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猪苓多糖硫酸酯的抗凝血活性研究

科技资讯 2012年第20期10卷 1-1页

作者：李伟合肥学院生物与环境工程系安徽合肥230022

通过硫酸化修饰猪苓多糖,制备猪苓多糖硫酸酯,与肝素标准品对比分析其抗凝血活性。测定样品的1/2凝固度的精确体积,计算其抗凝血效价,结果显示样品的效价为45.47U/mg,相当于肝素标准品的30.31%。

关键词：猪苓多糖硫酸酯抗凝血活性

芪参还五胶囊中虫类药材的仿生酶解工艺优化及抗凝血、溶栓活性评价

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食品与药品 2021年第5期23卷 385-390页

作者：王世信杨美娜崔友祥闫国强丁洪青河北省沧州中西医结合医院中药药学部河北沧州061001 河北省沧州中西医结合医院脑病三科河北沧州061001

目的筛选并优化芪参还五胶囊中虫类药材的仿生酶解工艺条件,并对其抗凝血、溶栓活性进行初步评价。方法以总蛋白含量、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、血浆凝血酶时间(TT)和溶栓活性为指标,评价水煎煮、水提醇沉、匀浆... 详细信息

目的筛选并优化芪参还五胶囊中虫类药材的仿生酶解工艺条件,并对其抗凝血、溶栓活性进行初步评价。方法以总蛋白含量、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、血浆凝血酶时间(TT)和溶栓活性为指标,评价水煎煮、水提醇沉、匀浆、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解和仿生酶解等不同提取方法对芪参还五胶囊中虫类药材的提取效果,并采用正交试验设计优化仿生酶解提取工艺的最佳工艺条件。结果仿生酶解提取物的总蛋白含量、APTT、PT、TT和溶栓活性均为最佳,血栓抑制率为41.97%,与阿司匹林阳性对照的抗凝血和溶栓作用相当。正交试验结果表明,加酶量和酶解时间两个因素对仿生酶解法提取效果有显著性影响(P<0.05),综合得出最佳仿生酶解工艺条件为药材粉碎粒度为80目,加酶量为2%生药量,胃蛋白酶和胰蛋白酶各自酶解时间为2 h。3次平行工艺验证结果表明该工艺条件稳定可行。结论本研究筛选的仿生酶解法工艺条件稳定可行,可作为芪参还五胶囊中三味虫类药材的最佳提取方法。

关键词：芪参还五胶囊虫类药材仿生酶解提取法抗凝血活性溶栓活性

牡蛎蛋白酶解条件优化及高活性体外抗凝血类蛋白修饰物制备

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中国食品添加剂 2024年第6期35卷 77-85页

作者：张铁涛武天明杭瑜瑜海南热带海洋学院食品科学与工程学院三亚572022 海南省海洋食品工程技术研究中心三亚572022

选取牡蛎肉为研究对象,以氨基酸态氮的含量和体外凝血因子Xa抑制活性为考核指标,考察木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶的酶解效果,其中胃蛋白酶对牡蛎的酶解效果最好。采用响应面法分析响应变量(酶添加量、温度、酶解时间)... 详细信息

选取牡蛎肉为研究对象,以氨基酸态氮的含量和体外凝血因子Xa抑制活性为考核指标,考察木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶的酶解效果,其中胃蛋白酶对牡蛎的酶解效果最好。采用响应面法分析响应变量(酶添加量、温度、酶解时间)之间的交互影响,并确定最佳酶解工艺条件为:酶添加量2.5%、温度37.7℃、酶解时间4 h,氨基酸态氮的含量达到了3.60 g·mL^(-1)。采用超滤膜技术筛选四-六牡蛎肽组分,采用可控酶解技术,在抑制活性较高的牡蛎肽组分C-端,外结合位点结合一定量的天冬氨酸/谷氨酸。通过体外活性试验确定生成的牡蛎类蛋白修饰物具有体外凝血因子Xa抑制活性。

关键词：牡蛎肉酶解抗凝血活性

3种养殖水蛭营养成分·氨基酸组成及抗凝血酶活性差异比较

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安徽农业科学 2024年

作者：陈晓瑛甘炼黄文刘威郝青孙育平广东省农业科学院动物科学研究所/农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室华南农业大学梅州安蛭生物科技有限公司

[目的]比较分析菲牛蛭、日本医蛭和宽体金线蛭3种养殖水蛭的营养成分、氨基酸组成和抗凝血活性，为水蛭的大规模开发利用提供参考。[方法]分别称量3种养殖水蛭成体150 g，经真空冷冻干燥后，随机分成3个重复，制得养殖水蛭冷冻干燥粉，... 详细信息

