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大口黑鲈2群体双列杂交子代的生长比较及通径分析

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上海海洋大学学报 2022年第1期31卷 131-139页

作者：龚雅婷傅建军朱文彬张林兵王兰梅强俊郜灿胡桂飞洪斌董在杰南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业与种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 安徽张林渔业有限公司安徽铜陵224151 铜陵市义安区水产管理站安徽铜陵244151

为了加快大口黑鲈(Micropterus salmoides)的良种更新,以引进的大口黑鲈美国群体(US)和国内养殖群体(YZ)为基础群体,开展完全双列杂交试验,获得USUS、USYZ、YZUS和YZYZ共4个配对组合,并对子代个体1龄的生长性能进行比较。研究结果显示:U... 详细信息

为了加快大口黑鲈(Micropterus salmoides)的良种更新,以引进的大口黑鲈美国群体(US)和国内养殖群体(YZ)为基础群体,开展完全双列杂交试验,获得USUS、USYZ、YZUS和YZYZ共4个配对组合,并对子代个体1龄的生长性能进行比较。研究结果显示:USYZ杂交子代在体质量、体长和绝对增重率方面具有显著性优势(P大口黑鲈养殖群体种质改良和新品种培育提供基础。

关键词：大口黑鲈生长性状杂种优势通径分析

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大口黑鲈生长性状的微卫星DNA标记筛选

遗传 2009年第5期31卷 515-522页

作者：樊佳佳白俊杰李小慧何小平何小燕李胜杰叶星吴立新中国水产科学研究院珠江水产研究所中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室广州510380 大连水产学院生命科学与技术学院大连116023 西北农林科技大学动物科技学院杨凌712100

本研究在人工养殖的大口黑鲈（Micropterus salmoides L．）群体中对40个微卫星位点进行扩增，运用卡方检验分析微卫星位点在极端大个体组和极端小个体组中的基因型分布差异，选择差异显著的16个微卫星位点对大口黑鲈随机群体进行基因... 详细信息

本研究在人工养殖的大口黑鲈（Micropterus salmoides L．）群体中对40个微卫星位点进行扩增，运用卡方检验分析微卫星位点在极端大个体组和极端小个体组中的基因型分布差异，选择差异显著的16个微卫星位点对大口黑鲈随机群体进行基因型与性状的关联分析，同时分析群体的遗传多样性。结果表明：关联分析得到7个微卫星位点（JZL60、JZL67、JZL72、JZL124、MiSaTPW76、MiSaTPW117和MiSaTPW173）与体重、体长和体高显著或极显著相关（P〈0．05或P〈0．01），同时对差异显著的位点进行不同基因型间与生长性状的多重比较，找到了与体重、体长和体高性状相关的最有利基因型为JZL60位点的AA、JZL67位点的BB、JZL72位点的AC、MiSaTPW76位点的BB和MiSaTPW117位点的BC。应用这16个微卫星位点对随机群体进行遗传多样性分析，共检测到47个等位基因，平均等位基因2．938个，每个位点检测到的等位基因数为2-5个、群体的平均观测杂合度、平均期望杂合度和平均多态信息含量分别为0．515、0．500和0．445，表明该群体遗传多样性处于中等水平。

关键词：大口黑鲈微卫星生长性状关联分析遗传多样性

大口黑鲈amh基因全长cDNA克隆、表达及多克隆抗体制备

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水生生物学报 2023年第5期47卷 775-785页

作者：李兵部曹哲明陶易凡徐钢春许爱国李鸣霄张红英陈诗扬强俊徐跑中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业与种质资源利用重点实验室无锡214081 中国农业科学院研究生院北京100081 苏州金澄福渔业科技有限公司苏州215121

为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗缪勒氏管激素(amh)基因的表达及其在性腺发育中的潜在作用,研究利用RACE技术克隆得到了大口黑鲈amh基因,并制备Amh多克隆抗体,通过qRT-PCR、Western Blot分析Amh在大口黑鲈不同组织和不同发育... 详细信息

