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叉头框蛋白o3通过调控Nod样受体蛋白3炎性小体抑制心脏成纤维细胞衰老

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中华老年心脑血管病杂志 2022年第12期24卷 1306-1309页

作者：师莹张艺扉赵莉莉李曦铭任珉秦勤天津市胸科医院天津市心血管病研究所 300222 天津大学医学部医学工程与转化医学研究院

目的研究叉头框蛋白o3(Foxo3)在心脏成纤维细胞(CF)衰老中的作用及机制。方法选取新生Wistar乳鼠第五代CF随机分为小干扰RNA转染对照(siNC)组和siFoxo3组(n=3)。siFoxo3组转染Foxo3小干扰RNA。通过实时定量PCR和免疫印迹法检测衰老和... 详细信息

目的研究叉头框蛋白o3(Foxo3)在心脏成纤维细胞(CF)衰老中的作用及机制。方法选取新生Wistar乳鼠第五代CF随机分为小干扰RNA转染对照(siNC)组和siFoxo3组(n=3)。siFoxo3组转染Foxo3小干扰RNA。通过实时定量PCR和免疫印迹法检测衰老和Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体相关基因以及Foxo3表达情况。结果与原代CF比较,第五代CF中细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂2A(p16)和细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂1A(p21)mRNA表达、p21和平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)蛋白表达明显升高(Poxo3 mRNA和蛋白表达明显低于原代(0.67±0.10 vs 1.03±0.02,0.47±0.12 vs 0.95±0.05,Poxo3组细胞中Foxo3 mRNA表达明显降低,而p16和p21 mRNA表达、p21蛋白表达明显上调(Poxo3组细胞中NLRP3、硫氧还蛋白结合蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1、白细胞介素1βmRNA表达明显升高(Poxo3通过调控NLRP3炎性小体抑制CF衰老,为衰老相关心血管疾病提供靶点。

关键词：叉头框蛋白o3 成纤维细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶肌动蛋白类 β半乳糖苷酶类

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中国热带医学 2022年第12期22卷 1179-1183页

作者：肖朗刘慧敏胡清亮重庆医科大学附属第一医院渝北医院重庆401120 陆军军医大学第一附属医院(西南医院) 重庆400038 重庆市公共卫生医疗救治中心重庆市沙坪坝区重庆400036

目的探究活动性肺结核(active pulmonary tuberculosis,APTB)患者外周血单个核细胞中沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、叉头框蛋白o3(forkhead box protein o3,FoXo3)水平与巨噬细胞相关细胞因子诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NoS)、精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)的相关性。方法选取2020年1月—2021年12月期间于重庆医科大学附属第一医院渝北医院接受治疗的64例APTB患者为APTB组,选取59例潜伏结核感染(LTBI)者为LTBI组,同期选取62例健康体检人群作为对照组。实时荧光定量PCR(qPCR)法进行外周血单个核细胞中SIRT1 mRNA、FoXo3 mRNA水平检测,ELISA法进行血清iNoS、Arg-1水平检测;采用RoC曲线分析SIRT1 mRNA、FoXo3 mRNA水平对LTBI、APTB的鉴别诊断价值;采用Pearson相关分析APTB患者外周血单个核细胞SIRT1 mRNA、FoXo3 mRNA与血清iNoS、Arg-1水平相关性。结果对照组、LTBI组、APTB组外周血单个核细胞SIRT1 mRNA、FoXo3 mRNA及血清iNoS水平依次降低,血清Arg-1水平依次升高(PoXo3mRNA水平鉴别诊断LTBI、APTB的AUC分别为0.876、0.887,灵敏度分别为71.2%、76.3%,特异度分别为96.9%、90.6%。APTB患者外周血单个核细胞SIRT1 mRNA与FoXo3 mRNA水平呈正相关(r=0.500,PoS呈正相关,与血清Arg-1呈负相关(PoXo3 mRNA及血清iNoS高于治疗前,血清Arg-1低于治疗前(PoXo3mRNA水平较低,且二者与巨噬细胞相关细胞因子iNoS呈正相关,与Arg-1呈负相关。

