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CQ复方对骨癌痛模型大鼠的痛觉敏化干预作用及机制

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中国实验方剂学杂志 2017年第22期23卷 119-124页

作者：张莹王志国欧阳竞锋李涛孙丹丹赵小亮焦玥刘洋姜宇懋王丹巧首都医科大学附属北京中医医院北京100010 中国中医科学院医学实验中心北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室北京100700

目的:研究CQ复方对大鼠骨癌痛模型的痛觉敏化干预作用及其相关机制。方法:将雌性Wistar大鼠随机分为假手术组和手术组,分别进行操作对照和Walker-256乳腺癌细胞移植于胫骨的转移性癌痛造模手术。将造模成功的40只大鼠随机分为模型组,CQ... 详细信息

目的:研究CQ复方对大鼠骨癌痛模型的痛觉敏化干预作用及其相关机制。方法:将雌性Wistar大鼠随机分为假手术组和手术组,分别进行操作对照和Walker-256乳腺癌细胞移植于胫骨的转移性癌痛造模手术。将造模成功的40只大鼠随机分为模型组,CQ复方高、中、低剂量组(200,150,100 mg·kg^(-1))及加巴喷丁组(100 mg·kg^(-1)),每组8只大鼠。以Von frey纤维丝测定的机械缩足阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)作为大鼠疼痛行为学评价指标;采用微透析分析仪检测脑脊液内谷氨酸(glutamate,Glu),放射免疫法检测脊髓L4~L6节段内P物质(substance P,SP)及β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)含量;采用Aim Plex流式高通量多因子检测技术分析肿瘤局部组织中白细胞介素-12(interleukin-12,IL^(-1)2-P70),神经生长因子(β-nerve growth factor,β-NGF)含量。结果:与模型组相比,CQ复方各组及加巴喷丁组均明显提高了大鼠的MWT,前者投药30 min后MWT上升,60 min升高最明显(P阈值升高呈量效依赖关系,且连续3 d投药的镇痛效果强于第1次投药;与模型组相比,CQ复方及加巴喷丁降低了骨癌痛模型大鼠脑脊液中Glu,脊髓L4~L6节段中SP,β-EP和肿瘤局部组织中β-NGF水平(P<0.05),提高了IL^(-1)2-P70的浓度(P<0.05)。结论:CQ复方具有干预骨癌痛大鼠痛觉敏化行为学指标的作用,强度与加巴喷丁相似;其机制可能与抑制中枢内兴奋性氨基酸类神经递质Glu,肽类神经调质SP,β-EP及周围组织β-NGF的水平、并促进机体免疫反应的IL^(-1)2-P70有关。

关键词： CQ复方胫骨转移性癌痛机械缩足阈值镇痛机制

肉毒毒素A对神经病理性疼痛小鼠施旺细胞髓鞘形成的影响

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中国疼痛医学杂志 2017年第4期23卷 248-255,263页

作者：李迪森周倩陈盼熊东林蒋昌宇孙伍平肖礼祖广东医科大学附属深圳南山区人民医院疼痛科深圳518000

目的:观察不同给药途径的肉毒毒素A(Botulinum neurotoxin type A,Bo NT/A)对慢性坐骨神经缩窄性损伤(Chronic constriction injury,CCI)疼痛模型小鼠的镇痛效果;研究Bo NT/A对施旺细胞髓鞘标志蛋白以及调控髓鞘形成的转录因子表达的影... 详细信息

目的:观察不同给药途径的肉毒毒素A(Botulinum neurotoxin type A,Bo NT/A)对慢性坐骨神经缩窄性损伤(Chronic constriction injury,CCI)疼痛模型小鼠的镇痛效果;研究Bo NT/A对施旺细胞髓鞘标志蛋白以及调控髓鞘形成的转录因子表达的影响。方法:通过CCI建立神经病理性疼痛模型小鼠,并随机平均分成4组:生理盐水皮下注射(intraplantar injection,***.)组、Bo NT/A皮下注射组、生理盐水神经旁注射(peripheral nerve injection,***.)组、Bo NT/A神经旁注射组,此外设置未造模的空白对照组。在造模后第5天给药,测量不同时间点各组小鼠机械缩足阈值和热缩足潜伏期的变化。在术后14天和28天分别对Bo NT/A皮下注射组、生理盐水皮下注射组及空白对照组小鼠进行坐骨神经采样,应用蛋白印迹检测坐骨神经髓鞘相关蛋白MBP、P0、Krox-20及C-jun表达量的变化,应用免疫荧光技术检测坐骨神经P0的表达情况。结果:皮下注射或神经旁注射Bo NT/A均可增加神经病理性疼痛模型小鼠的机械缩足阈值和热缩足潜伏期(P机械痛敏和热痛敏,但皮下注射Bo NT/A不能促进神经病理性疼痛小鼠坐骨神经施旺细胞髓鞘的形成,提示Bo NT/A并不是通过促进髓鞘形成这一机制来促进运动功能恢复以及缓解神经病理性疼痛。

