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表达前列腺特异性膜抗原的DNA疫苗对肿瘤细胞的抑制作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 570-573页

作者：任加强郑莉陈琦李华张琳朱虹光复旦大学上海医学院病理学系上海200032

目的构建表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)的DNA疫苗,观察其在体外对肿瘤细胞的免疫攻击和在体内对肿瘤细胞攻击的免疫保护作用。方法通过稳定转染构建表达PSMA的小鼠黑色素瘤细胞系B16-PSMA,将DNA疫苗pCDNA3.1-PSMA通过肌肉注射导入C57BL/... 详细信息

目的构建表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)的DNA疫苗,观察其在体外对肿瘤细胞的免疫攻击和在体内对肿瘤细胞攻击的免疫保护作用。方法通过稳定转染构建表达PSMA的小鼠黑色素瘤细胞系B16-PSMA,将DNA疫苗pCDNA3.1-PSMA通过肌肉注射导入C57BL/6小鼠体内,分离小鼠脾细胞,检测细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocytes,CTL)反应。以B16-PSMA细胞攻击免疫后小鼠,观察免疫动物的无瘤生存期和肿瘤体积增长情况,评价DNA疫苗的抗肿瘤作用。结果DNA疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞CTL活性,经过免疫后的小鼠成瘤率降低,无瘤生存期延长,肿瘤生长缓慢,肿瘤组织内有较多淋巴细胞浸润,表明产生较强的抗肿瘤反应。结论表达PSMA的DNA疫苗能够诱导小鼠产生特异性免疫反应,对表达PSMA的肿瘤细胞的攻击产生免疫保护作用,为前列腺癌的预防和免疫治疗提供了新的思路。

关键词：前列腺癌前列腺特异性膜抗原(PSMA) DNA疫苗前列腺特异性膜抗原肿瘤细胞 C57BL/6小鼠抑制作用免疫保护作用细胞毒性T淋巴细胞特异性免疫反应

靶向前列腺特异性膜抗原药物68Ga-SC691两种前列腺癌小鼠模型micro-PET/CT比较研究

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中华肿瘤防治杂志 2023年第1期30卷 7-13页

作者：蔡萍陈环宇王胤文刘楠陈跃周志军西南医科大学附属医院核医学科四川泸州646000 核医学与分子影像四川省重点实验室四川泸州646000 西南医科大学药学院四川泸州646000 西南医科大学核医学研究所四川泸州646000

目的比较分析靶向前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型特异性分子探针在不同放射生物模型中的特性,以寻求评估此类放射性药物的合理生物模型。方法采用人源性前列腺癌细胞LNCaP、22RV1对靶向PSMA诊断的药物68Ga-SC691进行体外细胞摄取内... 详细信息

目的比较分析靶向前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型特异性分子探针在不同放射生物模型中的特性,以寻求评估此类放射性药物的合理生物模型。方法采用人源性前列腺癌细胞LNCaP、22RV1对靶向PSMA诊断的药物68Ga-SC691进行体外细胞摄取内化实验,测定及比较分析2种细胞对68Ga-SC691的结合能力。采用SPF级别NOD/SCID鼠建立LNCaP、22RV1荷瘤鼠模型,经尾静脉注射68Ga-SC691后进行生物分布和小动物PET/CT成像研究,计算并比较肿瘤、肾脏、血液和各主要脏器的摄取值。结果体外结合实验显示,LNCaP细胞对68Ga-SC691的摄取高于22RV1细胞,在孵育2 h后,(46.01±2.43)%细胞摄取,22RV1细胞摄取为(2.20±0.58)%,t=22.62,P=0.000 1。小鼠体内分布结果表明,标记物主要经肾脏代谢,2种生物模型药代动力学特点类似,但在LNCAP荷瘤鼠肿瘤部位有更高的放射性摄取,在药物注射30 min时,其放射性摄取值在LNCaP模型中为(43.41±8.39)%ID/g,在22RV1模型中为(1.71±0.51)%ID/g,且显像效果优于使用22RV1模型。结论68Ga-SC691在生物模型LNCaP和22RV1中有不同程度的摄取,LNCaP模型对靶向PSMA前列腺癌显像评价效果优于22RV1模型,有利于PSMA靶向药物的开发与评价,利于后续临床工作的开展。