关键词：活动性肺结核外周血单个核细胞沉默信息调节因子1 叉头框蛋白o3 诱导型一氧化氮合酶精氨酸酶-1

叉头框蛋白o3介导Th1/Th17/Treg失衡在白塞综合征发病机制中的潜在作用

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中国临床医学 2023年第5期30卷 893-899页

作者：鲍华芳管剑龙复旦大学附属华东医院风湿免疫科上海200040

白塞综合征(Behçet’s syndrome,BS)是一种慢性复发性、可累及多种重要脏器的变异性血管炎。免疫紊乱是BS发生发展的基石,其中辅助性T细胞(T helper cell,Th)1/Th17/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)失衡起重要作用。叉头框蛋白o3(f... 详细信息

白塞综合征(Behçet’s syndrome,BS)是一种慢性复发性、可累及多种重要脏器的变异性血管炎。免疫紊乱是BS发生发展的基石,其中辅助性T细胞(T helper cell,Th)1/Th17/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)失衡起重要作用。叉头框蛋白o3(forkhead box o3,FoXo3)可调节T细胞活化、分化和T细胞功能。FoXo3表达改变与Th1/Th17/Treg失衡相关,使FoXo3成为免疫疾病治疗的潜在靶点。目前尚缺乏FoXo3与BS相关的研究,故本文对FoXo3作为BS潜在治疗靶点的机制进行总结与展望。

关键词：白塞综合征叉头框蛋白o3 辅助性T细胞1 辅助性T细胞17 调节性T淋巴细胞

槲皮素调控叉头框蛋白o3介导抗氧化效应减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤

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国际麻醉学与复苏杂志 2023年第9期44卷 897-903页

作者：李林桂胡俊凯张超胡晶辉孟晓文嵇富海苏州大学附属第一医院麻醉科苏州215006 苏州大学麻醉研究所苏州215006 苏州市第九人民医院麻醉科苏州215299

目的探讨槲皮素(quercetin, QUE)减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤的可能机制及叉头框蛋白o3(forkhead box o3, FoXo3)在其中的作用。方法以大鼠心肌细胞株H9c2为研究对象, 按随机数字表法分为5组(每组6个复... 详细信息

目的探讨槲皮素(quercetin, QUE)减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤的可能机制及叉头框蛋白o3(forkhead box o3, FoXo3)在其中的作用。方法以大鼠心肌细胞株H9c2为研究对象, 按随机数字表法分为5组(每组6个复孔):正常对照组(CoN组)、缺氧/复氧组(H/R组)、QUE组、QUE+FoXo3干扰小RNA(small interfering RNA, siRNA)组(QUE+si组)、QUE+阴性对照组(QUE+NC组)。采用缺氧6 h复氧6 h制备H/R损伤模型。CoN组细胞正常培养;H/R组细胞制备H/R损伤模型;QUE组给予终浓度为20 μmol/L的QUE孵育24 h后制备H/R损伤模型;QUE+si组和QUE+NC组分别用FoXo3 siRNA和FoXo3 siRNA阴性对照转染细胞, 24 h后给予终浓度为20 μmol/L的QUE再孵育24 h, 然后制备H/R损伤模型。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)法检测各组细胞活力, DCFH-DA法检测各组细胞活性氧(reactive oxygen species, RoS)水平, ELISA法检测各组细胞中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SoD)活力, Western blot法检测FoXo3、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase, SoD2)蛋白水平。Hoechst33258染色法检测各组H9c2心肌细胞凋亡情况。结果与CoN组比较:H/R组、QUE+NC组、QUE+si组细胞活力下降(PoS水平升高(PoD活力下降(PoXo3、SoD2表达下调(PoXo3、SoD2表达上调(PoS水平下降(PoD活力升高(PoS水平升高(PoD活力下降(PoXo3、SoD2表达下调(PoS水平、MDA含量、SoD活力和细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 QUE可减轻H9c2心肌细胞H/R损伤, 其机制可能与提高FoXo3蛋白水平, 上调抗氧化基因SoD2的表达有关。

关键词：槲皮素缺氧/复氧损伤叉头框蛋白o3 氧化应激

环状RNA叉头框蛋白o3靶向微小RNA-122-5p对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

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广西医学 2021年第24期43卷 2947-2952页

作者：赵彦焕张东姣樊丽伟汪景坤李洵付晓霞张磊赵玉红中国人民解放军第八十二集团军医院消化内科河北省保定市071000

目的探讨环状RNA叉头框蛋白o3(circFoXo3)靶向微小RNA(miRNA)-122-5p对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响。方法(1)选取38例结直肠癌患者结直肠癌组织、癌旁组织,采用实时定量PCR法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circFoXo3、miRNA-122-5... 详细信息

