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心房利钠肽及其A受体基因多态与急性脑血管疾病

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中华神经科杂志 2008年第7期41卷 457-459页

作者：上官亚菲秦秀燕贵阳医学院附属医院神经内科 550004

心房利钠肽（atrial natriuretic peptide，ANP）是利钠肽家族的一员，其与心房利钠肽A受体（natriuretic peptide receptor A，NPRA）结合而发挥其生理作用。大量动物实验及临床研究发现ANP及NPRA基因多态与心脑血管疾病相关，但结果... 详细信息

心房利钠肽（atrial natriuretic peptide，ANP）是利钠肽家族的一员，其与心房利钠肽A受体（natriuretic peptide receptor A，NPRA）结合而发挥其生理作用。大量动物实验及临床研究发现ANP及NPRA基因多态与心脑血管疾病相关，但结果存在争议。我们针对贵阳地区汉族人群急性脑血管疾病（acute cerebrovascular disease，ACVD）患者的ANP基因T2238C及NPRA基因M341I多态进行研究，探寻其与ACVD可能的相关性。

关键词：急性脑血管疾病心房利钠肽基因多态 A受体 peptide receptor ANP基因生理作用

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心房利钠肽与妊娠期高血压疾病相关性研究

现代预防医学 2012年第13期39卷 3244-3245+3247页

作者：王睿青海省红十字医院妇产科

目的探讨心房利钠肽(ANP)与妊娠期高血压(PIH)的相关性及其临床意义。方法选取2009年1月～2011年12月期间诊治的妊娠期高血压患者共100例作为观察对象(PIH组),其中妊娠期高血压62例(A组),轻度子痫前期28例(B组),重度子痫前期10例(C组)... 详细信息

目的探讨心房利钠肽(ANP)与妊娠期高血压(PIH)的相关性及其临床意义。方法选取2009年1月～2011年12月期间诊治的妊娠期高血压患者共100例作为观察对象(PIH组),其中妊娠期高血压62例(A组),轻度子痫前期28例(B组),重度子痫前期10例(C组)。随机选取同期孕周在30周-37周之间的正常妊娠孕妇100例作为对照组。检测ANP、BNP,观察终止妊娠周数及新生儿出生体重。结果 PIH组ANP、BNP测定平均值为(197.12±20.11)pg/ml、(17.63±5.34)pg/ml明显高于对照组测定值为(68.81±12.87)pg/ml、(8.57±2.66)pg/ml,差异有统计学意义(P﹤0.05);PIH组、A组、B组、C组ANP分别为(197.12±20.11)pg/ml、(184.76±20.24)pg/ml、(198.82±18.89)pg/ml、(220.38±20.22)pg/ml,明显高于对照组测定值为(68.81±12.87)pg/ml,与对照组差异有统计学意义(P﹤0.05);PIH组、B组、C组BNP为(17.63±5.34)pg/ml、(18.87±4.32)pg/ml、(47.85±11.73)pg/ml、高于对照组(8.57±2.66)pg/ml,与对照组差异有统计学意义(P﹤0.05);C组ANP、BNP与A组、B组差异有统计学意义(P﹤0.05),B组与A组差异有统计学意义(P﹤0.05);PIH组、B组、C组终止妊娠周数、新生儿体重低于与对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05),C组与A组、B组之间差异有统计学意义(P﹤0.05),终止妊娠周数在B组与A组间差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者血浆ANP、BNP均明显高于正常孕妇,并且与妊娠期高血压疾病严重程度存在正相关。

关键词：妊娠期高血压疾病心房利钠肽脑钠肽

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模拟失重4周增加大鼠心肌的心房利钠肽表达

生理学报 2013年第2期65卷 143-148页

作者：张文成卢元明杨怀章徐彭涛常惠余志斌第四军医大学航空航天医学教育部重点实验室航空航天生理教研室西安710032 空军西安飞行学院门诊部西安710306

失重或模拟失重引起体液的头向转移,导致上半身血容量增加,从而引起心房肌心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)分泌的改变,但现有研究报道缺乏一致的结论。本研究拟观测模拟失重大鼠心肌ANP表达的变化,并以可溶性N-乙基马来酰... 详细信息

