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柴胡皂苷d抑制肝星状细胞活化及PSME3表达的实验研究

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福建中医药 2024年第6期55卷 25-28页

作者：江继超洪洲潘光旭李君菡黄欣郑琳张捷平福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建中医药大学附属人民医院福建福州350004

目的观察柴胡皂苷d对人肝星状细胞LX-2活化及蛋白酶体激活子亚基3(PSME3)mRNA和蛋白表达的影响,探讨柴胡皂苷d治疗肝纤维化的可能作用机制。方法将生长期良好的LX-2细胞分为正常组、模型组和柴胡皂苷d组,空白组不加药物,模型组以10 ng/m... 详细信息

目的观察柴胡皂苷d对人肝星状细胞LX-2活化及蛋白酶体激活子亚基3(PSME3)mRNA和蛋白表达的影响,探讨柴胡皂苷d治疗肝纤维化的可能作用机制。方法将生长期良好的LX-2细胞分为正常组、模型组和柴胡皂苷d组,空白组不加药物,模型组以10 ng/mL转化生长因子-β1(TGF-β1)处理,柴胡皂苷d组以1μmol/L柴胡皂苷d+10 ng/mL TGF-β1联合处理24 h,采用CCK8检测各组细胞活力,qPCR和Western blot检测纤维化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、1型胶原蛋白(COL1A1)和PSME3 mRNA相对表达水平和蛋白表达量。结果与正常组比较,模型组细胞增殖活力显著增加(P柴胡皂苷d组细胞增殖活力下降(P柴胡皂苷d对LX-2细胞活化有抑制作用,其机制可能与抑制PSME3 mRNA表达水平和蛋白表达量有关。

关键词：肝纤维化肝星状细胞活化柴胡皂苷d 蛋白酶体激活子亚基3

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柴胡皂苷d调控糖酵解抑制乳腺癌细胞增殖的机制研究

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解剖科学进展 2024年第4期 405-408页

作者：孙路马欣刘运峰龙猛曹晓宁李建军中国医科大学附属第一医院肿瘤放射治疗科中国医科大学附属口腔医院科研与学科建设部中国医科大学人民医院辽宁省人民医院肿瘤科

目的探讨柴胡皂苷d通过糖酵解途径对乳腺癌细胞增殖的影响。方法将浓度为0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和50μmol/L的柴胡皂苷d加入到乳腺癌细胞中，通过四甲基偶氮唑盐法(tetramethylazolium salt, MTT)和免疫蛋白印迹法(Western b... 详细信息

目的探讨柴胡皂苷d通过糖酵解途径对乳腺癌细胞增殖的影响。方法将浓度为0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L和50μmol/L的柴胡皂苷d加入到乳腺癌细胞中，通过四甲基偶氮唑盐法(tetramethylazolium salt, MTT)和免疫蛋白印迹法(Western blot)分别检测MCF-7细胞活力和细胞中STAT3、JAK2、p-STAT3和p-JAK2蛋白表达水平；试剂盒检测分析细胞凋亡变化和乳酸生成和葡萄糖消耗情况；qPCR检测MCF-7细胞糖酵解相关酶mRNA水平。结果不同时间点，10μmol/L、20μmol/L和50μmol/L柴胡皂苷d均能使MCF-7细胞活力显著降低(P柴胡皂苷d可能通过抑制JAK2/STAT3通路抑制乳腺癌细胞增殖，促进细胞凋亡，抑制细胞糖酵解过程。

关键词：柴胡皂苷d MCF-7细胞增殖糖酵解 JAK2/STAT3

柴胡解表退热功效相关生物活性指标与柴胡皂苷a、柴胡皂苷d含量相关性分析

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中国现代中药 2024年第1期26卷 37-48页

作者：刘壮壮康媛郭怡琳郭欣慰李西蒙蔡润兰高源齐云中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的:寻找与柴胡解表退热功效相关的生物活性指标,并探明此功效的生物活性量化值与柴胡皂苷a(SSa)和柴胡皂苷d (SSd)含量是否具有相关性。方法:采用临床煎药方式获得柴胡水煎液,并通过醇沉去除多糖和蛋白质等大分子物质,得到适宜体外实... 详细信息

