检索结果-南通市图书馆

作者：张苗苗武汉轻工大学

学位级别：硕士

近年来,随着科技的进步以及人们生活观念的改变,消费者对面包的功能性提出了更高的要求。在满足美味的基本条件下,面包产业不断向健康化、营养化方向发展。功能性糖具有热量低,营养丰富,增强免疫调节、抗衰老等功效,在食品中的应用越来... 详细信息

近年来,随着科技的进步以及人们生活观念的改变,消费者对面包的功能性提出了更高的要求。在满足美味的基本条件下,面包产业不断向健康化、营养化方向发展。功能性糖具有热量低,营养丰富,增强免疫调节、抗衰老等功效,在食品中的应用越来越得到重视。本文选择低聚乳果糖,低聚异麦芽糖,异麦芽酮糖,探究不同添加水平的三种功能性糖对面粉流变学特性、品质特性、以及贮藏期间的抗老化性能的改善作用。首先,本文探究了不同添加量(1%,2%,3%,4%,5%)的三种功能性糖对小麦粉及面团性质的影响。粉质试验表明,三种功能性糖的加入均显著降低了面团的吸水率。低聚乳果糖延长了面团的稳定时间和断裂时间。低聚异麦芽糖的添加量在3%～5%时,面团的形成时间、稳定时间和断裂时间保持在较高的水平。异麦芽酮糖的加入降低了面团的稳定时间,这可能是由于异麦芽酮糖的溶融作用,降低了面团的耐搅性能。拉伸试验表明,三种功能性糖的加入增大了面团拉伸曲线面积,低聚乳果糖增大了面团的拉伸阻力,延伸度和最大拉伸阻力。异麦芽酮糖增强了面团的延伸度,当添加量为4%～5%时,面团的拉伸特性整体较好。糊化试验中,低聚乳果糖(2%～5%)、低聚异麦芽糖和异麦芽酮糖均降低了小麦粉的峰值粘度,衰减值,最终粘度和回生值,对小麦粉糊化温度无显著趋势性影响。表明三种功能性糖的加入抑制了小麦制品的短期回生。面团发酵试验表明,低聚乳果糖含量为1%～4%时,对增加面团的发酵高度有一定影响,低聚异麦芽糖和异麦芽酮糖对于面团高度的增加有负面作用。三种功能性糖的加入均缩短了气体释放曲线达到最大高度时间,提高了面团的持气率。动态流变测定结果表明,添加三种功能性糖后,相对于空白组,面团的储能模量G’和损耗模量G’均增大。当低聚乳果糖的添加量达到5%时,损耗角tanδ大于1,增强了面团的粘性。低聚异麦芽糖和异麦芽酮糖的损耗角均小于1。其次,探究了不同添加量三种功能性糖对面包品质的影响。质构结果表明,三种功能性糖的加入均降低了面包的硬度和咀嚼性,增强了面包的弹性。低聚乳果糖添加量为1%～5%,低聚异麦芽糖添加量为4%～5%,异麦芽酮糖为2%～5%时,增加了面包的黏聚性,低聚乳果糖和异麦芽酮糖增强了面包的回复性,而低聚异麦芽糖呈现相反的趋势。比容和感官结果表明,三种功能糖的加入均增大了面包的体积和感官评分,当三种功能性糖添加量达到5%,会降低面包的比容。切片组织结果表明,加入三种功能性糖后,面包的气孔数量显著增加,粗细气孔比降低。在1～4%的添加量范围内,三种功能性糖的气孔面积均小于对照组。当低聚乳果糖的添加量在1～3%,低聚异麦芽糖添加量在2～5%,异麦芽酮糖添加量在4～5%时,孔壁厚度低于对照组,气孔壁越薄,面包越柔软。面包芯色度结果表明,低聚乳果糖的和低聚异麦芽糖的加入增大了面包皮明度L*,三种功能性糖的加入均增加了增大了黄度b*。低聚异麦芽糖的添加量为1%～2%,异麦芽酮糖为1%～3%时,降低了红度a*。异麦芽酮糖的加入对于L*,a*和b*呈现浓度改善性。蛋白质二级结构结果表明,低聚乳果糖和异麦芽酮糖的存在促进了β-转角向β-折叠的转化,增加α-螺旋占比。低聚异麦芽糖的加入对β-折叠和β-转角呈现相反的转化趋势。低聚异麦芽糖和异麦芽酮糖可以降低无规卷曲占比。最后,基于三种功能性糖对于面团性质和面包品质的影响分析,选择2%的低聚乳果糖,4%的低聚异麦芽糖,5%的异麦芽酮糖进行面包储藏期抗老化机制的研究。储藏时间为0、1、3、5、7天,温度为4℃。储藏期质构试验结果表明,相对于空白组,加入三种功能性糖后,面包的硬度均显著降低,在第7天时,相对于空白组,硬度降幅分别达到22.5%、6.6%和32.5%。三种功能性糖的加入降低了面包样品Avrami方程中的斜率n,体现出较高的直链淀粉占比。加入三种功能性糖后,面包的老化速率常数k值均降低,功能性糖的加入延缓了面包贮藏期间的老化作用。水分测定试验结果表明,面包在3～7天时失水速率较快,三种功能性糖的加入降低了水分损失率,其中低聚乳果糖的保水性能最好。核磁数据表明,面包储藏期间,样品的弛豫时间随着储藏期的延长逐渐降低,加入三种功能性糖后,面包的A和A提高,说明保水能力的增强,与水分含量形成对应。储藏7天时,三种功能性糖的加入均降低了样品的T和T。热力学特性与晶体结构试验结果表明,添加三种功能性糖后,在整个贮藏过程中,面包样品的△H降低,结晶度减小。说明三种功能性糖的加入均能抑制淀粉重结晶,延缓淀粉回生。综上,添加量为2%的低聚乳果糖,含量为4%低聚异麦芽糖和添加量为5%的异麦芽酮糖等比例替代加入到小麦粉中,可以改善面团的流变特性,提高面包的烘焙品质,并延缓面包的老化。本研究可为功能性糖在烘焙制品的应用提供理论依据,有利于功能性糖产业的长远发展。