为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗缪勒氏管激素(amh)基因的表达及其在性腺发育中的潜在作用,研究利用RACE技术克隆得到了大口黑鲈amh基因,并制备Amh多克隆抗体,通过qRT-PCR、Western Blot分析Amh在大口黑鲈不同组织和不同发育阶段性腺中的表达模式,最后利用HE染色法和免疫组化观察不同发育阶段性腺的形态组织学变化及其与Amh表达的潜在关系。结果显示:大口黑鲈amh基因cDNA序列全长2050 bp,由24 bp5′非编码区、394 bp3′非编码区和1632 bp的开放阅读框组成,共编码543个氨基酸。amh基因mRNA在大口黑鲈11个组织中均有表达,其中雄鱼精巢中表达量最高,肌肉次之,雌鱼卵巢中表达量最高,肌肉次之。amh基因在雌雄鱼不同发育阶段的性腺中表达存在显著差异,精巢中表达量均显著高于卵巢(P大口黑鲈性腺发育中发挥着关键的调控作用。

关键词： amh 基因克隆组织表达多克隆抗体性腺发育大口黑鲈

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大口黑鲈ghrelin基因SNPs的筛选及与生长性状关联性分析

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水产学报 2016年第4期40卷 521-527页

作者：刘浩白俊杰李胜杰樊佳佳全迎春中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室上海海洋大学水产与生命学院

ghrelin是脊椎动物的一种脑肠肽,有促进摄食的功能,并能促进生长激素(GH)释放,参与能量平衡调控和糖类代谢。为探索ghrelin基因多态性与大口黑鲈生长性状的相关性,针对大口黑鲈ghrelin基因的启动子序列,实验采用直接测序法获得了2个SNP... 详细信息

ghrelin是脊椎动物的一种脑肠肽,有促进摄食的功能,并能促进生长激素(GH)释放,参与能量平衡调控和糖类代谢。为探索ghrelin基因多态性与大口黑鲈生长性状的相关性,针对大口黑鲈ghrelin基因的启动子序列,实验采用直接测序法获得了2个SNPs位点:S1(A-642C)和S2(A-639C)。随机选取同批繁殖、同塘养殖的大口黑鲈采用Sna Pshot方法进行SNPs位点检测和分型。结果显示,实验群体在ghrelin基因2个SNPs位点上基本处于哈温平衡,S1和S2共组成5种双倍型(D1、D2、D3、D4和D5)。基因型与生长性状的相关性分析结果表明,S1位点AC型个体在体高与全长上显著高于CC型个体,S2位点AA型个体在头长上显著高于AC型个体。双倍型D1在体质量、全长和体高方面显著高于双倍型D3,在体质量、体宽和体高方面显著高于双倍型D4。本研究在大口黑鲈ghrelin基因启动子区域获得的与生长性状相关的SNPs标记,可为大口黑鲈分子标记辅助育种提供帮助。

关键词：大口黑鲈 ghrelin基因 SNPs 双倍型生长

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大口黑鲈幼鱼对饲料中锰的需求量

水产学报 2023年第5期47卷 153-161页

作者：宋博文杨航冷向军徐禛姚文祥李小勤上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海海洋大学农业农村部鱼类营养与环境生态研究中心上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心

为确定大口黑鲈幼鱼对饲料中锰的需求量，在含锰5.2 mg/kg的半精制饲料中分别添加0、4、8、16、32和64 mg/kg锰(以MnSO4·H2O形式)，制成6种不同锰水平的饲料(5.2、9.6、13.5、20.7、 38.3和67.9 mg/kg)，投喂初始体重(16.00±0.07) g... 详细信息