目的探讨环状RNA叉头框蛋白o3(circFoXo3)靶向微小RNA(miRNA)-122-5p对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响。方法(1)选取38例结直肠癌患者结直肠癌组织、癌旁组织,采用实时定量PCR法检测结直肠癌组织、癌旁组织中circFoXo3、miRNA-122-5p的表达水平,并分析结直肠癌组织中circFoXo3与miRNA-122-5p表达水平的相关性。(2)取人结直肠癌细胞HCT116分为6组并给予相应干预,包括si-NC组(转染si-NC)、si-circFoXo3组(转染si-circFoXo3)、miRNA-NC组(转染miRNA-122-5p-NC)、miRNA-122-5p组(转染miRNA-122-5p模拟物)、si-circFoXo3+抗miRNA-NC组(共转染si-circFoXo3与抗miRNA-122-5p-NC)、si-circFoXo3+抗miRNA-122-5p组(共转染si-circFoXo3与抗miRNA-122-5p)。分别采用细胞计数法、平板克隆形成实验、Transwell小室实验检测人结直肠癌细胞HCT116的增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,采用蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达水平。(3)通过生物信息学数据库starBase预测circFoXo3的靶基因,通过双荧光素酶报告基因实验检测circFoXo3与miRNA-122-5p的靶向关系。结果(1)与癌旁组织相比,结直肠癌组织中的circFoXo3表达水平升高,miRNA-122-5p表达水平降低,结直肠癌组织中的circFoXo3与miRNA-122-5p表达水平呈负相关(均PoXo3组的miRNA-122-5p表达水平升高,细胞活力降低,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低(均P蛋白表达水平降低(均PoXo3+抗miRNA-NC组比较,si-circFoXo3+抗miRNA-122-5p组的细胞活力升高,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均增多,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平升高(均P3)circFoXo3与miRNA-122-5p存在结合位点,转染miRNA-122-5p模拟物可明显降低野生型载体WT-circFoXo3的荧光素酶活性(PoXo3的荧光素酶活性无明显影响(P>0.05)。结论干扰circFoXo3的表达可通过靶向调控miRNA-122-5p从而抑制结直肠癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力。

关键词：结直肠癌环状RNA 叉头框蛋白o3 微小RNA-122-5p 靶向调控增殖迁移侵袭克隆

贝母素乙调节FoXo3-FoXM1信号轴对卵巢癌生物学行为和化疗耐药性的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：杨发珍张红敏着么王乾印青海红十字医院妇科青海红十字医院产科

目的探讨贝母素乙（PMI）调节叉头框蛋白o3（FoXo3）-叉头框转录因子M1（FoXM1）信号轴对卵巢癌增殖、侵袭、迁移、凋亡和化疗耐药性的影响。方法以卵巢癌细胞SKoV3、SKoV3/顺铂（DDP）为研究对象，MTT法检测DDP对SKoV3、SKoV3/DDP细... 详细信息

目的探讨贝母素乙（PMI）调节叉头框蛋白o3（FoXo3）-叉头框转录因子M1（FoXM1）信号轴对卵巢癌增殖、侵袭、迁移、凋亡和化疗耐药性的影响。方法以卵巢癌细胞SKoV3、SKoV3/顺铂（DDP）为研究对象，MTT法检测DDP对SKoV3、SKoV3/DDP细胞的增殖抑制情况以及PMI对SKoV3/DDP细胞的增殖抑制情况；将SKoV3/DDP细胞分为对照组（正常培养）、DDP组（20 μg/mLDDP）L-PMI组、M-PMI组、H-PMI组（20 μg/mLDDP联合50、100、200 μmol/LPMI）、甘珀酸（CBX）组（20μg/mLDDP和200μmol/LPMI联合50ng/mLCBX）。平板克隆检测SKoV3/DDP细胞的增殖；TranswellTM实验检测SKoV3/DDP细胞的侵袭和迁移；流式细胞术检测SKoV3/DDP细胞的凋亡率；Westernblot法检测SKoV3/DDP细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、胱天蛋白酶3（caspase-3）、多药耐药相关蛋白5抗体（MRP5）、FoXo3、FoXM1蛋白表达量。结果 SKoV3和SKoV3/DDP细胞增殖抑制率在DDP干预下以剂量依赖性的方式显著增加，且SKoV3细胞的增殖抑制率高于SKoV3/DPP细胞。SKoV3/DDP细胞增殖抑制率在PMI干预下以剂量依赖性的方式显著增加。DDP组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FoXM1蛋白表达低于对照组，凋亡率、caspase-3、FoXo3蛋白表达高于对照组；与DDP组比较，L-PMI组、M-PMI组、H-PMI组的克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FoXM1蛋白表达显著下降，凋亡率、caspase-3、FoXo3蛋白表达显著上升；CBX组克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细胞数、PCNA、MRP5、FoXM1蛋白表达显著高于H-PMI组，凋亡率、caspase-3、FoXo3蛋白表达显著低于H-PMI组。结论 PMI可能是通过激活FoXo3，抑制FoXM1，进而抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭、迁移和化疗耐药。