失重或模拟失重引起体液的头向转移,导致上半身血容量增加,从而引起心房肌心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)分泌的改变,但现有研究报道缺乏一致的结论。本研究拟观测模拟失重大鼠心肌ANP表达的变化,并以可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors,SNARE)家族相关蛋白的变化作为ANP变化的佐证。采用公认的尾部悬吊大鼠模型在地面模拟失重状态,蛋白印迹法检测心房与心室肌ANP与SNARE相关蛋白的表达水平,并进行半定量分析。结果显示,与同步对照组(CON)相比,尾部悬吊4周大鼠(SUS)心房肌ANP表达增加;在CON大鼠左心室肌仅显示微量ANP表达,但SUS大鼠心室肌ANP表达明显增加。相比CON组,SUS组囊泡SNARE(v-SNARE)VAMP-1/2在心房肌与心室肌表达明显增加;细胞膜靶标SNARE(t-SNARE)syntaxin-4的表达未改变,但SNAP-23在心房肌的表达明显增加。SNARE调节蛋白synip与Munc-18c的表达在心房肌与心室肌未发生显著性改变。上述结果表明,尾部悬吊4周引起心房肌ANP表达增加,心室肌呈现ANP表达;与ANP囊泡相关的VAMP-1/2的表达亦增加,佐证心房肌与心室肌ANP表达增加。

关键词：尾部悬吊模型大鼠心房利钠肽可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体

心房利钠肽样免疫反应神经元在大鼠中脑和脑桥中某些锥体外系神经核内的分布

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中国组织化学与细胞化学杂志 1992年第2期1卷 236-239页

作者：黄文铎胡家荦章祖陈曾庆云柯国平许海云丁成萦湖北医学院人体解剖学教研室武汉430071

采用PAP免疫组织化学方法对大鼠中脑和脑桥内心房利钠肽(ANP)样免疫反应神经元的分布进行了研究,结果显示阳性神经元除存在于其他作者报导过的导水管周围灰质、Edinger-Westphal核、中缝核、脚间核和蓝斑核外,还存在于属于锥体外系的红... 详细信息

采用PAP免疫组织化学方法对大鼠中脑和脑桥内心房利钠肽(ANP)样免疫反应神经元的分布进行了研究,结果显示阳性神经元除存在于其他作者报导过的导水管周围灰质、Edinger-Westphal核、中缝核、脚间核和蓝斑核外,还存在于属于锥体外系的红核、黑质和脑桥核内,因此,推测脑内的ANP可能在锥外系对躯体运动的调节中起着一种神经递质或神经调质的作用。这为脑内ANP可能具有与液体和电解质平衡以及心血管功能的调节无关的其它作用提供了部分形态学证据。

关键词：红核黑质脑桥核心房利钠肽免疫组织化学大鼠

重组人心房利钠肽(ANP)的原核表达、纯化及鉴定

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生物工程学报 2016年第9期32卷 1273-1285页

作者：陈晨辉赵自叶徐进曹雪松郭尚敬李军王皓侯盛同济大学生命科学与技术学院上海200092 上海张江生物技术有限公司上海201203 聊城大学生命科学学院山东聊城252000 抗体药物与靶向治疗国家重点实验室上海201203 聊城大学药学院山东聊城252000 第二军医大学肿瘤研究所上海200433

为提高重组人心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)的表达量,将3个ANP通过赖氨酸(Lysine,K)串联,并构建相对应的重组表达载体p ET28a(+)/ANP3。转染大肠杆菌进行诱导表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的60%。经过包涵体变复性,赖氨酸... 详细信息

为提高重组人心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)的表达量,将3个ANP通过赖氨酸(Lysine,K)串联,并构建相对应的重组表达载体p ET28a(+)/ANP3。转染大肠杆菌进行诱导表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的60%。经过包涵体变复性,赖氨酸酶(Lys-C)和羧肽酶(CPB)水解,以及一系列层析纯化,每升培养液可获得约16 mg的ANP蛋白。最终,纯化后的ANP经UPLC及Tricine SDS-PAGE鉴定,纯度大于90%,LC-MS鉴定显示其分子量为3 080 Da,且为二硫键正确形成的ANP单体,通过ELISA试剂盒检测,其具有和参比品一致活性。本研究为ANP的大规模制备打下了基础。同时,所采用的串联表达技术也为其他多肽类药物的重组表达提供了新的思路。