为确定大口黑鲈幼鱼对饲料中锰的需求量，在含锰5.2 mg/kg的半精制饲料中分别添加0、4、8、16、32和64 mg/kg锰(以MnSO4·H2O形式)，制成6种不同锰水平的饲料(5.2、9.6、13.5、20.7、 38.3和67.9 mg/kg)，投喂初始体重(16.00±0.07) g的大口黑鲈幼鱼10周。结果显示，在基础饲料中添加锰，可显著提高大口黑鲈幼鱼的增重率，降低饲料系数，各组增重率与饲料系数在锰含量达到13.5 mg/kg后基本稳定。随饲料中锰含量的增加，血清T-SOD、Mn-SOD活性和全鱼、脊椎骨中的锰含量上升，并在饲料锰含量达到20.7mg/kg后趋于稳定，而血清丙二醛含量则表现为下降的趋势。全鱼铁、骨铁、骨锌和全鱼锰沉积率随饲料锰含量的增加而下降。研究表明，在半精制饲料中补充锰可以促进大口黑鲈幼鱼生长、提高饲料利用率、血清抗氧化能力、全鱼和骨锰的沉积。以增重率、饲料系数、全鱼锰和骨锰为评价指标，经折线回归分析，大口黑鲈幼鱼对饲料中锰的需求量分别为18.3、20.5、21.1和23.4 mg/kg干物质。

关键词：大口黑鲈锰生长饲料利用矿物质沉积

大口黑鲈糖稳态基因的克隆、分子特征及其营养调控的分析

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中国水产科学 2023年第5期30卷 604-616页

作者：雷彩霞宋含茹付豪谢玉净李胜杰中国水产科学研究院珠江水产研究所湖州师范学院生命科学学院

为进一步研究大口黑鲈(Micropterussalmoides)糖稳态调控特性,本研究克隆了糖稳态调控基因gp1、gp2、pepck1、pepck2、hk、pfk和g6p,分别编码878、842、635、624、918、780和338个氨基酸序列,并进行了进化树、空间分布和禁食对其基因表... 详细信息

为进一步研究大口黑鲈(Micropterussalmoides)糖稳态调控特性,本研究克隆了糖稳态调控基因gp1、gp2、pepck1、pepck2、hk、pfk和g6p,分别编码878、842、635、624、918、780和338个氨基酸序列,并进行了进化树、空间分布和禁食对其基因表达影响的分析。多序列比对和进化树分析显示,这些基因与其他脊椎动物的同源序列具有较高相似性。组织表达分析结果显示这些基因主要集中分布于肝脏和肌肉,但呈现出组织表达差异性。其中,gp1在肌肉表达量最高,肝脏次之,在脾脏表达量最低。gp2在肌肉中的mRNA水平也最高,在心脏、肝脏表达也较为丰富。pepck1主要分布在肝脏和肠,在脑、脾脏、肾脏和脂肪中分布较少。pepck2在肝脏和脑中高表达,而在脾脏和鳃中表达量最低。对于hk,其在肝脏、肌肉和心脏的mRNA水平显著高于其余组织。肝脏中g6p的表达也显著高于其余组织。除此之外,其在肌肉、肠和脂肪中分布也较为丰富。pfk的mRNA水平在肝脏和心脏最高,其次是肠和鳃。对实验大口黑鲈禁食后发现,肝脏gp2、pepck2和g6p的表达从禁食第6小时开始上调并持续到24h。而gp1、hk和pfK的表达则随禁食延长先上升后下降,并在第6小时时达到峰值。然而,肝脏pepck1基因在整个禁食阶段均趋于稳定。肌肉组织中, gp1的转录随禁食延长而持续增强,至24 h达到最高值。gp2和g6p表达均在禁食第12小时出现明显升高,并在24 h达到峰值。pepck1在禁食第0小时的mRNA水平最低,在12和24 h时最高。禁食第24小时pepck2的表达显著最高。hk和pfk则随禁食延长呈现先升后降的模式,其最高和最低值分别出现在禁食第6和第0小时。综上,本研究获得了糖稳态调控关键基因的完整编码序列,并研究了其在应对饥饿状态时的不同分子应答,研究结果将为后期进一步研究大口黑鲈糖稳态调控提供重要基础资料。

关键词：大口黑鲈糖稳态基因克隆表达分析营养调控

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大口黑鲈对饲料中酵母硒的耐受性研究

动物营养学报 2017年第6期29卷 1949-1960页

作者：李宁郑银桦吴秀峰王鑫薛敏吴立新大连海洋大学水产与生命学院大连116023 中国农业科学院饲料研究所国家水产饲料安全评价基地北京100081

本试验旨在通过研究酵母硒对大口黑鲈生长性能、血浆生化指标、组织抗氧化指标及肝脏组织结构的影响,评价大口黑鲈对饲料中酵母硒的耐受性。在基础饲料中分别添加0(Y0)、0.5(Y0.5)、2.5(Y2.5)、5.0 mg/kg(Y5.0)(以硒计)酵母硒,其中0.5 m... 详细信息