关键词：面包低聚乳果糖低聚异麦芽糖异麦芽酮糖抗老化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

蔗糖异构酶交联聚集体的制备及催化性能研究

蔗糖异构酶交联聚集体的制备及催化性能研究

引用

作者：常保根天津科技大学

学位级别：硕士

蔗糖异构酶(Surcose Isomerase,SIase)能将蔗糖分子内的α-1,2-糖苷键转换成α-1,6-糖苷键或α-1,1-糖苷键,从而得到异麦芽酮糖或海藻酮糖,根据其主产物不同也被称作异麦芽酮糖合酶或海藻酮糖合酶。异麦芽酮糖是一种具有天然甜味的新型... 详细信息

蔗糖异构酶(Surcose Isomerase,SIase)能将蔗糖分子内的α-1,2-糖苷键转换成α-1,6-糖苷键或α-1,1-糖苷键,从而得到异麦芽酮糖或海藻酮糖,根据其主产物不同也被称作异麦芽酮糖合酶或海藻酮糖合酶。异麦芽酮糖是一种具有天然甜味的新型甜味剂,相对于蔗糖,异麦芽酮糖具有热量低、稳定性高、易吸收和对人体健康无不良影响等特点。生物酶法制备异麦芽酮糖转化率较高,符合绿色环保的要求,通过对蔗糖异构酶进行固定化,可改善其在实际应用中存在的稳定性差、易失活、难以重复回收利用等工业应用难题。本文对蔗糖异构酶的固定化主要采用了无载体固定化法-交联酶聚集体(CLEAs)和有载体固定化法-硅球吸附-交联法(NPs-CLEAs)两种方法。CLEAs具有单位体积活性高、生产成本低、操作简单等优点,使其成为一种新型、通用的无载体固定化方法。CLEAs的制备主要分为沉淀和交联两个步骤,本文对于沉淀剂和交联剂浓度的优化得到CLEAs,后在沉淀过程中加入最适浓度的牛血清白蛋白(BSA)和海藻糖(Tre)得到CLEAs-BSA和CLEAs-Tre。三种CLEAs制剂的热稳定性、p H耐受性和贮存稳定性均优于游离酶,且具有良好的可重复使用性。经过10次循环使用,3种CLEAs样品的剩余活性均保持在61%以上,CLEAs-BSA可以保持91.7%的初始活性。以蔗糖和甘蔗汁为底物时,CLEAs-BSA的蔗糖转化率分别为88.4%和81.2%,且都高于游离酶。硅球吸附-交联固定化酶是一种操作简单且有效的固定化方法,在搅拌的条件下,将蔗糖异构酶吸附在硅球表面得到NPs-SI,后加入交联剂戊二醛进行交联得到NPsCLEAs。NPs-CLEAs和NPs-SI的热稳定性、p H耐受性都要优于游离酶,且具有良好的重复使用性,经过15次的重复使用,NPs-CLEAs和NPs-CLEAs的剩余活性仍能保留55%和72.9%的初始活性。因此,使用CLEAs和NPs-CLEAs方法固定蔗糖异构酶是制备异麦芽酮糖的高效方法,具有很强的工业应用潜力。

