_(18)反相高效液相色谱、Tricine-SDS-PAGE和等电聚焦等方法分离纯化与鉴定,以酵母tRNA为底物测定核糖核酸酶酶活性。结果 :从苦瓜中分离纯化获得一种核糖核酸酶,命名为MC-RNase。Tricine-SDS-PAGE和C18反相液相色谱鉴定表明该酶具有较高纯度。其N-端氨基酸序列为VNEFDYYQVVLQWQPAT,相对分子质量为14 ku,等电点PI值为8.1;酶学性质表明,该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为5,金属离子Zn^(2+)、Fe^(2+)、Fe^(3+)、Mg^(2+)对该酶均有抑制作用,而Pb^(2+)可以增强该酶活性;细胞试验结果表明,该酶对人正常细胞L-02及肝癌细胞Hep-G2并没有明显的抑制作用。结论:从新鲜苦瓜组织中分离并鉴定出一种新的核糖核酸酶。

关键词：苦瓜分离纯化核糖核酸酶表征

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核糖核酸酶抑制因子对血管生成素功能的调控

中国生物化学与分子生物学报 2015年第12期31卷 1247-1252页

作者：钟镇宇陈俊霞重庆医科大学第一临床学院重庆400016 重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室重庆400016

血管生成素(angiogenin,ANG)能有效促进血管生成和肿瘤细胞增殖,在肿瘤发生发展中起重要作用.其主要分子机制是通过核转位和激活PI3K/AKT/m TOR信号通路,刺激r RNA转录和核糖体生成.ANG也被发现在肌萎缩侧索硬化症(ALS)和帕金森病(PD)... 详细信息

血管生成素(angiogenin,ANG)能有效促进血管生成和肿瘤细胞增殖,在肿瘤发生发展中起重要作用.其主要分子机制是通过核转位和激活PI3K/AKT/m TOR信号通路,刺激r RNA转录和核糖体生成.ANG也被发现在肌萎缩侧索硬化症(ALS)和帕金森病(PD)患者中存在基因编码区的功能突变,表明其在运动神经元生理方面发挥作用,其缺陷是神经退行性疾病的一个危险因素.核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)是胞内酸性蛋白质,由460个氨基酸残基组成,分子质量约为50 k D,当其与核糖核酸酶A(RNase A)结合形成复合物后,可抑制RNase A的90%以上活性,从而有效调节细胞内RNA水平.ANG具有低核糖核酸酶活性,是RNase超家族一员,与RNase A有着高度保守的同源顺序.序列、结构和酶学等分析表明,RI也能够与ANG紧密结合,且得到体外实验的证明.研究发现,RI具抑癌基因功能;RI与ANG在细胞内共定位;Co-IP和GST pull-down证实其相互作用,获取了RI与ANG在体内结合的直接证据;RI与AKT磷酸化表达负相关.在膀胱癌细胞及临床标本中证实了RI与ANG和PI3K/AKT通路分子表达的相关性及与肿瘤细胞生长与转移的关系.在细胞和动物模型研究表明,RI调节ANG活性的功能及其分子机制,即RI通过结合ANG而封锁其核转位和调控PI3K/AKT/m TOR信号通路及其相关通路交互应答(cross-talk)的能力,从而抑制肿瘤生长及转移.RI是一个有希望的抗肿瘤蛋白新药和血管生成抑制剂,可望成为基因治疗的靶基因.

关键词：核糖核酸酶抑制因子血管生成素血管生成核糖核酸酶

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核糖核酸酶超家族A对感染病病原体的抑制

中华传染病杂志 2014年第4期32卷 254-256页

作者：周晓棠李淑萍陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室传染病诊治协同创新中心杭州310003

哺乳动物核糖核酸酶超家族A （ribonuclease A superfamily,RNase A）是最早在牛胰腺细胞中发现的一类具有RNA切割、血管生成、介导天然免疫等多种生物学功能的相对分子质量较小的蛋白,成熟的蛋白相对分子质量为14×103～16×103,包含6... 详细信息

哺乳动物核糖核酸酶超家族A （ribonuclease A superfamily,RNase A）是最早在牛胰腺细胞中发现的一类具有RNA切割、血管生成、介导天然免疫等多种生物学功能的相对分子质量较小的蛋白,成熟的蛋白相对分子质量为14×103～16×103,包含6～8个半胱氨酸残基,部分蛋白拥有与其酶解功能相关的结构域[1].该家族是目前人类基因组发现的唯一“脊椎动物”特有的酶家族,它们的基因均位于14q11.2上,各亚分子的基因序列存在高度相似性,在已经明确结构的亚分子中均发现存在二硫键[1].

关键词：核糖核酸酶超家族相对分子质量病原体感染病人类基因组 RNase 生物学功能

核糖核酸酶抑制因子对恶性实体瘤生长的抑制作用

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肿瘤 1996年第1期16卷 33-34页

作者：于秀萍崔秀云高颖王玉林大连医科大学生化教研室

核糖核酸酶抑制因子对恶性实体瘤生长的抑制作用于秀萍，崔秀云，高颖，王玉林大连医科大学生化教研室（大连１１６０２３）核糖核酸酶抑制因子（ＲｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＲＮａｓｉｎ）是一种糖蛋白，广泛存在于... 详细信息

核糖核酸酶抑制因子对恶性实体瘤生长的抑制作用于秀萍，崔秀云，高颖，王玉林大连医科大学生化教研室（大连１１６０２３）核糖核酸酶抑制因子（ＲｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＲＮａｓｉｎ）是一种糖蛋白，广泛存在于细胞的可溶性部分［１］。它能与ＲＮ...

关键词： RNasin 恶性实体瘤核糖核酸酶抑制作用

核糖核酸酶A在DAB-环己烷溶液中的活性和构象

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物理化学学报 1996年第4期12卷 353-356页

作者：黄文李晓峰顾惕人北京航天航空大学化学教研室北京100083

The activity and conformation of ribonuclerse A (RNaseA) solubilized in cyclohexane via dodecylammonium butyrate(DAB) reverse Ancelles were investigated. The activity of RNaseA was studied using the cytidine 2’,3’-phosphate as the substrate, and it was found that kcat increases significantly with respect to that in water attended by an increased Km·FT-IR spectra of RNaseA in reverse Ancellax solution were investigated as a function of w0(= [H2O]/ [DAB]), and it was noted that the structure of RNaseA became looser in reverse micelles campared to that in aqueous solution. The relation between activity and conformation was discussed.

关键词：核糖核酸酶反胶束构象 DAB 环己烷活性