关键词：心房利钠肽串联表达多肽纯化

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心房利钠肽的生理学研究进展

白求恩医科大学学报 1995年第1期21卷 91-93页

作者：陈兴明白求恩医科大学基础医学生理教研室

心房利钠肽的生理学研究进展基础医学院生理教研室陈兴明综述刘敏芝审校心房利钠肽（Ａｔｒｉａｌｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃｐｅｐｔｉｄｅ，ＡＮＰ）又称心房利钠因子（Ａｔｒｉａｌｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃｆａｃｔｏｒ，ＡＮＦ）、心钠... 详细信息

心房利钠肽的生理学研究进展基础医学院生理教研室陈兴明综述刘敏芝审校心房利钠肽（Ａｔｒｉａｌｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃｐｅｐｔｉｄｅ，ＡＮＰ）又称心房利钠因子（Ａｔｒｉａｌｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃｆａｃｔｏｒ，ＡＮＦ）、心钠素（Ｃａｒｄｉｏｒａｔｉｎ）和心房...

关键词：心房利钠肽心房肽生理学

心房利钠肽及其编码基因启动子区域DNA甲基化与心血管病关系的前瞻性队列研究

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心房利钠肽及其编码基因启动子区域DNA甲基化与心血管病关系的前...

作者：李静苏州大学

学位级别：硕士

研究背景与意义:心房利钠肽(Atrial Natriuretic Peptide,ANP),是一种由心房合成的含有二十八个氨基酸的多肽,已有研究发现ANP与心血管病(Cardiovascular disease,CVD)及其主要危险因素如动脉粥样硬化、高血压和糖尿病等的发生有关。除... 详细信息

