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玉竹多糖低共熔溶剂提取工艺优化及其抗氧化和抗糖基化活性研究

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食品与发酵工业 2022年第8期48卷 190-198页

作者：何瑞阳王锋苏小军李清明杨华朱晓慧范宽秀江雪梅湖南农业大学食品科学技术学院湖南长沙410128 湖南省发酵食品工程技术研究中心湖南长沙410128 湖南农业大学生物科学技术学院湖南长沙410128

为提高玉竹多糖提取率,采用响应面分析法优化低共熔溶剂(deep eutectic solvents,DESs)提取玉竹多糖的工艺,通过DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的清除率和氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)法评价低共熔溶剂... 详细信息

为提高玉竹多糖提取率,采用响应面分析法优化低共熔溶剂(deep eutectic solvents,DESs)提取玉竹多糖的工艺,通过DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的清除率和氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)法评价低共熔溶剂提取的玉竹多糖(Polygonatum odoratum polysaccharide extracted by deep eutectic solvents,DPoP)体外抗氧化活性,通过荧光分光光度法测定DPoP对体外非酶糖基化体系中晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)形成的抑制能力。结果表明,DESs提取法是一种高效的提取玉竹多糖的方法,尿素-氯化胆碱为供试方案中提取率最高的DESs组合,其优化的工艺参数为:尿素-氯化胆碱摩尔比3∶1,提取温度92℃,提取时间41 min,含水量19%,液料比29∶1。此条件下的多糖提取率达到(29.03±0.54)%,是热水浸提法的4.67倍。DPoP对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除率随质量浓度增加而增加,在质量浓度为20 mg/mL时,清除率分别达到(17.97±0.47)%、(40.69±0.34)%,ORAC值达到(121.67±3.65)μmol/g;DPoP对糖基化终末产物AGEs相对抑制率达到(87.63±0.66)%。该研究为玉竹多糖的开发利用提供理论性指导,同时在植物活性成分提取方面也具有一定的意义。

关键词：玉竹多糖工艺优化低共熔溶剂抗氧化抗糖基化

黑穗醋栗果实超声波降解多糖的结构及抗糖基化活性

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农业工程学报 2017年第5期33卷 295-300页

作者：徐雅琴刘菲郭莹莹陈宏超王丽波杨昱东北农业大学理学院哈尔滨150030

为了充分利用黑穗醋栗果实中的多糖资源,该文对水提醇沉,大孔树脂纯化制得黑穗醋栗果实多糖进行超声波降解,并对分离纯化后得到的低分子量多糖的理化性质、结构特征和抗糖基化反应活性进行了研究。利用葡聚糖凝胶Sephadex G-100对降解... 详细信息

为了充分利用黑穗醋栗果实中的多糖资源,该文对水提醇沉,大孔树脂纯化制得黑穗醋栗果实多糖进行超声波降解,并对分离纯化后得到的低分子量多糖的理化性质、结构特征和抗糖基化反应活性进行了研究。利用葡聚糖凝胶Sephadex G-100对降解多糖进行分离纯化,高效液相色谱法测定分子量,气相色谱法测定单糖组成,红外光谱、紫外光谱、刚果红试验和电镜扫描初步表征多糖结构。结果表明:黑穗醋栗果实降解多糖(BCP I)纯度为83.88%±0.76%;重均分子量为235 955 Da;BCP I为酸性杂多糖,单糖组成及物质量比为:半乳糖醛酸:鼠李糖:阿拉伯糖:甘露糖:葡萄糖:半乳糖=2.31:1.11:3.14:0.34:0.36:1.00。BCP I具有多糖的特征吸收峰,不含多酚、蛋白质和核酸;不具有三股螺旋结构,呈现片状不规则的形态。抗糖基化活性测定结果表明BCP I对糖基化反应3个阶段(Amadori产物形成阶段、二羰基化合物形成阶段和糖基化终产物形成阶段)产物的形成均表现出良好的抑制作用,抑制率随浓度与时间的增加而增大。最大抑制率分别为49.55%±0.79%,41.82%±0.72%和42.01%±0.13%,均高于对照氨基胍。研究结果可为后续深入探讨黑穗醋栗果实多糖结构与降血糖活性之间的构效关系提供理论基础。

