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流脑多糖协同扁豆凝集素诱生IFNγ

生物制品资料选编 1990年第14期 72-74页

作者：李绪中李瑞华

肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的研究

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生物化学与生物物理进展 2005年第5期32卷 442-448页

作者：代智刘银坤崔杰峰冯钜涛宋海燕陈洁孙瑞霞李娜申华莉张予杨芃原复旦大学附属中山医院肝癌研究所教育部"癌变和侵袭原理"重点实验室上海200032 复旦大学蛋白质组学研究中心化学系上海200433

通过比较研究不同转移潜能肝癌细胞系中核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的差别,筛查与转移相关的重要糖蛋白.用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向电泳(2-DE)和凝集素印迹技术联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分... 详细信息

通过比较研究不同转移潜能肝癌细胞系中核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的差别,筛查与转移相关的重要糖蛋白.用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向电泳(2-DE)和凝集素印迹技术联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析,建立3种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97L和MHCC97H的核心岩藻糖基化蛋白质表达图谱.比较研究发现,不同转移潜能肝癌细胞呈现不同的SDS-PAGE/LCA凝集素印迹图谱,MHCC-97H和MHCC-97L在35～45 ku和45～60 ku间出现了Hep3B未见的条带.在核心岩藻糖基化蛋白质表达图谱中,Hep3B、MHCC97L和MHCC97H分别平均检测到(55±7)个蛋白质点(n=3),(60±6)个蛋白质点(n=3),(61±4)个蛋白质点(n=3);以各自双向电泳图谱为参考胶,Hep3B、MHCC97L和MHCC97H分别与其匹配的平均匹配点数为(25±3)个(n=3),(30±4)个(n=3),(28±3)个(n=3).该图谱中,与Hep3B相比,MHCC97L有13个点未匹配,其中9个点为Hep3B(-)/MHCC97L(+);MHCC97H有9个点未匹配,其中6个点为Hep3B(-)/MHCC97H(+),MALDI-TOF-MS/MS可鉴定出Annexin1、Keratin 8等12种差异蛋白质.这些结果证实了不同转移潜能的肝癌细胞有明显的核心岩藻基化糖蛋白差异性表达.提示肝癌转移可能与这些差异糖蛋白及其核心岩藻糖基化有关.

关键词：肝癌细胞核心岩藻糖蛋白基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱扁豆凝集素糖蛋白质组学

人健康肝组织核心岩藻糖基化蛋白质的鉴定及生物信息学分析

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生物化学与生物物理进展 2008年第5期35卷 555-562页

作者：代智樊嘉周俭柏斗胜邱双健康晓楠崔杰峰郭坤李岩刘银坤复旦大学附属中山医院肝癌研究所教育部癌变和侵袭原理重点实验室上海200032 复旦大学生物医学研究院上海200032

糖蛋白质组学方法鉴定人健康肝组织核心岩藻糖基化蛋白质,将有助于发现肝癌、慢性肝病相关异常核心岩藻糖基化蛋白质.应用凝集素亲和层析技术、双向电泳(2-DE)联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析,建立人健康肝... 详细信息

糖蛋白质组学方法鉴定人健康肝组织核心岩藻糖基化蛋白质,将有助于发现肝癌、慢性肝病相关异常核心岩藻糖基化蛋白质.应用凝集素亲和层析技术、双向电泳(2-DE)联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析,建立人健康肝组织核心岩藻糖基化蛋白表达谱,图谱均点数为(130±3)个,挖取90个蛋白质点进行质谱鉴定,数据库搜索及去冗余后,共鉴定53种蛋白质,主要分布于pI5～9,分子质量为10～100ku区域处.Gene Ontology分类发现它们参与体内代谢等过程,应用NetNGlyc对它们进行糖基化位点预测,并通过蛋白质免疫沉淀联合凝集素亲和印迹对其中的结合珠蛋白前体,α烯醇化酶的核心岩藻糖基化进行了再验证.以上结果提示,凝集素层析、2-DE联合MALDI-TOF-MS/MS分析是一种鉴定某种特定类型糖蛋白的高通量检测方法,所建立的表达谱可用于发现疾病发生、发展中相关的异常核心岩藻糖基化蛋白质.

关键词：核心岩藻糖蛋白扁豆凝集素亲和层析糖蛋白质组学人健康肝组织

CK8寡糖链结构及翻译水平改变与人肝癌细胞转移相关性研究

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生物化学与生物物理进展 2007年第2期34卷 196-202页

作者：代智刘银坤郭坤孙强玲卢雯静杨芃原复旦大学附属中山医院肝癌研究所教育部"癌变和侵袭原理"重点实验室上海200032 复旦大学蛋白质组学研究中心化学系上海200433

糖组学方法筛查人肝癌细胞转移过程中发挥重要作用的核心岩藻糖基化蛋白质分子,解析比较筛出的差异蛋白——细胞角蛋白8(CK8)翻译及糖基化修饰改变与人肝癌细胞转移潜能的关系.应用双向电泳(2-DE)、凝集素亲和印迹、凝集素亲和沉淀联合... 详细信息

