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抑制变形杆菌的干酪乳杆菌LDJ主要抑菌物质分析

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湖南农业科学 2024年第2期 6-9页

作者：许丽娟吴海雁喻孟元高帅帅王玉梅吴民熙王震吴迎奔湖南省微生物研究院湖南长沙410009 湖南科美洁环保科技有限公司湖南长沙410000 长沙市生物消毒除臭技术创新中心湖南长沙410000

干酪乳杆菌LDJ是一株能抑制变形杆菌生长的优良菌株。为了探究干酪乳杆菌LDJ无细胞上清液的抑菌效果,采用牛津杯法测定了不同培养时间的无细胞上清液对变形杆菌的抑菌能力,发酵时间在0~4 h时无细胞上清液无抑菌能力,发酵至8 h时抑菌能... 详细信息

干酪乳杆菌LDJ是一株能抑制变形杆菌生长的优良菌株。为了探究干酪乳杆菌LDJ无细胞上清液的抑菌效果,采用牛津杯法测定了不同培养时间的无细胞上清液对变形杆菌的抑菌能力,发酵时间在0~4 h时无细胞上清液无抑菌能力,发酵至8 h时抑菌能力逐步上升,发酵时间在24~48 h时无细胞上清液抑菌能力趋于平稳;其中,发酵时间在36 h时,抑菌圈直径最大,为20.48 mm。干酪乳杆菌LDJ无细胞上清液中抑菌物质的理化特性研究结果表明:该抑菌物质对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌和李斯特菌都有不同程度的抑制作用;无细胞上清液经40~100℃处理30 min,仍有良好的抑菌活性;pH值在3~6范围内抑菌物质有良好的抑菌效果,在中性及碱性条件下则没有抑菌作用;不同酶处理对无细胞上清液的抑菌效果有不同程度的影响。因此,推测其抑菌有效成分可能为肽类及有机酸。

关键词：干酪乳杆菌变形杆菌抑菌活性抑菌物质

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微塑料对变形杆菌生物膜生长发育的影响

环境科学 2022年第3期43卷 1455-1462页

作者：陶辉戚怡婷于多杨兰顾颖厉彦辉河海大学浅水湖泊综合治理与资源开发教育部重点实验室南京210098 河海大学环境学院南京210098

微塑料对生物膜的影响现阶段主要集中于对成熟生物膜群落组成结构变化的研究,缺乏对不同发育阶段生物膜的研究.为探究微塑料对不同发育阶段生物膜的影响,选用环境中广泛存在的变形杆菌和1μm聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)作为研究对象,通过暴... 详细信息

微塑料对生物膜的影响现阶段主要集中于对成熟生物膜群落组成结构变化的研究,缺乏对不同发育阶段生物膜的研究.为探究微塑料对不同发育阶段生物膜的影响,选用环境中广泛存在的变形杆菌和1μm聚苯乙烯微塑料(PS-MPs)作为研究对象,通过暴露实验研究PS-MPs对生物膜生物量、胞外聚合物(EPS)组成和胞外酶活性的影响.结果表明,PS-MPs对不同阶段生物膜的影响存在显著差异,其抑制效应随生物膜的发育显著减轻.不同生长发育阶段的生物膜对微塑料敏感度不同.可逆附着期生物膜EPS组成、活性氧(ROS)生成和胞外酶活性的抑制效应临界浓度(NOEC)明显低于其他发育阶段,但总抗氧化能力(T-AOC)和乳酸脱氢酶(LDH)活性NOEC值与其他阶段相当.这可能是ROS介导的蛋白质氧化的结果,其他阶段生物膜较为完整的EPS可以减少但不会完全消除这种作用,说明PS-MPs对生物膜存在低毒性作用.

