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异绿原酸a通过PERK信号通路缓解小反刍兽疫病毒诱导的内质网应激

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中国兽医学报 2024年第7期 1408-1417页

作者：穆芸孙甜甜邝永胜袁书艺刘艳芬陈绍红刘铀郭富城广东海洋大学滨海农业学院广东海洋大学食品科技学院

病毒感染可诱导宿主细胞产生内质网应激(ERS)与未折叠蛋白反应(UPR),导致内质网稳态失衡。为了探讨异绿原酸a(IAA)在调节小反刍兽疫病毒(PPRV)诱导的ERS和UPR中的作用机制，采用MTT试验、间接免疫荧光试验和Western blot评估IAA的抗PPR... 详细信息

病毒感染可诱导宿主细胞产生内质网应激(ERS)与未折叠蛋白反应(UPR),导致内质网稳态失衡。为了探讨异绿原酸a(IAA)在调节小反刍兽疫病毒(PPRV)诱导的ERS和UPR中的作用机制，采用MTT试验、间接免疫荧光试验和Western blot评估IAA的抗PPRV活性；采用Western blot和实时荧光定量PCR观察IAA对PPRV诱导的ERS及PERK信号通路的影响。结果表明，IAA能显著抑制PPRV在LDG-2细胞中的复制及病毒诱导的细胞病变，显著提高病毒感染细胞的存活率；与病毒对照组相比，IAA处理的PPRV感染细胞中GRP78和PPRV表达水平、p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α比值均显著降低；GADD153表达水平则在病毒感染24、36 h显著降低，在48、60 h显著升高。用4-PBA阻断PPRV诱导的ERS,IAA和4-PBA+IAA处理PPRV感染细胞中GRP78、PPRV-N蛋白、GADD153的表达水平及p-eIF2α/eIF2α、p-PERK/PERK比值均显著降低。由此可见，IAA可通过抑制PERK-eIF2α-GADD153信号通路的激活缓解PPRV感染诱导的ERS,从而抑制病毒在宿主细胞的复制。

关键词：异绿原酸a 小反刍兽疫病毒(PPRV) 内质网应激(ERS) PERK信号通路

HPLC法同时测定杞菊叶黄素酯颗粒中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸a的含量

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特产研究 2024年第4期46卷 110-115页

作者：吴香婷刘晴赵诗聪程祥韩晓冉李海燕吉林大学药学院吉林长春130021 长春中医药大学附属医院吉林长春130021

为建立同时测定杞菊叶黄素酯颗粒中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸a含量的测定方法。本研究采用高效液相色谱法,用Amethyst C18-H(4.6 mm 250 mm,5 m)作为色谱柱,选择乙腈0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长348 nm,柱温25℃,进样... 详细信息

为建立同时测定杞菊叶黄素酯颗粒中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸a含量的测定方法。本研究采用高效液相色谱法,用Amethyst C18-H(4.6 mm 250 mm,5 m)作为色谱柱,选择乙腈0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长348 nm,柱温25℃,进样量2 L。结果显示,绿原酸、木犀草苷、异绿原酸a分别在0.01~0.07 mg/mL、0.01~0.05 mg/mL、0.03~0.16 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9994、0.9995、0.9992;平均回收率分别为101.33%、95.31%、109.60%,相对标准偏差为1.59%、1.29%、1.42%;精密度试验结果相对标准偏差(RSD)分别为1.01%、0.73%和0.45%;稳定性试验结果相对标准偏差为1.49%、1.26%、0.72%。该方法测得3批产品中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸a的含量均值为(98.94±0.56)mg/100 g、(90.45±0.82)mg/100 g、(145.63±2.21)mg/100 g(n=9)。本研究方法简便、准确、可靠,可作为杞菊叶黄素酯颗粒的含量测定方法。

关键词：绿原酸木犀草苷异绿原酸a 高效液相色谱法含量测定杞菊叶黄素酯颗粒

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异绿原酸a对联合霉菌毒素致PAM细胞线粒体动力学失衡和RLR损伤的保护作用

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异绿原酸A对联合霉菌毒素致PAM细胞线粒体动力学失衡和RLR损伤的...