糖组学方法筛查人肝癌细胞转移过程中发挥重要作用的核心岩藻糖基化蛋白质分子,解析比较筛出的差异蛋白——细胞角蛋白8(CK8)翻译及糖基化修饰改变与人肝癌细胞转移潜能的关系.应用双向电泳(2-DE)、凝集素亲和印迹、凝集素亲和沉淀联合质谱分析技术,筛查并验证与肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白;应用细胞免疫荧光和蛋白质免疫印迹检测CK8的蛋白质表达情况;应用免疫沉淀结合多种凝集素亲和印迹,推测其与肝癌转移相关的寡糖链结构改变.研究发现,3种不同转移潜能人肝癌细胞Hep3B、MHCC97-L和MHCC97-H的扁豆凝集素(LCA)亲和印迹表达谱中,分子质量55～60ku、等电点4～6区域处有核心岩藻糖基化蛋白呈差异表达,质谱鉴定为***亲和沉淀及蛋白质印迹进一步验证CK8异常核心岩藻糖基化与肝癌转移相关;研究发现,CK8分布于细胞浆内,在MHCC97-L和MHCC97-H细胞中蛋白质表达水平较Hep3B高,在MHCC97-H中与LCA和蓖麻凝集素(RCA-1)的亲和力较Hep3B强.以上结果提示,2-DE和凝集素印迹技术联合MALDI-TOF-MS/MS分析可用于筛查疾病过程相关的异常糖基化蛋白质分子,CK8蛋白水平、核心岩藻糖基化及β-1,4末端半乳糖基化的增加均与肝癌细胞转移潜能相关.

关键词：肝癌细胞肿瘤转移 CK8 扁豆凝集素核心岩藻糖基化

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甲胎蛋白异质体预测肝癌发生的临床价值

第二军医大学学报 1991年第5期12卷 417-419页

作者：屠振兴殷正丰崔贞福吴孟超长海医院肝胆外科研究所 200433

动态观察35例AFP阳性、B超或CT检查阴性患者的血清AFP-R-L含量。首次检查时,AFP-R-L为33.8±23.8％,阳性率65.7％。随访1～70个月,4例AFP-R-L由阴性转阳性。34例影像学检查逐渐显示阳性结果,其中30例经手术证实为肝细胞癌。1例AFP持续... 详细信息

动态观察35例AFP阳性、B超或CT检查阴性患者的血清AFP-R-L含量。首次检查时,AFP-R-L为33.8±23.8％,阳性率65.7％。随访1～70个月,4例AFP-R-L由阴性转阳性。34例影像学检查逐渐显示阳性结果,其中30例经手术证实为肝细胞癌。1例AFP持续低浓度阳性10年。AFP-R-L阳性对肝癌发生的预测率达96.3％。

关键词：肝肿瘤甲胎蛋白扁豆凝集素

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甲胎蛋白异质体鉴别诊断良恶性肝病

湖南医学 1989年第4期6卷 193-194页

作者：尹云洲骆绳祖湖南省肿瘤医院

不同组织产生之甲胎蛋白糖链结构不同,用不同植物凝集素可使之区别。本文报告用扁豆凝集素亲和交叉免疫电泳自显影法,对100例确诊肝癌患者和30例甲胎蛋白增高的良性肝病患者检测结果,可与扁豆凝集素结合的甲胎蛋白在肝癌中均>25％,良性... 详细信息

不同组织产生之甲胎蛋白糖链结构不同,用不同植物凝集素可使之区别。本文报告用扁豆凝集素亲和交叉免疫电泳自显影法,对100例确诊肝癌患者和30例甲胎蛋白增高的良性肝病患者检测结果,可与扁豆凝集素结合的甲胎蛋白在肝癌中均>25％,良性肝病均<25％。其灵敏度高,重复性好,无假阳性。

关键词：甲胎蛋白肝肿瘤扁豆凝集素

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甲胎蛋白及其异质体检测的临床应用价值

上海医学检验杂志 2000年第6期15卷 361-362,370页

作者：沈铮沈霞上海第二医科大学附属新华医院 200092

目的探讨甲胎蛋白 (AFP)异质体检测对原发性肝癌、良性肝病的临床应用价值。方法根据扁豆凝集素对 AFP不同的亲和力 ,采用亲和免疫印迹法检测 AFP- L3的百分含量。结果以 AFP- L3≥ 15 %作为原发性肝癌的诊断标准 ,其敏感性为 90 .0 % ... 详细信息

目的探讨甲胎蛋白 (AFP)异质体检测对原发性肝癌、良性肝病的临床应用价值。方法根据扁豆凝集素对 AFP不同的亲和力 ,采用亲和免疫印迹法检测 AFP- L3的百分含量。结果以 AFP- L3≥ 15 %作为原发性肝癌的诊断标准 ,其敏感性为 90 .0 % ,特异性为 92 .9%。结论 AFP及其异质体的检测对原发性肝癌 ,尤其是小肝癌的早期诊断和与良性肝病的鉴别诊断具有重要的临床应用价值。

关键词：甲胎蛋白异质体原发性肝癌扁豆凝集素甲胎蛋白检测临床应用