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振动切片法在胎儿角膜组化研究中的应用及探讨

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解剖学研究 2001年第4期23卷 344-344页

作者：郭家松彭朗鸣尹保国沈宏友第一军医大学分校解剖学教研室广州510315 第一军医大学分校外科学教研室广州510315

胎儿角膜即小又薄且透明,将之完全剥离进行切片的可行性很小,所以要在完整眼球上切片.根据组织化学研究的要求在制片过程中需要保护酶的活性,常规技术都是采取冷冻切片法进行切片.但用此法进行试验,切出的均为碎片.作者分析认为,可能是... 详细信息

胎儿角膜即小又薄且透明,将之完全剥离进行切片的可行性很小,所以要在完整眼球上切片.根据组织化学研究的要求在制片过程中需要保护酶的活性,常规技术都是采取冷冻切片法进行切片.但用此法进行试验,切出的均为碎片.作者分析认为,可能是在液氮冷冻过程中眼球内容物冰晶化所致.后来我们进行了探索,采用振动切片法取得了较好的效果.

关键词：胎儿角膜振动切片组织化学

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用于琼脂糖包埋小鼠全脑振动切削方法研究

用于琼脂糖包埋小鼠全脑振动切削方法研究

作者：张柳云华中科技大学

学位级别：硕士

大脑是人体的核心器官,支配着人类的一切生命活动。神经元是组成脑的基本单元,不同神经元之间以特定方式形成的神经连接网络对于脑功能的实现至关重要。已有研究表明,部分疾病的发病机理与神经连接网络的形成与调控密切相关,因此获取全... 详细信息

大脑是人体的核心器官,支配着人类的一切生命活动。神经元是组成脑的基本单元,不同神经元之间以特定方式形成的神经连接网络对于脑功能的实现至关重要。已有研究表明,部分疾病的发病机理与神经连接网络的形成与调控密切相关,因此获取全脑神经连接网络对于脑疾病的治愈和脑研究的发展具有重要意义。近年来,获取全脑神经连接网络的方法层出不穷,其中机械切片结合光学成像的技术手段以其成像范围大、成像分辨率高等优势被广泛应用。在发展的各种包埋方式及对应的机械切片方法中,采用琼脂糖包埋,包埋流程简单,无损样本形态、荧光信号及抗原性。但是受切片装置性能及鼠脑内部结构差异性的影响,样本切片精度不高,在成像时,需将焦面置于样本表面以下较深的位置来降低切削对成像质量的影响,造成信号不均匀的现象,使得这种包埋方法的应用受到了限制。基于此,本文研究了用于琼脂糖包埋小鼠全脑的振动切削方法,旨在提高振动切片系统切削琼脂糖包埋鼠脑样本的切削质量,使该包埋方式及切片方法能够应用于全脑神经连接网络的获取中。针对这一目标,本文提出了适用于小鼠全脑振动切削方法研究的具体实施方案:通过分析振动切片切削软组织的过程,确定影响样本切削质量的切削参数,并结合现有切片装置的特点,提出适用于全脑切削研究的振动切片装置的设计需求,利用所设计的切片装置结合现有的光学成像系统对琼脂糖包埋的小鼠全脑进行切削分析,建立鼠脑样本不同位置的切削质量与切削参数之间的定量关系,在此基础上分别确定适用于全脑不同位置切削的最佳切片参数。本文设计了基于柔性机构的振动切片装置。包括音圈电机驱动模块、传导机构、振动结构及刀片调节机构四部分。通过设计音圈电机的驱动部分,实现振幅、频率连续可调。采用在Y方向和X方向均具有较高刚度的传导机构,准确传递驱动力并能有效控制由音圈电机安装所带来的误差。通过设计基于双平行四边形机构的振动结构,实现系统的直线运动轨迹并降低Z向误差。为了调节刀片安装方向与振动方向近似平行,减小Z向误差,设计了刀片调节机构,实现了刀片滚动角能在0.9°范围内精密调节。最后对该振动切片装置进行性能测试,实验结果表明所设计的振动切片系统能实现振动频率在000 Hz、振动幅度在0.5 mm内连续调节。并且在频率为100 Hz、振幅为0.5 mm的条件下,系统的直线度误差小于2.5μm,Z向误差小于3μm。最后利用所设计的振动切片装置,完成对小鼠全脑振动切削方法的研究。研究了不同振动切片参数对鼠脑不同位置切削质量的影响,通过PI实时染色结合光学成像的方法准确恢复样本切削后的断面轮廓形貌,建立了鼠脑不同位置的切削质量与切削参数的定量关系。通过优化小鼠全脑不同位置的切削参数,使得鼠脑样本的断面平整度能有效控制在20μm以内。最后对切片系统所使用的陶瓷刀片进行磨损分析,实验证明以8μm切片厚度切削完四个完整鼠脑样本后,刃口磨损缺陷不超过5μm。