关键词：前列腺癌前列腺特异性膜抗原前列腺癌细胞生物模型

人前列腺特异性膜抗原胞外区基因重组腺病毒的构建

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武汉大学学报（医学版） 2010年第2期31卷 255-258页

作者：匡幼林刘修恒祝恒成翁小东陈志远江波涛陈晖刘东山沈昊武汉大学人民医院泌尿外科湖北武汉430060

目的:体外构建和表达人前列腺特异性膜抗原胞外区(tPSMA)基因重组腺病毒。方法:首先设计一对含BglⅡ和HindⅢ酶切位点的tPSMA引物,以质粒pCR3.1-Uni-hPSMA为模板,通过PCR扩增tPSMA并克隆到腺病毒穿梭质粒中,获得pAdTrack-CMV-tPSMA质粒... 详细信息

目的:体外构建和表达人前列腺特异性膜抗原胞外区(tPSMA)基因重组腺病毒。方法:首先设计一对含BglⅡ和HindⅢ酶切位点的tPSMA引物,以质粒pCR3.1-Uni-hPSMA为模板,通过PCR扩增tPSMA并克隆到腺病毒穿梭质粒中,获得pAdTrack-CMV-tPSMA质粒,将其与含有pAdeasy-1的BJ5183菌电转化,筛选阳性克隆,重组子经线性化后转染HEK293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达、RT-PCR、Western blot法检测目的基因tPSMA的表达。结果:成功构建了含tPSMA的重组腺病毒载体Ad-tPSMA,病毒滴度为2.0×1011pfu/L。结论:该重组腺病毒的构建为下一步研究用其制备树突状细胞疫苗基因治疗提供基础。

关键词：前列腺特异性膜抗原基因表达腺病毒

外源前列腺特异性膜抗原纯化及位点特异性N-糖基化修饰谱分析

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中华肿瘤防治杂志 2021年第23期28卷 1792-1797,1804页

作者：杜文倩张萌唐语彤林晓蕊潘慕垚刘宝琴中国医科大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室辽宁沈阳110122 中国医科大学临床二系辽宁沈阳110122

目的构建前列腺特异性膜抗原(PSMA)真核表达重组载体pcDNA3-FOLH1,293细胞系中过表达PSMA蛋白,纯化外源过表达PSMA蛋白,分析其位点特异性N-糖基化修饰谱。方法聚合酶链式反应(PCR)扩增叶酸水解酶1(FOLH1)全长基因,利用重组技术将FOLH1... 详细信息

目的构建前列腺特异性膜抗原(PSMA)真核表达重组载体pcDNA3-FOLH1,293细胞系中过表达PSMA蛋白,纯化外源过表达PSMA蛋白,分析其位点特异性N-糖基化修饰谱。方法聚合酶链式反应(PCR)扩增叶酸水解酶1(FOLH1)全长基因,利用重组技术将FOLH1基因连接到真核表达载体pcDNA3;双酶切鉴定及测序无误后,利用转染技术将真核表达载体转染进293细胞系,肽-N-糖苷酶F(PNGase F)酶切鉴定PSMA蛋白;免疫沉淀技术纯化293细胞系外源过表达PSMA蛋白,质谱分析位点特异性N-糖基化修饰谱。结果成功构建PSMA蛋白真核表达重组载体pcDNA3-FOLH1;293细胞系中外源过表达PSMA蛋白,PNGase F未处理PSMA蛋白相对分子质量为100×10^(3),酶切处理之后其相对分子质量约为85×10^(3),符合预期。免疫纯化获得外源过表达PSMA蛋白之后,LC-MS揭示重组PSMA蛋白中的大多数N-糖基化修饰位点都有寡糖链占位,且高甘露糖型、杂合型及复合型组成有一定差异。结论成功完成PSMA蛋白真核表达载体的构建、表达、纯化及位点特异性N-糖基化修饰谱分析,为后续靶向PSMA的肿瘤治疗提供基础科研数据。

关键词：前列腺特异性膜抗原 N-糖基化修饰叶酸水解酶1 位点特异性N-糖基化修饰分析前列腺癌

^(18)F-前列腺特异性膜抗原(PSMA)-1007 PET/CT参数评估前列腺癌骨转移

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中国医学影像技术 2023年第2期39卷 250-254页