目的:寻找与柴胡解表退热功效相关的生物活性指标,并探明此功效的生物活性量化值与柴胡皂苷a(SSa)和柴胡皂苷d (SSd)含量是否具有相关性。方法:采用临床煎药方式获得柴胡水煎液,并通过醇沉去除多糖和蛋白质等大分子物质,得到适宜体外实验的柴胡提取物。从抗炎、抗过敏、抗氧化应激及解热这4类与柴胡解表退热功效相关的体外模型中筛选量效关系明确的生物活性指标,并赋予各项指标不同的权重系数,对7个柴胡样品在各项指标上的作用强弱进行排序打分;分数与相应指标权重的积为该项得分;每项得分之和为该样品解表退热之生物活性量化值;采用CCK-8法检测细胞活力;Griss法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)水平;ELISA法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及补体活化水平;铁离子还原能力法(FRAP)测定总抗氧化能力;高效液相色谱法测定柴胡中的SSa和SSd含量。结果:筛选得到4项关联柴胡解表退热功效的量效关系明确的生物活性指标,分别为脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞分泌NO、LPS诱导THP-1细胞分泌TNF-α、总抗氧化能力及酵母多糖介导的替代途径补体活化。相关性分析显示,7个样品的SSa和SSd总量与解表退热的生物活性量化值不相关。结论:柴胡解表退热可能与其抑制促炎因子(NO)生成、压制内生性致热原(TNF-α)生成、抗氧化及抗补体C5a活化有关,而《中华人民共和国药典》 2020年版柴胡指标性成分SSa和SSd可能并非柴胡该功效的物质基础。

关键词：解表退热生物活性柴胡皂苷a 柴胡皂苷d 抗炎抗氧化内生性致热原补体

柴胡皂苷d对阿霉素治疗小鼠肝癌的靶向导引作用

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中草药 2021年第3期52卷 778-788页

作者：许严伟耿胜男王梦琪杜钢军郑州工业应用技术学院河南郑州451150 洛阳市第三人民医院河南洛阳471000 河南大学药学院河南开封475000

目的探讨柴胡皂苷d对阿霉素治疗小鼠肝癌可能的靶向导引作用。方法以小鼠肝癌H_(22)实体瘤模型评价柴胡皂苷d与阿霉素单独或联合对荷瘤小鼠的治疗效果。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖情况,激光全息系统分析细... 详细信息

目的探讨柴胡皂苷d对阿霉素治疗小鼠肝癌可能的靶向导引作用。方法以小鼠肝癌H_(22)实体瘤模型评价柴胡皂苷d与阿霉素单独或联合对荷瘤小鼠的治疗效果。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖情况,激光全息系统分析细胞大小,2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(2′,7′-dichlorodi-hydrofluoresceindiacetate,dCFH-dA)检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,线粒体示踪绿检测细胞线粒体功能,吖啶橙(acridine orange,AO)染色检测细胞自噬情况,Western blotting印迹法检测细胞有机阴离子转运多肽(organic aniontransporting polypeptide 1B1,Oatp1b1)的表达情况。结果0.5~16μg/m L柴胡皂苷d不影响H_(22)细胞增殖,但能增加H_(22)细胞体积,促进细胞摄取阿霉素,增强阿霉素的细胞增殖抑制作用。柴胡皂苷d能降低H_(22)细胞ROS水平,促进细胞线粒体功能和细胞自噬,增加细胞Oatp1b1的表达。柴胡皂苷d在20 mg/kg对小鼠肝癌H_(22)皮下实体瘤生长无影响,增加瘤组织阿霉素摄取,提高阿霉素对肝肿瘤的治疗效果。柴胡皂苷d可改善瘤组织细胞外基质沉积,降低转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平和血管通透性。结论柴胡皂苷d对阿霉素治疗小鼠肝癌有靶向导引作用,其机制是促进细胞自噬及线粒体功能,继而促进Oatp1b1表达,减少细胞外基质沉积。

关键词：柴胡皂苷d 阿霉素肝癌H22细胞导引作用靶向治疗

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柴胡皂苷d的体内外肠道吸收机制研究

中国药科大学学报 2022年第4期53卷 473-480页

作者：邢媛月任偲琪刘奇玮杨晋妮董海娟宋瑞张尊建中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室南京210009 中国药科大学公共实验室平台南京210009

