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Smac在TRAIL诱导人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡中的作用

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第二军医大学学报 2004年第1期25卷 87-89页

作者：金军赵健李博华张霞张瑞萍李晓东钱卫珠郭亚军第二军医大学科研部国际合作肿瘤研究所上海200433

目的 :初步研究 Smac在 TNF相关的凋亡诱导配体 (TNF- related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤 Saos- 2细胞凋亡中的作用。方法 :观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析 TRAIL 作用的 Saos- 2细胞 DNA片段 ,利用流... 详细信息

目的 :初步研究 Smac在 TNF相关的凋亡诱导配体 (TNF- related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的人骨肉瘤 Saos- 2细胞凋亡中的作用。方法 :观察细胞形态变化和以琼脂糖凝胶电泳分析 TRAIL 作用的 Saos- 2细胞 DNA片段 ,利用流式细胞术及细胞计数法比较 Smac或 Bcl- 2表达不同的细胞的凋亡程度 ,同时以 Western印迹半定量检测细胞胞质内Sm ac表达水平。结果 :Saos- 2细胞在 TRAIL 的作用下出现典型的凋亡样改变。在 TRAIL 作用 Saos- 2细胞时 ,Smac在胞质中的含量明显增加。在 TRAIL 作用 2 4 h后 ,Smac在 Saos- 2细胞中过表达 ,细胞凋亡率由 1 2 .7%增加到 31 .4 %。TRAIL 作用 Saos- 2细胞 4 8h后 ,转染 Bcl- 2的细胞与转染空载体的 Saos- 2细胞相比 ,凋亡率显著降低 (由 2 4 %降至 1 5 % ) ,且胞质中Sm ac的表达水平也明显降低。结论 :在 TRAIL 诱导的凋亡中 Sm ac起促进作用 ,Bcl- 2可以通过阻止 Sm

关键词： Smac TRAIL 人骨肉瘤 Saos-2 细胞凋亡凋亡诱导配体

鼠源TRAIL真核表达质粒的构建及其抑瘤效应的初步观察

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华中科技大学学报（医学版） 2002年第6期31卷 618-620页

作者：薛胜利冯作化张桂梅黎培员王洪涛肖徽华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系武汉430030

采用 RT- PCR自小鼠脾细胞 RNA中扩增出鼠 TRAIL 基因的全长 c DNA,利用 DNA重组技术将其插入到真核表达载体 pc DNA3.1中获得重组质粒 p X1。经酶切鉴定及序列分析 ,表明成功构建 TRAIL 的真核表达质粒。通过直接肌肉内注射进行基因转... 详细信息

采用 RT- PCR自小鼠脾细胞 RNA中扩增出鼠 TRAIL 基因的全长 c DNA,利用 DNA重组技术将其插入到真核表达载体 pc DNA3.1中获得重组质粒 p X1。经酶切鉴定及序列分析 ,表明成功构建 TRAIL 的真核表达质粒。通过直接肌肉内注射进行基因转染 ,p X1具有诱导肝癌细胞凋亡、抑制肝癌生长的作用。表明 TRAIL

关键词： TRAIL 凋亡诱导配体肝癌基因治疗

Trail在系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞的表达

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中华内科杂志 2007年第1期46卷 65-66页

作者：朱芸刘凤霞李明赵锦梅高明珍潍坊市人民医院风湿免疫科山东省潍坊市261041

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis-inducing ligand，Trail）在免疫细胞的表达及其所诱导的细胞凋亡，参与了肿瘤发病过程。对于Trail诱导系统性红斑狼疮（SEE）细胞凋亡，目前少见相关研究。本研究应用流式细胞... 详细信息

肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis-inducing ligand，Trail）在免疫细胞的表达及其所诱导的细胞凋亡，参与了肿瘤发病过程。对于Trail诱导系统性红斑狼疮（SEE）细胞凋亡，目前少见相关研究。本研究应用流式细胞术检测了SLE患者外周血淋巴细胞Trail表达水平，初步探讨Trail与SLE发病的关系。

关键词：系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞 Trail apoptosis 肿瘤坏死因子流式细胞术检测 SLE患者凋亡诱导配体

肾综合征出血热患者体内可溶型和膜型TNFα,FasL,TRAIL表达水平的研究

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免疫学杂志 2006年第4期22卷 426-428页

作者：刘京梅朱勇欧阳为明王九平庄然金伯泉第四军医大学免疫学教研室第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心西安710032

目的观察HFRS患者体内可溶型和膜型凋亡诱导配体的水平,探讨凋亡诱导配体与HFRS免疫病理损伤的关系。方法应用夹心ELISA方法检测了HFRS患者血浆中TNFα、sFasL和sTRAIL的水平,同时利用流式细胞术检测了膜型凋亡诱导配体在HFRS患者PBMC... 详细信息

