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凝血因子Ⅷ和Ⅸ活性检测参考物质的互通性研究

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中华医学杂志 2015年第34期95卷 2754-2759页

作者：周文宾李臣宾张海鹏成斐彭明婷北京医院卫生部临床检验中心 100730

目的评价凝血因子Ⅷ（FⅧ）和Ⅸ（FⅨ）活性国内常用检测系统的结果可比性以及参考物质的互通性.方法参照美国临床实验室标准化协会（CLSI） EP-30文件和行业标准WS/T 356-2011的互通性评价方法进行实验.将不同浓度水平且覆盖临床检... 详细信息

目的评价凝血因子Ⅷ（FⅧ）和Ⅸ（FⅨ）活性国内常用检测系统的结果可比性以及参考物质的互通性.方法参照美国临床实验室标准化协会（CLSI） EP-30文件和行业标准WS/T 356-2011的互通性评价方法进行实验.将不同浓度水平且覆盖临床检测范围的FⅧ和FⅨ活性检测样本,5个批号自制参考物质（F20140601 ～ F20140605）和英国国家生物制品检定所（NIBSC）标准品（SSCLOT4）分别用Stago STA-R Evolution、IL ACL TOP700和Sysmex CA7000全自动凝血分析仪及配套试剂进行FⅧ和FⅨ活性检测.3个检测系统依次进行2个系统间的结果比较.分别对2个系统临床样本的检测结果进行线性回归并计算偏差,以相关系数和偏差超出可接受范围的样本比例评价检测结果的可比性.剔除偏差超出可接受范围的结果后,再次进行线性回归并计算临床样本检测结果对应Y预测值双侧95％预测区间,绘制互通性评价图对自制参考物质和NIBSC标准品的互通性进行评价.结果临床样本FⅧ和FⅨ浓度的分布范围为0.5％～ 218.0％和1.6％～156.5％,能够覆盖临床常见浓度水平和满足参考物质互通性评价的要求.不同系统FⅧ和FⅨ检测结果的R2为0.89 ～0.94和0.81～0.93,偏差超出可接受范围的比例均＜10％,可认为3个系统FⅧ和FⅨ活性检测结果的可比性可被接受.根据可比性偏差可接受范围,删除偏差超出可接受范围的临床样本检测结果后,FⅧ活性检测分别有42份、41份和45份临床样本的结果用于自制参考物质和NIBSC凝血标准品的互通性分析,FⅨ活性检测分别有44份、42份和41份临床样本的结果用于互通性分析.5个批号10支自制参考物质和NIBSC凝血标准品的检测结果均落在95％预测区间内,表明其在3个检测系统间均具有互通性.结论对于FⅧ活性检测,不同检测系统间的结果可比性较好,FⅨ活性检测系统间的可比性尚可接受.自制参考物质和NIBSC标准品用于不同检测系统具有互通性。

关键词：凝血因子Ⅷ 凝血因子Ⅸ 参考物质可比性互通性

蛋白重组技术在制备视黄醇结合蛋白质控品和候选参考物质中的方法研究

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中华检验医学杂志 2022年第11期45卷 1131-1135页

作者：张超周伟燕张江涛汪静张传宝北京医院国家老年医学中心国家卫生健康委临床检验中心中国医学科学院老年医学研究院北京100730

目的通过蛋白重组技术低成本、快速制备高浓度人视黄醇结合蛋白4(hRBP4)参考物质,解决临床hRBP4高值参考物质难以获取的需求。方法在美国国立生物技术信息中心NCB查找hRBP4的互补DNA序列,经大肠埃希菌密码子优化后人工合成,然后将DNA片... 详细信息

目的通过蛋白重组技术低成本、快速制备高浓度人视黄醇结合蛋白4(hRBP4)参考物质,解决临床hRBP4高值参考物质难以获取的需求。方法在美国国立生物技术信息中心NCB查找hRBP4的互补DNA序列,经大肠埃希菌密码子优化后人工合成,然后将DNA片段克隆至原核表达质粒pET-28a(+)中,以构建重组hRBP4表达载体。将重组质粒转化至*** BL21感受肽中,优化诱导表达条件(如温度、转速和异丙基硫代半乳糖苷IPTG浓度等)、诱导质粒表达并对重组蛋白进行His融合标签纯化,获取纯化后的hRBP4重组蛋白。结果DNAMAN软件对比显示编码hRBP4蛋白的碱基序列完全正确,成功构建重组hRBP4原核表达质粒;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示亲和纯化产物中可清晰可见约相对分子质量26000电泳条带;临床尿液和血清hRBP4常规检测系统均可检测到纯化的hRBP4蛋白,且稀释倍数与检测浓度间呈现良好线性关系。结论成功构建重组hRBP4高水平表达系统,重组hRBP4蛋白纯度大、浓度高、生产周期短,有望在室间质量评价质控品和有证参考物质研制中发挥重要作用。