关键词：微塑料(MPs) 变形杆菌生物膜发育阶段胞外聚合物(EPS) 酶活性

1株新的变形杆菌噬菌体的分离、鉴定与生物学特性分析

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食品科学 2023年第18期44卷 214-222页

作者：苏雅航侯忠余寇肖迪刘爽朱成林陈娟刀筱芳唐俊妮西南民族大学食品科学与技术学院四川成都610041 西南民族大学青藏高原研究院青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室四川成都610041

目的:对1株新的变形杆菌(Proteus)噬菌体进行分离、鉴定与生物学特性及基因组分析。方法:将实验室从牦牛屠宰环节中分离到的菌株纯培养后,对其DNA提取进行16S rRNA测序,鉴定获得宿主菌,采集四川成都牦牛屠宰场环境污水,以获得的宿主菌... 详细信息

目的:对1株新的变形杆菌(Proteus)噬菌体进行分离、鉴定与生物学特性及基因组分析。方法:将实验室从牦牛屠宰环节中分离到的菌株纯培养后,对其DNA提取进行16S rRNA测序,鉴定获得宿主菌,采集四川成都牦牛屠宰场环境污水,以获得的宿主菌进行噬菌体分离;运用双层琼脂平板法进行噬菌体的分离纯化,测定噬菌体的最佳感染复数、一步生长曲线和噬菌体耐受性等;通过磷酸负染、透射电镜观察噬菌体的形态;采用试剂盒提取噬菌体全基因组DNA,使用Illumina MiSeq测序平台进行噬菌体全基因组测序,对噬菌体全基因组序列进行组装、注释和基因组学分析。结果:从67株分离菌株中鉴定出10株Proteus,并从污水中分离得到1株可裂解变形杆菌和粪肠球菌(Enterococcus faecalis)并且裂解性较强的噬菌体,命名为Proteus phage PV66;其最佳感染复数为0.1,一步生长曲线结果显示,感染宿主菌的潜伏期约为10 min,裂解期约为80 min,平均裂解量为321 PFU/cell;耐受pH值范围为3~12,耐受温度为65℃。电镜观察该噬菌体为C3形态噬菌体,其头部长(140±1)nm、宽(54±2)nm,尾部长为(36±1)nm。基因组测序结果表明PV66全序列长度为90 492 bp,系统发育树分析发现该噬菌体与奇异变形杆菌(P. mirabilis)噬菌体和克诺罗杆菌(Cronobacter)噬菌体同源性较高,与non-Kuravirus属处于同一分支。结论:本研究分离到1株新的变形杆菌噬菌体并具有良好的应用潜力,为进一步开发噬菌体类新型抗菌剂提供基础,同时也丰富了变形杆菌噬菌体的数据库。

关键词：变形杆菌噬菌体生物学特性基因组分析

百里香精油微胶囊对摩根氏菌和变形杆菌产组胺机制的影响

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食品科学 2020年第19期41卷 9-16页

作者：于红红吴明颖王庆玲董娟卢士玲石河子大学食品学院新疆石河子832000

本实验研究百里香精油微胶囊对产组胺的摩根氏菌ND和变形杆菌R3的生长、基因表达情况以及组胺积累量的影响。利用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应分析供试菌在百里香精油微胶囊作用下的组氨酸脱羧途径相关基因的表达情况,采用高效液... 详细信息

本实验研究百里香精油微胶囊对产组胺的摩根氏菌ND和变形杆菌R3的生长、基因表达情况以及组胺积累量的影响。利用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应分析供试菌在百里香精油微胶囊作用下的组氨酸脱羧途径相关基因的表达情况,采用高效液相色谱仪检测供试菌培养48 h期间的组胺积累量。结果表明,百里香精油微胶囊对两种供试菌有较强的抑菌活性,对摩根氏菌ND和变形杆菌R3的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)分别为1.56 mg/mL和0.78 mg/mL。百里香精油微胶囊可以通过抑制组氨酸脱羧酶(histidine decarboxylase,HDC)簇中HDC基因hdcA和组氨酸/组胺抗逆转录酶基因hdcP的表达从而明显减少组胺的积累。当百里香精油微胶囊的添加量为MIC时,可使摩根氏菌ND组胺积累量降低61.08%,变形杆菌R3组胺积累量降低55.89%。

关键词：百里香精油微胶囊摩根氏菌变形杆菌组胺组氨酸脱羧酶基因表达

临床分离变形杆菌不典型第1类整合子结构分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第6期38卷 440-445页

