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平喘方对哮喘小鼠NF-κB信号通路的调控及对TLR4 mRNA和蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2021年第3期41卷 356-363页

作者：杨艳薛征虞坚尔胡逸中刘亚尊徐万超上海中医药大学附属市中医医院儿科上海200071 上海中医药大学研究生院上海201203

目的研究平喘方通过调节核因子-K B(NF-K B)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体4(TLR4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组15只。除空白组外,其余组均采用... 详细信息

目的研究平喘方通过调节核因子-K B(NF-K B)信号通路对哮喘小鼠的作用及其对Toll样受体4(TLR4)mRNA和蛋白表达的影响。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、平喘方组,每组15只。除空白组外,其余组均采用先卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝凝胶[AI(OH)3]腹腔注射致敏,采用OVA雾化激发的方法来建立哮喘模型。地塞米松组、平喘方组分别予0.075 mg/mL地塞米松溶液、5.33 g/mL平喘方灌胃治疗1周,空白组、模型组给予等量生理盐水灌胃。末次给药24 h后,采用HE、Masson染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度,Western Blot观察肺组织中NF-κB亚单位(p65)、NF-κB的抑制蛋白(IκBα)、TLR4、髓样分化因子(MyD88)蛋白表达,RT-PCR法观察p65、IκBα、TLR4、MyD88 mRNA水平。结果HE及Masson染色可见模型组小鼠肺组织明显炎症细胞浸润,上皮基底膜增厚,胶原纤维增多,平喘方组小鼠肺部炎性细胞浸润明显减轻,胶原纤维面积减小;与空白组比较,模型组小鼠BALF中IL-6、TNF-α浓度,肺组织中p65、MyD88蛋白表达及mRNA水平,气管中TLR4mRNA及蛋白表达水平均升高(均P平喘方组BALF中IL-6、TNF-α浓度均降低,MyD88、p65、TLR4蛋白表达及mRNA水平下调(P平喘方组IκBαmRNA水平升高(P0.05)。与地塞米松组比较,平喘方组BALF中IL-6、TNF-α因子水平、p65 mRNA水平、TLR4 mRNA水平、MyD88蛋白表达及mRNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),p65及TLR4蛋白表达升高(P平喘方对OVA诱导哮喘小鼠的气道炎症有较好的改善作用,其机制可能与降低TLR4及MyD88活性,调控NF-κB信号通路有关。

关键词：哮喘平喘方核因子-Kappa B Toll样受体4

平喘方干预哮喘模型观察“IL-33-ST2”肺肠免疫变化的研究

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中国免疫学杂志 2022年第12期38卷 1445-1450页

作者：朴香吴杰虞坚尔(指导) 薛征徐万超上海中医药大学附属市中医医院上海200071 上海市第七人民医院上海200137

目的:采用平喘方干预哮喘模型观察IL-33-ST2通路在肺肠组织的变化研究。方法:40只BALB/c小鼠分空白对照组、模型组、地塞米松组(DEX)和平喘方组(PCF)。用OVA联合Al(OH)3建造哮喘模型。通过HE染色观察肺和肠道组织形态学变化。ELISA检测B... 详细信息

目的:采用平喘方干预哮喘模型观察IL-33-ST2通路在肺肠组织的变化研究。方法:40只BALB/c小鼠分空白对照组、模型组、地塞米松组(DEX)和平喘方组(PCF)。用OVA联合Al(OH)3建造哮喘模型。通过HE染色观察肺和肠道组织形态学变化。ELISA检测BALF中IL-5和IL-13的变化。通过RT-PCR和Western blot检测肺和肠道组织中IL-33-ST2通路上相关因子的mRNA和蛋白的表达。结果:平喘方能够有效下调哮喘小鼠肺部IL-5和IL-13(P平喘方下调哮喘模型肺肠组织IL-33-ST2通路中相关因子的表达。

