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乳酸菌原位生物降解胡柚果汁中柠檬苦素的研究

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农业机械学报 2008年第4期39卷 87-90页

作者：罗水忠罗建平潘利华姜绍通合肥工业大学生物与食品工程学院

探讨了乳酸菌对常山胡柚果汁柠檬苦素的降解性能并对其降解条件进行了优化。结果表明,被试的乳酸菌中有5株能够以胡柚果汁为唯一生长基质进行细胞生长并转化柠檬苦素,其中1株对柠檬苦素的降解率大于50%。该菌株降解柠檬苦素的最适条件为... 详细信息

探讨了乳酸菌对常山胡柚果汁柠檬苦素的降解性能并对其降解条件进行了优化。结果表明,被试的乳酸菌中有5株能够以胡柚果汁为唯一生长基质进行细胞生长并转化柠檬苦素,其中1株对柠檬苦素的降解率大于50%。该菌株降解柠檬苦素的最适条件为:温度37℃、果汁原始pH值、250mL三角瓶装150mL果汁、静置培养,此时对柠檬苦素的降解率为66.7%。胡柚果汁经乳酸菌处理后柠檬苦素和柚皮苷含量大幅度降低,固形物和糖度稍有增加,但是pH值和可滴定酸度变化不大。

关键词：胡柚柠檬苦素生物降解乳酸菌工艺优化

柠檬苦素通过激活AMPK减轻高脂饲料诱导的小鼠肾损伤

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畜牧兽医学报 2023年第4期54卷 1742-1750页

作者：聂桐马隽东北农业大学动物医学学院黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室哈尔滨150030

旨在研究柠檬苦素(Limonin,LM)对高脂饲料诱导的小鼠肾损伤的保护作用。选用体重21~23 g雄性C57BL/6小鼠25只,随机分为5组(n=5):对照组、LM组、高脂组、高脂+低剂量LM组(60 mg·(kg·d)^(-1))和高脂+高剂量LM组(120 mg·(kg·d)^(-1))... 详细信息

旨在研究柠檬苦素(Limonin,LM)对高脂饲料诱导的小鼠肾损伤的保护作用。选用体重21~23 g雄性C57BL/6小鼠25只,随机分为5组(n=5):对照组、LM组、高脂组、高脂+低剂量LM组(60 mg·(kg·d)^(-1))和高脂+高剂量LM组(120 mg·(kg·d)^(-1))。12周后称量各组小鼠体重;使用自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN);使用试剂盒检测肾组织TG、TC;通过苏木精-伊红(HE)、糖原(PAS)染色观察肾组织病理组织学变化;通过免疫组织化学检测肾中脂肪酸合成酶(FAS)、甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)蛋白含量;通过蛋白免疫印迹检测AMP活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化的AMPK(P-AMPK)、FAS、SREBP1、ATGL、HSL及肾损伤分子1(KIM1)的表达;通过分子对接检验LM、阿卡地新(AICA Riboside,AICAR)以及多索吗啡(Dorsomorphin,Compound C)与AMPK蛋白结合能力。结果显示,与高脂组相比,LM干预显著降低了小鼠血清和肾中甘油三酯含量(P<0.05),改善了高脂饲喂引起的肾组织病理学损伤,促进AMPK磷酸化(P<0.05),显著上调ATGL、HSL蛋白的表达(P<0.05),抑制SREBP1、FAS蛋白的表达(P<0.05)。分子对接结果显示LM能与AMPK紧密结合且存在多个与AICAR结合AMPK的相同位点。结果提示,LM通过激活AMPK减轻肾脂肪异位沉积从而改善高脂饲料诱导的小鼠肾损伤。

关键词：柠檬苦素高脂饲料肾损伤 AMP活化蛋白激酶

柠檬苦素通过抑制腺苷激酶活性改善小鼠迟发型超敏反应

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免疫学杂志 2012年第11期28卷 950-953页

作者：欧阳春丁翔连云港市第一人民医院药学部 222002

目的建立DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)模型,探讨柠檬苦素对小鼠DTH反应的影响并探索其作用机制。方法在小鼠DTH激发期腹腔注射柠檬苦素(5、10、20 mg/kg)以及地塞米松(DEX,1 mg/kg),考察化合物体内对小鼠耳肿胀程度的影响。构建... 详细信息

