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吉林敦化地区牛寄生蜱虫斑点热群立克次体分子流行病学调查

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特产研究 2024年

作者：梁晓彤卢梓烁严兴秀林紫依邓映玲黄誉汉刘昊李丽霞佛山科学技术学院

蜱虫是多种致病性立克次体的主要传播媒介，为了探究吉林敦化市立克次体的流行情况对于疫病的监测预警具有重要意义。2023年春季，从林区散养牛群体表采集了390只蜱虫，16S rRNA分析结合形态学分析结果显示，所采集的蜱虫包括森林革蜱（... 详细信息

蜱虫是多种致病性立克次体的主要传播媒介，为了探究吉林敦化市立克次体的流行情况对于疫病的监测预警具有重要意义。2023年春季，从林区散养牛群体表采集了390只蜱虫，16S rRNA分析结合形态学分析结果显示，所采集的蜱虫包括森林革蜱（Dermacentor silvarum）330只，草原革蜱（Dermacentor nuttalli）40只，全沟硬蜱（Ixodes persulcatus）10只，日本血蜱（Haemaphysalis japonica）10只，证明了森林革蜱为敦化地区牛体表寄生的优势蜱种。并对这390只蜱虫进行斑点热群立克次体（Spotted fever group rickettsiae，SFGR）流行病学调查，利用PCR方法检测柠檬酸合成酶（gltA）基因、细菌外膜蛋白A （ompA）基因和17k-Da（17-kDa）基因。其中，根据gltA基因的PCR结果，SFGR核酸阳性样本57例，感染率为73.1%（285/390）。其中在森林革蜱中检测阳性样本52例，感染率为78.8%（260/330），草原革蜱中检测到阳性样本6例，感染率为 75.0%（30/40），日本血蜱中检测到2例阳性样本，感染率为 100.0%（10/10），全沟硬蜱中检测到阳性样本1例，感染率为 50.0%（5/10）。立克次体ompA阳性样本也检测出SFGR 17-kDa和gltA基因阳性。不同蜱种间SFGR感染率差异没有统计学意义（P ＞ 0.05）。系统发育分析gltA，17-kDa和ompA基因数据表明，检测到的立克次体均为Rickettsia raoultii。本研究为吉林省敦化地区SFGR流行情况和主要传播媒介提供理论依据。

关键词：蜱虫斑点热群立克次体 Rickettsia raoultii

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新疆蜱类携带斑点热群立克次体的调查研究

寄生虫与医学昆虫学报 2024年第2期31卷 90-98页

作者：孙响施雪伟张桂林郑重李海龙董路宁罗钰洋光新疆军区保障部疾病预防控制中心乌鲁木齐830054

目的对新疆蜱类携带斑点热群立克次体情况进行调查,为新疆地区蜱媒病防治提供技术支撑。方法使用家畜体表法和布旗法采集蜱类,使用聚合酶链式反应(PCR)检测立克次体外膜蛋白A(ompA)基因片段。结果使用家畜体表采集法和布旗法共采集7105... 详细信息

目的对新疆蜱类携带斑点热群立克次体情况进行调查,为新疆地区蜱媒病防治提供技术支撑。方法使用家畜体表法和布旗法采集蜱类,使用聚合酶链式反应(PCR)检测立克次体外膜蛋白A(ompA)基因片段。结果使用家畜体表采集法和布旗法共采集7105只成年蜱样本,经形态学鉴定共7属12种。其中,3650只(51.4%)进行外膜蛋白A基因片段的聚合酶链式反应(PCR)检测立克次体核酸,共检测出8种斑点热群立克次体。从和硕、尉犁、玛纳斯和霍城地区采集的扇头蜱Rhipicephalus、璃眼蜱Hyalomma和血蜱Haemaphysalis中均检测出Candidatus ***立克次体、从和硕、尉犁、玛纳斯地区采集的扇头蜱Rhipicephalus和璃眼蜱Hyalomma中均检测出康氏立克次体Rickettsia conorii;从玛纳斯地区采集的图兰扇头蜱***中检测出马赛立克次体***;从各地区采集的革蜱中均检测出饶氏立克次体***,其在新疆范围内分布较广;从哈巴河地区采集的银盾革蜱Dermacentor niveus中检测出斯洛伐克立克次体***;从乌鲁木齐地区采集的亚洲璃眼蜱***中检测出西伯利亚立克次体蒙古株*** mongolotimonae;从哈巴河地区采集的嗜群血蜱***中检测出黑龙江立克次体***;从博乐地区采集的全沟硬蜱Ixodes persulcatus中检测出Candidatus ***立克次体。结论新疆地区广泛分布多种蜱类,携带多种蜱传斑点热群立克次体,可能对人群健康产生潜在威胁。