关键词： IL-33-ST2 哮喘平喘方

平喘方对支气管哮喘小鼠肺组织microRNA126与GATA-3表达的影响

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中成药 2013年第11期35卷 2324-2328页

作者：刘斐虞坚尔白莉上海中医药大学附属市中医医院上海200071

目的通过观察平喘方(麻黄、苦杏仁、紫苏子、桃仁、莱菔子、黄芩等)对支气管哮喘模型小鼠肺组织中microRNA126与GATA-3表达的影响,阐释平喘方改善气道炎症的作用机制。方法采用10%鸡卵白蛋白腹腔注射致敏和5%卵白蛋白雾化吸入激发,建立B... 详细信息

目的通过观察平喘方(麻黄、苦杏仁、紫苏子、桃仁、莱菔子、黄芩等)对支气管哮喘模型小鼠肺组织中microRNA126与GATA-3表达的影响,阐释平喘方改善气道炎症的作用机制。方法采用10%鸡卵白蛋白腹腔注射致敏和5%卵白蛋白雾化吸入激发,建立BALB/c小鼠支气管哮喘模型。40只雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组和平喘方组,每组10只,治疗4周后采集小鼠肺组织,用光学显微镜观察小鼠肺组织的病理学改变。用聚合酶链式反应测定肺组织中microRNA126与GATA-3 mRNA的表达量。结果平喘方可以有效降低microRNA126,负向调控GATA-3的表达量,减轻支气管哮喘模型小鼠的症状,其作用与地塞米松组相当。结论平喘方对microRNA126的干预可能是降低GATA-3的一个切入点,从而达到抑制TH2过度表达,改善气道炎症。

关键词：支气管哮喘平喘方 microRNA126 GATA-3

平喘方及拆方对哮喘模型小鼠pDC/cDC免疫失衡的影响

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中华中医药杂志 2018年第6期33卷 2349-2352页

作者：刘亚尊虞坚尔薛征徐万超张新光明溪上海中医药大学附属市中医医院上海200071 上海中医药大学上海201203

目的:研究平喘方及拆方对哮喘模型小鼠浆细胞样树突状细胞(p DC)与传统树突样细胞(c DC)免疫失衡的影响。方法:120只BALB/c小鼠随机分为6组:空白组、模型组、地米组、平喘方组、拆方1组、拆方2组,复制哮喘模型,分别给药干预7d、28d。HE... 详细信息

目的:研究平喘方及拆方对哮喘模型小鼠浆细胞样树突状细胞(p DC)与传统树突样细胞(c DC)免疫失衡的影响。方法:120只BALB/c小鼠随机分为6组:空白组、模型组、地米组、平喘方组、拆方1组、拆方2组,复制哮喘模型,分别给药干预7d、28d。HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA测定肺泡灌洗液(BALF)中胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)因子水平,Western Blot测定小鼠肺组织中吲哚胺2,3二氧化酶(IDO)、OX40配体(OX40L)蛋白表达情况。结果:治疗后7d和28d,各给药组较模型组BALF中TSLP因子水平、OX40L蛋白表达量均显著降低,IDO蛋白表达量显著升高(P方1组较平喘方组TSLP因子水平升高(P方2组较平喘方组OX40L表达量升高(P平喘方及其拆方均具有调节哮喘模型小鼠p DC/c DC免疫失衡,治疗哮喘的作用。给药7d时平喘方及拆方2(平喘化痰方)作用更强;给药28d时平喘方及拆方1(平喘祛瘀方)作用更强。

关键词：平喘方拆方哮喘浆细胞样树突状细胞传统树突样细胞胸腺基质淋巴细胞生成素吲哚胺2,3二氧化酶 OX40配体

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平喘方对支气管哮喘模型小鼠气道重建的影响

中西医结合学报 2009年第3期7卷 261-267页

作者：朱慧华虞坚尔张晓峰陈燕萍庞惠芳王国华管宇吴杰上海中医药大学岳阳中西医结合医院儿科上海200437 上海市中医医院儿科上海200071 上海市中医医院中心实验室上海200071 上海中医药大学病理学教研室上海201203