关键词：贝母素乙叉头框蛋白o3 叉头框转录因子M1 卵巢癌肿瘤免疫微环境

老年重症肺炎并发ARDS患者血清miR-27a、FoXo3与疾病严重程度及预后的关系

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疑难病杂志 2024年第3期23卷 302-307,322页

作者：金娴邵振华何梅姜俊王志安任蕾上海市静安区中心医院重症医学科 200040 上海市同济医院呼吸与危重症科 200065 上海市第四康复医院呼吸康复科 200040

目的分析老年重症肺炎并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清微小核糖核酸(miRNA)-27a、叉头框蛋白o3(FoXo3)与疾病严重程度及预后的关系。方法选取2022年10月—2023年9月上海市静安区中心医院重症医学科收治老年重症肺炎并发ARDS患者10... 详细信息

目的分析老年重症肺炎并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清微小核糖核酸(miRNA)-27a、叉头框蛋白o3(FoXo3)与疾病严重程度及预后的关系。方法选取2022年10月—2023年9月上海市静安区中心医院重症医学科收治老年重症肺炎并发ARDS患者108例(ARDS组)和老年重症肺炎未并发ARDS患者72例(非ARDS组),ARDS组患者再根据氧合指数分为轻度亚组26例、中度亚组34例、重度亚组48例,并根据28 d预后情况分为死亡亚组33例、存活亚组75例;另选取同期体检健康志愿者60例为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-27a、FoXo3水平,TargetScan数据库预测miR-27a与FoXo3的结合位点。通过Pearson/Spearman相关性分析血清miR-27a与FoXo3 mRNA水平的相关性,多因素Logistic回归分析老年重症肺炎并发ARDS患者预后的影响因素,受试者工作特征(RoC)曲线分析血清miR-27a、FoXo3 mRNA水平对老年重症肺炎并发ARDS患者死亡的预测价值。结果健康对照组、非ARDS组、ARDS组血清miR-27a水平依次降低,FoXo3 mRNA水平依次升高(F/P=77.352/oXo3 mRNA水平依次升高(F/P=83.597/33/oXo3的3’-非翻译区3257~3264处存在结合位点。老年重症肺炎并发ARDS患者血清miR-27a与FoXo3 mRNA水平呈负相关(r/P=-0.736/oXo3 mRNA水平呈负相关(r/P=0.751/30.56%(33/108)。年龄增加、机械通气时间延长、FoXo3 mRNA升高为影响老年重症肺炎并发ARDS患者预后的独立危险因素[oR(95%CI)=1.199(1.033~1.393)、1.547(1.009~2.373)、1.108(1.040~1.180)],氧合指数升高、miR-27a升高为独立保护因素[oR(95%CI)=0.973(0.958~0.989)、0.903(0.844~0.965)];血清miR-27a、FoXo3 mRNA水平及二者联合预测老年重症肺炎并发ARDS患者死亡的曲线下面积分别为0.784、0.786、0.879,二者联合的AUC大于血清miR-27a、FoXo3 mRNA水平单独预测(Z/P=2.550/0.011、2.963/0.003)。结论老年重症肺炎并发ARDS患者血清miR-27a水平降低,FoXo3 mRNA水平升高,与疾病加重和预后不良密切相关,二者联合预测老年重症肺炎并发ARDS患者死亡的价值较高。