研究背景与意义:心房利钠肽(Atrial Natriuretic Peptide,ANP),是一种由心房合成的含有二十八个氨基酸的多肽,已有研究发现ANP与心血管病(Cardiovascular disease,CVD)及其主要危险因素如动脉粥样硬化、高血压和糖尿病等的发生有关。除了这些发现外,许多前瞻性队列研究和临床试验研究也提示ANP和CVD发病可能存在因果关系。但是,在中国汉族人群中ANP与CVD发病风险之间的前瞻性证据有限。因此,需要更多的研究来阐明中国成年人中ANP与CVD发病之间的前瞻性关系。此外,尽管ANP在CVD发病中的重要作用已经在其他人群中得到证实,但是ANP的临床应用却十分受限。例如,卡培立肽(Carperitide)是一种人工合成的ANP,在日本已用于治疗急性失代偿性心力衰竭,但是会引起一些不良反应,如严重的低血压和住院死亡。因此,更好地了解ANP参与CVD的分子机制将有助于其药物的开发和改进。作为连接基因与环境的媒介,DNA甲基化在基因表达的调节中发挥重要作用。作为ANP的编码基因,NPPA基因启动子区域DNA甲基化水平可能通过影响ANP的表达,从而参与CVD的发病机制。然而,目前尚未发现关于NPPA基因甲基化与CVD发病关联性的研究,并且以往的研究多是基于单个CpG位点与疾病的关联性进行分析的,而单个CpG位点甲基化对疾病的贡献较小。因此,基于姑苏队列,我们开展了一项前瞻性队列研究,来探究血清NT-proANP、NPPA基因启动子区域DNA甲基化与CVD发病的关系。研究方法:姑苏队列是一项前瞻性队列研究,于2010年建立,收集了 2498名研究对象的人口统计学信息(年龄、性别、教育程度)、生活方式因素(吸烟、饮酒)、代谢因素(肥胖、血压、血脂、血糖)、病史和用药情况。之后每两年随访一次,于2020年完成了终末随访,收集CVD和死亡的发生情况。本研究的结局事件定义为CVD,包括非致死性冠心病(急性心肌梗死和不稳定型心绞痛)、非致死性脑卒中和因任何CVD事件导致的死亡。使用市场化的ELISA试剂盒(BIOMEDICA,AUSTRIA)测定基线血清NT-proANP浓度。采用目标区域亚硫酸盐测序的方法对NPPA基因启动子区域DNA甲基化进行量化,共检测到9个甲基化位点。首先,采用竞争风险模型分析基线血清NT-proANP、NPPA基因启动子区域各CpG位点的甲基化水平与CVD、冠心病和脑卒中发病之间的关联性,调整基线年龄、性别、受教育程度、吸烟、饮酒、体质指数、空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、收缩压和是否服用降压药物,采用FDR方法进行多重检验校正,校正后的P值(即q值)小于0.10认为有统计学意义。然后,用平均值法和加权截断乘积法(weight Truncated Product Method,wTPM)分析NPPA基因启动子区域多个CpG位点DNA甲基化水平与CVD、冠心病和脑卒中发病的联合效应关系。研究结果:1.研究对象的基线特征本研究共纳入2498名研究对象,平均年龄为52.70岁,男性占38.51%,高中以及上教育程度者占20.30%,吸烟者占23.30%,饮酒者占18.62%。血清NT-proANP的平均值为1.20 nmol/L,95%置信区间为1.16-1.23 nmol/L。与基线血清NT-proANP低水平组相比,高水平组的研究对象年龄更大、收缩压水平更高(所有P<0.05)。2.血清NT-proANP水平与CVD、冠心病和脑卒中发病的关联性排除掉NT-proANP缺失者后,2203人纳入分析,经过平均10.41年的随访,共发生CVD事件181例,包括126例冠心病和77例脑卒中(22人合并发生),死亡65人,失访197人。竞争分析模型结果显示,调整前,基线血清NT-proANP水平每升高1 nmol/L,CVD事件的发生风险升高49%(HR=1.49,95%CI:1.26-1.75,P<0.001)、冠心病发生风险升高 43%(HR=1.43,95%CI:1.17-1.74,P<0.001)、脑卒中的发生风险升高 51%(HR=1.51,95%CI:1.16-1.98,P=0.003)。调整基线年龄、性别、受教育程度、吸烟、饮酒、体质指数、空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、收缩压和是否服用降压药物后,基线血清NT-proANP水平每升高1 nmol/L,CVD事件的发生风险升高22%(HR=1.22,95%CI:1.03-1.44,P=0.025),但冠心病(HR=1.20,95%CI:0.98-1.47,P=0.085)和脑卒中(HR=1.14,95%CI:0.87-1.50,P=0.341)发生风险未见显著升高。与基线血清NT-proANP低水平

关键词： NPPA基因 DNA甲基化心房利钠肽心血管病

心房利钠肽对阿勒泰羊尾脂脂肪细胞脂质代谢的影响及其作用机制的研究

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心房利钠肽对阿勒泰羊尾脂脂肪细胞脂质代谢的影响及其作用机制的...

作者：马昕新疆农业大学

学位级别：硕士

心房利钠肽(ANP)是一种强效脂解剂,本研究旨在探究添加外源ANP对阿勒泰羊尾脂脂肪细胞脂解的影响。选取健康10日龄阿勒泰羔羊,采集尾部脂肪组织,经胶原酶消化分离获得原代脂肪细胞,在体外条件下添加10mol/L ANP,利用CCK-8、油红O染色观... 详细信息