本试验旨在通过研究酵母硒对大口黑鲈生长性能、血浆生化指标、组织抗氧化指标及肝脏组织结构的影响,评价大口黑鲈对饲料中酵母硒的耐受性。在基础饲料中分别添加0(Y0)、0.5(Y0.5)、2.5(Y2.5)、5.0 mg/kg(Y5.0)(以硒计)酵母硒,其中0.5 mg/kg是硒的最高推荐剂量,2.5和5.0 mg/kg分别是最高推荐剂量(0.5 mg/kg)的5和10倍。基础饲料本底硒含量为0.76 mg/kg。选用初始体重为(12.99±0.01)g大口黑鲈,随机分为4组,每组6个重复,每个重复20尾,试验期为10周。结果表明:Y0组增重率和摄食率最低,同时其饲料系数也最低,均显著低于其余各组(P0.05)。硒日摄入量和肝脏硒含量呈显著线性相关(P大口黑鲈的肝脏都有不同程度的损伤,但添加0.5 mg/kg酵母硒对肝脏损伤有缓减作用。由上述结果可知,饲料中添加0.5 mg/kg酵母硒(总硒含量为1.29 mg/kg)对大口黑鲈具有一定的脂肪代谢促进作用和抗氧化保护功能,且对大口黑鲈是安全的。本试验条件下,综合生长性能、血浆生化指标、组织抗氧化指标及肝脏组织结构,饲料本底硒含量为0.76 mg/kg时,大口黑鲈对饲料中酵母硒的耐受剂量为0.5 mg/kg(以硒计),即为硒的最高推荐剂量,安全系数为1。鱼粉、磷虾粉等动物蛋白质源中含有较高水平的硒元素,因此在高鱼粉水产动物饲料中补充硒要慎重。

关键词：大口黑鲈酵母硒耐受性生长抗氧化组织学

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大口黑鲈饲料中适宜的淀粉源及添加水平

中国水产科学 2017年第2期24卷 317-331页

作者：刘子科陈乃松王孟乐连雪原闫春为尹佳上海海洋大学水产与生命学院

以4种淀粉,蜡质玉米淀粉(L)、高直链玉米淀粉(Z)、小麦淀粉(X)和木薯淀粉(M),分别以5%和10%的添加量配制了8种等氮和等能(CP 48%,GE 18.5 MJ/kg)的饲料(L5、L10、Z5、Z10、X5、X10、M5和M10)。用上述饲料饲养初始体重为(23.46±0.19)g... 详细信息