作者：贾贵林四川农业大学

学位级别：硕士

黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivaleno,DON)和赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)在饲料及原料中混合污染严重,对动物和人类健康产生严重的危害。霉菌毒素通过诱导细胞氧化应激导致细胞线粒体损伤,进而产生... 详细信息

黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivaleno,DON)和赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)在饲料及原料中混合污染严重,对动物和人类健康产生严重的危害。霉菌毒素通过诱导细胞氧化应激导致细胞线粒体损伤,进而产生免疫毒性。绿原酸已被证明具有抗霉菌生长、增强机体抗氧化和免疫等功能。但是目前关于绿原酸对霉菌毒素诱导的线粒体动力学失衡和RLR损伤的研究还未见报道。本研究首先从绿原酸、异绿原酸a、新绿原酸中筛选出拮抗联合霉菌毒素效果最好的药物,然后探究该药物对联合霉菌毒素诱导的猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAM)线粒体动力学和RLR通路破坏的保护作用。为临床生产中联合霉菌毒素污染的防控以及绿原酸的应用提供理论依据。具体试验内容如下:试验一:绿原酸、异绿原酸a、新绿原酸对AFB1、DON、OTA联合暴露药物和浓度筛选本研究首先筛选拮抗联合霉菌毒素效果最好的绿原酸同分异构体。采用CCK-8法检测三种绿原酸同分异构体(2、4、8、16、32、64、128μg/m L)对PAM细胞的细胞毒性的影响。结果表明128μg/m L的三种绿原酸同分异构体明显表现出细胞毒性,浓度在64μg/m L时PAM细胞活力保持在85%以上。然后分别选取低、中、高(16μg/m L、32μg/m L、64μg/m L)的三种绿原酸同分异构体与AFB1、DON、OTA(0.94μg/m L、0.185μg/m L、1.255μg/m L)联合霉菌毒素共同处理细胞24 h,检测PAM细胞活力。结果发现与单独添加联合霉菌毒素组相比,添加64μg/m L的三种绿原酸同分异构体后PAM细胞活力最大,说明64μg/m L的三种绿原酸具有最佳的抗联合霉菌毒素效果。然后使用64μg/m L的三种绿原酸同分异构体与联合霉菌毒素共同处理PAM细胞24 h,检测细胞ROS水平和GPX4的含量,结果发现64μg/m L异绿原酸a较其他两种绿原酸极显著降低联合霉菌毒素诱导ROS水平,升高GPX4表达量(P异绿原酸a。试验二:异绿原酸a对联合霉菌毒素致PAM细胞线粒体动力学失衡的影响试验设置对照组(C组)、联合霉菌毒素组(M组)、异绿原酸a组(ICCA组)、异绿原酸a与联合霉菌毒素共同处理组(ICCA+M组)。(1)通过流式细胞术检测PAM细胞的线粒体ROS水平。结果发现,PAM细胞经联合霉菌毒素处理24 h后,相较于C组线粒体ROS的水平显著升高(P异绿原酸a组的线粒体ROS水平显著降低约40%(P异绿原酸a能够有效缓解由联合霉菌毒素诱导线粒体ROS升高。(2)通过q PCR和WB检测线粒体动力学相关蛋白Drp1、Opa1、Fis1、Mfn1以及Mfn2的m RNA和蛋白表达情况。结果表明,与C组相比PAM细胞经联合霉菌毒素处理24 h后,细胞内线粒体融合蛋白Opa1、Mfn1和Mfn2的m RNA和蛋白表达量均降低(P异绿原酸a能够有效改善由联合霉菌毒素诱导的线粒体动力学失衡。试验三:异绿原酸a致联合霉菌毒素对PAM细胞RLR通路的影响试验设分组同试验二。(1)将64μg/m L的异绿原酸a与联合霉菌毒素(0.94μg/m L AFB1、0.185μg/m L DON、1.255μg/m L OTA)共同处理PAM细胞24 h后,检测RIG-I、MAVS、IRF3、NF-κB的基因和蛋白表达情况。结果表明,联合霉菌毒素感染能够使PAM细胞RIG-I、MAVS、NF-κB的m RNA和蛋白表达显著升高(P异绿原酸a处理后,细胞中RIG-I、MAVS、NF-κB的基因和蛋白表达显著降低(P<0.05或0.01),IRF3的基因和蛋白表达有所恢复(P<0.01)。(2)然后我们利用q PCR法和ELISA对细胞内的RLR通路下游的细胞因子进行检测。结果发现,联合霉菌毒素感染后细胞内IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α的m RNA和蛋白表达升高(P<0.05或0.01),IFN-α蛋白水平极显著降低(P<0.01)。与M组相比,ICCA+M组显著降低了细胞内促炎细胞因子的m RNA和蛋白表达水平,升高了IFN-α的m RNA和蛋

