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伤寒杆菌耐药质粒pR_(ST98)毒力基因的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第5期23卷 393-396页

作者：黄瑞吴淑燕张学光苏州大学医学院微生物学教研室苏州大学医学院电镜室苏州大学生命科学学院

目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属其他致病菌毒力质粒上的保守基因spv。方法　用QIAGEN试剂盒提取pRST98,精确定量后选用 8种限制性核酸内切酶消化 ,建立该质粒的酶切图谱。用spv特异引物的PCR扩增和spv探针... 详细信息

目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属其他致病菌毒力质粒上的保守基因spv。方法　用QIAGEN试剂盒提取pRST98,精确定量后选用 8种限制性核酸内切酶消化 ,建立该质粒的酶切图谱。用spv特异引物的PCR扩增和spv探针Southernblot法分析pRST98的基因构成。结果　pRST98酶切图谱显示BglⅡ、PstⅠ和SacⅡ作用后片段均一 ,是对该质粒进行分子生物学和分子流行病学研究的理想工具。PCR和Southernblot结果显示 ,伤寒杆菌耐药质粒pRST98上存在其他沙门菌毒力质粒上高度保守基因spv的同源序列。结论　从基因水平首次证实伤寒杆菌耐药质粒pRST98具有多效性 ,是既编码抗药性又编码细菌毒力的“嵌合型”质粒。

关键词：伤寒杆菌耐药性 pRST98 毒力基因

Cre/loxP介导的伤寒杆菌染色体上插入基因的切除

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生物化学与生物物理进展 2001年第5期28卷 732-735页

作者：钱锋潘卫庆杜景伶第二军医大学病原生物学教研室上海200433

来源于P1噬菌体的位点专一性重组系统loxP/Cre,已成为一种新的DNA操作的有用工具 ,在体内外都获得了成功的应用 .为了将四环素诱导表达系统引入减毒伤寒杆菌CVD90 8株中 ,tetR loxP neo串联基因已通过同源重组被定位插入在CVD90 8株的△... 详细信息

来源于P1噬菌体的位点专一性重组系统loxP/Cre,已成为一种新的DNA操作的有用工具 ,在体内外都获得了成功的应用 .为了将四环素诱导表达系统引入减毒伤寒杆菌CVD90 8株中 ,tetR loxP neo串联基因已通过同源重组被定位插入在CVD90 8株的△aroC位点中 .构建一Cre酶表达受启动子PLtetO 1控制的自杀质粒 pJG9/Cre ,以切除CVD90 8株△aroC中同向loxP序列之间的neo基因 .质粒pJG9/Cre电转化入菌中 ,加入去水四环素诱导Cre酶表达 ,通过重组切除neo基因 ,再通过自杀质粒上SacB基因的启动 ,使质粒清除出菌细胞 .抗生素鉴定和PCR扩增都证明 ,CVD90

关键词： Cre loxP 位点专一性重组基因切除伤寒杆菌染色体疫苗

伤寒杆菌内毒素对GATA-3表达及前房相关免疫偏离形成的影响

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中华医学杂志 2003年第18期83卷 1615-1618页

作者：傅涛杨培增黄祥坤郑湖玲周红颜钟华红首都医科大学北京同仁眼科中心 100730 中山大学中山眼科中心

目的　观察眼部炎症时前房注射抗原后GATA 3表达的变化以及对前房相关免疫偏离(ACAID)形成的影响。方法　将 5 μl光感受器间维生素A类结合蛋白 (IRBP) ( 10g/L)注射至SD大鼠前房诱导ACAID的动物模型 ,于前房注射IRBP前 4d( - 4d组 )、2... 详细信息