目的观察HFRS患者体内可溶型和膜型凋亡诱导配体的水平,探讨凋亡诱导配体与HFRS免疫病理损伤的关系。方法应用夹心ELISA方法检测了HFRS患者血浆中TNFα、sFasL和sTRAIL的水平,同时利用流式细胞术检测了膜型凋亡诱导配体在HFRS患者PBMC上的表达。结果膜型凋亡诱导配体在健康对照的PBMC上几乎不表达,HFRS患者PBMC上TNF表达率为(0.90±0.05)%;FasL的表达率为(19.83±6.40)%;TRAIL的表达率为(15.79±4.73)%。HFRS患者急性期血浆中的TNF(77.69±21.11)pgmL、sFasL(40.69±6.75)pgmL和sTRAIL(19.04±5.54)pgmL水平分别是健康对照的4.8倍(16.26±14.09)pgmL、6.0倍(6.76±1.01)pgmL和1.8倍(10.72±1.41)pgmL。结论HFRS患者体内高表达的凋亡诱导配体可能与HTNV感染所致的免疫病理损伤有关。

关键词：肾综合征出血热凋亡诱导配体表达

TRAIL与泰素帝协同诱导人肺腺癌细胞凋亡的研究

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山东大学学报（医学版） 2006年第5期44卷 531-535,540页

作者：周伟王秀问姜政衣翠华郝静温培娥山东大学齐鲁医院肿瘤防治中心山东济南250012 山东大学齐鲁医院神经外科实验室山东济南250012 山东省医学科学院基础研究所免疫室山东济南250062

目的:探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducingligand,TRAIL)和化疗药物泰素帝(TXT)联合应用对体外培养人肺腺癌A549细胞的凋亡诱导作用,并初步探讨其作用机制。方法:通过形态学观察和MT... 详细信息

目的:探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducingligand,TRAIL)和化疗药物泰素帝(TXT)联合应用对体外培养人肺腺癌A549细胞的凋亡诱导作用,并初步探讨其作用机制。方法:通过形态学观察和MTT比色法检测TRAIL、TXT及二者联合应用对A549细胞的形态学影响和细胞增殖的抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI染色,流式细胞术检测A549细胞的凋亡率;半定量RT-PCR检测TXT对A549细胞死亡受体DR4、DR5基因表达的影响。结果:①TXT对A549细胞的生长有明显的抑制作用,且呈显著的剂量依赖性,IC50为62.1 ng/ml;而A549对TRAIL不敏感,100 ng/ml的抑制率仅为(6.84±1.14)%,1600 ng/ml的抑制率为(26.10±4.02)%。4 ng/ml TXT与100 ng/ml TRAIL联合应用有显著的协同抑制作用(P凋亡率为4.44%和12.26%。100 ng/ml TRAIL与4 ng/ml TXT联合作用A549细胞24 h的凋亡率为16.84%;③4 ng/ml TXT作用前后,死亡受体DR4、DR5mRNA表达水平无明显改变。结论:人肺腺癌细胞A549对TRAIL不敏感,但TRAIL与TXT联合有显著的协同诱导细胞凋亡作用,这种协同作用机制与DR4、DR5的表达无关。

关键词：肺肿瘤肿瘤坏死因子凋亡诱导配体泰素帝细胞凋亡

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卵巢癌筛查标记物研究进展

中国公共卫生 2007年第9期23卷 1150-1152页

作者：施渺筱宋宝安杨松贵州安顺学院化学系贵州安顺561000 贵州大学精细化工研究中心

研究表明,卵巢癌发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第3位,而其死亡率占各类妇科肿瘤的首位,晚期卵巢癌5年生存率仅为25%～30%[1],同时,卵巢癌发病率有逐年上升趋势[2].由于其发病隐匿,70%的患者就诊时已属晚期,因此,卵巢癌的诊断和... 详细信息

研究表明,卵巢癌发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第3位,而其死亡率占各类妇科肿瘤的首位,晚期卵巢癌5年生存率仅为25%～30%[1],同时,卵巢癌发病率有逐年上升趋势[2].由于其发病隐匿,70%的患者就诊时已属晚期,因此,卵巢癌的诊断和治疗面临着巨大难题[3].近年来,随着cDNA微阵列技术的应用,陆续发现凋亡诱导配体(TRAIL)[4]、存活素(survivin)[5]、端粒酶(Telomerase)[6]、CA125抗原[7]、血管内皮生长因子(VEGF)[8]等几种细胞因子可作为卵巢癌的肿瘤标记物,用于卵巢癌的筛查诊断和预后评价.以提高卵巢癌的早期诊断效率,降低卵巢癌的死亡率.