关键词：肉毒毒素神经病理性疼痛机械缩足阈值热缩足潜伏期施旺细胞髓鞘

预先切口浸润氟比洛芬酯对切口痛大鼠术后疼痛及炎症细胞因子的影响

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中国老年学杂志 2022年第14期42卷 3566-3570页

作者：江磊贾子普罗芳首都医科大学附属北京天坛医院北京100050

目的分析氟比洛芬酯预先切口局部浸润对切口痛大鼠术后疼痛及炎性细胞因子的影响。方法雄性大鼠24只随机等分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组,分别预先切口局部浸润生理盐水,5.0、7.5、10.0 mg/ml氟比洛芬酯各0.5 ml后建立切口... 详细信息

目的分析氟比洛芬酯预先切口局部浸润对切口痛大鼠术后疼痛及炎性细胞因子的影响。方法雄性大鼠24只随机等分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组,分别预先切口局部浸润生理盐水,5.0、7.5、10.0 mg/ml氟比洛芬酯各0.5 ml后建立切口痛模型。各组于造模前(T0)、造模后2 h(T2)、6 h(T6)、12 h(T12)、24 h(T24)及48 h(T48)测定机械缩足阈值(PWT)和累计疼痛评分(CPS),并记录副作用发生情况,筛选出最佳的药物浓度。最佳给药浓度下氟比洛芬酯对切口痛大鼠的干预作用:大鼠36只随机分为对照组和药物组,分别预先切口局部浸润生理盐水或筛选出最佳浓度的氟比洛芬酯各0.5 ml后建立切口痛模型,两组于T0、T2、T6、T12、T24及T48测定PWT和CPS,并在每个时间点处死大鼠3只采集血液标本,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性细胞因子包括肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β及IL-6的表达情况。结果最佳给药浓度筛选:与对照组比较,T12、T24及T48时低、中、高浓度组PWT明显升高(P<0.05),CPS明显下降(P<0.05)。各浓度组均未见明显副作用,因此按照最低有效的原则,以5 mg/ml氟比洛芬酯视为最佳浓度。最佳给药浓度下氟比洛芬酯对切口痛大鼠的干预作用:与T0相比,对照组和药物组术后T2、T6、T12及T24时TNF-α、IL-1β和IL-6表达均明显增高(P<0.05);与对照组相比,药物组T2、T6时IL-1β和IL-6表达明显降低(P<0.05)。结论预先切口局部浸润5 mg/ml氟比洛芬酯可能通过抑制炎症细胞因子IL-1β和IL-6释放,安全有效降低切口痛大鼠的术后疼痛。

关键词：氟比洛芬酯切口痛机械缩足阈值炎性细胞因子

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加巴喷丁减轻骨癌痛大鼠的机械痛敏

中华行为医学与脑科学杂志 2012年第8期21卷 693-695页

作者：陈立平岳冬梅胡学铭柳娇马正良申文袁燕徐州医学院江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室徐州221000 南京市鼓楼医院麻醉科徐州医学院附属医院疼痛科徐州221000

目的观察不同剂量加巴喷丁对胫骨癌痛大鼠机械痛敏的影响.方法雌性SD大鼠42只,随机分为7组（n=6）,即空白对照组（N组）、假手术＋生理盐水组（SN组）、假手术＋加巴喷丁200 mg ·kg-1·d-1组（SG200组）、骨癌痛＋生理盐水组（BN组... 详细信息

