一种应用振动切片技术的改良TTC切片染色法

作     者：徐晶 赵嘉仪 华丽博 许民栋 汤小荣 洪学勤 姚露露 许能贵 王琳 XU Jing;ZHAO Jia-Yi;HUA Li-Bo

作者机构：广州中医药大学针灸康复临床医学院华南针灸研究中心广东广州510006 

出 版 物：《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期：2024年第44卷第10期

页      面：2434-2438页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金青年项目(81904297) 国家中医药管理局中医药创新团队及人才支持计划项目(ZYYCXTD-C-202004) 2019年度广东省重点领域研发计划“岭南中医药现代化”重点专项(2020B1111100008) 广州中医药大学“青年英才培养工程”第四批培养对象(QNYC20190106) 

主　　题：局灶性脑缺血 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色 振动切片 

摘      要：目的探索一种更为合理便捷且可相对精准测量小鼠局灶性脑缺血模型梗死灶体积的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)切片染色法。方法光化学栓塞法制备小鼠局灶性脑缺血模型,使用激光散斑检测缺血,TTC染色法对梗死灶进行染色评估。改良的TTC切片染色法是使用振动切片机切片后将脑片放入TTC染色液染色;而传统的TTC切片染色法是将小鼠脑组织先置于-20℃冰箱冷冻40 min,然后直接目测切片或使用小鼠脑模具手动切片后放入TTC染色液进行染色,最终将两种方法的染色效果进行对比。结果与传统的TTC切片染色法相比,使用振动切片机的改良TTC染色法降低了小鼠脑片破碎损伤的概率,对其脑细胞的损伤更小,进而最大程度保持了脑片的完整性;并且非梗死区域脑组织染色均匀,可更清晰地凸显梗死灶的范围,成功实现了微米级别厚度的小鼠脑片制备,使其梗死灶体积的计算更加精准客观。结论针对小鼠局灶性脑缺血模型,使用振动切片技术改良的TTC染色法明显优于传统的TTC切片染色法,不仅染色效果更为均匀,且可较为精确地计算小鼠脑缺血梗死灶的体积。