为揭示柴胡皂苷d(SSd)的体内外肠道吸收机制,采用Caco-2单层和大鼠在体单向肠灌流模型,研究了不同实验条件(时间、浓度、温度、pH、肠段)、转运蛋白抑制剂、细胞旁途径增强剂、代谢酶抑制剂等因素对SSd体内外肠道吸收的影响。研究结果表... 详细信息

为揭示柴胡皂苷d(SSd)的体内外肠道吸收机制,采用Caco-2单层和大鼠在体单向肠灌流模型,研究了不同实验条件(时间、浓度、温度、pH、肠段)、转运蛋白抑制剂、细胞旁途径增强剂、代谢酶抑制剂等因素对SSd体内外肠道吸收的影响。研究结果表明,SSd的表观渗透系数(P_(app))和有效渗透系数(P_(eff))分别为4.75×10^(-7)~6.38×10^(-7)cm/s和0.19×10^(-4)~0.27×10^(-4)cm/s,提示其属于低渗透性化合物,SSd的跨膜转运具有浓度(0.5~5μmol/L)和时间(0~180 min)依赖性,回肠是其主要吸收部位;P-糖蛋白抑制剂和细胞旁途径增强剂均显著增强SSd的体内外吸收(Pd肠道吸收影响的体内外相关性较差,这可能与上述转运蛋白在空肠中表达量较低有关。本研究结果表明,SSd的肠道吸收涉及被动扩散、主动转运以及细胞旁通路途径等方式,P-糖蛋白在SSd的主动转运中发挥重要作用。

关键词：柴胡皂苷d 吸收 Caco-2单层单向肠灌流 UPLC-MS/MS

柴胡皂苷d对大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及其机制研究

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陆军军医大学学报 2022年第14期44卷 1410-1420页

作者：黄祎夏莉雷青松张长江刘华宝李麟重庆市中医院肝病科重庆400021 重庆大学附属肿瘤医院肿瘤放射治疗中心重庆400030

目的结合网络药理学分析与动物实验验证,探讨柴胡皂苷d(saikosaponin d,SSd)对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及机制。方法网络药理学分析方法获得SSd与自身免疫性肝病的潜在靶点,利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白... 详细信息

目的结合网络药理学分析与动物实验验证,探讨柴胡皂苷d(saikosaponin d,SSd)对猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化的保护作用及机制。方法网络药理学分析方法获得SSd与自身免疫性肝病的潜在靶点,利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用网络图。利用dAVId数据库对潜在靶点进行KEGG通路富集分析。制备大鼠免疫性肝纤维化模型,SSd干预后ELISA检测大鼠血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-18水平,HE染色观察大鼠肝脏病理改变,Western blot检测大鼠肝脏组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSdMd、TLR4、Myd88、p65及p-p65蛋白的表达。结果通过筛选获得SSd与自身免疫性肝病的潜在靶点177个,KEGG富集分析得到与免疫系统相关的通路主要包括NOd样受体信号通路等,获得潜在靶点在NOd样受体信号通路中的富集情况。实验研究显示与模型组比较,高剂量SSd可显著降低大鼠血清中ALT和AST水平(Pd可显著改善大鼠肝脏纤维化程度,减轻肝脏损伤;ELISA检测显示中、高剂量SSd可显著降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-18的水平(Pd可明显下调NLRP3、ASC、Caspase-1、GSdMd、TLR4、Myd88和p65蛋白的水平,并抑制p65的磷酸化。结论SSd能减少免疫性肝纤维化大鼠血清中炎性因子释放、减轻肝脏细胞损伤,其机制可能与调控TLR4/NF-κB和NLRP3炎症小体信号通路有关。

关键词：柴胡皂苷d 肝纤维化炎症反应 NOd样受体蛋白3炎症小体 TLR4/NF-κB信号通路

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柴胡皂苷d对肝病防治作用及机制研究进展

中草药 2022年第12期53卷 3852-3862页

作者：杨新荣窦霞李国峰宋沁洁李咸慰吴红伟李东辉李越峰甘肃中医药大学甘肃兰州730000 甘肃省中药制药工艺工程研究中心甘肃兰州730000 甘肃中医药大学附属医院甘肃兰州730000