目的　观察眼部炎症时前房注射抗原后GATA 3表达的变化以及对前房相关免疫偏离(ACAID)形成的影响。方法　将 5 μl光感受器间维生素A类结合蛋白 (IRBP) ( 10g/L)注射至SD大鼠前房诱导ACAID的动物模型 ,于前房注射IRBP前 4d( - 4d组 )、2 4h( - 2 4h组 )、0h( 0h组 )以及前房注射IRBP后 3d( 3d组 )、7d( 7d组 )从足底注射 2 0 0 μg伤寒杆菌内毒素 (LPS)。各组于前房注射IRBP后第 8天 ,采用酶联免疫吸附分析 (ELISA)法检测血清白细胞介素 4 (IL 4 )水平 ,以监测ACAID的形成 ,并取脾组织行逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和Western免疫印迹 ,检测GATA 3基因及蛋白表达的变化 ,进行半定量分析。每组 6只 ,每个样品实验重复 3次。结果　 - 2 4h组和 0h组LPS注射后 2 4h眼部炎症到达高峰 ,前房注射IRBP 8d后血清中测不出IL 4 ,GATA 3基因和蛋白表达无明显增加 ;- 4d组LPS注射 4d后眼部炎症消退 ,此时前房注射IRBP ,8d后血清中IL 4水平显著升高( 10 4pg/ml± 3 4pg/ml,P <0 0 1) ,GATA 3基因和蛋白表达增加 ;3d组前房注射IRBP 8d后血清中未测出IL 4 ,GATA 3基因和蛋白表达无增加 ;7d组前房注射IRBP 8d后血清中IL 4升高 ( 10 0pg/ml± 2 5pg/ml,P <0 0 1) ,GATA 3基因和蛋白表达增加。结论　LPS诱导眼部炎?

关键词：伤寒杆菌内毒素 GATA-3 表达前房相关免疫偏离形成

表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的减毒鼠伤寒杆菌口服疫苗制备

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Chinese Medical Journal 2002年第10期115卷 1513-1516页

作者：刘晓峰胡家露等济南军区总医院消化科济南市250031 第四军医大学西京医院全军消化病研究所西安710032

目的：制备表达幽门螺杆菌（***）尿素酶B亚单位（UreB）的减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗，并观测Balb/c小鼠口服该重组疫苗后的免疫效果。方法：构建表达UreB的重组减毒鼠伤寒杆菌的疫苗株，SL3261/pTC01-UreB，并用Western-blot检测Ure... 详细信息

目的：制备表达幽门螺杆菌（***）尿素酶B亚单位（UreB）的减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗，并观测Balb/c小鼠口服该重组疫苗后的免疫效果。方法：构建表达UreB的重组减毒鼠伤寒杆菌的疫苗株，SL3261/pTC01-UreB，并用Western-blot检测UreB的表达。将SL3261/pTC01-UreB口服免疫Balb/c小鼠，12周后检测肠液和血清中的特异性抗体反应及脾细胞培养液上清中的IFN-γ和IL-10含量。结果：Western-blot显示减毒鼠伤寒杆菌株SL3261/pTC01-UreB能表达约61KD的蛋白，与***亚单位蛋白分子量相符，具有抗原性。口服免疫小鼠后，疫苗组小鼠的肠液和血清中可分别检测到针对UreB的特异性IgA和IgG抗体，小鼠脾细胞培养上清中的IFN-γ和IL-10的含量亦明显升高。病理学检查显示疫苗组小鼠与对照组小鼠胃粘膜炎症指数无差异。结论：表达*** UreB的减毒鼠伤寒杆菌SL3261/pTC01-UreB可用作抗***感染的口服疫苗。

关键词：口服疫苗幽门螺杆菌尿毒酶伤寒杆菌

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伤寒杆菌耐喹诺酮类机制分子生物学基础研究

中华传染病杂志 2000年第2期18卷 106-109页

作者：肖永红王其南重庆医科大学附属第一医院 400016

目的　研究伤寒杆菌DNA旋转酶A亚单位基因 (gyrA)变异与其耐喹诺酮类的关系。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)检测、限制性片段长度多态性 (RFLP)、单链构象多态性分析 (SSCP)及序列测定 ,对伤寒杆菌S2 75 (临床分离敏感菌株 )及其自发耐... 详细信息

目的　研究伤寒杆菌DNA旋转酶A亚单位基因 (gyrA)变异与其耐喹诺酮类的关系。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)检测、限制性片段长度多态性 (RFLP)、单链构象多态性分析 (SSCP)及序列测定 ,对伤寒杆菌S2 75 (临床分离敏感菌株 )及其自发耐药突变株RG1,DNAgyrA喹诺酮类耐药决定区进行了研究。结果　伤寒杆菌S2 75 gyrA第 12 8～ 42 6位碱基与大肠杆菌KL 16高度同源 ,仅 7.49%有差异 ,且大部分为静变异 ,最终仅使DNA旋转酶A亚单位产生Thr 45→His、Arg 49→Leu及Val 5 6→Gly ,均位于喹诺酮耐药决定区 (第 6 7～ 10 6位氨基酸 )外。RG1仅有第 2 47位碱基T→G变异 ,相应Ser 83→Ala ,使萘啶酸、氧氟沙星及环丙沙星对伤寒杆菌的MIC由 2、0 .0 6、杆菌该位以苯丙氨酸、酪氨酸替换为主不同。PCR RFLP及SSCP分析结果与上述情况类似。结论　gryA第

