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一株氨氮高效降解菌的分离鉴定及培养条件优化

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生物技术 2025年第1期35卷 102-108页

作者：曾宪军刘悦高育慧郑卫国周建凯广东文科绿色科技股份有限公司研发部广东深圳518038

[目的]从景观湖水体及其底泥中分离筛选具有氨氮高效降解的菌株,以解决景观水体因氨氮浓度超标而导致的水体富营养化等问题。[方法]采用稀释涂布平板法分离筛选氨氮降解菌,利用细菌的形态特征、生理生化,结合其16S rRNA基因测序及系统... 详细信息

[目的]从景观湖水体及其底泥中分离筛选具有氨氮高效降解的菌株,以解决景观水体因氨氮浓度超标而导致的水体富营养化等问题。[方法]采用稀释涂布平板法分离筛选氨氮降解菌,利用细菌的形态特征、生理生化,结合其16S rRNA基因测序及系统发育树分析,对氨氮菌株FX1予以鉴定,通过纳氏试剂分光光度法对氨氮菌株FX1进行氨氮降解功能验证,采用单一因素试验与正交试验优化培养条件。[结果]分离得到了一株具有氨氮高效降解的菌株FX1,经过形态学和分子生物学鉴定,鉴定菌株FX1为阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae。单因素试验结果证实,该菌株最优碳源是柠檬酸钠;正交试验结果表明,菌株FX1的最优培养条件:初始pH 6.5、C/N 10、温度30℃、转速90 r/min;在此最优条件下,菌株FX1对氨氮的24 h去除率为98.15%。[结论]阴沟肠杆菌FX1具有高效降解氨氮的能力,为景观水体氨氮降解的优良菌株。

关键词：城市景观水体生物脱氮筛选分离 16S rRNA基因序列分析阴沟肠杆菌氨氮去除率生长曲线培养条件优化

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一株耐酸异养硝化真菌筛选及培养条件优化

中文科技期刊数据库（全文版）自然科学 2025年第1期 171-175页

作者：王秋宇张先文湖南农业大学生物科学技术学院湖南长沙410128

近年来,氨氮废水排放量逐年增加,同时酸性氨氮废水也呈上升趋势,因此筛选具有耐酸功能的异养硝化微生物对污水处理具有重要意义。本研究从垃圾填埋场活性污泥中筛选出具有耐酸功能的异养硝化真菌,通过形态观察和分子生物学鉴定确定菌株... 详细信息

近年来,氨氮废水排放量逐年增加,同时酸性氨氮废水也呈上升趋势,因此筛选具有耐酸功能的异养硝化微生物对污水处理具有重要意义。本研究从垃圾填埋场活性污泥中筛选出具有耐酸功能的异养硝化真菌,通过形态观察和分子生物学鉴定确定菌株为库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii),命名为OHCC-1。优化试验结果表明,菌株OHCC-1的最佳氨氮代谢培养条件是以葡萄糖为碳源,控制C/N为10,pH值5.0,初始氨氮浓度为200 mg/L,最终氨氮降解率为87.02%。本研究为规模化酸性污水处理进行了有益的探索,提供了重要信息。

关键词：异养硝化氨氮降解培养条件优化耐酸

培养条件优化和菌种选育提高雷帕霉素发酵水平

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化学工程 2011年第1期39卷 81-84页

作者：陈希杨朱湘成杨冬沈文和徐志南岑沛霖浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

研究了雷帕霉素发酵的最佳种子培养时间,发现60 h的种子液能够产生最高的发酵水平。系统地考察了发酵培养基中不同水平的碳氮源和各种无机盐对雷帕霉素发酵水平的影响,并确定最优的培养基配方。在以上优化后的条件下雷帕霉素原始菌的发... 详细信息

研究了雷帕霉素发酵的最佳种子培养时间,发现60 h的种子液能够产生最高的发酵水平。系统地考察了发酵培养基中不同水平的碳氮源和各种无机盐对雷帕霉素发酵水平的影响,并确定最优的培养基配方。在以上优化后的条件下雷帕霉素原始菌的发酵水平从未优化时95 mg/L提高到170 mg/L左右,提高幅度达到79%,取得了明显的效果。然后通过多种诱变手段,经过多轮诱变育种,筛选到最高产量为420 mg/L的一株菌株,比出发菌株提高了3倍多。

关键词：雷帕霉素免疫抑制剂培养条件优化诱变育种

一株南方红壤区杉木根际高效解钾菌的筛选、鉴定及其培养条件优化

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林业科学研究 2022年第1期35卷 172-181页

作者：赵君饶惠玲冯清玉黄伟吴承祯李键福建农林大学林学院福建福州350002 武夷学院生态与资源工程学院福建南平354300 福建省高校森林生态系统过程与经营重点实验室福建福州350002

[目的]南方红壤区杉木人工林下根际土壤存在低钾胁迫环境,通过筛选、鉴定、优化培养高效解钾菌株,能够丰富解钾微生物资源库,为林木解钾工程菌的开发提供研究基础与数据支持。[方法]从不同林龄(2,4,10,15 a)杉木人工林下根际土壤中分离... 详细信息