关键词：重症肺炎急性呼吸窘迫综合征微小核糖核酸-27a 叉头框蛋白o3 疾病严重程度预后老年人

叉头框蛋白o亚型3a和p27激酶蛋白抑制剂1在电针促进面神经再生中的作用研究

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河北中医 2020年第6期42卷 902-907,I0001-I0003页

作者：郑红弟费静余莉亚李雷激西南医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科四川泸州646000

目的通过观察叉头框蛋白o亚型3a(Foxo3a)和p27激酶蛋白抑制剂1(p27 kip1)在电针治疗面神经压榨性损伤过程中的表达变化,探讨电针促进面神经再生可能的作用机制。方法将42只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为3组。正常组6只,不做任何处理;... 详细信息

目的通过观察叉头框蛋白o亚型3a(Foxo3a)和p27激酶蛋白抑制剂1(p27 kip1)在电针治疗面神经压榨性损伤过程中的表达变化,探讨电针促进面神经再生可能的作用机制。方法将42只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为3组。正常组6只,不做任何处理;模型组18只,建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型;电针组18只,建立右侧面神经上颊支压榨损伤模型后予穴位电针治疗。模型组、电针组均于术后4、14、28 d分别随机抽取6只大鼠取材。采用苏木素-伊红染色观察面神经元的形态变化,蛋白免疫印迹法及免疫组化法检测面神经元中Foxo3a及p27 kip1的表达,进行统计分析。结果与模型组比较,电针组面神经元在术后各时间点细胞团更聚集,边界更清晰,细胞数目、神经元突起增多。术后模型组及电针组Foxo3a、p27 kip1蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数均呈现出先下降后上升的趋势。术后4、14 d与正常组比较,模型组和电针组Foxo3a、p27 kip1蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数均低于正常组(Poxo3a蛋白表达量及免疫组化阳性细胞数与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05);术后28 d,电针组p27 kip1蛋白表达低于正常组(Poxo3a、p27 kip1的表达量下降、缩短细胞周期有关。

关键词：电针面神经叉头框蛋白o3 周期素依赖抑制剂p27 面神经元

绝经后女性非酒精性脂肪肝患者miR-122-5p及FoXo3水平与骨质疏松的相关性研究

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中华内分泌外科杂志 2023年第6期17卷 748-752页

作者：张方洁王松张国民赵瑞娟刘耀敏承德医学院附属医院感染性疾病科承德067000 承德医学院附属医院甲状腺外科承德067000

目的探讨绝经后女性非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者miR-122-5p及FoXo3为叉头框蛋白o3(forkhead box protein o3,FoXo3)水平与骨质疏松(osteoporosis,oP)的相关性研究。方法收集30例绝经后女性NAFLD患者与48例绝经后女性非NAFLD患者的临床资料及血清。qRT-PCR检测血清中miR-122-5p、FoXo3水平。生化自动分析仪检测甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白。骨密度分析仪检测第1~4腰椎、Wards三角骨、股骨颈、大转子、全髋5个部位的骨密度。分析以上临床指标与骨质疏松的相关性。结果miR-122-5p在绝经后女性NAFLD患者中表达为0.76±0.28,较非NAFLD患者的1.00±0.31表达低(t=3.43,P=0.001)。借助生物信息学网站分析得出miR-122-5p的下游靶基因FoXo3。FoXo3在绝经后女性NAFLD患者中表达为1.31±0.30,较非NAFLD患者的1.00±0.27表达升高(t=4.73,Pogistic回归分析显示甘油三酯、miR-122-5p、FoXo3水平是NAFLD患病的危险因素(均Pon相关系数显示miR-122-5p水平与股骨颈(r=0.49,P=0.006)、大转子(r=0.37,P=0.046)、全髋(r=0.40,P=0.027)的骨密度呈显著正相关,FoXo3水平与股骨颈(r=-0.45,P=0.014)、全髋(r=-0.51,P=0.004)骨密度呈显著负相关,其余指标相关性不明显(均P>0.05)。结论绝经后女性NAFLD患者血清miR-122-5p水平降低、FoXo3水平升高可能增加患者患骨质疏松的风险。

关键词：绝经后女性非酒精性脂肪肝 miR-122-5p 叉头框蛋白o3 骨质疏松骨密度