关键词：蜱斑点热群立克次体新疆地区分子生物学检测

滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物斑点热群立克次体和莫氏立克次体感染调查

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中华地方病学杂志 2022年第12期41卷 966-971页

作者：贺琪楠罗云燕刘思彤洪汝丹艾志琼朱俊洁尹家祥大理大学公共卫生学院大理671000 云南省曲靖市第二人民医院信息管理部曲靖655000

目的了解滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物斑点热群立克次体(spotted fever group Rickettsiae,SFGR)和莫氏立克次体(Rickettsia mooseri,***)感染情况。方法应用磁珠法提取2015-2016年自滇西梁河县、剑川县和玉龙县鼠疫疫源地捕获的2512只... 详细信息

目的了解滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物斑点热群立克次体(spotted fever group Rickettsiae,SFGR)和莫氏立克次体(Rickettsia mooseri,***)感染情况。方法应用磁珠法提取2015-2016年自滇西梁河县、剑川县和玉龙县鼠疫疫源地捕获的2512只野外鼠形动物肝脏样本DNA,选用热休克蛋白groEL基因引物进行巢式PCR扩增。分别采用DNAStar 7.1软件和美国国家生物技术信息中心(NCBI)的GenBank进行基因序列剪切、拼接和Blast同源性比对分析,同时采用DNAStar 7.1软件和MEGA 6.0软件构建系统发育树。结果感染SFGR的野外鼠形动物有锡金小鼠、斯氏家鼠、灰麝鼩和臭鼩鼱(各1只),总感染率为0.16%(4/2512);未检出***感染。梁河县和剑川县鼠疫疫源地野外鼠形动物SFGR感染率分别为0.49%(3/611)和0.10%(1/1029),玉龙县鼠疫疫源地野外鼠形动物未检出SFGR感染。同源性分析显示,SFGR阳性样本的基因序列与参考序列同源性为95.45%~100.00%;4份阳性样本间groEL基因部分序列高度相似,同源性达89.60%~97.40%。序列进化分析显示,梁河县鼠疫疫源地的3个SFGR阳性样本序列聚在同一分支,同源性达94.40%~97.40%;剑川县鼠疫疫源地的1个阳性样本序列单独为1个分支。结论滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物SFGR感染率较低,未发现***感染。

关键词：斑点热群立克次体莫氏立克次体鼠形动物 GroEL基因鼠疫疫源地

塞罕坝自然保护区蜱媒斑点热群立克次体检测及遗传进化分析

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中国媒介生物学及控制杂志 2022年第2期33卷 252-257页

作者：高杨许士奇王丽娜郭文平刘铭承德医学院基础医学院病原生物学教研室河北承德067000

目的调查塞罕坝自然保护区蜱媒斑点热群立克次体(SFGR)的感染情况,分析该地区蜱媒体内SFGR种类并进行同源性分析,为防控蜱媒疾病提供理论依据。方法在塞罕坝自然保护区内采用布旗法收集游离蜱并提取DNA,采用PCR技术对SFGR外膜蛋白A基因(... 详细信息