关键词：视黄醇结合蛋白质类重组蛋白参考物质质控品室间质量评价

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尿碘参考物质的研制及应用

中国地方病学杂志 2001年第1期20卷 52-53页

作者：顾仪周定友李津蜀刘颖赵凯利华基礼李卫东郑朝晖四川省卫生防疫站四川成都610031 中国地方病防治研究中心地甲病研究所黑龙江哈尔滨150086 中国预防医学科学院国家碘缺乏病参照实验室北京102206 陕西省地方病防治研究所陕西西安710061 安徽省卫生防疫站安徽合肥230021 湖北省卫生防疫站湖北武汉430079

目的　研制尿碘参考物质。方法　对采集的尿进行防腐、过滤、混匀、分装、定值。结果　研制的参考物质均匀性良好 ,- 2 0℃保存的样品在 1年观察内碘含量稳定 ,样品由 2个国家级实验室及 4个省级实验室 ,采用 2种不同原理的方法进行了... 详细信息

目的　研制尿碘参考物质。方法　对采集的尿进行防腐、过滤、混匀、分装、定值。结果　研制的参考物质均匀性良好 ,- 2 0℃保存的样品在 1年观察内碘含量稳定 ,样品由 2个国家级实验室及 4个省级实验室 ,采用 2种不同原理的方法进行了检测、分析及定值合格。结论　研制的尿碘参考物质可以满足不同实验室的要求 ,其制备方法、简便、经济。

关键词：尿碘参考物质碘缺乏病

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载脂蛋白A1/B国际参考物质的靶值转移

中华检验医学杂志 2005年第4期28卷 438-441页

作者：但万春韩瑜王涛吴玉薇中生北控生物科技股份有限公司北京100083

目的制备定值可溯源至WHO国际参考物质的载脂蛋白A1/B工作校准品。方法采用中生北控生物科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1/B免疫透射比浊试剂盒,在OLYMPUSAU400全自动生化分析仪上,按照美国西北脂类研究实验室(NWLRL)制定的方案,进行... 详细信息

目的制备定值可溯源至WHO国际参考物质的载脂蛋白A1/B工作校准品。方法采用中生北控生物科技股份有限公司生产的载脂蛋白A1/B免疫透射比浊试剂盒,在OLYMPUSAU400全自动生化分析仪上,按照美国西北脂类研究实验室(NWLRL)制定的方案,进行载脂蛋白国际参考物质靶值转移及相关性试验考核。结果三期试验结果表明,将国际参考物质的靶值转移到中生北控公司制备的工作校准品(Lot030310)后,载脂蛋白(apo)A1/apoB测定的准确度和精密度达到NWLRL的要求;测定NWLRL提供的40份血清样品。与NWLRL定值相比较,apoA1和apoB的相关系数分别为0.983和0.987,平均绝对偏差分别为2.7%和3.0%,达到方案规定的合格标准。结论NWLRL已向中生北控公司颁发了WHOapoA1/apoB国际参考物质靶值转移合格证书。

关键词：载脂蛋白A1 参考物质靶值转移国际 apoA1/apoB OLYMPUS 免疫透射比浊生化分析仪上 AU400 研究实验室生物科技试验结果血清样品相关系数校准品 WHO 试剂盒公司全自动相关性精密度准确度格标准定值制备

一种高效制备人乳酸脱氢酶LDH_5参考物质的方法及应用

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生物技术 2017年第2期27卷 174-179页

作者：刘赪阳王玉梅黄薇王萌张恩毅郭健肖飞北京大学第五临床医学院北京医院国家老年医学中心老年医学重点实验室北京100730 中国食品药品检定研究院体外诊断试剂室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050 北京医院检验科北京100730

[目的]研究高效、廉价制备人乳酸脱氢酶LDH5参考物质的方法。[方法]选取人乳酸脱氢酶基因(LDHA)CDS序列进行分析及优化,合成优化后的基因,克隆至表达载体pRSF-Duet中构建重组乳酸脱氢酶LDH5表达载体。使用大肠杆菌*** BL21(DE3)菌株对... 详细信息