[目的]比较分析菲牛蛭、日本医蛭和宽体金线蛭3种养殖水蛭的营养成分、氨基酸组成和抗凝血活性，为水蛭的大规模开发利用提供参考。[方法]分别称量3种养殖水蛭成体150 g，经真空冷冻干燥后，随机分成3个重复，制得养殖水蛭冷冻干燥粉，采用标准方法测定干物质、粗蛋白质、粗脂肪、灰分含量及氨基酸组成，采用凝血酶滴定法测定抗凝血活性。[结果]3种养殖水蛭冷冻干燥粉中，水分含量差异明显（P菲牛蛭>日本医蛭。日本医蛭粗蛋白质、粗脂肪和灰分含量最高，宽体金线蛭最低，其中菲牛蛭粗蛋白质和粗脂肪含量显著低于日本医蛭（P0.05）。3种养殖水蛭冷冻干燥粉中的抗凝血活性差异明显（P日本医蛭>宽体金线蛭。[结论]3种养殖水蛭均具有良好的营养价值和较强的体外抗凝血酶活性，可作为药食同源的优质品种进行规模化人工养殖。

关键词：养殖水蛭营养成分氨基酸组成抗凝血活性

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羊栖菜和裙带菜中抗凝血活性物质的初步筛选

水产学报 2004年第4期28卷 473-476页

作者：刘承初周颖邬英睿甘建红周培根上海水产大学食品学院上海水产大学食品学院上海 200090

广阔的海洋占地球总面积的71％,其中蕴涵着丰富的生物资源。海藻系生长于海洋中的低等隐花植物,曾被大量用作工业原料、肥料和饲料。而近年来,其保健作用和药用价值越来越受到人们的关注。中国古代《神农本草经》和《本草纲目》等书中... 详细信息

广阔的海洋占地球总面积的71％,其中蕴涵着丰富的生物资源。海藻系生长于海洋中的低等隐花植物,曾被大量用作工业原料、肥料和饲料。而近年来,其保健作用和药用价值越来越受到人们的关注。中国古代《神农本草经》和《本草纲目》等书中曾记载,海藻具有软坚散结、清热解毒、利水消肿、补肾养心、破血祛瘀和消食驱虫等功效。近代研究表明,海藻中含有多种药理活性很强

关键词：羊栖菜裙带菜抗凝血活性硫酸多糖岩藻糖

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中国林蛙蛙头提取物中抗凝血活性物质的研究

中国林蛙蛙头提取物中抗凝血活性物质的研究

作者：徐丽琴辽宁师范大学

学位级别：硕士

中国林蛙(Rana Chensinensis)，俗称田鸡，蛤士蟆，属两栖纲，无尾目蛙科，是我国特有的经济价值很高的药用两栖动物。它在我国许多地区都能生存，但主要分布在东北三省。中国林蛙浑身都是宝，具有较高的药用价值和经济价值，目前国内... 详细信息

中国林蛙(Rana Chensinensis)，俗称田鸡，蛤士蟆，属两栖纲，无尾目蛙科，是我国特有的经济价值很高的药用两栖动物。它在我国许多地区都能生存，但主要分布在东北三省。中国林蛙浑身都是宝，具有较高的药用价值和经济价值，目前国内关于中国林蛙的利用多为雌蛙的制药及蛙肉的食用等传统的研究范畴，有关中国林蛙深加工的报道很少。本文旨是从林蛙头中分离出具有抗凝血活性的提取物，为大幅度提高林蛙产品的附加值，实现其综合利用开辟一条新的途径。首先，实验以中国林蛙的蛙头为原料，经过剪切，匀浆，碱解，去蛋白，干燥等处理后得到一种有抗凝血活性的提取物，并以L(3)正交实验设计优化选出抗凝血提取物的最佳提取工艺是匀浆时加入的生理盐水的量为林蛙头体积的2倍，碱解时的时间为8h，碱解时加入碱液的体积为原液的5倍，碱解时的温度为30℃。并在此条件下进行了中试实验，结果表明此放大中试试验是完全可行的，可以用于工业化生产。其次，对林蛙头提取物进行了抗凝血活性研究，结果显示林蛙头提取物在体外能延长凝血时间，复钙凝血时间，凝血酶原时间，凝血酶时间，抑制凝血酶活性，并和剂量呈依赖关系。但没有水解纤维蛋白的活性和对纤溶酶原激活活性。在体内能延长凝血时间和出血时间，但和剂量没有依赖关系。并对林蛙头提取物进行了抗凝血性能的评价，大概有肝素活性的二十分之一，同时用试管血液凝固方法测定了其抗凝血活性的效价为5.2U。然后，对林蛙头提取物进行了理化性质分析。结果表明，林蛙头提取物易溶解于水中和稀酸溶液中，尤其易溶于稀碱溶液中，不溶于乙醇，乙醚，乙酸乙酯，丙酮等有机溶剂。林蛙头提取物热稳定性较好。在强酸和强碱下活性降低。由组分测定可知，林蛙头提取物中含有多糖，蛋白，氨基酸，氨基己糖，半乳糖醛酸，硫酸根等物质，是一种蛋白聚糖复合物。本实验也确定了林蛙头提取物的抗凝的有效成分是蛋白和多糖。林蛙头提取物可能是一种氨基多糖，是类肝素类物质。最后，也对林蛙头提取物的抗凝血机制进行了初步的探索，研究结果表明，林蛙头提取物是通过抑制血浆中的凝血因子Ⅱ，Ⅶ，Ⅹ的活性来达到抗凝血作用的。林蛙头提取物的抗凝作用作用机制和肝素相似，推测林蛙头提取物是类肝素物质。在以上研究结果的基础上，本研究得出结论：林蛙头提取物是一种蛋白聚糖，实验室提取工艺适合工业化大生产，它在体内体外均有抗凝血作用，但没有溶栓作