作者：魏取好肖林林胡庆丰李万翔刘维薇上海市奉贤区中心医院检验科 201499 浙江省人民医院检验中心杭州310014 同济大学附属上海市第十人民医院检验科 200072

目的确定临床分离变形杆菌中不典型第1类整合子的结构。方法在26株第1类整合酶基因阳性可变区扩增失败的变形杆菌临床分离株中，选取6株通过反向PCR扩增第1类整合酶基因周围DNA片段，PCR产物测序结果通过BLAST进行比对分析，确定同源目... 详细信息

目的确定临床分离变形杆菌中不典型第1类整合子的结构。方法在26株第1类整合酶基因阳性可变区扩增失败的变形杆菌临床分离株中，选取6株通过反向PCR扩增第1类整合酶基因周围DNA片段，PCR产物测序结果通过BLAST进行比对分析，确定同源目标序列后，查看GenBank该提取码对应序列文件靶序列周围序列，再根据周围序列设计合成引物进行重叠PCR并测序验证。结果通过反向PCR及重叠PCR测序分析，26株变形杆菌临床分离株中，25株细菌第1类整合子可变区结构全部或部分确定，其中22株细菌第1类整合子可变区结构为estX-psp-aadA2-cmlA1-aadA1a-qacI-tnpA-sul3，另3株第1类整合子可变区分别为estX-psp-aadA2-cmlA1、dfrA14、IS26，均缺失3′保守区。结论反向PCR可用于临床菌株中不典型第1类整合子结构分析，在临床分离变形杆菌中首次检出基因盒psp及基因盒组合estX-psp-aadA2-cmlA1-aadA1a-qacI-tnpA-sul3、estX-psp-aadA2-cmlA1。

关键词：整合子基因盒反向PCR 耐药性变形杆菌

减毒耐药变形杆菌对慢性乙型肝炎患者外周血树突细胞CD80、CD86表达的影响

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南方医科大学学报 2009年第4期29卷 801-803页

作者：王鹏舒斯云胡艳群南方医科大学江都医院广东广州510450 南方医科大学珠江医院广东广州510282

目的观察减毒耐药变形杆菌对慢性乙型肝炎(HBV)患者和健康人DC细胞表面表达的CD80、CD86的影响。方法分离慢性HBV患者和健康人外周血单个核细胞,并对树突状细胞进行体外定向诱导分化和培养,FACS检测DC细胞表面分子的表达。结果在加入减... 详细信息

目的观察减毒耐药变形杆菌对慢性乙型肝炎(HBV)患者和健康人DC细胞表面表达的CD80、CD86的影响。方法分离慢性HBV患者和健康人外周血单个核细胞,并对树突状细胞进行体外定向诱导分化和培养,FACS检测DC细胞表面分子的表达。结果在加入减毒耐药变形杆菌共培养后,慢性乙肝病人CD80,CD86的表达率显著增加(P=0.000,P=0.000),而健康人的CD80、CD86表达阳性百分率改变不显著(P=0.185,P=0.118)。结论减毒耐药变形杆菌能够显著增加慢性乙肝病人外周血中树突细胞CD80和CD86阳性细胞百分率,对正常人外周血中树突细胞CD80和CD86表达的阳性细胞百分率并不增加。

关键词：变形杆菌乙型肝炎 CD80 CD86

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变形杆菌质粒介导的喹诺酮耐药基因的检测

临床检验杂志 2008年第2期26卷 93-95页

作者：陈晓莉李涛徐元宏黄颖储洁熊自忠安徽医科大学临床检验诊断学教研室合肥230022 安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 安徽医科大学第一附属医院传染科合肥230022

目的了解临床分离的变形杆菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因(qnr基因)存在情况。方法用PCR检测对146株变形杆菌的qnr基因。药敏试验用M-H肉汤微量稀释法。结果146株变形杆菌中有3株检出qnr基因:分别为qnrA、qnrB2、qnrS1,其中有1株同时携带... 详细信息