关键词：蔗糖异构酶异麦芽酮糖交联酶聚集体硅球吸附-交联重复使用性

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

新型功能性帕拉金糖及其衍生物的应用与生产

引用

食品与生物技术学报 1999年第5期20卷 142-144,152页

作者：臧向莹广东省微生物研究所广东广州510070

报导了新型功能性帕拉金糖(Palatinose)

关键词：帕拉金糖异麦芽酮糖低聚帕拉金糖帕拉金糖醇

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Pantoea dispersa蔗糖异构酶的重组表达及应用研究

Pantoea dispersa蔗糖异构酶的重组表达及应用研究

引用

作者：刘军彤江南大学

学位级别：硕士

蔗糖异构酶(EC 5.***.99.11),能够将底物蔗糖转化成其同分异构体异麦芽酮糖和海藻酮糖。已报道的大部分蔗糖异构酶酶反应的主产物为异麦芽酮糖。由于异麦芽酮糖具有甜度较高、易溶于水、预防糖尿病及不致龃齿等性质,因此适用于儿童及糖尿... 详细信息

蔗糖异构酶(EC 5.***.99.11),能够将底物蔗糖转化成其同分异构体异麦芽酮糖和海藻酮糖。已报道的大部分蔗糖异构酶酶反应的主产物为异麦芽酮糖。由于异麦芽酮糖具有甜度较高、易溶于水、预防糖尿病及不致龃齿等性质,因此适用于儿童及糖尿病患者等,能应用于糖果、糕点等食品领域。本研究将来源于Pantoea dispersa UQ68J的蔗糖异构酶基因在Escherichia coli和Bacillus brevis中重组表达,优化培养条件提高蔗糖异构酶的表达量。此外,本实验对蔗糖异构酶粗酶液进行分离纯化,并研究了蔗糖异构酶的相关酶学性质及应用特性。主要研究内容如下。(1)将*** UQ68J来源的蔗糖异构酶基因(含信号肽及成熟蛋白)进行密码子优化后,与无信号肽的表达载体pET-24a(+)连接。将构建正确质粒转入*** BL21(DE3)构建表达菌株—ORI菌株。采用TB培养基发酵培养,胞外酶活及总酶活分别达到65、85 U·mL-1。为提高蔗糖异构酶产量,研究了PelB、Omp A信号肽及不同的成熟蛋白起始位点对蔗糖异构酶的影响,发现从天然信号肽开始第22位氨基酸作为成熟蛋白的起始,连接PelB信号肽构建的P22菌株总酶活最高,达到143 U·mL-1,是ORI菌株总酶活的1.5倍;同时其发酵上清与周质空间中蔗糖异构酶酶活之和是ORI菌株相应酶活的1.3倍。由于P22菌株发酵时,其周质空间及细胞浆内分布大量蔗糖异构酶,为进一步提高蔗糖异构酶的胞外产量,3 L发酵罐中,研究甘氨酸浓度和诱导时间对蔗糖异构酶酶活的影响。当补加0.5%甘氨酸,DCW为18 g·L-1开始诱导,P22菌株的蔗糖异构酶胞外酶活最高达1981 U·mL-1,同时总酶活达到2640 U·m L-1。(2)将去除信号肽序列的蔗糖异构酶基因(起始位点为第22或34位氨基酸)与Bacillus brevis胞外表达载体pSVEB连接,构建的重组表达载体转入宿主***中,构建重组菌株B22、B34菌株。摇瓶中,经TM培养基发酵培养48 h,B22菌株胞外酶活达到50U·m L-1,B34菌株胞外酶活为35 U·m L-1。对B22菌株进行摇瓶培养基优化,蔗糖异构酶胞外酶活达到138 U·m L-1。为进一步提高蔗糖异构酶产量,在3 L发酵罐中研究了氮源含量及搅拌恒转速对蔗糖异构酶的影响。当氮源含量为30 g·L-1,恒转速为400 r·min-1时,蔗糖异构酶的胞外酶活提升至190 U·m L-1。(3)将不同宿主菌表达的胞外蔗糖异构酶经分离纯化后,研究相关酶学性质。大肠杆菌和短小芽孢杆菌表达的胞外蔗糖异构酶,两者最适温度及pH都是30℃和6.0。而且,两者比活分别是597.0、555.0 U·mg-1。此外,对动力学进行研究:大肠杆菌及短小芽孢杆菌表达的蔗糖异构酶Vmax分别为660.9、657.2 U·mg-1;Km分别为21.3、20.6 m M;Kcat分别为730、724 s-1及Kcat/Km分别是34.3、35.1 mM-1·s-1。(4)研究了不同条件对蔗糖异构酶催化蔗糖形成异麦芽酮糖的影响,获得最优的酶转化条件为,加酶量20 U·g-1,初始pH 6.5,35℃及底物浓度为400 g·L-1,转化率最高达到92.0%;同时,底物浓度提升至700 g·L-1,转化率仍然高于90%。

关键词：蔗糖异构酶异麦芽酮糖大肠杆菌短小芽孢杆菌发酵优化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

蔗糖异构酶的高效异源表达及应用研究

蔗糖异构酶的高效异源表达及应用研究

引用

作者：王茂军天津科技大学

学位级别：硕士

蔗糖异构酶(sucrose isomerase,EC.5.***.99.11)可以通过异构化反应,转化蔗糖生产异麦芽酮糖,随着异麦芽酮糖多种生理功能被不断验证,使其在食品和保健品等领域广泛应用,但也受制于酶产量低和其热稳定性差的特性,无法大规模生产。因此实... 详细信息

