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凋亡诱导因子与细胞凋亡(英文)

生物化学与生物物理学报 2003年第10期35卷 881-885页

作者：吕翠仙樊廷俊胡国斌丛日山中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系青岛266003

凋亡诱导因子 (apoptosisinducefactor,AIF)是定位于线粒体膜间隙中的一种氧化还原酶 ,含有线粒体定位信号和核定位信号序列 ,具有很强的促凋亡活性 ,在类胚体成腔和胚胎早期分化过程中具有重要作用。在死亡信号或细胞胁迫的刺激下 ,线... 详细信息

凋亡诱导因子 (apoptosisinducefactor,AIF)是定位于线粒体膜间隙中的一种氧化还原酶 ,含有线粒体定位信号和核定位信号序列 ,具有很强的促凋亡活性 ,在类胚体成腔和胚胎早期分化过程中具有重要作用。在死亡信号或细胞胁迫的刺激下 ,线粒体通透性转变孔开放 ,释放AIF及细胞色素c至细胞质溶质中 ,具有核定位信号序列的AIF便进入细胞核内 ,引起染色质的初步凝集和DNA大规模断片化 (约 5 0kb) ,进而引发不依赖于胱冬肽酶的细胞凋亡途径 ;线粒体膜间隙释放出来的细胞色素c则可引起染色质的进一步凝集和DNA的寡核小体断片化 ,从而引发依赖于胱冬肽酶的细胞凋亡途径 ;与此同时 ,从线粒体膜间隙释放出来的AIF又可反馈放大线粒体通透性转变孔的渗透性 ,引起AIF与细胞色素c的进一步释放从而加快细胞死亡的进程。此外 ,细胞胁迫还可激活由多聚 (ADP 核糖 )聚合酶 1(PARP 1)所引发的细胞凋亡途径 ,通过AIF和细胞色素c引发细胞凋亡。最新研究结果表明 ,AIF同源线粒体关联死亡诱导者 (AIF homologousmitochondria associatedinducerofdeath ,AMID)与p5 3应答基因的编码产物 (p5 3 responsivegene 3,PRG3)均为AIF的同源蛋白质 ,可直接诱导人类细胞的凋亡。线虫的凋亡诱导因子WAH 1所诱导的细胞凋亡途径依赖于胱冬肽酶

关键词：凋亡诱导因子 AIF同源线粒体关联死亡诱导者AMID p53应答基因的编码产物PRG3 线虫凋亡诱导因子胱冬肽酶

凋亡诱导因子是线粒体内介导核凋亡的最主要蛋白质之一

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生物化学与生物物理进展 2002年第2期29卷 177-179页

作者：于翠娟孟艳玲王成济杨安钢第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安710032

凋亡诱导因子 (apoptosis inducingfactor ,AIF)基因定位于X染色体上 ,其编码产物是一种可直接介导细胞核凋亡的效应分子 .鼠AIF前体蛋白在胞浆中合成后 ,通过其N端的线粒体定位信号 (MLS)有效地穿入线粒体膜间隙 ,然后在 10 2位甘氨酸... 详细信息

凋亡诱导因子 (apoptosis inducingfactor ,AIF)基因定位于X染色体上 ,其编码产物是一种可直接介导细胞核凋亡的效应分子 .鼠AIF前体蛋白在胞浆中合成后 ,通过其N端的线粒体定位信号 (MLS)有效地穿入线粒体膜间隙 ,然后在 10 2位甘氨酸处水解掉MLS ,其余部分再与黄素腺嘌呤二核苷酸 (FAD)结合 ,并重新折叠成为具有促凋亡潜能的成熟AIF分子 ,分子质量为 5 7ku .当凋亡信号刺激时 ,AIF分子从线粒体释放到胞浆 ,然后转位到细胞核内 ,引起染色体核周边凝集和DNA呈大片段断裂 (～ 5 0kb) .该作用不受广谱caspases抑制剂z VAD .fmk的抑制 ,也不受Bcl 2过量表达的影响 .基因剔除实验表明 ,AIF蛋白的促凋亡活性是胚胎小鼠形态发生过程中类胚体成腔所必需的 ,而且是AIF独立作用的结果 ,可以不依赖caspase 3的活性 .因此AIF介导的细胞凋亡可能代表了独立于caspase通路之外的另一条更原始、更保守的凋亡途径 .