目的调查塞罕坝自然保护区蜱媒斑点热群立克次体(SFGR)的感染情况,分析该地区蜱媒体内SFGR种类并进行同源性分析,为防控蜱媒疾病提供理论依据。方法在塞罕坝自然保护区内采用布旗法收集游离蜱并提取DNA,采用PCR技术对SFGR外膜蛋白A基因(ompA)和柠檬酸合成酶A基因(gltA)进行扩增,对阳性样本进行序列测定,同时构建分子系统进化树进行分析。结果在塞罕坝自然保护区内共采集游离蜱919只,其中全沟硬蜱546只、嗜群血蜱242只、森林革蜱131只。测得SFGR阳性蜱72只,总阳性率为7.8%,其中全沟硬蜱阳性率为6.2%(34/546),嗜群血蜱为9.5%(23/242),森林革蜱为11.5%(15/131);不同蜱种SFGR感染率差异无统计学意义(χ^(2)=1.261,P=0.263)。分别对ompA和gltA基因进行序列比对,发现该地区存在劳氏立克次体与新塔拉塞维奇立克次体2种SFGR。分子系统进化树(ompA和gltA基因)显示,森林革蜱携带的SFGR与GenBank中劳氏立克次体(AH015610、DQ365804)聚为同一分支;全沟硬蜱和嗜群血蜱携带的SFGR与GenBank中新塔拉塞维奇立克次体(MT667416、MT66740)亲缘关系最近,处于同一分支。结论塞罕坝自然保护区内存在劳氏立克次体和新塔拉塞维奇立克次体,因此对当地蜱以及蜱媒疾病应加强防控,以免对当地人群健康造成威胁。

关键词：蜱斑点热群立克次体塞罕坝序列分析

斑点热群立克次体HN-98株的分离和初步鉴定

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中华流行病学杂志 2000年第3期21卷 202-204页

作者：常丙功张健之田小东毕德增蔡军张远富陆振豸中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所立克次体研究室北京102206 广州军区军事医学研究所微生物学研究室海南省琼中县大丰农场卫生院

目的　从海南省斑点热疫源地不明热病人体内分离斑点热群立克次体。方法　用鸡胚卵黄囊培养法直接从斑点热疫区一不明热病人血标本中分离立克次体 ,继之用分子生物学及血清学试验对分离株进行鉴定。结果　从海南省琼中县斑点热疫区一不... 详细信息

目的　从海南省斑点热疫源地不明热病人体内分离斑点热群立克次体。方法　用鸡胚卵黄囊培养法直接从斑点热疫区一不明热病人血标本中分离立克次体 ,继之用分子生物学及血清学试验对分离株进行鉴定。结果　从海南省琼中县斑点热疫区一不明热男性民工的血标本中分离到了一株立克次体 ,命名为HN 98株立克次体 ,西伯利亚种。结论　该结果进一步从病原学上证实海南省琼中县存在有斑点热疫源地。

关键词：斑点热群立克次体分子流行病学 HN-98株病原学

贵州省部分地区蜱和宿主动物携带斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体的分子流行病学调查

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贵州省部分地区蜱和宿主动物携带斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体...

作者：孟娇贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:通过现场流行病学调查结合实验室检测鉴定,对贵州山区蜱及携带病原体情况展开研究,了解贵州蜱传斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体的流行病学特征,初步掌握媒介蜱和宿主动物蜱传病原体的感染状况及其分布,为当地蜱传疾病防治提供科... 详细信息