关键词：纯化超声波降解黑穗醋栗果实多糖结构抗糖基化

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蓝靛果多糖功能特性、结构及抗糖基化活性

食品科学 2020年第2期41卷 8-14页

作者：徐雅琴刘柠月李大龙任耀宇董晓彤杨昱王丽波东北农业大学文理学院黑龙江哈尔滨150030 东北农业大学园艺园林学院黑龙江哈尔滨150030

以蓝靛果果实为原料,采用超声波辅助复合酶法提取,经D4006大孔树脂纯化,制得蓝靛果多糖。并对多糖的功能特性、结构特征和抗糖基化反应活性进行研究。结果表明蓝靛果多糖具有一定的持水性、持油性、乳化性及乳化稳定性;蓝靛果多糖为典... 详细信息

以蓝靛果果实为原料,采用超声波辅助复合酶法提取,经D4006大孔树脂纯化,制得蓝靛果多糖。并对多糖的功能特性、结构特征和抗糖基化反应活性进行研究。结果表明蓝靛果多糖具有一定的持水性、持油性、乳化性及乳化稳定性;蓝靛果多糖为典型的非牛顿流体,呈现剪切稀释现象,具有作为食品或者生物医药的质地改性剂或增稠剂的潜力;同时蓝靛果多糖热稳定性较好,可作为功能性添加剂应用到食品工业中。气相色谱法测定结果表明,蓝靛果多糖为酸性杂多糖,单糖组成及物质的量比为:半乳糖醛酸-鼠李糖-阿拉伯糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖=2.84∶10.02∶15.47∶1.00∶2.48∶36.12。红外光谱、紫外-可见光谱表明,蓝靛果多糖具有多糖的特征吸收峰,不含核酸、蛋白质和花色苷。刚果红实验、扫描电镜和X射线衍射测定结果显示:蓝靛果多糖不具有三股螺旋结构,呈现无定形片状结构。体外抗糖基化活性测定结果表明蓝靛果多糖对糖基化反应3个阶段产物(Amadori产物、二羰基化合物和糖基化终产物)的形成均表现出良好的抑制作用,质量浓度为0.5 mg/mL时,最大抑制率分别为(35.24±1.44)%、(33.41±1.01)%和(42.62±0.70)%,均高于对照氨基胍。研究结果可为进一步开发利用蓝靛果资源提供一定的理论依据。

关键词：蓝靛果多糖功能特性结构表征抗糖基化

桑椹提取物中酚类化合物的抗氧化及抗糖基化活性分析

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食品科学 2016年第17期37卷 19-26页

作者：范智义李晓琳李巨秀西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100

利用葡聚糖凝胶层析柱将桑椹提取物分为6个组分(F1、F2、F3、F4、F5、F6),研究了桑椹中酚类化合物的抗氧化能力和抗糖基化能力。采用Folin-酚法、p H示差法和高效液相色谱法测定各组分总酚、总花色苷含量和酚类化合物成分;通过1,1-二苯... 详细信息

利用葡聚糖凝胶层析柱将桑椹提取物分为6个组分(F1、F2、F3、F4、F5、F6),研究了桑椹中酚类化合物的抗氧化能力和抗糖基化能力。采用Folin-酚法、p H示差法和高效液相色谱法测定各组分总酚、总花色苷含量和酚类化合物成分;通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮-二(3-苯并噻唑-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid),ABTS)自由基清除率和亚铁还原能力实验评价各组分抗氧化能力;建立牛血清白蛋白-果糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙酮醛模拟反应体系评价各组分抗糖基化能力。结果表明:桑椹提取物中检测出5种酚酸、两种花色苷和两种黄酮类物质;F3的总花色苷含量最高(P抗氧化能力显著高于其他组分(P抗糖基化能力显著强于其他组分(P糖基化抑制率分别为(87.23±0.36)%和(66.99±1.62)%);桑椹提取物的抗氧化能力、抗糖基化能力分别与总花色苷、总酚含量呈现显著的回归关系(P<0.05)。

关键词：桑椹酚类化合物抗氧化抗糖基化

锁阳原花青素提取方法及抗氧化和抗糖基化研究

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天然产物研究与开发 2018年第12期30卷 2039-2048页

作者：张喜峰陈雨迪崔晶程雯慧河西学院农业与生物技术学院甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室张掖734000

为比较不同提取方法对锁阳原花青素得率、抗氧化性和抗糖基化活性的影响,本研究分别采用超声波法、乙醇/硫酸铵双水相萃取法、水提法、微波法和酶解法提取锁阳中原花青素,用香草醛-浓盐酸法测定原花青素含量。采用DPPH·清除能力和·OH... 详细信息