关键词：凋亡诱导因子细胞凋亡天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶线粒体核凋亡

凋亡诱导因子介导缺氧/复氧致肥大心肌细胞凋亡的作用

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生理学报 2006年第6期58卷 599-605页

作者：冯兵周小波杨旭叶自林何作云第三军医大学新桥医院肾内科重庆400037

心肌细胞凋亡导致心肌组织合胞体功能丧失,最终使代偿性心肌肥大向心力衰竭转化。过去的研究已经确认天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspartate-specificcysteinylproteinase,caspase)依赖机制在心肌细胞凋亡中的作用,但对caspase非... 详细信息

心肌细胞凋亡导致心肌组织合胞体功能丧失,最终使代偿性心肌肥大向心力衰竭转化。过去的研究已经确认天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspartate-specificcysteinylproteinase,caspase)依赖机制在心肌细胞凋亡中的作用,但对caspase非依赖机制即凋亡诱导因子(apoptosis-inducingfactor,AIF)在心肌细胞凋亡中的作用尚不明确。本研究应用血管紧张素Ⅱ(0.1μmol/L培养12h)诱导培养的小鼠肥大心肌细胞,利用三气孵箱建立缺氧/复氧模型以模拟缺血再灌注。应用RT-PCR、Westernblot、siRNA基因转染、Hoechst33258染色法检测AIF在mRNA和蛋白质水平的表达及细胞凋亡的变化,分析AIF在缺氧/复氧致肥大心肌细胞凋亡中的意义。结果如下:(1)与对照组比较,缺氧8h组(H8h)和缺氧12h组(H12h)AIFmRNA及蛋白表达水平均显著升高(mRNA:0.52±0.04及0.85±0.10vs0.29±0.08,P凋亡无明显影响(P>0.05),但可显著降低缺氧/复氧诱导的肥大心肌细胞凋亡率(P诱导的肥大心肌细胞凋亡的抑制作用。(4)抑制caspase-3活性对缺氧/复氧诱导的AIF核转位无明显影响。上述结果提示,缺氧/复氧时AIFmRNA、蛋白表达和核转位均显著增加,且在缺氧/复氧诱导肥大心肌细胞凋亡中具有重要的作用。

关键词：心肌肥大细胞凋亡缺氧/复氧凋亡诱导因子

凋亡诱导因子介导顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡

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中华肿瘤杂志 2010年第3期32卷 173-178页

作者：刘晔郭晔吴慧娟张志刚郭慕依复旦大学上海医学院病理学系 200032 复旦大学肿瘤医院化疗科

目的研究凋亡诱导因子（AIF）在顺铂诱导肾小管上皮细胞HK-2凋亡中的作用。方法采用Westernblot法和荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）分别检测不同浓度（0、25、50、100、150、***／L）和不同时问（0、3、6、9、12h）顺铂作用下，体外培... 详细信息