肝病的科学研究众多,开发防治肝病的药物是当前研究的热点。总结了近年来有关柴胡药效成分防治肝病的大量文章,发现柴胡皂苷具有治疗肝病的作用,其中柴胡皂苷d(saikosaponind)药理活性最强,值得深入研究,但有关其防治肝病作用机制的报... 详细信息

肝病的科学研究众多,开发防治肝病的药物是当前研究的热点。总结了近年来有关柴胡药效成分防治肝病的大量文章,发现柴胡皂苷具有治疗肝病的作用,其中柴胡皂苷d(saikosaponind)药理活性最强,值得深入研究,但有关其防治肝病作用机制的报道较少。从柴胡皂苷d防治的常见肝病出发,对其作用机制进行总结和分析,以期为柴胡皂苷d防治肝病的深入研究和临床应用提供思路。

关键词：柴胡皂苷d 肝脏炎症肝脏损伤肝脏代谢作用机制

柴胡皂苷d通过调控mTORC信号通路诱发肝癌细胞自噬的作用研究

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中国药学杂志 2018年第19期53卷 1652-1657页

作者：王宗明王敏肖欢智贵阳中医学院第一附属医院脾胃病肝病内科贵阳550001

目的本实验旨在研究和探讨柴胡皂苷d(SSd)诱发人肝癌细胞凋亡和自噬的作用以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测SSd对肝癌细胞增殖活性的抑制作用;采用GFP荧光法检测肝癌细胞自噬体的形成;采用流式细胞术检测SSd对肝... 详细信息

目的本实验旨在研究和探讨柴胡皂苷d(SSd)诱发人肝癌细胞凋亡和自噬的作用以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测SSd对肝癌细胞增殖活性的抑制作用;采用GFP荧光法检测肝癌细胞自噬体的形成;采用流式细胞术检测SSd对肝癌细胞凋亡的影响;采用Western blot的方法检测SSd对肝癌细胞中LC3Ⅱ、Beclin 1、p-S6K1蛋白表达的影响。结果人肝癌细胞PLC、MHCC-97H、SMMC-7721以及Huh7经SSd干预48 h后,增殖活性明显受到抑制,且具有剂量依赖性。IC50分别为51. 48,46. 19,39. 87和48. 95μmol·L^(-1)。经SSd处理后,肝癌细胞出现自噬体的数量明显多于未处理的细胞(P d+3-MA和SSd+z-dEVd-fmk处理后,肝癌细胞死亡率明显低于仅用SSd处理的细胞死亡率(P d作用后,肝癌细胞LC3Ⅱ和Beclin 1的表达量较未作处理的细胞明显上调,而p-S6K1蛋白表达量明显降低(P d可以通过负调控mTORC信号传导通路诱发肝癌细胞自噬性死亡,从而发挥抗肿瘤活性。

关键词：柴胡皂苷d 肝癌细胞自噬凋亡 LC3

柴胡皂苷d抗肝纤维化大鼠脂质过氧化作用的研究

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中国中药杂志 2008年第8期33卷 915-919页

作者：何燕胡志峰李平肖诚陈玉武李克明郭景珍潘琳熊佳鹏卫生部中日友好医院北京100029

目的:探讨柴胡皂苷d(SSd)对肝纤维化过程中脂质过氧化的影响。方法:采用腹腔注射二甲基亚硝胺(dMN)10 ***-1诱导大鼠肝纤维化,以柴胡皂苷d(1.8 ***-1)同时预防给药4周,检测正常组、模型组和SSd组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(A... 详细信息

目的:探讨柴胡皂苷d(SSd)对肝纤维化过程中脂质过氧化的影响。方法:采用腹腔注射二甲基亚硝胺(dMN)10 ***-1诱导大鼠肝纤维化,以柴胡皂苷d(1.8 ***-1)同时预防给药4周,检测正常组、模型组和SSd组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、IV型胶原(IV-C)及丙二醛(MdA)含量和超氧化物歧化酶(SOd)活性及肝组织中MdA的含量和SOd的活性。结果:SSd能显著降低肝纤维化大鼠血清ALT,AST水平和HA,LN,IV-C的含量,并可提高肝组织中SOd的活性,降低血清和肝组织中的MdA的含量。结论:SSd具有很明显的保护肝细胞、抗肝纤维化的作用,其机制可能与抗脂质过氧化有关。

关键词：柴胡皂苷d 肝纤维化脂质过氧化