以4种淀粉,蜡质玉米淀粉(L)、高直链玉米淀粉(Z)、小麦淀粉(X)和木薯淀粉(M),分别以5%和10%的添加量配制了8种等氮和等能(CP 48%,GE 18.5 MJ/kg)的饲料(L5、L10、Z5、Z10、X5、X10、M5和M10)。用上述饲料饲养初始体重为(23.46±0.19)g的大口黑鲈45 d,以评定大口黑鲈饲料的适宜淀粉源及添加水平。结果显示,饲料中淀粉的添加水平和淀粉源对大口黑鲈的生长、饲料利用、体组成和非特异性免疫指标均有显著影响。随着同一种淀粉的添加量从5%升至10%,L10、X10和M10组实验鱼的特定生长率和摄食率显著降低,但饲料效率和蛋白质效率显著升高,而Z5和Z10组间的上述指标的差异不显著;L10、X10和M10组的肝体比、脏体比和肝糖原含量均显著升高,但Z5和Z10组间的脏体比差异不显著;全鱼和肝的脂肪含量及肝的蛋白质含量均显著降低;L10组的红细胞数和红细胞压积、Z10组的血清甘油三酯及X10组的红细胞压积和血清甘油三酯水平显著降低;Z10组的血清补体活性显著降低;L5、Z5、X5和M5组的餐后3~12 h的血糖水平各自低于L10、Z10、X10和M10组。不同的淀粉源在相同的添加量的情况下,Z5组的淀粉表观消化率和肝体比显著地低于L5、X5和M5组,而脂肪沉积率显著高于L5、X5和M5组;M5组的蛋白质表观消化率显著低于L5、Z5和X5组;Z10组的淀粉表观消化率、肝体比、脏体比和肝糖原含量显著低于L10、X10和M10组,而脂肪沉积率显著高于L10、X10和M10组;M10组的蛋白质表观消化率显著低于L10、Z10和X10组。饲料中淀粉的添加水平和淀粉源对大口黑鲈的摄食率、特定生长率、蛋白质消化率、脂肪沉积率、肝体比、肝糖原含量、红细胞数、血清甘油三酯含量和血清补体活性均有显著的交互作用。本研究表明,饲料的淀粉源和水平对大口黑鲈的生长、体组成、血液学指标、餐后血糖和非特异性免疫指标均有不同程度的影响,饲料中添加5%的蜡质玉米淀粉、高直链玉米淀粉、小麦淀粉和木薯淀粉均无妨碍,但添加10%的淀粉水平唯有高直链玉米淀粉较为合适。

关键词：大口黑鲈饲料淀粉源添加量生长非特异性免疫

大口黑鲈鰤鱼诺卡氏菌传代弱毒株特性及免疫效果评价

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水生生物学报 2024年第7期48卷 1120-1129页

作者：杨娜黄雷蔺凌云姚嘉赟陈静刘忆瀚陈雪兰王亿文沈锦玉潘晓艺浙江海洋大学水产学院舟山316022 浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省鱼类健康与营养重点实验室湖州市渔业环境与水产品质量安全重点实验室湖州313001

为探究鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)强毒株LY20810 F1与其传代弱毒株LY20810 F110的特性差异,比较了两个菌株的生物学特征、毒力基因序列、致病力及引起大口黑鲈免疫反应的差异,并评价了弱毒株LY20810 F110对大口黑鲈的免疫保护效... 详细信息

为探究鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)强毒株LY20810 F1与其传代弱毒株LY20810 F110的特性差异,比较了两个菌株的生物学特征、毒力基因序列、致病力及引起大口黑鲈免疫反应的差异,并评价了弱毒株LY20810 F110对大口黑鲈的免疫保护效果。结果表明,通过BHI培养基连续传代培养110代次后,菌株LY20810 F110的菌落、菌体形态发生显著变化,其生长速度较原始毒株LY20810 F1快1倍以上。通过比较两株菌的10个毒力基因序列,发现菌株LY20810 F110的SodC和ESAT6基因发生了单位点突变。致病力测试结果显示,强毒株LY20810 F1以0.1 mL 1×10^(7) cfu/mL攻毒剂量感染大口黑鲈,30d内鱼累积死亡率为100%,而传代弱毒株LY20810 F110在相同剂量下未造成鱼死亡。强毒株LY20810 F1攻毒3d后引起脾脏、头肾中IL-1β、IL-10、TNF-α、IFN-γ等炎症细胞因子显著上调,表明细菌感染引起炎症风暴。传代弱毒株LY20810 F110在感染中后期(14d和28d)诱导包括IgM、CD4-α、CD8-α、MHCI-α等8种免疫因子的上调。免疫效果评价结果显示,弱毒株LY20810 F110的注射、浸泡免疫(1×10^(8) cfu/mL)对大口黑鲈的相对保护率分别为75.0%和66.7%,有效降低了鰤鱼诺卡氏菌入侵造成大口黑鲈脾脏和头肾的病理损伤。以上结果表明,鰤鱼诺卡氏菌传代弱毒株LY20810 F110是安全有效的弱毒疫苗候选株,将为诺卡氏菌减毒疫苗的研制提供科学依据。

关键词：鰤鱼诺卡氏菌传代培养减毒疫苗免疫保护大口黑鲈

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