蔗糖异构酶(sucrose isomerase,EC.5.***.99.11)可以通过异构化反应,转化蔗糖生产异麦芽酮糖,随着异麦芽酮糖多种生理功能被不断验证,使其在食品和保健品等领域广泛应用,但也受制于酶产量低和其热稳定性差的特性,无法大规模生产。因此实现蔗糖异构酶的高效异源表达和提高其热稳定性,来满足酶转化法生产异麦芽酮糖的需求,具有一定的应用价值。本论文首先利用毕赤酵母GS115对分散泛菌Pantoea dispersa来源的蔗糖异构酶基因sim1异源表达,通过摇瓶发酵筛选出一株酶活力最高的重组菌株,重组菌株TCCC31117最高酶活为288.75 U/m L。在50 L发酵罐水平对重组菌株TCCC31117进行放大培养和发酵优化,确定诱导温度为28℃、诱导pH值为5.5、诱导时菌体湿重为200-220 g/L和甲醇流加速率为9.5 m L/(L·h)的最佳发酵条件,优化后重组菌株TCCC31117最高酶活达到783.60 U/m L,是摇瓶发酵最高酶活的2.71倍。测定了蔗糖异构酶Sim1的最适温度和最适p H分别为35℃和6.0,在50℃时蔗糖异构酶Sim1的半衰期为35.95 min。其次,利用生长迅速且目的蛋白易纯化的解淀粉芽孢杆菌作为宿主对分散泛菌Pantoea dispersa来源的蔗糖异构酶基因sim2进行异源表达。通过不同底盘菌对产蔗糖异构酶的影响,筛选出最优的底盘菌TCCC19030,重组菌株TCCC19228摇瓶发酵最高酶活为301.48 U/mL。由于培养基中渣滓过多,对工业上分离蔗糖异构酶酶液造成不便,故接下来对发酵培养基中复合氮源比例进行优化,使培养基中固形物含量下降28.57%。在7 L发酵罐水平对重组菌株TCCC19228进行分批补料发酵,蔗糖异构酶最高酶活在40 h达到541.52 U/m L,相较于发酵毕赤酵母产蔗糖异构酶极大的缩短了发酵周期。然后,为了改善蔗糖异构酶热稳定性较差的特性,利用易错PCR技术对sim2基因进行随机突变并将突变体质粒进行表达,通过对约4000个转化子发酵36 h的蔗糖异构酶粗酶液的酶活和其经过50℃热处理30 min后的残余酶活数据进行综合分析,最终筛选获得一株粗酶液酶活相近且半衰期是天然酶1.4倍的突变体A199L。最后,通过摇瓶实验确定蔗糖转化时蔗糖异构酶的最佳加酶量为25 U/g,并利用TCCC31117和TCCC19228表达的蔗糖异构酶进行5 L体积的转化实验,二者均能在工业生产的要求下制备异麦芽酮糖,且异麦芽酮糖纯度分别达到99.98%和98.74%,符合国标规定异麦芽酮糖纯度需大于98%的要求,为异麦芽酮糖的大规模生产奠定了基础。

关键词：蔗糖异构酶异源表达异麦芽酮糖毕赤酵母解淀粉芽孢杆菌发酵优化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