关键词：林蛙头提取物提取工艺抗凝血活性抗凝效价

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地龙抗凝血活性物质研究

地龙抗凝血活性物质研究

作者：杨新江汉大学

学位级别：硕士

目的:地龙(Pheretima)又名蚯蚓,有广地龙和沪地龙两个不同品种:钜蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum(***)的干燥体习称“广地龙”,通俗环毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛蚓Pheretima guillelmi(Michaelsen)或栉盲环毛蚓Pheretima pectinifera Michaelsen三种动物的干燥体习称“沪地龙”,是我国传统中药之一,据《本草纲目》记载,地龙具有活血化瘀、预防治疗心脑血管疾病等功效,广泛地应用于多种心血管疾病的治疗。近代研究表明,地龙具有促纤溶、抗凝、改善血液循环等作用。本文分别对广地龙、沪地龙中抗凝血活性物质的提取方法进行研究,获得地龙抗凝血活性物质提取工艺,并运用凝胶、阴离子交换色谱法对广地龙最优提取工艺条件下的提取物进行分离及性质研究,为新型地龙抗凝血药物的进一步研究奠定基础。方法:1以宽体金钱蛭为阳性对照、0.9%NaCl溶液做阴性对照,以三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(Tris-HCl,pH=7.40)做空白对照,应用凝血酶滴定法分别比较两种不同品种地龙——广地龙、沪地龙的水煎煮、0.9%NaCl溶液煎煮、70%乙醇溶液回流提取、石油醚脱脂后水煎煮、石油醚脱脂后0.9%NaCl溶液煎煮及石油醚脱脂后70%乙醇溶液回流提取6种不同提取方法提取物中抗凝血活性物质的差异。2运用凝胶、阴离子交换色谱,构建Sephadex G50、DEAE Cellulose-52、Sephadex G50脱盐及Sephadex LH-20色谱分离体系分离广地龙经石油醚脱脂后0.9%NaCl溶液煎煮提取法的提取物,运用茚三酮反应、双缩脲反应对各流份进行蛋白质或多肽类物质性质鉴定,结合凝血酶滴定法检测各流份抗凝血活性确定最终的抗凝血活性流份。结果:1应用凝血酶滴定法分别比较广、沪两种不同品种地龙,不同提取前处理、不同提取方法提取物中抗凝血活性物质的差异,发现地龙经过石油醚脱脂处理后提取物抗凝血活性明显增强,并且在相同条件下,经过石油醚脱脂处理后,两种地龙干品均是0.9%NaCl溶液煎煮法提取物抗凝血活性最强。2广地龙经石油醚脱脂后0.9%NaCl溶液煎煮提取法的提取物经Sephadex G50分离后得到抗凝血活性流份Ⅰ、Ⅱ,流份Ⅰ、Ⅱ分别经DEAE Cellulose-52分离后得到抗凝血活性流份Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4,流份Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4分别经Sephadex G50脱盐后得到流份Ⅱ-2-1、Ⅱ-3-1、Ⅱ-4-2,最后流份Ⅱ-2-1、Ⅱ-3-1、Ⅱ-4-2分别经Sephadex LH-20分离后得到最终的抗凝血活性流份Ⅱ-2-1-2、Ⅱ-3-1-1、Ⅱ-4-2-2。分离过程中具有抗凝血活性的流份进行茚三酮反应、双缩脲反应均显示阳性,表明这些有抗凝血活性的流份可能是蛋白质或肽类物质。结论:1不同品种的地龙抗凝活性强度与提取前处理、提取方法有密切联系。广、沪两种不同品种地龙,经不同提取前处理、不同提取方法提取物中抗凝血活性物质存在一定的差异,并发现地龙经过石油醚脱脂处理后提取物抗凝血活性明显增强,可能是因为地龙中部分在水中有溶解的脂溶性杂质可以通过脱脂去掉,单位体积内水能溶解更多抗凝物质,同时脱脂也有助于脱色,去掉了色素干扰,脱脂后的提取液比未脱脂提取液明显清澈,有利于后一步的分离。2广地龙经石油醚脱脂后0.9%NaCl溶液煎煮提取法的提取物经构建的Sephadex G50、DEAE Cellulose-52、Sephadex G50脱盐及Sephadex LH-20色谱分离体系最终得到Ⅱ-2-1-2、Ⅱ-3-1-1、Ⅱ-4-2-2三个具有抗凝血活性的流份,并且茚三酮反应、双缩脲反应均显示阳性,表明这些有抗凝血活性的流份可能是蛋白质或肽类物质,为新型地龙抗凝血药物的进一步研究奠定基础。