目的:通过现场流行病学调查结合实验室检测鉴定,对贵州山区蜱及携带病原体情况展开研究,了解贵州蜱传斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体的流行病学特征,初步掌握媒介蜱和宿主动物蜱传病原体的感染状况及其分布,为当地蜱传疾病防治提供科学数据。方法:1.根据贵州的野外生境、蜱的生活习性等因素,利用体表采集法捕获贵州省不同地区家畜动物体表寄生蜱,用静脉采血法采集不同地区家畜动物抗凝血液样本。2.将捕获的蜱肉眼初步观察大致分类,在正置显微镜下进行拍照,记录蜱的背面观,腹面观等特征。根据蜱的不同发育阶段进行初步形态学鉴定,使用试剂盒提取蜱DNA。采用PCR技术扩增蜱的线粒体16S r RNA基因片段,用分子生物学技术鉴定蜱种。3.对采集的蜱和动物全血样本提取DNA后,用SFGR柠檬酸合酶(glt A)、外膜蛋白酶A(omp A)基因及***间隔基因5S～23S r RNA为靶标基因进行PCR扩增,将双向测序结果用美国国家生物技术信息中心网站(NCBI)Gen Bank中的BLAST进行序列比对,使用MEGA 7.0软件构建系统发育树并进行遗传进化分析。4.采用SPSS 26.0对实验结果进行统计学分析,率的比较采用χ检验,若P立克次体阳性数为703份,总阳性率为64.91%,通过序列分析发现劳氏立克次体(Rickettsia raoultii)和敬信立克次体(Ca ndidatus ***)的基因片段,同时经检测发现蜱还携带了伯氏疏螺旋体,阳性数为178份,总阳性率为16.43%,发现的基因分型为***。本研究发现家畜寄生蜱中存在斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体的复合感染,感染率为14.86%(161/1083)。3.本研究采集贵阳市乌当区猫血153份;犬血142份;罗甸县羊血18份;岑巩县羊血14份;铜仁市羊血56份;安龙县羊血12份,共采集396份血液。对采集的396份动物全血样本进行检测后发现立克次体阳性数为1份,总阳性率为0.25%,通过序列分析发现猫氏立克次体(Rickettsia felis)的基因片段,同时经检测发现了动物携带了伯氏疏螺旋体,阳性数为62份,总阳性率为15.65%,发现的基因分型为***。4.经统计学分析,贵州六个地区媒介蜱携带的SFGR的阳性率差异有统计学意义(χ2=614.041,P立克次体和敬信立克次体感染,同时发现媒介蜱感染伯氏疏螺旋体,均为公认的对人类具有致病性的病原体。2.发现贵州省贵阳市宠物猫携带***,研究同时检出了动物猫、犬、羊***的基因片段。家畜动物作为SFGR和***的重要宿主动物,与人类密切接触,提示存在人类感染蜱传病原体的风险。3.贵州省家畜寄生蜱同时复合感染两种严重威胁人兽健康的病原体:斑点热群立克次体和伯氏疏螺旋体。提示在蜱媒疾病流行地区接受诊断和治疗的蜱咬患者时,应考虑可能存在蜱传病原体复合感染的情况,以便制定正确的治疗方案。

关键词：斑点热群立克次体伯氏疏螺旋体蜱宿主动物贵州

斑点热群立克次体中国分离株rOmpA基因片段的克隆和序列分析

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微生物学报 1998年第4期38卷 276-282页

作者：陈敏范明远毕德增张健之陈香蕊中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所北京102206 军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

用Rr190.70p-602n引物扩增了斑点热群立克次体（spottedfevergrouprickettsiae，SFGR）中国分离株（BJ－90株、Ha－91株和HLJ－054株）及SFGR国际标准株西伯利亚立克次体（Rickettsiasibiricu）246株和派克立克次体（***）的rOmpA基因片段，将PCR产物克隆入pGEM－T载体中，用双脱氧法进行序列测定，并与SFGR的rOmpA基因已知序列进行了比较。结果表明，SFGR国际标准株间rOmpA基因片段的核苷酸同源性为90.06%～96.62%，推定氨基酸的同源性为83.05％～94.35％，中国分离株与国际标准株及参考株rOmpA基因片段比较的结果发现：BJ－90株及Ha－91株与西伯利亚立克次体标准株的核苷酸同源性分别为99．06％和98．31％，推定氨基酸的同源性则为98.87％和96.61％，HL－93株和HLJ-054株与日本立克次体（***）核苷酸同源性较高，分别为96.62％和95.68％，推定氨基酸的同源性为92．09％和89．27％。在中国分离株内，BJ-90株和Ha－91株的核昔酸同源性高达99．20％，推定氨基酸的同源性为97．74％，HIJ－054株和HL－93株rOmpA基因片段的核苷酸及推定氨基酸的同源性分别为98.12％，94.92％。因此认为在中国广阔的地域内，除HLJ-054株和HL-93株可能为SFGR的新成员外。