关键词：异绿原酸a 联合霉菌毒素线粒体动力学 RLR信号通路

异绿原酸a体外抗小反刍兽疫病毒活性及其作用机制研究

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异绿原酸A体外抗小反刍兽疫病毒活性及其作用机制研究

作者：焦豪杰广东海洋大学

学位级别：硕士

小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种急性、高度接触性传染病,主要感染山羊、绵羊及野生小反刍兽类,其发病率和死亡率可高达100%,严重威胁着世界养羊业的... 详细信息

小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种急性、高度接触性传染病,主要感染山羊、绵羊及野生小反刍兽类,其发病率和死亡率可高达100%,严重威胁着世界养羊业的健康发展。尽管全球疫苗免疫接种计划在控制小反刍兽疫暴发流行中发挥了积极作用,亚临床和散发型病例仍时有发生,迄今尚无用于PPR治疗的药物。因此,有必要研究开发抗病毒药物用于小反刍兽疫的防治。运用分子对接技术筛选具有抗PPRV活性的绿原酸类衍生物,采用MTT法测定异绿原酸a对非洲绿猴肾细胞(Vero)的最大无毒质量浓度、半数细胞毒性(CC);空斑形成试验测定异绿原酸a的半数有效质量浓度(EC),计算治疗指数(TI);采用最大无毒质量浓度以内的异绿原酸a处理感染PPRV细胞,观察细胞病变,并用MTT法测定感染细胞活性;采用免疫印迹试验、实时荧光定量PCR、空斑形成试验和间接免疫荧光试验(IFA)观察异绿原酸a对PPRV侵入、复制、增殖、分布和释放的影响。采用6-羧基-2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯(乙酰氧基甲酯)(C-DCDHF-DA-AM)荧光探针、硫代巴比妥酸(TBA)比色法和羟胺比色法分别检测异绿原酸a对PPRV感染细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响;采用WB、q RT-PCR检测异绿原酸a对PPRV感染的细胞中PI3K/AKT、JAK/STAT通路以及下游信号分子表达水平的影响。结果表明:1、异绿原酸a与PPRV P蛋白的对接参数将8种绿原酸类物质(异绿原酸a、异绿原酸B、异绿原酸C、新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、奎宁酸)与PPRV P蛋白进行分子对接后,结合自由能分别为-6.0、-5.7、-5.8、-5.8、-5.8、-5.2、-5.2、-4.9 kj/mol,其中异绿原酸a对接参数最好,同P蛋白489位点的赖氨酸形成两个氢键,提示异绿原酸a可能干扰依赖RNA的RNA聚合酶复合物的组成,成为抗PPRV的候选化合物。2、异绿原酸a的抗PPRV活性异绿原酸a对Vero细胞的最大无毒质量浓度、CC、EC和TI分别为7.81mg/L、125.60 mg/L、21.02 mg/L和5.98;异绿原酸a处理能显著抑制PPRV诱导的细胞病变及病毒的增殖,显著提高病毒感染细胞活力(P异绿原酸a处理能显著抑制PPRV侵入Vero细胞及其在宿主细胞中的增殖,病毒结构蛋白F和N基因表达水平显著降低(P异绿原酸a可通过抑制PPRV侵入、复制、增殖和释放发挥其抗病毒活性。3、异绿原酸a对PPRV感染引起的氧化应激的抑制作用PPRV感染的细胞中ROS和MDA含量显著升高(P异绿原酸a处理的PPRV感染细胞中SOD活性显著升高(P异绿原酸a能显著抑制病毒感染细胞的氧化应激,提高宿主细胞活力。4、PI3K/AKT信号通路介导异绿原酸a抗PPRV活性PPRV感染Vero细胞中PI3K、AKT、p-AKT、p-GSK及下游信号分子Bax和Bcl-2表达水平均显著上调(P异绿原酸a处理的PPRV感染细胞中PI3K、AKT表达水平显著升高(P异绿原酸a通过调节PI3K/AKT信号通路表达促进病毒感染细胞凋亡,抑制病毒的持续感染。5、JAK/STAT信号通路介导异绿原酸a抗PPRV活性感染PPRV的Vero细胞中JAK1表达水平显著升高(P异绿原酸a通过调节JAK/STAT信号通路表达,增强宿主细胞天然免疫,抑制病毒增殖。综上所述,异绿原酸a是一种潜在抗PPRV化合物。异绿原酸a能抑制PPRV感染引发的氧化应激和细胞损伤。异绿原酸a通过PI3K/AKT通路及其下游细胞凋亡相关蛋白质抗病毒蛋白Bax和Bcl-2,促进PPRV感染细胞凋亡,抑制病毒持续感染;同时,异绿原酸a通过上调JAK/STAT及其