目的建立DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)模型,探讨柠檬苦素对小鼠DTH反应的影响并探索其作用机制。方法在小鼠DTH激发期腹腔注射柠檬苦素(5、10、20 mg/kg)以及地塞米松(DEX,1 mg/kg),考察化合物体内对小鼠耳肿胀程度的影响。构建腺苷激酶活性无细胞检测系统,考察柠檬苦素对腺苷激酶活性的抑制作用。利用高效液相色谱法(high performanceliquid chromatogroaphy,HPLC)检测小鼠耳组织局部腺苷浓度,考察柠檬苦素体内对腺苷激酶活性的抑制效应。进一步通过腺苷受体拮抗剂干预,验证腺苷在柠檬苦素治疗效果中的作用。结果 DTH小鼠耳肿胀程度以及HE染色结果均表明激发期给予柠檬苦素可以显著改善小鼠DTH。腺苷激酶活性实验证明柠檬苦素体外可以抑制腺苷激酶的活性,HPLC结果显示柠檬苦素体内可促进小鼠耳组织局部腺苷累积。腺苷受体拮抗剂咖啡因可拮抗柠檬苦素对小鼠DTH的抑制效果。结论柠檬苦素可抑制腺苷激酶活性,影响体内腺苷代谢,导致耳组织局部腺苷累积,改善小鼠迟发型超敏反应。

关键词：迟发型超敏反应柠檬苦素腺苷激酶腺苷

柠檬苦素对溃疡性结肠炎大鼠肠道损伤和肠道菌群紊乱的改善作用及机制

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中国药房 2024年第1期35卷 51-56页

作者：张霞贾慧宇康金旺赵汉清河北北方学院附属第二医院消化内科河北张家口075100 河北北方学院附属第二医院检验科河北张家口075100 河北北方学院附属第二医院中医科河北张家口075100

目的探究柠檬苦素对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道损伤和肠道菌群紊乱的改善作用及机制。方法构建UC大鼠模型,将建模成功的70只大鼠随机分为模型组和柠檬苦素低、中、高剂量组(12.5、25、50 mg/kg)以及柳氮磺胺吡啶组(阳性对照组,500 mg/kg)... 详细信息

目的探究柠檬苦素对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道损伤和肠道菌群紊乱的改善作用及机制。方法构建UC大鼠模型,将建模成功的70只大鼠随机分为模型组和柠檬苦素低、中、高剂量组(12.5、25、50 mg/kg)以及柳氮磺胺吡啶组(阳性对照组,500 mg/kg),每组14只;另取14只大鼠作为对照组。各组大鼠灌胃相应药液或等量生理盐水,每天1次,连续2周。末次给药结束24 h后,观察大鼠一般情况并称重,取结肠组织进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;检测大鼠结肠组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;观察大鼠结肠组织病理学变化;检测大鼠结肠组织中紧密连接蛋白1(Claudin-1)、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)蛋白的表达水平;基于16S rRNA检测大鼠肠道菌群的相对丰度。结果与对照组相比,模型组大鼠精神状态不佳、皮毛较暗、情绪烦躁易发怒,结肠组织腺体排列杂乱,出现炎症细胞浸润和细胞坏死、水肿现象;CMDI评分和结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,HMGB1、RAGE蛋白表达水平以及肠道变形菌门、拟杆菌门菌群的相对丰度均显著升高(P柠檬苦素各剂量组大鼠一般情况和结肠组织病理损伤均改善,上述指标水平均显著逆转(P柠檬苦素高剂量组大鼠各项指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论柠檬苦素可改善UC模型大鼠肠道损伤及肠道菌群紊乱,其作用机制可能与下调HMGB1/RAGE信号通路活性有关。