目的研究凋亡诱导因子（AIF）在顺铂诱导肾小管上皮细胞HK-2凋亡中的作用。方法采用Westernblot法和荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）分别检测不同浓度（0、25、50、100、150、***／L）和不同时问（0、3、6、9、12h）顺铂作用下，体外培养HK-2细胞中AIF蛋白和mRNA表达。采用免疫荧光染色检测顺铂作用下HK．2细胞AIF表达分布。采用原位末端标记（TUNEL）法和流式细胞仪检测泛caspase抑制剂和AIF靶向siRNA对顺铂作用下HK-2细胞凋亡的抑制作用。结果经不同浓度和不同时间顺铂的作用，HK-2细胞胞质AIF（cAIF）、胞核AIF（nAIF）及其mRNA表达均有不同程度增加。从25μmol／L顺铂作用12h和50μmol／L顺铂作用3h起，cAIF表达均有升高，分别是对照组的2．3倍（P〈0．05）和1．7倍（P〈0．01）。nAIF表达呈一定浓度和时间依赖性，在150μmol／L顺铂作用12h和50p,mol／L顺铂作用9h达到高峰，分别为25μmol／L组的4．3倍（P〈0．005）和3h组的3．7倍（P〈0．05），nAIF表达与多聚腺苷二磷酸一核糖聚合酶1（PARP-1）剪切片段（cl—PARP）的表达趋势基本一致。AIFmRNA表达在50μmol／L顺铂作用0～9h区间呈梯度增加。免疫荧光染色结果显示，经顺铂作用后，部分HK-2细胞发生AIF核转位。泛caspase抑制剂***-FMK和AIFsiRNA对顺铂诱导细胞凋亡的抑制率分别为60，1％和39．2％，两者联合应用的抑制作用更加明显。结论AIF蛋白激活和核转位以及AIFmRNA表达的增加介导了顺铂诱导的肾小管上皮细胞的凋亡，可能为防治顺铂诱导的肾毒性作用提供了新靶点。

关键词：凋亡诱导因子顺铂 HK-2细胞凋亡多聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶l caspases RNA干扰

凋亡诱导因子AIF基因真核表达载体的构建及表达

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四川大学学报（医学版） 2013年第2期44卷 170-174页

作者：邓雯文刘蜀坤张遵真四川大学华西公共卫生学院环境卫生学教研室成都610041 成都中医药大学公共卫生学院卫生毒理学教研室成都611137

目的利用TA克隆法构建凋亡诱导因子(AIF)的真核表达载体AIF-pcDNA3.1(+),并研究其在人肺腺癌A549细胞中的表达。方法根据GenBank上AIF的mRNA序列设计特异性引物,以A549细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增AIF基因。并用TA克隆法,将AIF目的基因... 详细信息

目的利用TA克隆法构建凋亡诱导因子(AIF)的真核表达载体AIF-pcDNA3.1(+),并研究其在人肺腺癌A549细胞中的表达。方法根据GenBank上AIF的mRNA序列设计特异性引物,以A549细胞总RNA为模板,RT-PCR扩增AIF基因。并用TA克隆法,将AIF目的基因连接到pUC-T载体,行双酶切和DNA测序鉴定;回收目的片段并将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+)构建重组质粒AIF-pcDNA3.1(+)。最后,将AIF-pcDNA3.1(+)转染A549细胞,RT-PCR和Western blot检测转染细胞AIF基因的表达。结果成功扩增617bp的AIF目的基因片段并连接pUC-T载体,测序后回收目的片段并与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,DNA序列分析显示,连接在真核表达载体上的基因片段与GenBank中的AIF序列完全吻合。RT-PCR和Western blot检测结果显示,转染了AIF-pcDNA3.1(+)的A549细胞AIF mRNA和蛋白表达水平均高于未转染细胞(P<0.05)。结论成功构建了真核表达载体AIF-pcDNA3.1(+),转染后能够在A549细胞中表达。

关键词：凋亡诱导因子真核表达载体TA克隆转染

凋亡诱导因子和caspase-3在结直肠腺瘤-癌序列中的表达及相关性

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中华胃肠外科杂志 2009年第4期12卷 391-394页

作者：关健婷王玲王永李园王蓉张文燕詹兰周总光四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室消化外科研究室成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室病理科研究室成都610041