目的观察不同剂量加巴喷丁对胫骨癌痛大鼠机械痛敏的影响.方法雌性SD大鼠42只,随机分为7组（n=6）,即空白对照组（N组）、假手术＋生理盐水组（SN组）、假手术＋加巴喷丁200 mg ·kg-1·d-1组（SG200组）、骨癌痛＋生理盐水组（BN组）、骨癌痛＋加巴喷丁50mg·kg^-1·d^-1组（BG50组）、骨癌痛＋加巴喷丁100mg·kg^-1·d^-1组（BG100组）和骨癌痛＋加巴喷丁200mg· kg-1·d-1组（BG200组）.从术后第7天起,在保持正常饮水量的前提下,SG200组、BG50组、BG100组和BG200组每天分别按体重将加巴喷丁200mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg溶于5 ml生理盐水中饲喂,N组、SN 组和BN组仅给予同等量的生理盐水.分别在术前、术后1,3,5,7d和8,10,12,14d（分别对应为给药后1,3,5,7d）测定右后肢机械缩足阈值（MWT）和自由行走痛行为评分.结果术后第7天,骨癌痛大鼠MWT [ （3.78 ±0.38）g]和自由行走痛评分[（0.76 ±0.44）分]与空白对照组[（14.50 ±1.38）g,（0.00±0.00）分]和假手术组[（10.21±0.88）g,（0.00±0.00）分]比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）.在连续应用加巴喷丁的1周中,SN组和SG200组大鼠行为学的差异无统计学意义（P＞0.05）; BG50组与BN组比较,MWT无明显差异（P＞0.05）,自由行走痛行为评分相对降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;术后第10天,BG100组[（5.35±0.85）g]和BG200组[（5.71±0.72）g]与BN组[（2.61±0.40）g]和BG50组[（3.28±1.15）g]比较,MWT明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;直到术后14d,差异仍有统计学意义（P＜0.05）;从术后第8天起,BG100组和BG200组自由行走痛行为评分较BN组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论中到大剂量的加巴喷丁可以缓解骨癌痛大鼠的疼痛症状,但是随着肿瘤骨破坏的加重,加巴喷丁的止痛作用也随之降低.

关键词：加巴喷丁骨癌痛机械缩足阈值自由行走痛行为评分

帕瑞昔布在脊髓水平抑制痛觉超敏作用的实验研究

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帕瑞昔布在脊髓水平抑制痛觉超敏作用的实验研究

作者：曾彦茹广州医学院

学位级别：硕士

背景帕瑞昔布(Parecoxib,Par)是一种高选择性环氧合酶-2抑制剂,静脉注射后可迅速被肝脏羧酸酯酶水解成伐地昔布,通过特异性抑制环氧合酶-2阻断花生四烯酸合成前列腺素而发挥抗炎镇痛作用。帕瑞昔布2002年在欧洲获准上市,2008年获准在... 详细信息

背景帕瑞昔布(Parecoxib,Par)是一种高选择性环氧合酶-2抑制剂,静脉注射后可迅速被肝脏羧酸酯酶水解成伐地昔布,通过特异性抑制环氧合酶-2阻断花生四烯酸合成前列腺素而发挥抗炎镇痛作用。帕瑞昔布2002年在欧洲获准上市,2008年获准在中国上市,作为全球第一种注射用选择性环氧合酶-2抑制剂,是NSAIDs类药物发展的一个里程碑。但帕瑞昔布投入临床使用以来常被认为其镇痛作用主要在外周,而对其在中枢抑制痛觉超敏的作用及机制少有报道。环氧合酶(Cyclooxygenase,COX)是以花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)为底物生成前列腺素(PGs)途径中的限速酶。COX主要含有两种亚型,即COX-1和COX-2。COX-1是机体的正常成分,在大多数组织中均有表达,通常产生前列腺素类物质以满足持续的生理过程需要,又称结构型酶;COX-2正常情况下在细胞中极少,可被炎症刺激和细胞因子诱导表达,其催化产生的前列腺素与疼痛、炎症反应等有关,又称诱导型酶。前列腺素E(Prostaglandin E,PGE)是花生四烯酸在环氧合酶作用下的代谢产物,是一种重要的炎症和促伤害介质,在外周和中枢敏感化方面起着重要的作用。在损伤局部区域,PGE能够降低痛阈,激活外周痛觉感受器,敏化外周痛觉传入纤维,同时也可在脊髓合成释放PGE,增加脊髓背根神经元细胞的兴奋性,从而产生痛敏。已有研究表明,在基础情况下脊髓就存在COX-1和COX-2,而在伤害性刺激下,脊髓中的PGE迅速增高。本课题采用Brennan切口痛模型,应用行为学测定、微透析、ELISA和免疫组化的方法,观察术后疼痛形成和发展的过程中帕瑞昔布对切口痛大鼠的镇痛作用及脊髓水平主要致痛物质PGE以及COX两种亚型(COX-1和COX-2)表达的影响,探讨帕瑞昔布在术后疼痛导致的痛觉超敏中的抑制作用及机制。第一部分帕瑞昔布对切口痛大鼠的镇痛作用目的探讨帕瑞昔布对切口痛大鼠的镇痛作用及超前镇痛效应。方法选用雄性Wistar大鼠40只,体重250～350g,随机分为4组,分别为对照组(C组)、手术组(P组)、超前镇痛组(P组)、术后镇痛组(P组),每组10只。对照组(C组)仅静注0.9%生理盐水2ml,15min后吸入2%异氟醚不行Brennan切口痛术;手术组(P组)静注0.9%生理盐水2ml,15min后吸入2%异氟醚行Brennan切口痛术;超前镇痛组(P组)静注帕瑞昔布5mg/kg,15min后吸入2%异氟醚行Brennan切口痛术;术后镇痛组(P组)吸入2%异氟醚行Brennan切口痛术,手术结束时静注帕瑞昔布5mg/kg。采用von Frey测痛仪和热辐射甩尾测痛仪测定切口痛术前30min和术后1h、2h、3h、4h、5h和6h机械缩爪阈值(MWT)和热甩尾反应潜伏期(TFL)。结果 1、机械缩足反射阈值(MWT)变化 4组大鼠MWT基础值基本相同(P>0.05)。C组各时点MWT变化较小(P>0.05),维持在(14.524.76)g;P组切口痛术后MWT由(14.82±0.48)g明显降低到(4.93±0.48)g,2h达最低值(比基础值降低了74.49%),随后稍有回升,但仍明显低于同时点对照C组;P组术后MWT稍有降低,但降低幅度平缓,波动在(10.841.96)g,术后MWT在术后2h降幅最少(11.96±0.35g),仅比基础值降低18.92%;P组和P组术后各时点MWT均明显高于P组(P0.05),术后2h P组MWT明显高于P组(P0.05)。C组各时点TFL变化较小(P>0.05),维持在(3.72.84)s;P组术后TFL由(3.76±0.36)s明显降低到(1.89±0.17)s,2h达最低值(比基础值降低了73.40%),随后稍有回升,但仍明显低于同时点对照C组;P组术后TFL稍有降低,但降低幅度平缓,波动在(2.12.03)s,TFL在术后2h降幅最少(3.03±0.09s),仅比基础值降低20.26%;P组和P组术后各时点TFL均明显高于P组(P0.05),术后2h P组TFL明显高于P组(P<0.05)。结论帕瑞昔布对切口痛大鼠具有良好镇痛作用,且表现出明确的超前镇痛效应。第二部分帕瑞昔布在脊髓水平对前列腺素E和环氧合酶的影响目的观察术后疼痛形成和发展的过程中帕瑞昔布对大鼠脊髓水平PGE以及COX-1和COX-2表达的影响,探讨帕瑞昔布在术后疼痛导致的痛觉超敏中的抑制作用及机制。方法选用成功留置微透析探