为比较不同提取方法对锁阳原花青素得率、抗氧化性和抗糖基化活性的影响,本研究分别采用超声波法、乙醇/硫酸铵双水相萃取法、水提法、微波法和酶解法提取锁阳中原花青素,用香草醛-浓盐酸法测定原花青素含量。采用DPPH·清除能力和·OH清除能力衡量其体外抗氧化能力,采用牛血清白蛋白(BSA)-葡萄糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙醛酸(MGO)模拟反应体系评价原花青素抗糖基化活性。结果表明:微波法提取得率最高,可达15. 00%,提取时间短,仅为19 min。不同提取方法对DPPH·清除能力依次为微波法>酶法>超声波法>乙醇/硫酸铵双水相萃取法>水提法;不同提取方法对·OH清除能力依次为:微波法>酶解法>超声法>水提法>乙醇/硫酸铵双水相萃取法。微波法制备原花青素在牛血清白蛋白-果糖模拟反应体系和牛血清白蛋白-丙酮醛模拟反应中均有最高抑制率;但抗氧化和抗糖基化活性无相关性。

关键词：锁阳原花青素微波法抗糖基化

桑椹多酚抗氧化、抗糖基化活性及改善HepG2细胞葡萄糖摄入的研究

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桑椹多酚抗氧化、抗糖基化活性及改善HepG2细胞葡萄糖摄入的研究

作者：范智义西北农林科技大学

学位级别：硕士

桑椹中含有丰富的多酚类物质,具有抗氧化、抗糖基化等活性,可减轻由多种原因引发的氧化应激及胰岛素抵抗。活性二羰基化合物丙酮醛(methyglyoxal,MG)可通过非酶糖基化修饰多种生物大分子,引发功能性蛋白损伤,并与机体氧化损伤及葡萄糖... 详细信息

桑椹中含有丰富的多酚类物质,具有抗氧化、抗糖基化等活性,可减轻由多种原因引发的氧化应激及胰岛素抵抗。活性二羰基化合物丙酮醛(methyglyoxal,MG)可通过非酶糖基化修饰多种生物大分子,引发功能性蛋白损伤,并与机体氧化损伤及葡萄糖耐受性下降密切相关。目前,MG对细胞氧化应激及葡萄糖摄入的研究仍较为缺乏,利用天然多酚减轻MG毒性与危害的报道较少。此外,桑椹多酚的成分与其抗氧化、抗糖基化活性的关系也缺乏系统的资料。本研究利用葡聚糖层析柱,将桑椹多酚提取物分离为六个组分,并分析了各组分的抗氧化、抗糖基化能力。同时,以人肝癌细胞系HepG2为研究模型,探究了MG处理下桑椹花色苷提取物对细胞氧化应激、葡萄糖摄入的改善。本研究深入评价了桑椹多酚的功能活性,为抑制MG等活性二羰基化合物的研究建立了基础。本研究得到如下主要结论:(1)葡聚糖层析柱分离出的六个桑椹多酚提取物组分(F1-F6)均具有一定的DPPH、ABTS自由基清除力及亚铁还原能力,并抑制了牛血清蛋白-果糖、牛血清蛋白-MG模型中晚期糖基化末端产物的生成。桑椹多酚提取物中检测出原儿茶酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、对香豆酸和邻香豆酸五种酚酸、矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷两种花色苷和芦丁、槲皮素两种黄酮类物质;六个组分中,F3的总花色苷含量最高,F5的总酚含量最高(P抗氧化能力显著高于其他组分(P抗糖基化能力显著强于其他组分(P抗氧化能力、抗糖基化能力分别与总花色苷、总酚含量呈现显著的回归关系(P化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)等抗氧化酶活性显著下降(P化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)值显著下降(P化及蛋白氧化水平升高(P化应激。10-40μg/mL桑椹花色苷提取物预处理细胞后,由MG引发的细胞毒性及氧化应激得到明显抑制(P抗氧化酶系活性显著增加,T-GSH水平及GSH/GSSG值显著改善(P化及蛋白氧化水平均显著下降(P化水平显著下降(P化水平的下降,并降低了GLUT2的水平(P<0.05)。MG显著降低了HepG2细胞内胰岛素受体底物1(IRS1)和GLUT2的mRNA水平,提高了AKT2的mRNA水平(P<0.05),桑椹花色苷提取物处理显著逆转了以上情况(P<0.05)。