目的探讨非caspase依赖凋亡途径的凋亡诱导因子（AIF）与caspase依赖凋亡途径的caspase-3在结直肠腺瘤．癌序列中的表达变化及两种蛋白之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色检测18例正常黏膜、84例结直肠腺瘤和72例结直肠癌中AIF及ca... 详细信息

目的探讨非caspase依赖凋亡途径的凋亡诱导因子（AIF）与caspase依赖凋亡途径的caspase-3在结直肠腺瘤．癌序列中的表达变化及两种蛋白之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色检测18例正常黏膜、84例结直肠腺瘤和72例结直肠癌中AIF及caspase-3的表达情况。结果结直肠腺瘤组织中AIF及caspase-3的阳性表达率均明显高于正常黏膜组织（P〈0．05）；腺瘤组织中AIF阳性表达率与腺癌之间的差异无统计学意义（P〉0．05），而caspase-3阳性表达率则明显高于腺癌组织（P〈0．05）；腺瘤组内绒毛状腺瘤AIF阳性表达率明显低于管状腺瘤（P〈0．05），而caspase-3阳性表达率在两种腺瘤之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。相关分析显示，AIF表达与caspase-3表达无显著相关性（P〉0．05）。结论AIF代表的非caspase依赖凋亡途径异常发生在腺瘤向癌突变早期．而caspase依赖途径的凋亡失控可能是更重要的促进结直肠癌发生的因素之一。非caspase依赖的凋亡途径与caspase依赖的凋亡途径是肿瘤发生中两条相对独立的细胞凋亡途径。

关键词：结直肠肿瘤腺瘤凋亡诱导因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

截断型线粒体凋亡诱导因子相互作用蛋白质的筛选与鉴定

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生物化学与生物物理进展 2009年第1期36卷 42-48页

作者：付玉荣伊正君李猛邵丽军宋淑亚山东省潍坊医学院基础医学教学部病原生物学教研室潍坊261053 山东省潍坊医学院临床学院临床免疫学教研室潍坊261042 山东省潍坊医学院预防医学系潍坊261042

线粒体凋亡诱导因子(AIF)是一类存在于线粒体内外膜之间保守的黄素蛋白,它从线粒体到细胞核的转位可诱导细胞凋亡.AIF诱导细胞凋亡的确切机制还不是很清楚.为了筛选可能与截断型AIF存在相互作用的蛋白质,探讨截断型AIF诱导细胞凋亡的机... 详细信息

线粒体凋亡诱导因子(AIF)是一类存在于线粒体内外膜之间保守的黄素蛋白,它从线粒体到细胞核的转位可诱导细胞凋亡.AIF诱导细胞凋亡的确切机制还不是很清楚.为了筛选可能与截断型AIF存在相互作用的蛋白质,探讨截断型AIF诱导细胞凋亡的机制,用逆转录PCR扩增剪切掉线粒体定位信号的人AIF基因片段并克隆入pcDNA3.1载体,导入肝癌HepG2细胞.成功检测到截断型在转录与翻译水平上的表达.提取转染截断型AIF基因的细胞的蛋白质,用免疫沉淀方法分离与截断型可能存在相互作用的蛋白质,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱对分离得到的蛋白质进行鉴定,其中一蛋白质条带经鉴定为β-actin.再次用反向免疫共沉淀法与Western blot法对筛选出的可能相互作用蛋白质进行验证.结果表明,截断型AIF与β-actin之间可能存在相互作用.