关键词：帕瑞昔布切口痛机械缩足阈值甩尾反应潜伏期前列腺素E2 环氧合酶中枢敏感化微透析

活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶在骨癌痛—吗啡耐受大鼠脊髓中的表达变化

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活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶在骨癌痛—吗啡耐受大鼠脊髓中的表达变...

作者：秦明秀广西医科大学

学位级别：硕士

目的:测定活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(AI-CDA)在骨癌痛-吗啡耐受大鼠脊髓中的表达,探讨AI-CDA参与骨癌痛-吗啡耐受的可能机制。方法:30只wister实验大鼠依照随机数字表法分为三组,各组10只(n=10):生理盐水对照组(I组),骨癌痛组(II组)和... 详细信息

目的:测定活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(AI-CDA)在骨癌痛-吗啡耐受大鼠脊髓中的表达,探讨AI-CDA参与骨癌痛-吗啡耐受的可能机制。方法:30只wister实验大鼠依照随机数字表法分为三组,各组10只(n=10):生理盐水对照组(I组),骨癌痛组(II组)和骨癌痛-吗啡耐受组(III组)。给II组和III组大鼠接种鼻咽癌HONE1细胞,同时在I组大鼠相同部位注射等体积无菌无污染的生理盐水,制备骨癌痛模型,每天测定各组大鼠的MWT值。接种术后第14天行辅助检查帮助诊断骨癌。接种术后第15天21天给III组行吗啡治疗,I组和II组给予等容积无菌无污染的生理盐水。术后第21天观察胫骨的病理切片,并提取L46脊髓组织的RNA,用RT-PCR法测定脊髓组织中AI-CDA m RNA的表达。结果:(1)MWT值改变:与II组比较,给予吗啡镇痛治疗后第1天3天III组大鼠MWT明显高于II组,差异有统计学意义(P<0.05),III组大鼠在给予镇痛药吗啡注射后第4天6天与第1天3天相比前者MWT下降,差异有统计学意义(P<0.05);(2)影像学检查:与I组相比,II组和III组术侧胫骨X光片均显示骨组织被破坏;(3)病理切片检查:显微镜下能观察到有癌细胞出现在II组和III组骨髓腔内;(4)AI-CDA m RNA的表达:与II组比较,III组L46脊髓组织中的AI-CDA m RNA表达升高,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AI-CDA在骨癌痛-吗啡耐受的大鼠脊髓中表达增加,AI-CDA可能参与大鼠骨癌痛-吗啡耐受机制的形成。