关键词：桑椹多酚抗氧化抗糖基化葡萄糖摄入丙酮醛

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罗汉果黄素及其主要代谢物抗糖基化活性研究

现代食品 2021年第23期6卷 164-167,172页

作者：陈杨童优芸李梦月高艺笑项颖芳刘合生浙江万里学院生物与环境学院浙江宁波315100 诺安检测服务有限公司浙江宁波315000

为探讨罗汉果黄素及其主要代谢物的抗糖基化活性,本研究采用体外牛血清白蛋白-果糖-葡萄糖(BSA-Fru-Glu)糖基化体系,探讨罗汉果黄素及其主要代谢产物山奈苷、阿福豆苷和山奈酚对糖基化的抑制作用。结果表明,罗汉果黄素原形物无明显的抗... 详细信息

为探讨罗汉果黄素及其主要代谢物的抗糖基化活性,本研究采用体外牛血清白蛋白-果糖-葡萄糖(BSA-Fru-Glu)糖基化体系,探讨罗汉果黄素及其主要代谢产物山奈苷、阿福豆苷和山奈酚对糖基化的抑制作用。结果表明,罗汉果黄素原形物无明显的抗糖基化活性,但其主要代谢物山奈苷、阿福豆苷和山奈酚表现出较强的抗糖基化活性,这些代谢物对荧光AGEs形成的抑制作用的次序为山奈苷抗糖基化活性增强。

关键词：罗汉果黄素代谢物山奈酚抗糖基化活性二羰基化合物

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龙眼核多酚抗皮肤糖基化衰老作用的研究

龙眼核多酚抗皮肤糖基化衰老作用的研究

作者：郑子锋江南大学

学位级别：硕士

蛋白非酶糖基化对皮肤老化有显著的作用,晚期糖基化终产物(AGEs)在老化的皮肤中积累,能够引起皮肤生物力学特性的改变和生物变化,使得皮肤变得干燥,变薄,缺乏弹性和刚性,寻找安全的抗糖化物质作为化妆品中的一种成分是抗皮肤衰老类化妆... 详细信息

蛋白非酶糖基化对皮肤老化有显著的作用,晚期糖基化终产物(AGEs)在老化的皮肤中积累,能够引起皮肤生物力学特性的改变和生物变化,使得皮肤变得干燥,变薄,缺乏弹性和刚性,寻找安全的抗糖化物质作为化妆品中的一种成分是抗皮肤衰老类化妆品产品发展的关键之一。本文通过多种模型对龙眼核多酚抑制牛血清白蛋白(BSA)非酶糖基化效果和机制进行研究,并通过检测氧化应激、促炎因子和受体RAGE等指标研究龙眼核多酚对AGEs影响人皮肤成纤维细胞的保护作用。最后利用组织工程对龙眼核多酚的在真皮等效物中的抗糖化效果做了研究。主要内容如下:以BSA-葡萄糖为糖化模型研究龙眼核多酚对蛋白非酶糖基化抑制效果。利用NBT法测得龙眼核多酚并没有抑制糖基化第一阶段Amadori产物的生成,利用HPLC衍生化法,发现龙眼核多酚能够显著降低体系70%的乙二醛和丙酮醛,对抑制3-脱氧葡萄糖醛酮的水平具有浓度依赖性。通过荧光分析法和酶联免疫技术,测得在激发/发射波长为335/385 nm和370/440 nm处,5μg/m L的龙眼核多酚对荧光性AGEs生成的抑制率分别为62.4%和21.3%,对CML生成的抑制率为61.5%,表明龙眼核多酚对蛋白具有良好的抗糖基化效果。捕获羰基实验表明龙眼核多酚具有良好的捕获乙二醛和丙酮醛能力。在Amadori产物反应模型中,龙眼核多酚能够通过抗氧化作用抑制Amadori产物氧化生成乙二醛和荧光性AGEs。通过比较MGO-BSA与MGO-Arg两个体系并结合分子对接结果分析,龙眼核多酚能与蛋白相互作用,更好的保护氨基不受二羰基化合物的进攻。通过合成AGEs诱导成纤维细胞损伤,AGEs对成纤维细胞具有一定的细胞毒性和抑制细胞增殖作用。0.5 mg/m L AGEs存在下,细胞内促炎因子NF-κB p65含量增加13.9%,加入5μg/m L龙眼核多酚后下降为8.8%,龙眼核多酚能够抑制AGEs诱导成纤维细胞NF-κB p65的合成。1 mg/m L AGEs存在下,细胞内胶原蛋白含量从285μg/mgprot下降为238μg/mgprot,细胞内ROS上升62.5%,细胞内SOD活性从3.26 U/mg下降为2.57U/mg,NF-κB p65磷酸化增加49.2%,RAGE的表达增加94.4%,表明AGEs能够引发成纤维细胞氧化应激,激活细胞信号通路,诱导细胞损伤;加入5μg/m L龙眼核多酚后,细胞内胶原蛋白含量上升为285.9μg/mgprot,ROS增加率降低至28%,SOD活性上升为2.89 U/mg,NF-κB p65磷酸化增加率降低至36.8%,AGE受体RAGE的表达增加率降低至71.9%。龙眼核多酚的加入能减轻AGEs诱导成纤维细胞氧化应激,增加胶原蛋白的合成,抑制持续性激活促炎因子NF-κB,下调RAGE的表达来保护成纤维细胞。利用胶原凝胶形成真皮等效物,初步评估龙眼核多酚在仿生真皮模型中的抗糖化作用。结果表明:胶原混合液在37℃,5%CO条件形成乳白色不含细胞真皮等效物和粉红色含细胞真皮等效物。在真皮等效物糖化过程中,龙眼核多酚能够抑制或清除二羰基化合物的形成,在激发/发射波长为370/440 nm和335/385 nm处,5μg/m L的龙眼核多酚对真皮等效物中荧光性AGEs生成的抑制率分别为59.2%和57.9%。在胶原蛋白溶液预糖化过程中,100μg/m L的龙眼核多酚在激发/发射波长为370/440 nm和335/385 nm处对荧光性AGEs生成的抑制率分别为70.0%和37.4%。在含细胞的老化真皮等效物的细胞增殖实验中,龙眼核多酚处理形成的真皮等效物细胞相对活力高于核糖处理。龙眼核多酚能够通过抑制细胞外基质胶原蛋白的糖基化,减少胶原蛋白糖基化对成纤维细胞增殖的影响,从而保护细胞。