关键词：凋亡诱导因子细胞基质辅助激光解析电离飞行时间质谱免疫共沉淀

凋亡诱导因子在慢性氟中毒大鼠脑组织神经细胞凋亡中的作用

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中华地方病学杂志 2015年第9期34卷 655-659页

作者：魏露莎禹文峰詹赞琳周冰峰吴忠琴官志忠贵州医科大学病理学教研室贵阳550004 贵州省医学分子生物学重点实验室贵州省贵阳市妇幼保健院优生遗传科

目的了解凋亡诱导因子（apoptosis—inducing factor，AIF）介导的非凋亡经典途径在慢性氟中毒大鼠大脑神经细胞凋亡过程中的作用。方法清洁级SD大鼠60只，体质量100～120g，按体质量采用随机数字表法分为对照组与染氟组，每组30只，雌... 详细信息

目的了解凋亡诱导因子（apoptosis—inducing factor，AIF）介导的非凋亡经典途径在慢性氟中毒大鼠大脑神经细胞凋亡过程中的作用。方法清洁级SD大鼠60只，体质量100～120g，按体质量采用随机数字表法分为对照组与染氟组，每组30只，雌雄各半，均饲以标准营养动物饲料（含氟量〈0．5mg／kg）。对照组自由饮用自来水（含氟量〈0．5mg／L）；染氟组自由饮用含氟水，氟含量[用氟化钠（NaF）配制]为50．0mg／L，复制慢性氟中毒大鼠模型。10个月后，采用磷酸盐缓冲液经心脏灌流处死动物，断头并取脑组织备用。采用免疫组织化学方法检测大脑皮质及海马AIF分布；蛋白免疫印迹方法检测脑组织中AIF、具有活性的已剪切的（cl）-caspase-3及cl—caspase-9的蛋白表达水平；流式细胞术检测大鼠脑组织细胞凋亡率。结果免疫组织化学结果：染氟组大鼠海马（***2、CA3）及皮质顶叶神经细胞AIF阳性表达（7．50±2．17、9．00±1．63、8．00±0．82、10．24±1．80）明显高于对照组（5．18±1．66、6．27±1．42、6．36±1．96、6．96±2．62），差异有统计学意义（t=2．76、4．09、2．45和5．77，P均〈0．05）。蛋白免疫印迹结果：染氟组大鼠脑组织神经细胞线粒体内AIF的蛋白表达水平[（89．46±8．47）％]明显低于对照组[（100．00±7．12）％，t=3．16，P〈0．01]，而细胞核中AIF的蛋白表达水平[（112．80±7．10）％]明显高于对照组[（100．00±8．20）％，t=3．75，P〈0．01]；染氟组大鼠脑组织神经细胞cl—caspase-3、cl-caspase-9蛋白表达[海马与皮质分别为（132．14±18．66）％、（107．31±2．58）％。（121．33±14．86）％、（112．97±7．97）％]明显高于对照组[（100．00±11．99）％、（100．00±3．74）％，（100．00±16．87）％、（100．00±8．04）％，t=3．55、3．94、2．32、2．81，P〈0．01或〈0．05]。细胞凋亡结果：染氟组大鼠海马与皮质神经细胞凋亡率[（2．55±0．58）％、（3．05±0．65）％]与对照组[（1．28±0．59）％、（1．88±0．25）％]比较显著增高，差异有统计学意义（t=3．08、3．40，P均〈0．05）。结论以AIF为主的非easpase依赖性凋亡途径与通过激活caspase介导的经典途径共同参与慢性氟中毒大鼠脑组织神经细胞凋亡，是慢性氟中毒引起的脑损伤发生机制之一。

关键词：氟中毒凋亡诱导因子脑细胞凋亡

凋亡诱导因子与遗传性听神经病及相关疾病研究进展

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中华耳科学杂志 2015年第2期13卷 255-257页

作者：纵亮王秋菊解放军总医院解放军医学院耳鼻咽喉头颈外科解放军耳鼻咽喉研究所北京100853

凋亡诱导因子（AIF）由AIFMI基因（apoptosis inducingfactor1）编码，这是一种定位于线粒体内膜间隙的黄素蛋白。最早AIF是作为caspase-非依赖性凋亡效应分子被发现的，其在凋亡损伤时由线粒体转运至细胞核，诱导细胞程序性死亡。

关键词：凋亡诱导因子相关疾病听神经病遗传性细胞程序性死亡黄素蛋白效应分子非依赖性