关键词：异绿原酸a 分子对接小反刍兽疫病毒抗病毒活性信号通路

异绿原酸a体外抗小反刍兽疫病毒活性及其作用机制研究

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河南农业大学学报 2023年第1期57卷 125-135页

作者：焦豪杰陈绍红刘铀广东海洋大学滨海农业学院广东湛江524088 广东海洋大学食品科技学院广东湛江524088

【目的】研究异绿原酸a(isochlorogenic acid A,IAA)体外抗小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminant virus,PPRV)的效果及其作用机制。【方法】采用MTT法测定IAA对非洲绿猴肾细胞(verda reno,Vero)的最大无毒质量浓度、半数细胞毒性... 详细信息

【目的】研究异绿原酸a(isochlorogenic acid A,IAA)体外抗小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminant virus,PPRV)的效果及其作用机制。【方法】采用MTT法测定IAA对非洲绿猴肾细胞(verda reno,Vero)的最大无毒质量浓度、半数细胞毒性质量浓度(50%cytotoxic mass concentration,CC_(50));空斑形成试验测定IAA的半数有效质量浓度(median effect mass concentration,EC_(50))并计算治疗指数(therapeutic index,TI);MTT法观察IAA对PPRV感染的Vero细胞活性的影响;采用空斑形成试验、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、免疫印迹试验和间接免疫荧光试验观察IAA对PPRV增殖和分布的影响;采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)比色法和羟胺比色法分别检测IAA对PPRV感染细胞内ROS、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的影响;采用免疫印迹试验检测IAA对PPRV感染细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B cell lymphoma-2 protein,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达水平的影响。【结果】IAA对Vero细胞的最大无毒质量浓度、CC_(50)、EC_(50)分别为7.81、125.60、21.02 mg·L^(-1),TI值为5.98;IAA处理能显著抑制PPRV诱导的细胞病变及病毒在Vero细胞中的增殖;细胞活力显著高于病毒感染细胞;病毒噬斑形成数量、病毒F和N基因表达水平显著降低;宿主细胞胞浆内病毒分布显著减少。IAA能显著提高PPRV感染细胞SOD活性,清除病毒感染细胞内的ROS和MDA。经IAA处理的PPRV感染细胞中PI3K、AKT表达水平极显著提高,p-AKT表达水平显著降低,Bax/Bcl-2比值显著降低。【结论】IAA通过调节宿主细胞PI3K/AKT通路及其下游细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达水平来缓解PPRV感染引起的氧化应激反应,从而发挥其抗PPRV活性。