关键词：伤寒杆菌喹诺酮类药物耐药性

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伤寒杆菌R质粒不相容性分群

中华微生物学和免疫学杂志 1992年第6期12卷 357-360页

作者：顾国浩穆荣普苏州医学院医学生物技术研究所

对11株伤寒沙门氏菌耐药质粒进行了不相容性（Incompatibility, Inc）分群。结果该质粒和R 40a或pIP 55质粒呈不相容反应，属Inc C群，与近年来国外耐药伤寒杆菌的Inc HI 1群质粒不同，暂命名为pMG质粒。质粒电泳图谱进... 详细信息

对11株伤寒沙门氏菌耐药质粒进行了不相容性（Incompatibility, Inc）分群。结果该质粒和R 40a或pIP 55质粒呈不相容反应，属Inc C群，与近年来国外耐药伤寒杆菌的Inc HI 1群质粒不同，暂命名为pMG质粒。质粒电泳图谱进一步确认了分群结果。pMG质粒具有分子量大、表面排斥性和温敏结合转移等特性。推测pMG质粒的传播和扩散是苏州地区1987～1988年伤寒流行的主要因素；1985年以来国内其他地区流行的耐药伤寒杆菌的R质粒很可能也与Inc C群有关。该质粒目前在散发病例的伤寒杆菌中依然存在，应引起足够重视。

关键词：伤寒杆菌质粒分群沙门氏杆菌属

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伤寒杆菌的L型变异

临床检验杂志 1989年第4期7卷 211-212页

作者：宋秀宇黄谷良林特夫蚌埠医学院微生物学教研室

伤寒的诊断一般基于有典型的临床表现及从患者体内分离出伤寒沙门氏菌,但是即使在某些症状典型、病情严重的患者,常规的分离培养有时也得不到阳性结果,而增做细菌L 型培养可提高分离培养的阳性率.一、伤寒杆菌L 型的诱导1.培养条件软琼... 详细信息

伤寒的诊断一般基于有典型的临床表现及从患者体内分离出伤寒沙门氏菌,但是即使在某些症状典型、病情严重的患者,常规的分离培养有时也得不到阳性结果,而增做细菌L 型培养可提高分离培养的阳性率.一、伤寒杆菌L 型的诱导1.培养条件软琼脂、动物血清及厌氧培养对伤寒杆菌L 型的诱导、分离及传代是必需的条件。

关键词：伤寒杆菌 L型变异抗原

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伤寒杆菌引起化脓性髋关节炎1例报告

中国矫形外科杂志 2015年第15期23卷 1439-1440页

作者：王鼎陈达杨鹏韩序勇张庆文广州中医药大学广州510006 广州中医药大学第一附属医院三骨科

伤寒杆菌是肠道沙门氏菌的一个血清型,主要经粪口途径传播,常引起急性肠胃炎。感染伤寒杆菌可出现各种表现,如伤寒热、败血症、肠胃炎及病菌携带状态等。败血症可以伴或不伴局部化脓性病灶,局部化脓灶可以侵犯人体各个部位,也包括骨关... 详细信息

伤寒杆菌是肠道沙门氏菌的一个血清型,主要经粪口途径传播,常引起急性肠胃炎。感染伤寒杆菌可出现各种表现,如伤寒热、败血症、肠胃炎及病菌携带状态等。败血症可以伴或不伴局部化脓性病灶,局部化脓灶可以侵犯人体各个部位,也包括骨关节组织。虽然人类容易感染伤寒杆菌,但是由其引起的化脓性关节炎则非常罕见。作者在临床上遇到一例系统性红斑狼疮患者并发伤寒杆菌性化脓性髋关节炎,现将病例报告如下。

关键词：系统性红斑狼疮伤寒杆菌化脓性关节炎髋关节

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伤寒杆菌耐药性及R质粒的研究进展

国外医学（流行病学．传染病学分册） 1989年第5期16卷 211-215页

作者：阮冰龚正马亦林浙江医科大学附属一院传染病科

近几年来、伤寒杆菌耐药菌株不断出现,而且呈现多重耐药,且后果严重。研究发现,抗药性的发生及传播与R质粒密切相关。本文就这方面的一些进展作一述评。

关键词：伤寒杆菌抗药性 R质粒