关键词：晚期卵巢癌肿瘤标记物癌筛查 cDNA微阵列技术血管内皮生长因子 CA125抗原癌发病率凋亡诱导配体

XIAPsiRNA、Embelin对TRAIL诱导肝癌细胞生长抑制和细胞凋亡的影响

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中华肝胆外科杂志 2012年第5期18卷 381-385页

作者：胡回忆杨建辉宜昌市三峡大学人民医院＆宜昌市第一人民医院普通外科 443000

目的研究X-连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis，XIAP）siRNA或x1AP拮抗剂Embelin对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necros isfactor-relatedapoptosis—in—ducingligand，TRAIL）所致肝癌细胞HepG2生长抑制和细胞凋亡的影响。方法HepG2细胞转染xIAPsiRNA或者阴性对照，然后给予TRAIL处理。此外，HepG2细胞给予TRAIL、Embelin或者联合处理。XIAP表达水平变化、生长抑制、caspase-3活性分别用Westernblot、MTT测定、caspase-3荧光法检测。切割PARP的表达水平用Westernblot测定。结果XIAP蛋白表达水平在转染XIAPsiRNA后显著下调。与阴性对照相比，XIAPsiRNA显著增强TRAIL在100ng／ml（6．8％4-1．2％比11．8％±4．0％，P〈0．05）和1000ng／ml（18．9％±2．0％比26．6％±1．5％，P〈0．01）的生长抑制作用。在转染xIAPsiRNA后，TRAIL诱导caspase-3的活性和PARP的切割显著增强。此外，Embe—lin显著增强TRAIL对HepG2细胞的生长抑制（P〈0．01）、caspase-3活化（P〈0．01）和PAPR切割。结论XIAPsiRNA或Embelin在肝细胞癌的临床治疗方面具有潜在应用前景。

关键词：肝癌凋亡凋亡抑制蛋白 XIAP 凋亡诱导配体 TRAIL siRNA Embelin

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端粒酶启动子肿瘤靶向基因抗大肠癌的研究

中华普通外科杂志 2004年第8期19卷 475-477页

作者：何超陈斌张磊胡文献劳伟峰黄学锋胡晓彤方炳良浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤科杭州310016 美国MD.Anderson癌症中心

目的探讨端粒酶 (hTERT)启动子驱动的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)基因在大肠癌细胞DLD1的表达及肿瘤杀伤作用。方法通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TRAIL基因转入大肠癌细胞DLD1... 详细信息

目的探讨端粒酶 (hTERT)启动子驱动的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)基因在大肠癌细胞DLD1的表达及肿瘤杀伤作用。方法通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TRAIL基因转入大肠癌细胞DLD1,流式细胞仪检测GFP/TRAIL的表达和DLD1细胞凋亡率。结果端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白 )基因在DLD1内的表达率分别达 4 1 6 3%和 5 4 0 7% ;GFP/TRAIL基因对DLD1细胞的生长抑制率和凋亡率分别达 93 5 0 %和 5 6 97% ,与PBS和Ad/hTERT LacZ的差异有显著性 (P 凋亡作用。

关键词：端粒酶启动子基因治疗大肠癌肿瘤坏死因子凋亡诱导配体

化疗药物对TRAIL诱导人肺腺癌细胞凋亡的影响及其机制

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化疗药物对TRAIL诱导人肺腺癌细胞凋亡的影响及其机制

作者：周伟山东大学

学位级别：硕士

研究背景:原发于支气管-肺的癌(简称肺癌)为当前世界各地最常见的恶性肿瘤之一,发病率在多数国家都有明显增高趋势。在我国城市居常见恶性肿瘤的首位。预期到本世纪末,肺癌将占多数发达国家和其它国家常见恶性肿瘤的第1、2位,每4～5个... 详细信息

研究背景:原发于支气管-肺的癌(简称肺癌)为当前世界各地最常见的恶性肿瘤之一,发病率在多数国家都有明显增高趋势。在我国城市居常见恶性肿瘤的首位。预期到本世纪末,肺癌将占多数发达国家和其它国家常见恶性肿瘤的第1、2位,每4～5个死于癌症的病人中便有一个是肺癌。所以这是一个严重威胁人类生命的疾病,也是学术上受到广泛重视的研究课题。在现有化疗药物中,绝大多数在抑制生长或杀伤肿瘤细胞的同时,对机体内迅速增殖的正常细胞同样有毒害作用,尤其是骨髓造血细胞与胃肠道粘膜上皮细胞,此为化疗药物提高疗效的主要障碍。肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)作为TNF家族的新成员,对肿瘤细胞杀伤具有高度特异性,而对正常细胞无明显毒性,所以成为生物治疗领域的研究热点。研究目的:探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL或称APO-2)对人肺腺癌细胞株A549体外诱导细胞凋亡的作用及化疗药物对TRAIL抗瘤活性的影响,并初步探讨其影响机制。研究方法:1.人肺腺癌细胞株(human lung adenocarcinoma cell strain)A549体外培养。测定培养细胞增殖动力学指标,绘制A549细胞生长曲线。采用四唑盐(MTT)比色法测定TRAIL,化疗药物顺铂(DDP)、足叶乙甙(VP16)、多西他赛(TXT)以及联合应用对A549细胞增殖的生长抑制率(growth inhibitory rate,GIR),绘制生长抑制率曲线(growth inhibitory curve,GIC),计算半数抑制浓度(IC)。2.光学显微镜观察培养的正常细胞形态学及TRAIL诱导细胞凋亡的形态学改变。研究化疗药物DDP、VP16、TXT单独及与TRAIL联合应

关键词：肿瘤坏死因子凋亡诱导配体肺肿瘤/药物疗法细胞凋亡