关键词：异绿原酸a 小反刍兽疫病毒抗病毒活性作用机制信号通路

蕲艾中咖啡酸、异绿原酸a等绿原酸类成分的化感抑草效应及其作用机制研究

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蕲艾中咖啡酸、异绿原酸A等绿原酸类成分的化感抑草效应及其作用...

作者：陈乐湖北中医药大学

学位级别：硕士

艾（Artemisia Argyi Lé*** Van.）是菊科蒿属多年生草本植物,其干燥叶片为我国传统中药材。艾叶按照应用历史和产地,分为北艾、海艾、蕲艾和祁艾等道地药材。艾叶在亚洲分布广泛,主要分布在中国、日本和韩国,具有较强的生态适应性。... 详细信息

艾（Artemisia Argyi Lé*** Van.）是菊科蒿属多年生草本植物,其干燥叶片为我国传统中药材。艾叶按照应用历史和产地,分为北艾、海艾、蕲艾和祁艾等道地药材。艾叶在亚洲分布广泛,主要分布在中国、日本和韩国,具有较强的生态适应性。前期研究发现,将蕲艾艾粉作为肥料施用时田间杂草数量和生物多样性显著下降。进一步实验证实,蕲艾提取物对白菜（Brassica pekinensis）、生菜（Lactuca sativa）和水稻（Oryza sativa）的种子萌发和幼苗生长有较强的抑制作用,其中水提物的抑制作用最强。植物化感作用是一种广泛存在的生物现象,是指植物分泌的次生代谢物或其分解产物释放到土壤和环境中,影响其他植物的生长发育。目前,化感植物分泌的大量化感物质被认为是植物在生态竞争中占优势的重要原因,并可利用其有效控制杂草。因此,本文对蕲艾水提物中的化感抑草活性物质及其作用机制展开系统研究,为阐明艾叶生态优势和开发绿色除草剂提供科学依据。目的:评价蕲艾水提物的化感抑草活性,筛选鉴定其化感抑草作用的有效成分,阐明有效活性成分抑草作用的生理生化和分子机制,为艾叶综合开发利用提供理论依据。方法:1.采用培养箱试验评价不同浓度蕲艾水提物溶液对4种田间常见有害杂草稗草、狗尾草、马齿苋和反枝苋的化感抑草活性,并利用UPLC-QTOF-MS和HPLC法初步解析其药效物质基础。2.以狗尾草和马齿苋为研究对象,采用培养箱试验测定蕲艾水提物中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和隐绿原酸4种含量丰富的酚酸类成分的化感抑草作用;运用生物活性导向分离法和UPLC-QTOF-MS技术相结合的方式分离鉴定蕲艾水提物中的关键化感活性物质,通过6种不同科属的杂草评价其广谱抑草活性;此外,利用HPLC法检测蕲艾向其生长环境中释放的化感物质种类,并综合分析蕲艾水提物中化感物质结构相似性。3.以狗尾草为模式植物利用体视显微镜、光学显微镜、透射电镜、生理指标检测研究蕲艾中主要化感物质对杂草叶片的生理效应。