心房利钠肽(ANP)是一种强效脂解剂,本研究旨在探究添加外源ANP对阿勒泰羊尾脂脂肪细胞脂解的影响。选取健康10日龄阿勒泰羔羊,采集尾部脂肪组织,经胶原酶消化分离获得原代脂肪细胞,在体外条件下添加10mol/L ANP,利用CCK-8、油红O染色观察ANP对脂肪细胞增殖、分化的影响。更换诱导培养基诱导脂肪细胞分化成熟,收集对照组、诱导3 d、诱导6 d培养基上清用于测定生理生化指标(甘油、甘油三酯、游离脂肪酸)及ELISA法测定脂代谢相关指标;细胞样本提取RNA用于转录组测序及脂质代谢组学分析,并通过q RT-PCR验证转录组结果。结果显示:(1)经油红O染色后鉴定为脂肪细胞,生长曲线近似“S”型,符合细胞基本生长规律,ANP处理后细胞增殖能力变强。(2)添加ANP后,相较于对照组,诱导3 d和诱导6 d甘油、游离脂肪酸、环鸟苷酸(c GMP)和激素敏感性脂肪(HSL)含量均极显著升高(P钠肽受体1(NPR1)、激素敏感性脂肪酶(LIPE)等基因显著表达(P<0.05)。GO功能显著富集到的生物过程包括免疫相关、磷酸化、细胞内物质运输等与细胞参与反应过程相关;细胞组分包括内质网、高尔基体等与蛋白质合成相关;分子功能包括受体结合、趋化因子及相关酶活性。KEGG显著富集在肿瘤坏死因子信号通路(TNF signaling pathway)、MAPK信号通路(MAPK signaling pathway)、AMPK信号通路(AMPK signaling pathway)等(P<0.05)。(4)基于脂质组学分析,正负离子模式下共筛选得到514种差异代谢物,其中显著上调195种,显著下调133种(P<0.05),其中包括磷脂类、鞘脂类、三酰甘油(TAG)等不同脂质类别中。综上所述,通过胶原酶消化法分离出阿勒泰羊尾脂原代脂肪细胞,且添加ANP后甘油、FFA、c GMP、HSL均有不同程度的增加;对脂代谢相关基因,KEGG信号通路,脂质代谢物产生显著影响,表明ANP参与了促进脂肪细胞脂解的代谢活动。

关键词：心房利钠肽尾脂脂肪细胞脂代谢指标转录组测序脂质代谢组学脂解

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心房利钠肽在炎症性肠病中的表达及作用研究

心房利钠肽在炎症性肠病中的表达及作用研究

作者：陈超越华中科技大学

学位级别：硕士

【目的】检测心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)及其受体在炎症性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD)患者和葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的结肠炎模型小鼠中的表达,探索ANP系统在IBD发生发展中的作用及机制。【方法】临床采集IBD病人和对照者的外周血与结肠活检标本。DSS诱导结肠炎小鼠模型。RT-q PCR法检测人和小鼠肠道组织ANP及其主要受体NPR-1 m RNA表达,Western Blot法检测c GAS-STING通路蛋白表达,ELISA法检测血清ANP的水平。ANP重组蛋白和STING通路激动剂干预DSS小鼠,通过小鼠疾病活动指数、结肠病理学评分、结肠长短及脾脏重量对各组小鼠的肠道炎症进行评估,Western Blot检测c GAS-STING通路活化情况,RT-q PCR检测小鼠结肠组织及肠上皮细胞中炎性因子的表达。Western Blot检测小鼠肠道组织连接蛋白ZO-1和occludin的表达水平,同时免疫荧光观察ZO-1。异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FD4)检测小鼠肠道黏膜屏障的通透性。【结果】ANP及其受体NPR-1在小鼠的免疫器官和肠道均不同程度表达,结肠炎小鼠和IBD患者肠道组织中ANP和NPR-1的表达降低。结肠炎小鼠和IBD患者血清ANP蛋白的表达相较对照组降低,血清ANP水平与同期CRP水平无明显相关性。IBD患者肠道组织的STING通路活化。ANP腹腔注射的方式干预DSS小鼠,发现ANP可以缓解急性结肠炎小鼠的肠道炎症,抑制结肠炎小鼠肠道组织和肠上皮细胞中炎性因子的分泌。STING通路激动剂DMXAA干预DSS结肠炎小鼠降低小鼠生存率,ANP可抑制小鼠肠道STING通路的激活,提高小鼠生存率;同时,ANP提高了小鼠肠道组织中紧密连接蛋白ZO-1和occludin的表达,降低了小鼠肠道屏障的通透性。【结论】ANP可通过抑制结肠炎小鼠的STING通路缓解肠道炎症,这种作用可能是通过修复肠道屏障功能实现的,ANP有望成为IBD治疗的新药物。

关键词：心房利钠肽 STING通路炎症性肠病肠道屏障