关键词：斑点热群立克次体 rOmpA基因片段克隆序列分析

斑点热群立克次体中国分离株HL-93和HLJ-054亲缘关系的研究

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中国人兽共患病杂志 2000年第3期16卷 12-14页

作者：陈敏张健之毕德增范明远陈香蕊中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所北京102206 军事医学科学院微生物和流行病研究所

目的　通过斑点热群立克次体 (spottedfevergrouprickettsiae ,SFGR)rOmpA基因片段的序列分析对HL 93和HLJ 0 5 4的亲缘关系进行研究。方法　用PCR分段扩增rOmpA基因重复区后 1 9kb片段 ,PCR产物直接测序 ,用WinstarDNA分析软件包进行... 详细信息

目的　通过斑点热群立克次体 (spottedfevergrouprickettsiae ,SFGR)rOmpA基因片段的序列分析对HL 93和HLJ 0 5 4的亲缘关系进行研究。方法　用PCR分段扩增rOmpA基因重复区后 1 9kb片段 ,PCR产物直接测序 ,用WinstarDNA分析软件包进行同源性比较、进化树分析及酶切位点的分析。　结果　HL 93株和HLJ 0 5 4株核苷酸及推定氨基酸的同源性均在 99%以上 ,在树形图上单独聚为一类。常用酶的酶切位点完全一致。结论　HL 93株和HLJ 0 5 4株为同一种SFGR ,建议均命名为黑龙江立克次体 ,但可能存在株间差异性。

关键词：斑点热群立克次体 rOmpA基因片段 HL-93 HLJ-054

斑点热群立克次体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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现代预防医学 2015年第22期42卷 4137-4139+4146页

作者：吴捷王少玲马焱曾祥洁贾鹏本吴维学苏新元李沅张丽娟海南省疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室

目的探讨实时荧光定量PCR快速检测斑点热群立克次体标本的应用价值。方法根据斑点热群立克次体外膜蛋白A(Omp A)基因保守序列设计Taq Man特异性探针和引物,进行实时荧光定量PCR方法学评估,并同时运用该法和普通PCR法对对海南省2012年不... 详细信息

目的探讨实时荧光定量PCR快速检测斑点热群立克次体标本的应用价值。方法根据斑点热群立克次体外膜蛋白A(Omp A)基因保守序列设计Taq Man特异性探针和引物,进行实时荧光定量PCR方法学评估,并同时运用该法和普通PCR法对对海南省2012年不明原因发热病人157份血标本进行斑点热群立克次体的检测及结果分析。结果本研究建立的定量标准曲线循环阈值(Ct值)和模板拷贝数呈良好的线性关系(R2值为0.998)。该法能检出斑点热群立克次体阳性标准品—西伯利亚立克次体(***)最小浓度为102copies/μl,灵敏度比普通PCR高100倍。用该法检测斑点热群立克次体DNA,结果为阳性,检测金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、致泻性大肠埃希菌和副溶血弧菌等其他病原细菌DNA结果均为阴性。采用实时荧光定量PCR法对实验室库存的发热病人血标本DNA进行回顾性检测,结果示阳性2例,检出率为1.2%(2/157),而普通PCR检测结果均为阴性。结论实时荧光定量PCR法具有快速、特异和灵敏的优点,在处理突发公共卫生事件中可发挥快速检测的优势,在斑点热诊断中具有重要的临床意义。

关键词：实时荧光定量PCR 外膜蛋白A基因斑点热群立克次体