目的:通过研究平喘方对支气管哮喘模型小鼠外周血和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveo larlavage fluid,BALF)巨噬细胞炎性蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和免疫球蛋白E(immuno-globulin E,IgE)含量及CD86分子表达的影响,探索平喘方对小鼠支气管哮喘模型气道重建的作用机制。方法:采用卵清白蛋白腹腔注射和雾化吸入致敏,建立BALB/c小鼠支气管哮喘模型。50只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘方小剂量、常规剂量组,每组10只。造模后4周,予相应药物灌胃治疗8周。用亲和素-生物素复合物酶联免疫吸附测定法检测外周血和BALF中MIP-1α水平;用酶联免疫吸附测定法检测血清和BALF中IgE水平;直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86+、CD3-CD86+细胞百分率;利用普通光学显微镜观察支气管哮喘模型小鼠肺组织病理学改变。结果:模型组外周血和BALF中MIP-1α、IgE含量及CD86+、CD3-CD86+细胞百分率均明显高于空白对照组(P0.05),平喘方小剂量组外周血中CD3-CD86+细胞百分率高于地塞米松组(P平喘方能降低支气管哮喘模型小鼠MIP-1α和IgE水平,下调CD86分子表达,这可能是平喘方减轻支气管哮喘模型小鼠的症状,改善支气管哮喘气道炎症的作用机制之一。

关键词：支气管哮喘平喘方气道重建小鼠

平喘方调控PNEC-CGRP-ILC2-IL-5通路改善哮喘小鼠气道炎症的机制研究

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时珍国医国药 2022年第11期33卷 2565-2569页

作者：周欢朴香薛征韩兆鹏上海中医药大学附属市中医医院上海200071 上海中医药大学上海201203 上海中医药大学中医儿科研究所上海200071 山西中医药大学山西太原030024

目的探讨平喘方通过干预PNEC-CGRP-ILC2-IL-5信号通路改善哮喘小鼠气道炎症的机制研究。方法将20只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘方组,每组5只。除空白组外,其余3组小鼠均采用10%卵白蛋白(OVA)腹腔注射... 详细信息

目的探讨平喘方通过干预PNEC-CGRP-ILC2-IL-5信号通路改善哮喘小鼠气道炎症的机制研究。方法将20只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、哮喘模型组、地塞米松组和平喘方组,每组5只。除空白组外,其余3组小鼠均采用10%卵白蛋白(OVA)腹腔注射和5%OVA超声雾化吸入建立哮喘小鼠模型。每次雾化后2h分别予相应药物灌胃,连续干预7天。HE染色显示小鼠肺组织病理结构情况,嗜银染色检测肺神经内分泌细胞(PNEC)数量变化,ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)白介素5(IL-5)和免疫球蛋白E(Ig-E)含量,RT-PCR观察肺组织降钙素基因相关肽基因(CGRPmRNA)变化,Western blot检测肺组织CGRP蛋白表达,流式细胞术检测肺组织中ILC2细胞的变化。结果与空白对照组相比,光镜下哮喘模型组小鼠肺组织及支气管可见大量炎性细胞浸润,PNEC数量增多,BALF中IL-5和Ig-E含量增加,肺组织CGRP表达量上调,ILC2的表型LIN、GATA-3、CD45、CD127和CDIL-33表达升高。与哮喘模型组相比,平喘方和地塞米松组小鼠肺组织及支气管在光镜下可见少量炎性细胞浸润,PNEC数量减少,BALF中的IL-5、Ig-E含量降低(P平喘方可能通过调控PNEC-CGRP-ILC2-IL-5信号通路,降低Th2细胞因子IL-5和Ig-E的释放,减轻气道炎症,控制哮喘发作。

关键词：平喘方 PNEC-CGRP-ILC2-IL-5 哮喘气道黏液分泌气道炎症

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平喘方加味治疗小儿哮喘发作期临床疗效观察

中华中医药杂志 2013年第10期28卷 3012-3014页

作者：吴杰虞坚尔薛征上海市中医医院儿科上海中医药研究院中医儿科研究所上海200071

目的:观察平喘方加味治疗小儿哮喘发作期的临床疗效。方法:将120例哮喘发作期患儿随机分为对照组和试验组,每组60例。对照组用硫酸沙丁胺醇气雾剂治疗,试验组在硫酸沙丁胺醇气雾剂治疗基础上,用平喘方加味治疗,疗程均为3d。结果:试验组... 详细信息