关键词：非酶糖基化龙眼核多酚抗糖基化荧光性AGEs RAGE

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丹酚酸B多重护肤功效的综合评价

中国食品药品监管 2024年第7期 134-145页

作者：龚旭田云才田勇张文环刘秋文燕徐学涛甘礼社五邑大学药学与食品工程学院上海致臻志臣科技有限公司浙江中医药大学药学院

目的:本文利用非酶糖基化反应模型、人永生化角质形成(HaCaT)细胞光老化模型、人胚胎皮肤成纤维细胞(ESF)内的胶原蛋白含量测定、酪氨酸酶抑制实验和细胞酪氨酸酶抑制实验对丹酚酸B(Sal B)的多重护肤活性进行了系统评价。方法:通过非酶... 详细信息

目的:本文利用非酶糖基化反应模型、人永生化角质形成(HaCaT)细胞光老化模型、人胚胎皮肤成纤维细胞(ESF)内的胶原蛋白含量测定、酪氨酸酶抑制实验和细胞酪氨酸酶抑制实验对丹酚酸B(Sal B)的多重护肤活性进行了系统评价。方法:通过非酶糖基化反应模型评价了Sal B抗糖基化效果;HaCaT细胞光老化模型评价了Sal B抗皮肤衰老活性;天狼猩红-苦味酸染色法测定ESF中胶原蛋白含量,评价了Sal B紧致皮肤的活性;蘑菇酪氨酸酶抑制实验、小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)中酪氨酸酶活性抑制实验,评价了Sal B的美白作用,结合分子对接,推断了Sal B抑制酪氨酸酶的作用位点。结果:Sal B能抑制晚期高级糖化终末产物(AGEs)生成,具有抗糖基化作用,也能增强紫外损伤的HaCaT细胞活力,具有明确的抗皮肤细胞光老化作用,其作用机制与提高细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)等抗氧化物活性和含量有关。Sal B还能增加ESF中胶原蛋白含量,从而发挥紧致皮肤的功效。Sal B可通过氢键作用、疏水作用等方式与酪氨酸酶结合,抑制其活性,从而发挥良好的美白功效。结论:本文利用多种模型综合评价了Sal B的多重护肤功效,以期为Sal B在护肤产品中的开发利用提供理论依据。

关键词：丹酚酸B 抗糖基化抗光老化抗氧化美白紧致皮肤