[目的]南方红壤区杉木人工林下根际土壤存在低钾胁迫环境,通过筛选、鉴定、优化培养高效解钾菌株,能够丰富解钾微生物资源库,为林木解钾工程菌的开发提供研究基础与数据支持。[方法]从不同林龄(2,4,10,15 a)杉木人工林下根际土壤中分离筛选出79株解钾菌,并根据其形态、生长特征选取20株优势菌株,通过测定发酵液可溶性钾含量及解钾率筛选出1株最优解钾菌株,经16S rDNA鉴定确定菌属,采用单因素实验与正交试验对该菌株的培养基组分与培养条件进行优化。[结果](1)初筛获得的20株测试菌株中,共13株菌株解钾率为正值,即有效分解钾长石的解钾菌占65%。(2)经鉴定,芽孢杆菌属(Bacillus altitudinis)的JK13为最优解钾菌,其发酵液可溶性钾含量为81.06μg·mL^(−1),解钾率为60.49%,显著高于其他菌株(P培养温度为35℃时菌液OD600值显著高于CK(P优化后以0.5%甘露醇、1.5%酵母粉为最适培养基组分,培养条件在弱碱、高温下能够显著提高菌株生长量,研究结果能够为改善林木钾素利用提供菌种资源与生物工程支持。

关键词：杉木解钾菌筛选与鉴定培养条件优化

假交替单胞菌LJ1菌株产褐藻胶裂解酶的培养条件优化及酶学性质

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微生物学报 2009年第8期49卷 1086-1094页

作者：马悦欣纪涛李慧琼陈炜高嵩刘声锋大连水产学院辽宁省省级高校水生生物学重点实验室大连116023

【目的】为了优化LJ1菌株的培养条件使之产生高活性的胞外褐藻胶裂解酶。【方法】通过富集培养技术从海带筛选到一株褐藻胶裂解酶产生菌LJ1,依据表型特征、脂肪酸组成分析及16SrRNA基因序列分析对该菌株进行鉴定。通过单因子和正交试验... 详细信息

【目的】为了优化LJ1菌株的培养条件使之产生高活性的胞外褐藻胶裂解酶。【方法】通过富集培养技术从海带筛选到一株褐藻胶裂解酶产生菌LJ1,依据表型特征、脂肪酸组成分析及16SrRNA基因序列分析对该菌株进行鉴定。通过单因子和正交试验对LJ1菌株产胞外褐藻胶裂解酶的培养条件进行了优化。【结果】LJ1菌株属于假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)。该菌株产酶的最佳培养基组成为:褐藻胶3g/L、(NH4)2SO43g/L、NaCl20g/L、KH2PO40.1g/L、CaCl20.1g/L;最佳培养条件为:250mL三角烧瓶中装液量25mL、接种量3%、摇瓶转速150r/min、pH7.5、培养温度为28℃、培养时间为24h。LJ1菌株所产褐藻胶裂解酶的最适温度为40℃,最适pH7.6,最适NaCl浓度为0.3mol/L。1mol/L金属离子Mg2+对酶活力有明显的促进作用,而Co2+和Zn2+对酶活力有较强的抑制作用。【结论】LJ1菌株是Pseudoalteromonas新的胞外褐藻胶裂解酶产生菌,在最佳培养条件下,该菌株的酶活力提高了66%。

关键词：褐藻胶裂解酶菌种筛选培养条件优化酶学特性

1株产烟酸羟基化酶海洋细菌H9的分离鉴定及培养条件优化

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食品科学 2017年第10期38卷 130-136页

作者：陈国忠郭秋翠谭其秀武硕军刘炼强冯志彬鲁东大学生命科学学院山东烟台264025

利用96孔板和紫外显影相结合的定向快速筛选方法,从烟台渤海湾采集的腐败鱼尸上分离筛选得到1株高产烟酸羟基化酶的菌株H9,通过形态、生理生化特征和16S r DNA系统发育分析鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida),对其产酶培养条件进... 详细信息

利用96孔板和紫外显影相结合的定向快速筛选方法,从烟台渤海湾采集的腐败鱼尸上分离筛选得到1株高产烟酸羟基化酶的菌株H9,通过形态、生理生化特征和16S r DNA系统发育分析鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida),对其产酶培养条件进行优化,最适培养基和培养条件为:可溶性淀粉15 g/L、玉米浆15 g/L、烟酸10 g/L、K_2HPO_4 1.0 g/L、初始pH 7.0、培养温度25℃、接种量7%、500 mL三角瓶装液量50 mL。优化后烟酸羟基化酶活力达到0.37 U/mL,比优化前提高了68%,采用静息细胞转化生产6-羟基烟酸产率达到124.77 g/L,具有工业化生产6-羟基烟酸的应用前景。

关键词：烟酸 6-羟基烟酸恶臭假单胞菌烟酸羟基化酶培养条件优化

同时降解两种真菌毒素的食品级重组酵母培养条件优化

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食品与发酵工业 2021年第21期47卷 86-93页

作者：夏雨吴梓凤胡修玉包红朵何瑞秋杨煜程倩倩王周平江南大学食品学院江苏无锡214122 中国生物发酵产业协会北京100833 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014

