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地中海实蝇幼虫分子鉴定

昆虫知识 2007年第4期44卷 562-566页

作者：叶军周国梁易建平吴家教阮长浩梁帆郑建中王文兵上海出入境检验检疫局上海200135 广东出入境检验检疫局广州510623 江苏大学生命科学院镇江212013

通过对从秘鲁进口的葡萄中截获实蝇类幼虫进行ITS区和线粒体COⅠ,COⅡ,COⅢ、ND5基因序列的扩增和测序,并与GenBank中对应的序列进行比对,结果表明,截获样品ITS区序列和地中海实蝇Ceratitis capitata(Wiedemann)同源性为95·16%(其中ITS... 详细信息

通过对从秘鲁进口的葡萄中截获实蝇类幼虫进行ITS区和线粒体COⅠ,COⅡ,COⅢ、ND5基因序列的扩增和测序,并与GenBank中对应的序列进行比对,结果表明,截获样品ITS区序列和地中海实蝇Ceratitis capitata(Wiedemann)同源性为95·16%(其中ITS1为99·52%,ITS2为86·2%),线粒体COⅠ,COⅡ,COⅢ,ND5基因序列和地中海实蝇***同源性为100%,99·9%,99·5%,99·8%;基于COⅠ序列构建的系统发育树中,幼虫样品和地中海实蝇最为接近。根据序列分析和系统发育关系分析的结果,将截获的实蝇类幼虫鉴定为地中海实蝇***。

关键词：地中海实蝇幼虫序列分析系统发育关系鉴定

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地中海实蝇地理种群遗传分化研究

环境昆虫学报 2010年第4期32卷 469-475页

作者：林丽莉曾玲梁广文吴佳教顾渝娟刘海军胡学难华南农业大学昆虫生态室广州510642 广东出入境检验检疫局广州510623

以mtDNA的COⅠ基因的部分序列作为分子标记,研究了来自安哥拉、黎巴嫩、刚果共和国、尼日利亚、贝宁、多哥、加纳、科特迪瓦、南非、埃及、法国、约旦、秘鲁、智利、美国佛罗里达和美国夏威夷等16个国家和地区共75个个体的地中海实蝇Cer... 详细信息

以mtDNA的COⅠ基因的部分序列作为分子标记,研究了来自安哥拉、黎巴嫩、刚果共和国、尼日利亚、贝宁、多哥、加纳、科特迪瓦、南非、埃及、法国、约旦、秘鲁、智利、美国佛罗里达和美国夏威夷等16个国家和地区共75个个体的地中海实蝇Ceratitis capitata地理种群序列特征和单倍型特征,并分析了各种群间的遗传分化水平和进化关系,结果表明,在供试的样品中发现单倍型的数目是29,其中有5种为共享倍型。地中海实蝇各地理种群的遗传多态性水平差异较大,总体遗传距离D等于0.007。非洲南撒哈拉区(安哥拉、刚果、尼日利亚、贝宁、多哥、加纳、科特迪瓦)的种群的单倍型数、单倍型百分比和群内遗传距离等遗传多态性参数值都高于其它供试地区,多样性明显较其他地区丰富。

关键词：地中海实蝇 COI基因线粒体DNA 地理种群遗传分化

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地中海实蝇与植物检疫

昆虫学报 2000年第S1期43卷 191-194页

作者：姚文国陈洪俊国家出入境检验检疫局北京100020 北京出入境检验检疫局北京100029

地中海实蝇Ceratitiscapitata (Wiedemann)是国际上十分重要的检疫性害虫 ,也是我国植物检疫工作中重要防御的检疫性害虫之一 ,近年来 ,从我国口岸检疫中共截获地中海实蝇 12次。这充分表明了其潜在的危险性。为此 ,我国采取了一系列严... 详细信息

地中海实蝇Ceratitiscapitata (Wiedemann)是国际上十分重要的检疫性害虫 ,也是我国植物检疫工作中重要防御的检疫性害虫之一 ,近年来 ,从我国口岸检疫中共截获地中海实蝇 12次。这充分表明了其潜在的危险性。为此 ,我国采取了一系列严格的检疫措施 ,有效地防止地中海实蝇传入。同时 ,为适应改革开放和国际贸易的发展 ,对检疫政策进行了调整 ,积极开展对水果、蔬菜的有害生物风险分析 (PRA)研究工作 ,根据国际标准 ,划定非疫区范围 ,使植物检疫对贸易的不利影响降到最低限度 ,以促进水果。