作者：董思颖陈建李艳梅杨鹏飞李娟宁夏医科大学总医院核医学科宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004

目的观察^(18)F-前列腺特异性膜抗原(PSMA)-1007 PET/CT参数评估前列腺癌(PCa)骨转移的价值。方法根据有无骨转移将53例经病理确诊的PCa患者分为骨转移组(n=27)及无骨转移组(n=26)。于PET/CT三维图像上勾画PCa原发灶感兴趣容积,测量其... 详细信息

目的观察^(18)F-前列腺特异性膜抗原(PSMA)-1007 PET/CT参数评估前列腺癌(PCa)骨转移的价值。方法根据有无骨转移将53例经病理确诊的PCa患者分为骨转移组(n=27)及无骨转移组(n=26)。于PET/CT三维图像上勾画PCa原发灶感兴趣容积,测量其最大标准摄取值(SUV max)、前列腺肿瘤PSMA表达体积(PSMA-TVp)和前列腺肿瘤病灶PSMA表达总量(TL-PSMAp);比较组间PSMA表达参数差异,采用单因素logistic回归分析预测PCa骨转移的独立因素,绘制受试者工作特征曲线,分析PSMA表达参数评估骨转移的效能。结果骨转移组PCa原发灶SUV max、PSMA-TVp及TL-PSMAp均高于无骨转移组(P均<0.01)。原发灶SUV max、PSMA-TVp及TL-PSMAp均为预测PCa骨转移的独立因素(OR=1.091、1.327、1.042,P均<0.05),其评估PCa骨转移的曲线下面积分别为0.734、0.908及0.929,PCa原发灶TL-PSMAp、PSMA-TVp的评估效能明显高于SUV max(P均<0.05)。结论^(18)F-PSMA-1007 PET/CT所示PCa原发灶PSMA表达参数可用于评估PCa骨转移,尤以体积参数如PSMA-TVp和TL-PSMAp更具价值。

关键词：前列腺肿瘤肿瘤转移前列腺特异性膜抗原体层摄影术,X线计算机正电子发射断层显像

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反向前列腺特异性膜抗原增强子启动子调控重组质粒的构建及增强子调控活性的比较

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四川大学学报（医学版） 2005年第6期36卷 782-785页

作者：曾浩廖咏川王芳吴琦杨宇如四川大学华西医院泌尿外科成都610041 四川大学华西医院眼科四川大学基础医学与法医学院感染免疫研究室

目的探讨前列腺特异性膜抗原(PSM A)启动子和增强子调控目的基因表达的前列腺细胞特异性,了解增强子增强转录效率的能力。方法采用PCR方法从前列腺癌细胞DNA中分别扩增PSM A增强子序列,将其按不同方向亚克隆到含有报告基因——绿色荧光... 详细信息

目的探讨前列腺特异性膜抗原(PSM A)启动子和增强子调控目的基因表达的前列腺细胞特异性,了解增强子增强转录效率的能力。方法采用PCR方法从前列腺癌细胞DNA中分别扩增PSM A增强子序列,将其按不同方向亚克隆到含有报告基因——绿色荧光蛋白(GFP)的重组质粒载体pEGFP-PSM AP ro,脂质体介导基因转染不同癌细胞并观察GFP在所转染的细胞的表达情况。结果成功构建质粒pEGFP-PSM AE-P和pEGFP-PSM AE(r)-P,质粒转染结果显示PSM A表达阳性的LNC aP细胞中存在GFP的特异有效表达,增强子序列能使基因转录效率提高30倍,不同方向的增强子序列在增强转录效率方面具有同样效应。结论反向PSM A增强子启动子调控GFP表达的重组质粒的构建证明该调控序列具有前列腺细胞特异性,增强子具有增强启动子转录效率的功能且没有方向性。

关键词：前列腺特异性膜抗原启动子反向增强子前列腺癌绿色荧光蛋白

前列腺特异性膜抗原PET/MR在前列腺癌诊断中的研究进展

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国际放射医学核医学杂志 2023年第1期47卷 33-38页