为提高能同时降解黄曲霉毒素B_(1)和玉米赤霉烯酮的食品级重组乳酸克鲁维酵母GG799(pKLAC1-ZPF1)的培养生物量,对该菌进行了高密度培养条件优化。选择并试验了几种基础培养基的摇瓶培养效果,在此基础上采用单因素试验和响应面试验对该... 详细信息

为提高能同时降解黄曲霉毒素B_(1)和玉米赤霉烯酮的食品级重组乳酸克鲁维酵母GG799(pKLAC1-ZPF1)的培养生物量,对该菌进行了高密度培养条件优化。选择并试验了几种基础培养基的摇瓶培养效果,在此基础上采用单因素试验和响应面试验对该菌的培养基成分进行优化,采用单因素试验和正交试验对该菌的培养工艺参数进行优化,最后以5 L发酵罐扩大培养来验证优化结果。结果表明摇瓶优化的培养基成分为:葡萄糖20.41 g/L、蛋白胨30.46 g/L、酵母提取物24.73 g/L、KH_(2)PO_(4)4.48 g/L、MgSO_(4)0.65 g/L,在此条件下获得生物量是对照的5.5倍;优化的培养参数为:培养温度26℃、转速220 r/min、初始pH 4.5,在此条件下获得生物量是对照的7.5倍。按照优化的培养基和培养参数进行发酵罐扩大培养,获得的生物量为(34.05±3.34)g/L,是摇瓶培养对照的29.6倍。研究结果为食品级重组乳酸克鲁维酵母工业化应用提供了重要理论依据和参考数据。

关键词：食品级重组酵母乳酸克鲁维酵母培养条件优化黄曲霉毒素B_(1) 玉米赤霉烯酮

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耐热赖氨酸氨肽酶毕赤酵母表达及培养条件优化

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食品与生物技术学报 2018年第6期37卷 589-594页

作者：刘强田亚平江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

为实现耐热耐氨酸氨肽酶的异源表达,通过PCR扩增技术从Pseudomonas aeruginosa NJ-814基因组中克隆获得耐热的赖氨肽酶基因(PLAP),构建重组载体p PIC9K-PLAP,并最终实现在毕赤酵母GS115中的分泌表达。对重组毕赤酵母进行初步筛选,单因... 详细信息

为实现耐热耐氨酸氨肽酶的异源表达,通过PCR扩增技术从Pseudomonas aeruginosa NJ-814基因组中克隆获得耐热的赖氨肽酶基因(PLAP),构建重组载体p PIC9K-PLAP,并最终实现在毕赤酵母GS115中的分泌表达。对重组毕赤酵母进行初步筛选,单因素实验优化获得重组毕赤酵母最佳诱导条件如下:诱导培养基初始pH为5.0、甲醇质量浓度1.5 g/dL、诱导温度28℃、装液量25 mL/250 mL、Co^(2+)浓度50μmol/mL、山梨醇添加量9 g/L。在最优条件下,氨肽酶酶活提高了5.2倍,比酶活2.74 U/mg。实验结果表明:PLAP基因已成功转入毕赤酵母GS115并获得表达。

关键词：铜绿假单胞杆菌耐热氨肽酶基因克隆培养条件优化

中温大曲产淀粉酶菌株的筛选鉴定及培养条件优化

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中国酿造 2023年第1期42卷 78-85页

作者：胡晓龙冯大鸿田瑞杰王永亮曹满堂魏涛韩素娜沈祥坤何培新郑州轻工业大学食品与生物工程学院河南郑州450001 贾湖酒业集团有限责任公司河南漯河462400 河南仰韶酒业有限公司博士后科研工作站河南三门峡472400 河南省食品工业科学研究所有限公司河南郑州450053

为获得高产淀粉酶菌株,丰富淀粉酶生产菌株资源,该研究以中温大曲为样品,利用淀粉水解圈法初筛、摇瓶发酵复筛得到高产淀粉酶菌株,结合菌落形态观察、革兰氏染色和16S rRNA同源序列分析对其进行菌种鉴定,通过单因素试验、Plackett-Burma... 详细信息

为获得高产淀粉酶菌株,丰富淀粉酶生产菌株资源,该研究以中温大曲为样品,利用淀粉水解圈法初筛、摇瓶发酵复筛得到高产淀粉酶菌株,结合菌落形态观察、革兰氏染色和16S rRNA同源序列分析对其进行菌种鉴定,通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验确定其产淀粉酶的最佳培养条件。结果表明,共分离筛选得到6株产淀粉酶菌株,其中一株产淀粉酶活最高的菌株(编号为DQ47)被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其最佳培养条件为:可溶性淀粉60 g/L,酵母粉37 g/L,发酵温度39℃,装液量85 mL/250 mL,转速175 r/min,初始pH值6,接种量3%。在此优化条件下,淀粉酶活力为8158.23 U/mL,是优化前的14.75倍。

关键词：中温大曲淀粉酶枯草芽孢杆菌培养条件优化响应面法