关键词：地中海实蝇检疫

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地中海实蝇的检疫及其检验鉴定技术

植物检疫 1998年第4期12卷 233-237页

作者：刘瑞祥张剑英汪万春洪琼华首都机场动植物检疫局

地中海实蝇的检疫及其检验鉴定技术刘瑞祥，张剑英，汪万春，洪琼华（首都机场动植物检疫局北京１００６２１）北京动植物检疫局自１９９４年１１月至１９９７年９月，先后４次在首都机场截留国际旅客携带的甜橙、石榴、芒果中发现地中... 详细信息

地中海实蝇的检疫及其检验鉴定技术刘瑞祥，张剑英，汪万春，洪琼华（首都机场动植物检疫局北京１００６２１）北京动植物检疫局自１９９４年１１月至１９９７年９月，先后４次在首都机场截留国际旅客携带的甜橙、石榴、芒果中发现地中海实蝇Ｃｅｒａｔｉｔｉｓ（Ｃ．）ｃ...

关键词：地中海实蝇植物检疫检验鉴定技术

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地中海实蝇与实蝇属间的竞争

植物检疫 1990年第5期4卷 379-380页

作者：梁广勤广州动植物枪疫所

实蝇属间的竞争,这个问题早已为一些昆虫学家所注意,并从一些现象中感觉到竞争的存在。一、特殊的竞争一个种群,能否在异地立足,当然要受多种因素的影响,似乎是与其生态学或生物学有着重要的关系,也与对某一地区生物气候学的适应有关。

关键词：地中海实蝇寡鬃实蝇生物气候学种群数量危险性害虫 dorsalis 诱剂昆虫学家主要寄主发生数量

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地中海实蝇及其在美国的发生

植物检疫 1993年第1期7卷 8-12页

作者：梁广勤广州动植物检疫局

地中海实蝇 Ceratitis capitata(Wied.),是世界上公认最具破坏性的水果、蔬菜害虫,其寄主达400多种。此虫在16～32℃和75％～80％之间的相对湿度条件下,世代可连续发生,完成一个世代需622日度。成虫的发育起点为9.7℃;卵的发育起点是11... 详细信息

地中海实蝇 Ceratitis capitata(Wied.),是世界上公认最具破坏性的水果、蔬菜害虫,其寄主达400多种。此虫在16～32℃和75％～80％之间的相对湿度条件下,世代可连续发生,完成一个世代需622日度。成虫的发育起点为9.7℃;卵的发育起点是11℃;幼虫在5℃时停止发育,在平均温度为25～26℃时,幼虫期6～10天;蛹的发育起点为13℃,在26℃下蛹期6天,低湿低温蛹的死亡率高。地中海实蝇于1910年传进美国的夏威夷。1929年传入美国本土:1929年在佛罗里达州发现,1966年得克萨斯州有发生,1975午此虫传到加利福尼亚州。在美国加州,自1975年开始,对此虫进行过11次根除行动,但尚未成功,仍在不断发生。1992年1月,在加州靠近 Westminster 县的 Los Alemitos 有捕获到地中海实蝇的报道。同年7月,加州圣何塞亦捕获到此虫。

关键词：地中海实蝇发生美国植物检疫

地中海实蝇及其近缘种和桔小实蝇复合种基因芯片的研制及应用

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地中海实蝇及其近缘种和桔小实蝇复合种基因芯片的研制及应用

作者：李文芬湖南师范大学

学位级别：硕士

检疫性实蝇的鉴定是国际果蔬贸易中最突出的技术问题之一。我国农业部最新颁布的进境植物检疫性有害生物名录将小条实蝇属Ceratitis、果实蝇属Bactrocera列入其中。目前,实蝇的口岸检疫鉴定以传统的形态学鉴定为主,此方法对鉴定者经验... 详细信息

