检索结果-南通市图书馆

济南大学学报(自然科学版) 2024年

作者：马林鞠金鑫李琳秦晓春董士尚济南大学生物科学与技术学院

为了获得托高土病毒核蛋白氮端结构域的蛋白(THOV NPN)晶体，进一步探究其结构和功能，依次采用镍亲和层析、肝素亲和层析方法，对大肠杆菌异源表达获得的THOV NPN进行纯化；利用凝胶过滤层析及十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对... 详细信息

为了获得托高土病毒核蛋白氮端结构域的蛋白(THOV NPN)晶体，进一步探究其结构和功能，依次采用镍亲和层析、肝素亲和层析方法，对大肠杆菌异源表达获得的THOV NPN进行纯化；利用凝胶过滤层析及十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对THOV NPN的均一性和纯度进行检测；分别使用坐滴法和悬滴法对THOV NPN进行结晶条件的筛选和优化，结合质谱法对所得的晶体进行验证。结果表明：所使用的提取方法可以获得纯度较高、性质均一的THOV NPN；在培养温度16 ℃，THOV NPN的质量浓度为25.0 g/L，池液中磷酸氢二铵、柠檬酸钠、氯化钠的浓度分别为0.8、0.1、0.2 mol/L及pH= 5.0的条件下可以获得粒径为0.05 mm、形状近似正方体的THOV NPN晶体。

关键词：托高土病毒核蛋白分离纯化结晶

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