蔗糖异构酶的异源表达及其酶学性质表征

蔗糖异构酶的异源表达及其酶学性质表征

引用

作者：宋蕾大连工业大学

学位级别：硕士

异麦芽酮糖(Isomaltulose)作为在自然界中存在的二糖,是由α-1,6糖苷键连接的葡萄糖和果糖单体组成。这种天然新型的功能性低聚糖是一种重要的工业原料和食品原料,由于其热量低、不致龋齿、吸收缓慢等特点,可作为健康的蔗糖替代品。同... 详细信息

异麦芽酮糖(Isomaltulose)作为在自然界中存在的二糖,是由α-1,6糖苷键连接的葡萄糖和果糖单体组成。这种天然新型的功能性低聚糖是一种重要的工业原料和食品原料,由于其热量低、不致龋齿、吸收缓慢等特点,可作为健康的蔗糖替代品。同时异麦芽酮糖已被美国认证为安全的食品原料,可在食品中不限量添加。因此,异麦芽酮糖具有广泛的应用前景。目前异麦芽酮糖的生产主要依靠微生物来源的蔗糖异构酶转化蔗糖实现,在生产的过程中存在转化效率不够高、转化产物不单一、宿主菌不具有食品安全性等问题,因此,获得一个能够高效转化蔗糖形成较为单一产物、具有食品安全性的工程菌对于异麦芽酮糖的工业化生产至关重要。针对以上问题,本实验将来自Klebsiella ***3的蔗糖异构酶Pal I编码基因构建于食品安全型菌种解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica Pog1中进行异源表达,重组的蔗糖异构酶Pal I能够有效地催化蔗糖异构化为异麦芽酮糖。本工作的主要研究内容为:(1)将按解脂耶氏酵母密码子偏好性进行优化的蔗糖异构酶编码基因Pal I构建于解脂耶氏酵母外泌表达菌株中,获得重组蔗糖异构酶Pal I;(2)为提高蔗糖异构酶的表达量对发酵培养基进行优化,优化后产酶量明显提高,酶活力提高了2.9倍;(3)对重组蔗糖异构酶进行了纯化,纯化后的蔗糖异构酶的酶活力为916±9.34 U/mg,高于以往报道的蔗糖异构酶酶活力;(4)将纯化后的重组Pal I酶学性质进行了一系列表征,结果表明该酶最适温度为40 C,最适p H为5.7,且该酶对酸性及碱性环境的耐受范围较广(p H 4～10),较以往报道的蔗糖异构酶的稳定性有显著提高;(5)利用薄层层析法和高效液相色谱法对重组蔗糖异构酶Pal I转化蔗糖的产物进行分析,结果显示该重组酶能够有效地转化蔗糖,生成异麦芽酮糖和海藻酮糖的同时,存在少量单糖副产物。进一步分析酶浓度与反应温度对产物比例的影响时,发现酶浓度及反应温度都可不同程度的改变产物的比例,结果表明在55 C时,20μg重组蔗糖异构酶Pal I与4%蔗糖在1:4的比例下反应,产物中异麦芽酮糖占比最高。本工作为后续研究生产食品安全型蔗糖异构酶奠定理论基础,并为异麦芽酮糖的工业化生产及应用提供了理论依据。