[目的]研究高效、廉价制备人乳酸脱氢酶LDH5参考物质的方法。[方法]选取人乳酸脱氢酶基因(LDHA)CDS序列进行分析及优化,合成优化后的基因,克隆至表达载体pRSF-Duet中构建重组乳酸脱氢酶LDH5表达载体。使用大肠杆菌*** BL21(DE3)菌株对目的基因进行表达,异丙基硫代半乳糖苷酶(IPTG)诱导,镍离子亲和层析纯化,SDS-PAGE鉴定酶纯度,BCA法分析酶浓度,全自动生化仪分析酶活性、稳定性。[结果]经优化后的LDHA基因的大肠杆菌密码子适应指数为1;纯化蛋白达到电泳纯,比活性达19.01 U/mg,在4℃及25℃可稳定保存8 d。[结论]重组乳酸脱氢酶的表达效率为100 mg/L,酶活性、稳定性、纯度达到临床生化检测的参考物质的条件,可以作为血清乳酸脱氢酶检测的标准物质。

关键词：乳酸脱氢酶基因重组密码子参考物质

稳定同位素测试技术与参考物质研究现状及发展趋势

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岩矿测试 2002年第4期21卷 291-300页

作者：丁悌平中国地质科学院矿产资源研究所北京100037

同位素测试技术是同位素研究的基础。新的测试技术的创立,新的测试仪器的研制,原有仪器设备和测试方法的改进是稳定同位素地球化学研究发展的依托。因此发展同位素测试技术始终是同位素地球化学研究的一个主要方面。文章介绍了同位素测... 详细信息

同位素测试技术是同位素研究的基础。新的测试技术的创立,新的测试仪器的研制,原有仪器设备和测试方法的改进是稳定同位素地球化学研究发展的依托。因此发展同位素测试技术始终是同位素地球化学研究的一个主要方面。文章介绍了同位素测试仪器设备、稳定同位素研究对象和测试方法、同位素参考物质的研制以及同位素绝对比值测量的研究现状及近年来的发展。概括起来,总的趋势是:快速化、精确化、微量化、微区化、多样化和标准化。

关键词：稳定同位素地球化学测试技术参考物质原子量

回归和多元分析在参考物质互换性研究中的应用

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中国卫生统计 2012年第3期29卷 462-464页

作者：胡丽涛王薇王治国卫生部北京医院卫生部临床检验中心 100730

目的探讨回归和多元分析在参考物质互换性研究中的应用。方法参照美国临床和实验室标准化研究院(CLSI)C53-A及相关文件,结合实际工作总的实例进行分析总结,应用回归分析和多元分析评价参考物质互换性。结果用于参考物质互换性评价的回... 详细信息

目的探讨回归和多元分析在参考物质互换性研究中的应用。方法参照美国临床和实验室标准化研究院(CLSI)C53-A及相关文件,结合实际工作总的实例进行分析总结,应用回归分析和多元分析评价参考物质互换性。结果用于参考物质互换性评价的回归方法有普通最小平方法(OLS)、戴明(Deming)和Passing-Bablock(PB),具体的实施可通过建立95%预测区间和标准差的倍数进行分析。多元统计主要适用于没有参考方法的多种方法比较。结论临床实验室应该根据具体的互换性评价研究计划和实际情况选择合适的统计方法。

关键词：参考物质互换性回归分析相应分析

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万能材料试验机期间核查用参考物质试验研究

铁道建筑 2015年第6期55卷 168-171页

作者：霍志刚中铁六局集团有限公司北京100036

期间核查是检测实验室确保检测结果准确性的内部质量控制活动。为选用简单、实用、可靠的期间核查参考物质,应用万能材料试验机以标准试验方法测试了标准砂浆试件的抗压强度和钢筋试件的极限抗拉力。大量数据的统计分析结果表明,采用标... 详细信息

期间核查是检测实验室确保检测结果准确性的内部质量控制活动。为选用简单、实用、可靠的期间核查参考物质,应用万能材料试验机以标准试验方法测试了标准砂浆试件的抗压强度和钢筋试件的极限抗拉力。大量数据的统计分析结果表明,采用标准砂浆试件和钢筋试件作为万能材料试验机期间核查用参考物质具有可行性及稳定性。

关键词：期间核查实验室参考物质离散性试验机校准

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欧洲参考物质研发动态

理化检验（化学分册） 2005年第9期41卷 705-706,708页

作者：周南上海材料研究所上海200437

《理化检验-化学分册》（2002年38卷8期421～425页）曾报道欧共体联立研究中心下属的参考物质与测量研究所（IRMM）供应的标定参考物质已超过500种，其中冠以BCR（Bureau Communautaire de Rererence）注册商标（即以BCR／IRMM作标志）... 详细信息

《理化检验-化学分册》（2002年38卷8期421～425页）曾报道欧共体联立研究中心下属的参考物质与测量研究所（IRMM）供应的标定参考物质已超过500种，其中冠以BCR（Bureau Communautaire de Rererence）注册商标（即以BCR／IRMM作标志）的有400多种。现将当前有关重点分析领域的部分择要介绍。[第一段]

关键词：参考物质研发动态欧洲 2002年研究中心理化检验注册商标 500 研究所