4.利用转录组测序综合分析蕲艾中主要化感物质处理后狗尾草叶片中的差异表达基因（P异表达基因进行深入分析,揭示蕲艾中主要化感物质可能的关键作用通路和靶点基因,并利用实时荧光定量PCR及生化指标检测等进行验证。结果:1.不同浓度的蕲艾水提物(5、10、20 mg·m L)对单子叶杂草稗草、狗尾草和双子叶杂草马齿苋、反枝苋的茎长、根长、生物量抑制作用显著,总体呈现浓度依赖性,其中狗尾草对蕲艾水提物最为敏感;UPLC-QTOF-MS分析鉴定的14个化合物中13个为酚类化合物,其中9个为酚酸类成分;含量测定发现蕲艾水提物中总酚酸含量是总黄酮含量的两倍以上,其中含量较为丰富的依次为咖啡酸、隐绿原酸、新绿原酸和绿原酸,充分表明酚酸类成分可能是蕲艾水提物化感作用的药效物质基础。2.4种含量丰富的酚酸类成分对狗尾草和马齿苋的化感抑草活性强弱与其含量相吻合,依次为咖啡酸>隐绿原酸>新绿原酸>绿原酸,咖啡酸为蕲艾水提物中含量最高且化感作用较强的化合物。经过一系列的生物活性指导分离、纯化和核磁鉴定,异绿原酸a（ICGAA）被鉴定为蕲艾活性部位（Fr.C-3）中最重要的化感活性物质;不同浓度的异绿原酸a溶液（250、500、1000μM）能显著抑制稗草、狗尾草、马唐、马齿苋、空心莲子草和藜等不同科属杂草的生长,显示出作为广谱抑草潜力,并通过盆栽实验以狗尾草进行了验证。3.经HPLC法检测蕲艾生长地中表层土壤中的化学成分,发现蕲艾可向环境中释放异绿原酸a、咖啡酸、绿原酸等物质,表明这些物质均为蕲艾中重要的化感物质;综合分析蕲艾水提物中的多种化感活性成分发现,它们具有结构相似性,均为咖啡酸和奎宁酸缩合生成的单咖啡酰奎宁酸和双咖啡酰奎宁酸,可统称为绿原酸类物质。4.利用体视显微镜观察到,随着咖啡酸浓度升高（250、500、1000μM）,狗尾草叶片逐渐出现卷曲、发黄和干枯的现象。1000μM异绿原酸a处理后同样严重阻碍了狗尾草叶片的生长发育,且光学显微镜观察发现狗尾草叶尖细胞横切面中上、下表皮细胞严重萎缩,叶脉维管束细胞膨大,内部叶绿素减少;透射电镜则发现超微结构中细胞膜和细胞器严重降解。同时,在咖啡酸处理下,叶片中活性氧（ROS）积累爆发,脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量上升;且在1000μM浓度下,过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性均显著性降低。这些结果表明咖啡酸、异绿原酸a等绿原酸类成分可通过破坏叶片的生理结构、导致氧化损伤、扰乱抗氧化酶活性发挥抑草活性。5.转录组测序和实时荧光定量PCR（RT-q PCR）分析发现咖啡酸处理后叶片中下调基因富集的“二萜类物质生物合成”和“