关键词：蔗糖异构酶解脂耶氏酵母异麦芽酮糖异源表达培养基优化酶学性质

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Serratia plymuthica蔗糖异构酶的重组表达、热稳定性改造及应用研究

Serratia plymuthica蔗糖异构酶的重组表达、热稳定性改造及应用...

引用

作者：程胜江南大学

学位级别：硕士

蔗糖异构酶(EC 5.***.99.11),又称异麦芽酮糖合酶,可以催化蔗糖异构化生成异麦芽酮糖和海藻酮糖。目前报道的大部分微生物来源的蔗糖异构酶催化反应的主产物都是异麦芽酮糖(75%-85%)。异麦芽酮糖具有甜度低、不刺激胰岛素分泌和能够持续... 详细信息

蔗糖异构酶(EC 5.***.99.11),又称异麦芽酮糖合酶,可以催化蔗糖异构化生成异麦芽酮糖和海藻酮糖。目前报道的大部分微生物来源的蔗糖异构酶催化反应的主产物都是异麦芽酮糖(75%-85%)。异麦芽酮糖具有甜度低、不刺激胰岛素分泌和能够持续提供能量等独特性能,非常适合肥胖人群、糖尿病患者和运动员食用。因此,异麦芽酮糖作为新型的功能性甜味剂,具有广阔的市场应用前景。本论文将来源于Serratia plymuthica AS9(普城沙雷氏杆菌)的蔗糖异构酶分别在大肠杆菌(Escherichia coli)和短小芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)中进行了异源重组表达,并对重组蔗糖异构酶进行纯化和酶学定性。此外,对重组蔗糖异构酶转化蔗糖生成异麦芽酮糖的酶转化条件进行了优化。最后,基于前期研究发现重组酶具有较差的热稳定性,因此通过基于氨基酸B因子的定点突变对蔗糖异构酶进行改造以提高热稳定性。主要研究内容如下:(1)将经过密码子优化的蔗糖异构酶基因(pal I)与大肠杆菌表达载体p ET-24a(+)连接,构建成功的表达质粒p ET-24a(+)-pal I转化表达宿主*** BL21(DE3),得到重组菌*** BL21(DE3)/p ET-24a(+)-pal I。重组菌接种至TB培养基中,在25°C、200r·min-1的条件下振荡培养24 h,胞外酶活达到253.1 U·m L-1。之后进一步探讨了3 L罐中不同乳糖流加速率对重组菌产酶的影响。结果表明:33°C恒温发酵,控制p H 7.0和30%的溶氧水平,当菌浓OD600达到40时,最适乳糖流加速度为0.4 g·L-1·h-1。在该条件下诱导27 h时,胞外酶活达到最高,为1381.4 U·m L-1,是摇瓶发酵的5.46倍,此时重组酶的胞外分泌率为64.5%。(2)重组菌胞外发酵粗酶液经过硫酸铵沉淀、缓冲液透析和SP-Sepharose FF阳离子交换层析等纯化步骤得到纯酶。随后,对重组酶的酶学性质进行分析发现:重组酶的比活为957.7 U·mg-1;最适温度为30°C,在40°C和45°C下半衰期分别为100 h和39.2 min;最适p H为6.0;动力学分析显示,重组酶以蔗糖为底物时的Vmax、Km、Kcat和Kcat/Km分别为825.5 U·mg-1、30.1 mmol·L-1、992.8 s-1和33.0 mmol·L-1·s-1。