作者：谷振勇程超左长京海军军医大学第一附属医院核医学科上海200433

作为男性高发病率的恶性肿瘤,前列腺癌(PCa)的早期诊断和精准分期对临床治疗方案的选择和患者的远期预后具有重要的临床意义。基于分子靶点前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型PET分子探针在PCa的诊断中显示出较高的临床效能,其在临床上的... 详细信息

作为男性高发病率的恶性肿瘤,前列腺癌(PCa)的早期诊断和精准分期对临床治疗方案的选择和患者的远期预后具有重要的临床意义。基于分子靶点前列腺特异性膜抗原(PSMA)的新型PET分子探针在PCa的诊断中显示出较高的临床效能,其在临床上的开发和应用越来越广泛。一体化PET/MR将PET的高灵敏度功能信息与MRI的优良软组织分辨率相结合,其在临床中的初步应用已显示出重要的临床价值。PSMA PET/MR在PCa的诊断中具有潜在的优势,现就其研究进展作一综述。

关键词：前列腺肿瘤前列腺特异性膜抗原正电子发射断层显像术磁共振成像放射性示踪剂

前列腺特异性膜抗原在泌尿系统肿瘤中的诊疗进展

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肿瘤综合治疗电子杂志 2020年第4期6卷 63-68页

作者：王子龙韩承林王慕文山东大学附属省立医院泌尿外科济南250021 山东第一医科大学附属省立医院泌尿外科济南250021

前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)作为前列腺癌的生物标志物之一,不仅在前列腺癌细胞的细胞膜中表达,还在肾癌和膀胱癌等多数实体瘤组织中的新生血管内皮细胞中表达。PSMA既可通过影像学显像对前列腺癌进... 详细信息

前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen,PSMA)作为前列腺癌的生物标志物之一,不仅在前列腺癌细胞的细胞膜中表达,还在肾癌和膀胱癌等多数实体瘤组织中的新生血管内皮细胞中表达。PSMA既可通过影像学显像对前列腺癌进行精准定位和靶向治疗,还可能与泌尿系统肿瘤的侵袭和转移密切相关。本文对PSMA在泌尿系统肿瘤中的生物学特性及其诊疗进展进行综述。

关键词：前列腺特异性膜抗原泌尿系统肿瘤前列腺癌

前列腺特异性膜抗原与前列腺癌Gleason评分的相关性分析及在早期诊断及预后中的价值

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临床外科杂志 2022年第9期30卷 885-888页

作者：季金涛康波苏燕胜空军第九八六医院泌尿外科西安710054

目的探讨前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen, PSMA)在前列腺癌组织及外周血中的表达情况,分析其与Gleason评分的关系及在早期诊断和预后中的价值。方法 2015年3月~2020年6月于我院诊治的前列腺癌病人270例,前列... 详细信息

目的探讨前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen, PSMA)在前列腺癌组织及外周血中的表达情况,分析其与Gleason评分的关系及在早期诊断和预后中的价值。方法 2015年3月~2020年6月于我院诊治的前列腺癌病人270例,前列腺增生病人50例。收集病人的石蜡切片标本,免疫组织化学染色(immumohistochemical staining, IHC)检测组织中的PSMA表达情况,分析其与病人Gleason评分的相关性,并采用Kaplan-Meier方法法对比PSMA阳性表达组和阴性表达组病人总体生存(overall survival, OS)和无生化复发生存(biochemical relapse-free survival, BRFS)情况。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组病人血清中PSMA含量,采用受试者工作曲线(ROC)评价PSMA作为诊断标志物的价值。结果在270例前列腺癌组织中,PSMA表达阳性221例(81.9%);50例前列腺增生组织中,PSMA表达阳性24例(48.0%),两组比较差异有统计学意义(,P7分的病人PSMA阳性表达率较Gleason评分≤7分高,差异有统计学意义(P前列腺癌病人血清PSMA含量为(17.97±6.66)μg/L,前列腺增生组为(7.90±5.03)μg/L,差异有统计学意义(P17.50μg/L为截断值时,曲线下面积(AUC)为0.845,诊断灵敏度为71.1%,特异度为82%。结论前列腺癌组织中PSMA呈现高表达,与Gleason评分密切相关,且其表达与病人更差的预后相关,血清中PSMA水平可以作为前列腺癌诊断指标。

关键词：前列腺癌前列腺特异性膜抗原诊断预后