关键词：骨癌痛吗啡耐受活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶机械缩足阈值

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改良大鼠挫伤型脊髓损伤模型的制备与评估

中华神经创伤外科电子杂志 2023年第6期9卷 325-332页

作者：陈业煌陈恺钦薛亮吴箭午黄预备魏梁锋曾炳香王守森福建医科大学福总临床医学院(联勤保障部队第九〇〇医院)神经外科福州350025

目的利用新型脊髓损伤(SCI)打击器制备大鼠挫伤型SCI模型,并对模型进行评估,为探究SCI后神经病理性疼痛(NP)发生机制及早期干预治疗奠定基础。方法100只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为Control组(对照组,20只)、Sham组(假手术组,4... 详细信息

目的利用新型脊髓损伤(SCI)打击器制备大鼠挫伤型SCI模型,并对模型进行评估,为探究SCI后神经病理性疼痛(NP)发生机制及早期干预治疗奠定基础。方法100只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为Control组(对照组,20只)、Sham组(假手术组,40只)及SCI组(40只)。SCI组大鼠暴露T10节段并采用改进型Allen's法制备SCI模型,假手术组只暴露T10节段但不实施脊髓撞击,Control组不做任何干预措施。使用开放场地实验(BBB评分)评估伤前1 d及伤后1、3、7、14、21、28 d大鼠的运动功能。于伤前1 d及伤后14、21、28 d测定后肢机械缩足阈值(MWT),并采用苏木精-伊红(HE)染色检测脊髓组织病理学变化,评估SCI模型是否构建成功。结果(1)3组大鼠伤后1、3、7、14、21、28 d的BBB评分比较,差异均有统计学意义(P0.05),伤后14、21、28 d后肢MWT比较,差异有统计学意义(P0.05),其余各时间点后肢MWT比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)伤后14 d,HE染色可见脊髓胶质细胞大量浸润;伤后21 d胶质细胞大量分化增生;伤后28 d大量胶质纤维生成。结论利用新型打击器建立的挫伤型SCI模型,具有数字化、稳定、标准化、操作性强、重复性好的特点,可为SCI后NP形成的病理学机制及靶向药物研究提供标准化的模型。

关键词：挫伤型脊髓损伤改良动物模型神经病理性疼痛机械缩足阈值

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糖尿病大鼠坐骨神经传导速度变化

癫痫与神经电生理学杂志 2015年第1期24卷 1-4页

作者：李二平孙宇楠董世芬秦灵灵刘铜华孙建宁北京中医药大学中药学院中药药理系北京100102 北京中医药大学

目的：探讨链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）诱导的糖尿病大鼠坐骨神经传导速度（NCV）变化，初步确立糖尿病周围神经病（diabetic peripheral neuropathy，DPN）大鼠模型的构建和评价方法。方法：选用SD大鼠，随机分为正常对照组和... 详细信息

目的：探讨链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）诱导的糖尿病大鼠坐骨神经传导速度（NCV）变化，初步确立糖尿病周围神经病（diabetic peripheral neuropathy，DPN）大鼠模型的构建和评价方法。方法：选用SD大鼠，随机分为正常对照组和模型组，模型组腹腔注射STZ。检测动物体质量、血糖、触觉、神经传导速度（NCV）变化，并取大鼠坐骨神经组织进行HE染色，观察其形态结构变化。结果：与正常对照组比较，给予STZ后，模型组动物体质量逐渐下降，4w后比较差异有显著意义（P〈0．05），血糖显著升高（P〈0．001）；50％机械缩足阈值，于注射STZ 2w后明显下降（P〈O．05），注射STZ后4w明显上升（P〈0．05）；给予STZ后4w，模型组大鼠运动神经传导速度（MCV）和感觉神经传导速度（SCV）显著减慢（P〈0．05），坐骨神经组织神经纤维松散，密度不均匀。结论：注射STZ4W后，大鼠MCV和SCV减慢，触觉敏感度呈双相变化，坐骨神经出现病理形态结构，成功复制出DPN大鼠模型。

关键词：糖尿病周围神经病(DPN) 机械缩足阈值运动神经传导速度(MCV) 感觉神经传导速度(SCV)

不同强度针灸样刺激对c-kit基因敲除大鼠痛阈的影响

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不同强度针灸样刺激对c-kit基因敲除大鼠痛阈的影响