此外,考察了温度、p H、加酶量、反应时间和底物浓度等因素对重组蔗糖异构酶制备异麦芽酮糖的影响,最终确定了重组酶制备异麦芽酮糖的最佳转化条件:温度30°C、初始p H6.5、加酶量20 U·g-1蔗糖,转化8 h,蔗糖浓度400 g·L-1。在最佳的转化条件下,异麦芽酮糖最大转化率可以达到87.9%。(3)B因子(原子取代因素)指的是由热运动和位置混乱引起的原子在其平衡位置周围电子密度的模糊度。B因子高的氨基酸在受热的条件下,结构容易被破坏,从而导致酶活力下降。基于蔗糖异构酶的氨基酸B因子分析,选择B因子值较高的Lys576和Glu175作为突变位点。利用Rosetta Design软件对这两个位点的稳定性突变进行预测。在软件预测的基础上,采用定点突变构建了3个突变体(E175N、K576D和E175N/K576D),突变体经过纯化后进行酶学性质分析。结果显示,突变体E175N、K576D和E175N/K576D的最适温度都为35°C,比天然酶提高了5°C;45°C下的半衰期分别是天然酶的2.30、1.78和7.65倍;动力学研究表明,E175N、K576D和E175N/K57D的Km值分别比天然酶下降了6.6%、2.0%和11.0%,催化效率Kcat/Km分别是天然酶的1.38、1.04和1.19倍。此外还考察了突变体催化蔗糖生产异麦芽酮糖的应用效果,结果表明,突变体E175N、K576D和E175N/K57D的异麦芽酮糖最大转化率分别比天然酶提高了1.8%、0.7%和1.6%。(4)将蔗糖异构酶基因(pal I)与短小芽孢杆菌表达载体p SVEB连接,并构建表达质粒p SVEB-pal ILSP,将质粒转化短小芽孢杆菌表达宿主,构建得到重组菌***/p SVEB-pal ILSP。重组工程菌***/p SVEB-pal ILSP接种至TM培养基中,在30°C、200 r·min-1的条件下振荡培养48 h,胞外酶活达到143.3 U·m L-1。

关键词：蔗糖异构酶异麦芽酮糖重组表达 B因子定点突变

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

三种口味芒果醋营养饮料配方设计

引用

广西科学 2008年第3期15卷 321-324页

作者：孙菲菲秦艳韦星明广西科学院广西南宁530007

以蜂蜜、海藻糖、异麦芽酮糖为甜味剂,同时添加乳酸钙,用正交试验设计出蜂蜜口味、海藻糖口味、异麦芽酮糖口味芒果醋营养饮料的最佳饮料配方。蜂蜜口味芒果醋饮料最佳配方为芒果原醋10%,蜂蜜¨蔗糖5%¨5%,乳酸钙0.12%;海藻糖口味芒果... 详细信息

以蜂蜜、海藻糖、异麦芽酮糖为甜味剂,同时添加乳酸钙,用正交试验设计出蜂蜜口味、海藻糖口味、异麦芽酮糖口味芒果醋营养饮料的最佳饮料配方。蜂蜜口味芒果醋饮料最佳配方为芒果原醋10%,蜂蜜¨蔗糖5%¨5%,乳酸钙0.12%;海藻糖口味芒果醋饮料最佳配方为芒果原醋10%,海藻糖12%,乳酸钙0.18%;异麦芽酮糖口味芒果醋饮料最佳配方为芒果原醋12%,异麦芽酮糖12%,乳酸钙0.12%。按最佳配方调制的3种口味芒果醋饮料酸甜适口,口感柔和,风味独特,营养丰富。

关键词：芒果醋配方蜂蜜海藻糖异麦芽酮糖正交试验

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论