目的:观察平喘方加味治疗小儿哮喘发作期的临床疗效。方法:将120例哮喘发作期患儿随机分为对照组和试验组,每组60例。对照组用硫酸沙丁胺醇气雾剂治疗,试验组在硫酸沙丁胺醇气雾剂治疗基础上,用平喘方加味治疗,疗程均为3d。结果:试验组临床痊愈率为53.33%,对照组为35.00%,两组临床痊愈率差异有统计学意义(P平喘方能较好改善哮喘发作期患儿的症状和体征,提高临床疗效。

关键词：平喘方哮喘发作期疗效

平喘方对支气管哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的实验研究

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上海中医药杂志 2008年第9期42卷 58-62页

作者：朱慧华虞坚尔张晓峰陈燕萍庞惠芳王国华管宇吴杰上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院儿科上海200437 上海市中医医院儿科上海200071 上海市中医医院中心实验室上海200071 上海中医药大学病理学教研室上海201203

目的通过研究哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的影响,探索平喘方防治支气管哮喘的作用机制。方法通过对BALB/C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘小鼠模型。150只BALB/C小鼠随机分为5组,在... 详细信息

目的通过研究哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α水平及CD86分子表达的影响,探索平喘方防治支气管哮喘的作用机制。方法通过对BALB/C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘小鼠模型。150只BALB/C小鼠随机分为5组,在激发哮喘7d、14d、21d时,用双抗体夹心ABC-ELISA法检测外周血和BALF中巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)水平,直接免疫荧光流式细胞术检测外周血和BALF中CD86+、CD3-CD86+细胞百分率,观察肺组织病理学改变。结果哮喘激发7d:各治疗组外周血和BALF中MIP-1α水平、CD86+细胞百分率均明显低于模型组(P平喘方常规剂量组、地塞米松组外周血和BALF中MIP-1α水平均明显低于模型组(P平喘方能显著降低MIP-1α水平、下调CD86分子表达、减轻气道黏膜上皮损伤,减少气道炎细胞浸润,减轻支气管壁及周围间质充血、水肿,具有减轻哮喘发病症状,改善哮喘气道炎症的作用。

关键词：支气管哮喘平喘方 MIP-1α CD86分子表达

平喘方加减治疗小儿哮喘发作期（风痰哮证）的临床研究

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平喘方加减治疗小儿哮喘发作期（风痰哮证）的临床研究

作者：赵玉蓉长春中医药大学

学位级别：硕士

目的：通过临床观察平喘方加减在治疗小儿哮喘发作期方面的治疗效果，提出哮喘发作期时的用药规律以及为临床研究提供更有效的治疗方案，其性质属于内治法治疗哮喘发作期的临床研究。方法：通过随机对照法，将100例支气管哮喘发作期的... 详细信息

目的：通过临床观察平喘方加减在治疗小儿哮喘发作期方面的治疗效果，提出哮喘发作期时的用药规律以及为临床研究提供更有效的治疗方案，其性质属于内治法治疗哮喘发作期的临床研究。方法：通过随机对照法，将100例支气管哮喘发作期的患儿随机分成治疗组和对照组各50例。治疗组患儿均运用平喘方加减治疗，对照组运用清咳平喘颗粒治疗，观察两组治疗后症状、体征改善程度。对其临床疗效进行统计处理。结果：平喘方加减治疗小儿哮喘发作期50例（总有效率为98%），与对照组清咳平喘颗粒治疗小儿哮喘发作期50例（总有效率为80%），经统计学处理，二者有显著性差异（P方平喘方治疗小儿哮喘发作期，方中根据小儿哮喘的发生机制以及病机特点灵活运用中药的用药的配伍特性以及虫类药的特点，采用了白果，苦参，全蝎，杏仁，麻黄等一些祛风清热，除痰平喘的药物，并指出风邪为支气管哮喘的主因，故又选用全蝎，地龙等虫类药以祛风定哮。平喘方既总结了经典方定喘汤的经典之处，且优于定喘汤的治疗效果，也有更多的创新之处，根据风邪的性质及致病特征选用药物以祛风平哮，去除哮喘的发作因素，从而达到治疗哮喘的目的。

关键词：小儿哮喘祛风化痰平喘方