关键词：柠檬苦素溃疡性结肠炎肠道损伤肠道菌群高迁移率族蛋白B1/晚期糖基化终末产物受体信号通路

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超高效液相色谱法快速并同时检测金柑中柠檬苦素和诺米林

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中国食品学报 2013年第2期13卷 177-181页

作者：孟鹏郑宝东福建农林大学食品科学学院福州350002 福建省产品质量检验研究院福州350002

采用超高效液相色谱(UPLC)技术,建立金柑中柠檬苦素和诺米林的快速、同时检测技术。样品经二氯甲烷超声波提取,ACQUITYUPLCTMBEHC18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm)分离,以乙腈-水(45∶55)为流动相,梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温35℃,检测波... 详细信息

采用超高效液相色谱(UPLC)技术,建立金柑中柠檬苦素和诺米林的快速、同时检测技术。样品经二氯甲烷超声波提取,ACQUITYUPLCTMBEHC18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm)分离,以乙腈-水(45∶55)为流动相,梯度洗脱,流速0.3mL/min,柱温35℃,检测波长215nm。柠檬苦素和诺米林可在3min内实现同时分离、测定。柠檬苦素和诺米林分别在1～1780μg/mL和1～1720μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.9999),方法检出限分别为1.65μg/g和1.28μg/g,加标回收率分别为97.19%～100.06%和95.35%～99.83%,相对标准偏差(RSD)均小于5%。本法分析时间短,灵敏度高,操作方便,结果准确,适用于金柑中柠檬苦素和诺米林的同时测定。

关键词：超高效液相色谱柠檬苦素诺米林金柑

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柠檬苦素对大鼠肝纤维化的影响及机制初探

中国药房 2022年第24期33卷 2968-2972页

作者：肖玉洪安祯祥贵州中医药大学第一临床医学院贵阳550002 贵州中医药大学第一附属医院消化内科贵阳550001

目的探讨柠檬苦素对大鼠肝纤维化的影响及机制。方法将42只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(秋水仙碱0.1 mg/kg)和柠檬苦素低、高剂量组(12.5、50 mg/kg),正常组和模型组各9只,其余组各8只。除正常组外,采用四氯化碳构建... 详细信息

目的探讨柠檬苦素对大鼠肝纤维化的影响及机制。方法将42只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(秋水仙碱0.1 mg/kg)和柠檬苦素低、高剂量组(12.5、50 mg/kg),正常组和模型组各9只,其余组各8只。除正常组外,采用四氯化碳构建肝纤维化模型。造模成功后,正常组及模型组灌胃水,其余各组灌胃相应药物,每日1次,持续4周。末次给药后,采用酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)含量;采用苏木精-伊红(HE)及Masson染色观察肝组织形态和肝纤维化变化;采用Western blot法检测肝组织中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)蛋白表达水平,并计算p-Akt/Akt比值。结果与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、HA、LN含量均显著升高(P柠檬苦素低、高剂量组大鼠肝组织的纤维增生程度均有所减轻,除柠檬苦素低剂量组的LN、E-cadherin指标外其余指标均显著逆转(P柠檬苦素能改善大鼠肝纤维化,作用机制可能与抑制Akt磷酸化及逆转上皮间质转化进程有关。

关键词：柠檬苦素肝纤维化上皮间质转化大鼠

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印楝种子中柠檬苦素类化合物及其细胞毒活性研究

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中国中药杂志 2018年第3期43卷 537-543页

作者：卢小锋代冬梅于荣敏宋丽艳朱建华樊晓娜訾佳辰暨南大学中药生物技术研究所广东广州510632 浙江大学宁波理工学院生物与化学工程学院浙江宁波315100 中山大学生命科学院广东广州510275

采用硅胶、Sephadex LH-20、高效液相等色谱技术,对印楝干燥种子95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行了系统分离,得到8个柠檬苦素类化合物。通过与文献报道的波谱数据对比,这些化合物被鉴定为salannin（1）,1-detigloyl-1-isobutylsala... 详细信息

