谷胱甘肽键合柱对变性核糖核酸酶的复性研究

作     者：柯从玉 孟祖超 KE Cong-Yu;MENG Zu-Chao

作者机构：西安石油大学化学化工学院西安710065 

出 版 物：《高等学校化学学报》 (Chemical Journal of Chinese Universities)

年 卷 期：2012年第33卷第5期

页      面：925-930页

核心收录：

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39880003) 西安石油大学博士科研启动基金(批准号:YS29030804)资助 

主　　题：蛋白折叠 核糖核酸酶 离子交换色谱 谷胱甘肽键合柱 

摘      要：将氧化还原型谷胱甘肽(GSH/GSSG)共价键合到色谱固定相上,实现了对变性核糖核酸酶(RNase)的复性.实验发现,谷胱甘肽键合柱具有典型的弱阳离子交换性质,在离子交换(IEC)模式下能够对4种标准蛋白进行基线分离,且具有较高的柱效.当蛋白浓度为5 mg/mL,流速为0.2 mL/min时,在流动相中不加GSH/GSSG的条件下,GSH/GSSG柱对变性核糖核酸酶的活性回收率可达(39.5±3.8)%,而普通IEC柱对变性核糖核酸酶的活性回收率几乎为0,说明其对变性蛋白二硫键的正确对接具有明显的促进作用;在收集液中加入GSH/GSSG后,其活性回收率可达到(81.5±4.3)%.本文结果对蛋白折叠液相色谱法的发展及降低蛋白复性成本具有一定的应用价值.