关键词：鼠脑琼脂糖包埋切削质量振动切片刀具磨损

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大鼠脑组织高尔基染色三种制备方法的比较

临床与实验病理学杂志 2017年第1期33卷 113-115页

作者：王蕾张芳汤仁仙张冠群牛海晨徐州医科大学基础医学院形态学实验教学中心徐州221004 东南大学医学院附属徐州中心医院神经内科徐州221009 徐州医科大学基础医学院遗传学教研室徐州221004

1873年意大利著名的神经解剖学家卡米洛·高尔基发明硝酸银染色法，从此可以定性定量地观察神经元的形态。随后Cox等心对高尔基染色法的固定液和染色液进行改良，提高结果的可视性，但初学者选择合适的染色方法仍较为困难。本实验采用... 详细信息

1873年意大利著名的神经解剖学家卡米洛·高尔基发明硝酸银染色法，从此可以定性定量地观察神经元的形态。随后Cox等心对高尔基染色法的固定液和染色液进行改良，提高结果的可视性，但初学者选择合适的染色方法仍较为困难。本实验采用相同的固定、染色和显色液.

关键词：脑组织高尔基染色法冷冻切片振动切片石蜡切片

生理实验教学中开展大鼠脑片制备及观察实验的实践

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实验技术与管理 2017年第7期34卷 174-177页

作者：周辰高珊魏军毕群北京大学生命科学学院生物学国家级实验教学示范中心北京100871 山东省医学科学院基础医学研究所山东济南250062

急性脑片是神经生物学研究中的重要材料,开展急性脑片制备的实验,有助于接触科学前沿、增加学习兴趣、提高教学质量。北京大学生理学实验课程组从2013年开始,尝试在选做实验部分开展大鼠急性脑片制备与观察的内容,至今已有112人完成了实... 详细信息

急性脑片是神经生物学研究中的重要材料,开展急性脑片制备的实验,有助于接触科学前沿、增加学习兴趣、提高教学质量。北京大学生理学实验课程组从2013年开始,尝试在选做实验部分开展大鼠急性脑片制备与观察的内容,至今已有112人完成了实验,取得了比较好的反馈。积累的教学经验为进一步开展与脑片相关的扩展实验提供了较好的基础,并且也为教学改革提供了思路和方向。

关键词：生理实验急性脑片振动切片

两种方法制备的脑组织切片激光共聚焦显微镜成像效果的比较研究

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中国细胞生物学学报 2015年第11期37卷 1528-1533页

作者：李贵苹朱晓娜易静杭勤上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系上海200025 上海交通大学医学院解剖学与组织胚胎学系上海200025

该文比较研究了振动切片法与冰冻切片法制作的脑组织切片的质量及其激光共聚焦显微镜成像的效果。振动切片法通过灌流固定、取小鼠脑、琼脂糖包埋后利用振动切片机连续冠状切片。冰冻切片法通过蔗糖脱水、OCT包埋液氮骤冷后利用冰冻切... 详细信息

该文比较研究了振动切片法与冰冻切片法制作的脑组织切片的质量及其激光共聚焦显微镜成像的效果。振动切片法通过灌流固定、取小鼠脑、琼脂糖包埋后利用振动切片机连续冠状切片。冰冻切片法通过蔗糖脱水、OCT包埋液氮骤冷后利用冰冻切片机连续冠状切片。制备的脑组织切片进行免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察成像效果。结果表明,与冰冻切片相比,振动切片法简单快速,且制片质量较高,脑组织切片无冰晶形成,抗原免遭破坏,组织结构较完整,更适用于脑组织样品的激光共聚焦显微镜的成像观察。

关键词：脑组织振动切片冰冻切片激光共聚焦显微镜

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小鼠脑切片漂浮染色方法研究

现代科学仪器 2023年第6期40卷 70-73页

作者：石玉华刘振江吉林大学生命科学学院吉林大学艾滋病疫苗国家工程实验室

为了提高小鼠脑组织学研究效率,解决传统石蜡切片和冰冻切片样品准备时间长、步骤复杂等问题,提出了振动切片结合漂浮染色快速进行小鼠脑组织切片形态学研究的方法。该方法通过小鼠心脏灌注后,获取脑组织,利用琼脂糖快速包埋固定;通过... 详细信息

为了提高小鼠脑组织学研究效率,解决传统石蜡切片和冰冻切片样品准备时间长、步骤复杂等问题,提出了振动切片结合漂浮染色快速进行小鼠脑组织切片形态学研究的方法。该方法通过小鼠心脏灌注后,获取脑组织,利用琼脂糖快速包埋固定;通过振动切片方法,40微米厚度连续获取脑组织切片,结合漂浮染色观测特征区域神经元形态;最后通过体视学方法,快速统计估算神经元数量。实验结果表明,振动切片联合漂浮染色可快速进行小鼠脑组织学研究,并具有较高的稳定性和可重复性。

关键词：振动切片漂浮染色脑组织神经元