关键词：地龙提取方法凝血酶滴定法抗凝血活性凝胶色谱阴离子交换色谱

手性人参皂苷Rg_3的抗凝血和抗血小板聚集活性差异研究

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中华中医药学刊 2015年第9期33卷 2072-2075页

作者：彭茗张瑱张彤杨永健乐健陶建生吴秋上海中医药大学上海201203 上海市食品药品检验所上海201203 上海市医药工业研究院上海200437 云南文山坤七药业有限公司云南663000

目的:观察人参皂苷20(S)-Rg3和20(R)-Rg3的的大鼠体内抗凝血活性和体外ADP诱导的血小板聚集活性的差异,初步探究其抗凝作用机制。方法:将大鼠随机分为5组[对照组、20(S)-Rg3和20(R)-Rg3低、高剂量组],每组3只。给药组分别以5 mg·kg-1和... 详细信息

目的:观察人参皂苷20(S)-Rg3和20(R)-Rg3的的大鼠体内抗凝血活性和体外ADP诱导的血小板聚集活性的差异,初步探究其抗凝作用机制。方法:将大鼠随机分为5组[对照组、20(S)-Rg3和20(R)-Rg3低、高剂量组],每组3只。给药组分别以5 mg·kg-1和20 mg·kg-1剂量尾静脉给药,眼眶取血后,测定血浆的APTT、PT和TT值;取大鼠全血,以ADP为诱导剂,体外测定Rg3对血小板聚集的抑制率。结果:在20 mg·kg-1的剂量下,20(R)-Rg3对APTT有显著的延长作用(P抗凝血和抗血小板聚集作用上有差异。20(R)-Rg3构型相对于S构型更具有抗凝作用,通过延长APTT和抗血小板聚集两种机制体现出来。

关键词：人参皂苷Rg3 手性抗凝血活性血小板聚集

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萱藻多糖的制备及抗凝血抗血栓活性研究

中国海洋药物 2012年第1期31卷 25-28页

作者：滕洪明吕东泽戴淑芳剧锦哲李巧梅邹向阳大连医科大学生物技术系辽宁大连116044 大连医科大学基础医学院辽宁大连116044

目的制备萱藻多糖并对家兔体外凝血及小鼠体内血栓形成的抑制作用进行研究。方法采用热水浸提-乙醇沉淀法制备萱藻多糖;检测家兔心脏动脉血活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)。以角叉菜胶诱导小鼠尾部血栓模型... 详细信息

目的制备萱藻多糖并对家兔体外凝血及小鼠体内血栓形成的抑制作用进行研究。方法采用热水浸提-乙醇沉淀法制备萱藻多糖;检测家兔心脏动脉血活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)。以角叉菜胶诱导小鼠尾部血栓模型,检测萱藻多糖体内抗血栓作用。结果萱藻多糖可显著延长家兔血浆APTT、PT和TT;对角叉菜胶诱导的小鼠尾部血栓具有显著的抑制作用(P抗凝和抑制实验性血栓形成的作用。

关键词：萱藻多糖抗凝血活性血栓形成