Cre/loxP介导的伤寒杆菌染色体上插入基因的切除

作     者：钱锋 潘卫庆 杜景伶 

作者机构：第二军医大学病原生物学教研室上海200433 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2001年第28卷第5期

页      面：732-735页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 0703[理学-化学] 10[医学] 

基　　金：国家"8 63"计划 (10 2 0 7 0 4 0 4) 国家自然科学基金(3 9780 0 2 4)资助项目~~ 

主　　题：Cre loxP 位点专一性重组 基因切除 伤寒杆菌 染色体 疫苗 

摘      要：来源于P1噬菌体的位点专一性重组系统loxP/Cre,已成为一种新的DNA操作的有用工具 ,在体内外都获得了成功的应用 .为了将四环素诱导表达系统引入减毒伤寒杆菌CVD90 8株中 ,tetR loxP neo串联基因已通过同源重组被定位插入在CVD90 8株的△aroC位点中 .构建一Cre酶表达受启动子PLtetO 1控制的自杀质粒 pJG9/Cre ,以切除CVD90 8株△aroC中同向loxP序列之间的neo基因 .质粒pJG9/Cre电转化入菌中 ,加入去水四环素诱导Cre酶表达 ,通过重组切除neo基因 ,再通过自杀质粒上SacB基因的启动 ,使质粒清除出菌细胞 .抗生素鉴定和PCR扩增都证明 ,CVD90