关键词：蕲艾水提物 UPLC-QTOF-MS 咖啡酸异绿原酸a 抑草效应生理机制分子机制

异绿原酸a抑制NLRP3炎性复合体/NF-κB活化减轻胶原诱导型关节炎大鼠炎症反应

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中国药理学通报 2019年第10期35卷 1415-1419页

作者：刘杨段学清严福林潘春吴继春曹峰梁江贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学药学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学第一附属医院风湿免疫科贵州贵阳550025

目的分析异绿原酸a对胶原诱导型关节炎大鼠抗炎效应与潜在作用机制。方法SD♂大鼠分为正常组、模型组、异绿原酸a高、低剂量组。高、低剂量异绿原酸a连续给药6周,测量大鼠足跖肿胀度,脾脏脏器系数;HE染色观察骨关节病理改变;Westernblo... 详细信息

目的分析异绿原酸a对胶原诱导型关节炎大鼠抗炎效应与潜在作用机制。方法SD♂大鼠分为正常组、模型组、异绿原酸a高、低剂量组。高、低剂量异绿原酸a连续给药6周,测量大鼠足跖肿胀度,脾脏脏器系数;HE染色观察骨关节病理改变;Westernblot检测关节滑膜NLRP3、caspase-1、NF-κBp65、p-NF-κBp65、p-IκB-ɑ、RANKL蛋白表达;ELISA检测血浆IL-1β、IL-6、TNF-ɑ、CRP、IFN-γ、IL-18表达。结果与正常组比较,模型组大鼠足跖明显肿胀,脾脏系数变大;关节滑膜内NLRP3、caspase-1、NF-κBp65、p-NF-κBp65、p-IκB、RANKL蛋白表达明显升高;血浆IL-1β、IL-6、TNF-ɑ、CRP、IFN-γ、IL-18明显上升。不同剂量异绿原酸a能明显降低模型组上述各项指标。结论异绿原酸a对胶原诱导型关节炎有较好的抗炎作用,其抗炎活性可能与降低NLRP3炎性复合体激活和NF-κB磷酸化表达有关。

关键词：异绿原酸a 类风湿关节炎炎症滑膜病变骨关节炎骨破坏

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异绿原酸a、B和C的制备工艺研究

中草药 2015年第3期46卷 369-373页

作者：倪付勇宋亚玲刘露赵祎武黄文哲王振中萧伟江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222000 中药制药过程新技术国家重点实验室江苏连云港222000

目的建立从金银花Lonicera japonica中分离制备高质量分数异绿原酸a、B和C的方法。方法采用D-101大孔树脂、中低压制备色谱分离制备金银花中异绿原酸a、B和C单体,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果分离制备的异绿原酸a、B和C质量... 详细信息

目的建立从金银花Lonicera japonica中分离制备高质量分数异绿原酸a、B和C的方法。方法采用D-101大孔树脂、中低压制备色谱分离制备金银花中异绿原酸a、B和C单体,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果分离制备的异绿原酸a、B和C质量分数分别为98.7%、99.2%和97.6%。结论该方法经济、简单、快速,可用于制备高质量分数的异绿原酸a、B和C。

关键词：异绿原酸a 异绿原酸B 异绿原酸C 金银花 D-101大孔树脂中低压制备色谱

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异绿原酸a抑制变应性鼻炎大鼠炎症反应

解剖科学进展 2022年第2期28卷 234-238页

作者：卡迪丽娅·木拉提艾力根·阿不都热依木张瑾新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉科诊疗中心新疆乌鲁木齐830001

目的探究异绿原酸a对变应性鼻炎(AR)大鼠的炎症抑制作用及机制。方法 36只SD大鼠随机分为对照组(Sham)、模型组(Model)和治疗组(ICOA),每组12只。卵清蛋白致敏制备AR大鼠模型,观察异绿原酸a抗AR的作用,比较各组大鼠行为学评分;HE染色... 详细信息

目的探究异绿原酸a对变应性鼻炎(AR)大鼠的炎症抑制作用及机制。方法 36只SD大鼠随机分为对照组(Sham)、模型组(Model)和治疗组(ICOA),每组12只。卵清蛋白致敏制备AR大鼠模型,观察异绿原酸a抗AR的作用,比较各组大鼠行为学评分;HE染色观察大鼠鼻黏膜病理变化;ELISA检测各组大鼠鼻腔灌洗液中EOS%、IFN-γ、IL-4含量及血清OVA-sIgE含量;免疫组化检测鼻黏膜组织中TSLP、IL-4、IFN-γ表达分布情况;Westernblot检测NLRP3、 ASC、 caspase-1蛋白表达量。结果治疗21d起AR症状评分(4.31±0.46)显著低于Model组(6.04±0.70),鼻黏膜病理显著改善,炎症细胞浸润减轻,大鼠体液中OVAsIgE、EOS%及IL-4含量显著降低,IFN-γ表达水平上调,鼻黏膜组织IL-4、TSLP阳性细胞表达量较Model组受到显著抑制,IFN-γ表达量增加,抑制黏膜组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达水平。结论异绿原酸a对AR模型大鼠的治疗作用与调控细胞免疫应答平衡、抑制NLRP3炎性复合体组装相关。

关键词：异绿原酸a 变应性鼻炎炎症抑制细胞免疫 NLRP3炎性复合体大鼠