目的了解临床分离的变形杆菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因(qnr基因)存在情况。方法用PCR检测对146株变形杆菌的qnr基因。药敏试验用M-H肉汤微量稀释法。结果146株变形杆菌中有3株检出qnr基因:分别为qnrA、qnrB2、qnrS1,其中有1株同时携带qnrB2和qnrS1。qnrB2在第259位碱基发生C→A(精氨酸→丝氨酸)突变,3种qnr基因序列已在基因库注册,授权号:EF488761,EF488762,EF501989。3株qnr基因阳性株中2株为产ESBLs菌株。结论qnr基因在变形杆菌中的携带率较低。

关键词：喹诺酮耐药基因变形杆菌喹诺酮类耐药

变形杆菌环介导等温扩增检测法的可视化方法的比较

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河北农业大学学报 2016年第3期39卷 73-77,82页

作者：申培立王羽李志辉郭梦冉马晓燕张伟马雯李英军檀建新河北农业大学食品科技学院/河北省农产品加工工程技术中心河北保定071001 河北农业大学理工学院河北黄骅061100

通过比较现有几种可视化检测环介导等温扩增反应产物的方法,建立一种可视化检测变形杆菌的方法。利用已有的LAMP检测变形杆菌的方法作为出发检测体系,比较了焦磷酸镁反应沉淀观察法和分别单独添加核酸染料SYBR Green I、孔雀绿(Malachit... 详细信息

通过比较现有几种可视化检测环介导等温扩增反应产物的方法,建立一种可视化检测变形杆菌的方法。利用已有的LAMP检测变形杆菌的方法作为出发检测体系,比较了焦磷酸镁反应沉淀观察法和分别单独添加核酸染料SYBR Green I、孔雀绿(Malachite Green)、钙黄绿素-氯化锰(Calcein-MnCl2)的可视化检测方法,结果显示,焦磷酸镁沉淀的指示效果较差,SYBR Green I法会造成实验场所的交叉污染,孔雀绿法指示反应不够灵敏,钙黄绿素-氯化锰法综合考虑较优;并证明该方法用于可视化LAMP检测变形杆菌,具有良好的特异性,灵敏度达到4.8CFU/mL。试验证明钙黄绿素-氯化锰法是一种较优的LAMP可视化检测法。

关键词：环介导等温扩增可视化检测变形杆菌

变形杆菌的分离鉴定及其毒力与耐药相关基因检测

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畜牧与兽医 2017年第12期49卷 97-101页

作者：路振香孙坤郭伟娜刘畅朱元招程金龙安徽科技学院动物科学学院安徽凤阳233100 江苏优仕生物科技发展有限公司江苏宿迁223831

将从病死的牛、猪和鹅肝脏内分离的3株菌分别进行分离纯化、革兰染色镜检、生化试验和药敏试验,对其16S rRNA基因进行PCR扩增、测序、同源性比对,测定其毒力和耐药相关基因。结果显示,3株均为革兰阴性杆菌。16S rRNA基因序列同源性分析... 详细信息

将从病死的牛、猪和鹅肝脏内分离的3株菌分别进行分离纯化、革兰染色镜检、生化试验和药敏试验,对其16S rRNA基因进行PCR扩增、测序、同源性比对,测定其毒力和耐药相关基因。结果显示,3株均为革兰阴性杆菌。16S rRNA基因序列同源性分析显示,2株分离菌与普通变形杆菌同源性高达999%,另外1株与奇异变形杆菌同源性高达100%。毒力基因检测表明,2株普通变形杆菌携带rpoA和fliL,奇异变形杆菌携带hpmA、hpmB、rpoA和fliL,均为编码溶血素和鞭毛的基因。药敏试验结果显示,3株变形杆菌对多种抗菌药物耐药,仅对头孢吡肟等敏感。对其耐药基因——头孢菌素酶(ampC)基因检测结果与药敏试验的结果基本一致。3株不同来源的分离菌均为变形杆菌,其致病性可能与其含有编码溶血素以及鞭毛的基因有关,对头孢菌素类耐药性可能与其携带ampC基因有关。

关键词：变形杆菌分离鉴定 PCR 毒力基因耐药基因