检疫性实蝇的鉴定是国际果蔬贸易中最突出的技术问题之一。我国农业部最新颁布的进境植物检疫性有害生物名录将小条实蝇属Ceratitis、果实蝇属Bactrocera列入其中。目前,实蝇的口岸检疫鉴定以传统的形态学鉴定为主,此方法对鉴定者经验依赖性强,受实蝇虫态、饲养周期等的限制。常规分子生物学的方法,如PCR、探针杂交等检测技术只能一次对一种实蝇进行检测,不能满足实际检测的需要。基因芯片技术不但可以弥补上述方法自动化程度低、检测分子数量少和低通量等不足之处,而且能大大提高检测效率。本研究应用基因芯片技术,建立了地中海实蝇***及其近缘种和桔小实蝇***复合种两种基因芯片,用于地中海实蝇三个近缘种和桔小实蝇五个复合种的鉴定,同时具有小条实蝇属、果实蝇属实蝇初筛的功能。本研究获得了如下主要结果:1.地中海实蝇及其近缘种和桔小实蝇复合种基因芯片的制备选择线粒体DNA(mtDNA)细胞色素氧化酶Ⅰ基因(COI)为分子标记基因,根据Genbank发表的实蝇科昆虫mtDNA-COI序列,运用DNAstar软件,分析基因序列间的差异性,先后设计合成通用引物2对。在通用引物扩增区间内,设计了检测探针16条,分别是实蝇科通用探针1条,小条实蝇属通用探针1条,果实蝇属通用探针1条,桔小实蝇亚属通用探针1条,地中海实蝇、芒果小条实蝇***和纳塔尔小条实蝇***近缘种探针2条和种特异探针4条,桔小实蝇、木瓜实蝇***、杨桃实蝇***、菲律宾实蝇***、芒果实蝇***等复合种探针6条;设计了质控探针3条,分别是定位点探针、阳性质控探针和阴性质控探针各1条。将探针按照相应阵列点样至醛基化基片,用NANO-PLOTTER 2芯片点样仪分别点样,制备出地中海实蝇及其近缘种芯片和桔小实蝇复合种芯片两种检测芯片。2.地中海实蝇及其近缘种和桔小实蝇复合种基因芯片杂交条件的优化芯片杂交条件的优化主要包括芯片杂交体系模板DNA浓度(0.09ng/μL,0.18ng/μL,0.45ng/μL,0.9ng/μL)、杂交时间(1h,2h,6h)、杂交液浓度(0.5×SSPE,2%SDS;1×SSPE,2%SDS;5×SSPE,2%SDS;7.5×SSPE,2%SDS;10×SSPE,2%SDS;3×Blocking)和杂交温度(42℃,44℃,46℃)的优化。筛选出当模板DNA浓度为0.9ng/μL;杂交时间3h;杂交液浓度为:10×SSPE,2%SDS;杂交温度为46℃时,能获得较好的杂交信号。3.地中海实蝇及其近缘种和桔小实蝇复合种两种基因芯片的初步应用用制备好的地中海实蝇及其近缘种基因芯片检测了地中海实蝇(不同虫态和地理种)、纳塔尔小条实蝇和芒果小条实蝇;用桔小实蝇复合种基因芯片检测了杨桃实蝇(不同虫态)、桔小实蝇、木瓜实蝇、菲律宾实蝇、芒果实蝇,两种芯片的检测结果与常规形态学鉴定结果完全吻合。结果表明两种基因芯片可以作为实蝇快速检测的一种重要手段。

关键词：实蝇科地中海实蝇桔小实蝇近缘种复合种基因芯片分类鉴定

关于地中海实蝇起源、扩散和定殖的分子遗传学研究概述

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植物检疫 1998年第1期12卷 46-51页

作者：陈宏宾州大学昆虫系

分子遗传学技术已用于分析研究地中海实蝇的种群结构，为该害虫的检疫与防治提供了依据。本文综述了有关文献，介绍了一些正在进行的与检疫有关的研究工作，并对分子遗传学技术在研究分析地中海实蝇起源。

关键词：地中海实蝇起源扩散定殖分子遗传学检疫

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实时荧光PCR法快速检测地中海实蝇的研究

新疆农业科学 2016年第6期53卷 1107-1113页

作者：李京张祥林罗明李亚伟王羽中张小菊新疆农业大学农学院乌鲁木齐830052 新疆出入境检验检疫局乌鲁木齐830063

【目的】设计用于扩增地中海实蝇的特异性引物,建立快速、灵敏检测地中海实蝇的实时荧光PCR方法。【方法】采用实蝇科昆虫线粒体DNA COI基因的通用引物扩增地中海实蝇以及其它三种供试实蝇的DNA片段,经测序、比对分析,设计出扩增地中海... 详细信息

【目的】设计用于扩增地中海实蝇的特异性引物,建立快速、灵敏检测地中海实蝇的实时荧光PCR方法。【方法】采用实蝇科昆虫线粒体DNA COI基因的通用引物扩增地中海实蝇以及其它三种供试实蝇的DNA片段,经测序、比对分析,设计出扩增地中海实蝇的特异性引物,用SYBR Green实时荧光PCR方法验证该引物的特异性与灵敏度。【结果】设计的引物对DZH-F/DZH-R能特异性检测出地中海实蝇,扩增产物的溶解曲线峰值Tm为79.2。该对引物检测地中海实蝇的灵敏度为10-3ng/μL。【结论】所建立的SYBR Green实时荧光PCR方法检测地中海实蝇特异性强、灵敏度高。

关键词：地中海实蝇 COI基因实时荧光PCR 快速检测