采用硅胶、Sephadex LH-20、高效液相等色谱技术,对印楝干燥种子95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行了系统分离,得到8个柠檬苦素类化合物。通过与文献报道的波谱数据对比,这些化合物被鉴定为salannin（1）,1-detigloyl-1-isobutylsalannin（2）,salannol-3-acetate（3）,salannol（4）,spirosendan（5）,1-detigloyloxy-3-deacetylsalannin-1-en-3-one（6）,nimbin（7）,6-deacetylnimbin（8）。化合物2和5为属内首次分离,并且化合物5为目前发现的唯一1个C环开裂、并与D环形成螺环结构的柠檬苦素。化合物6为新天然产物。在体外细胞毒活性筛选中,化合物6对人宫颈癌细胞（HeLa）和人白血病细胞（HL-60）具有一定生长抑制作用,IC（50）分别为（21.61±4.37）和（27.33±5.74）μmol·L^-1;7和8均对HeLa细胞表现出较弱生长抑制作用,IC（50）分别为（33.15±5.24）和（38.56±6.41）μmol·L^-1。

关键词：印楝柠檬苦素细胞毒活性

基于网络药理学和动物实验探讨柠檬苦素抗肝纤维化的作用机制

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中国现代应用药学 2024年第4期41卷 460-468页

作者：肖玉洪安祯祥王芳王锦雯邵霞袁颖贵州中医药大学第一临床医学院贵阳550001 达州市达川区中医医院四川达州635000 贵州中医药大学第一附属医院贵阳550001

目的通过网络药理学方法探讨柠檬苦素治疗肝纤维化的作用机制,并运用分子对接和动物实验进行验证。方法首先,利用SwissTargetPrediction、GeneCards和DisGeNet等数据库筛选柠檬苦素和肝纤维化的靶点,并运用微生信网站获得柠檬苦素与肝... 详细信息

目的通过网络药理学方法探讨柠檬苦素治疗肝纤维化的作用机制,并运用分子对接和动物实验进行验证。方法首先,利用SwissTargetPrediction、GeneCards和DisGeNet等数据库筛选柠檬苦素和肝纤维化的靶点,并运用微生信网站获得柠檬苦素与肝纤维化的共同靶点。然后运用STRING数据库和Cytoscape软件构建共同靶点的蛋白质相互作用网络,并利用CytoNCA插件筛选核心靶点;使用Metascape数据库对共同靶点进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,以预测其可能的作用机制。最后运用AutoDock Vina软件对柠檬苦素与核心靶蛋白进行分子对接验证,并将网络药理学预测结果进行动物实验验证。结果预测结果表明柠檬苦素可能作用于AKT1、VEGFA、HIF1A等86个靶点,参与激素应答、蛋白磷酸化、血管生成等生物过程和PI3K/AKT通路、HIF-1通路、VEGF通路等与肝纤维化相关的信号通路。蛋白质相互作用分析结果显示核心靶点包括AKT1、VEGFA、HIF1A、PIK3CA等11个靶点。分子对接结果表明柠檬苦素与AKT1、VEGFA、HIF1A 3个核心靶蛋白具有较强的结合活性和稳定的结合构象。动物实验显示,与模型组比较,柠檬苦素高剂量(high-dose group of limonin,LH)组、柠檬苦素低剂量(low-dose group of limonin,LL)组中血清透明质酸(hyaluronidase,HA)、层黏连蛋白(laminin,LN)含量(LL组中LN除外)均下降(P柠檬苦素主要作用于AKT1、VEGFA、HIF1A等核心靶点来干预肝纤维化血管新生,其机制可能与其抑制AKT/HIF-1α/VEGF信号通路有关。

关键词：网络药理学分子对接柠檬苦素肝纤维化血管新生

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枳实副产物中柠檬苦素最佳提取条件的研究

农业工程学报 2006年第7期22卷 226-229页

作者：刘亮戚向阳董绪燕华中农业大学食品科技学院武汉430070

通过单因素试验和旋转正交试验对枳实副产物中柠檬苦素的提取工艺进行优化。结果表明:最佳提取工艺参数为提取剂乙醇浓度78%、pH值6.5、料液比1∶6(w/v)、浸提温度60℃、提取时间2 h,该条件下柠檬苦素的提取率为94.2%。

关键词：枳实副产物柠檬苦素提取