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人参肽LTGYAP抗衰老作用的研究

人参肽LTGYAP抗衰老作用的研究

作者：何金霖吉林大学

学位级别：硕士

衰老是一个由多因素引起的、复杂的、必然的生理过程,在此过程中可能会引起很多疾病的发生,如心血管疾病（如动脉粥样硬化）、自身免疫性疾病、呼吸系统疾病、神经系统疾病（如阿尔兹海默症）和代谢性疾病（如糖尿病）等。一些常规抗衰... 详细信息

衰老是一个由多因素引起的、复杂的、必然的生理过程,在此过程中可能会引起很多疾病的发生,如心血管疾病（如动脉粥样硬化）、自身免疫性疾病、呼吸系统疾病、神经系统疾病（如阿尔兹海默症）和代谢性疾病（如糖尿病）等。一些常规抗衰老的药物存在一定的副作用与不耐受情况,因此迫切需要开发新的、有效的和低副作用的药物。人参具有一定的抗氧化和抗衰老活性,本文以植物来源的人参肽单体LTGYAP为研究对象,通过体内外实验探究了LTGYAP抗衰老的活性,利用生物信息学方法探究了LTGYAP抗衰老作用的潜力及潜在机制,主要内容如下:（1）本文使用H2O2诱导Hep G2细胞氧化应激,探究LTGYAP的体外抗氧化效果。实验结果表明,H2O2可以在一定程度上损伤细胞,与模型组相比,LTGYAP显著降低了细胞内MDA（Malondialdehyde丙二醛）、LDH（Lactatedehydrogenase乳酸脱氢酶）以及ROS（Reactive Oxygen Species活性氧）含量。同时LTGYAP也显著增加了内源性抗氧化酶的产生。在凋亡相关实验中,LTGYAP可以维持细胞结构稳定、缓解氧化应激下线粒体膜电位的下降,流式细胞凋亡检测的结果证明,LTGYAP可以减少细胞凋亡率。上述结果表明LTGYAP可以缓解H2O2诱导的细胞氧化应激反应、抑制线粒体功能损伤和细胞凋亡,维持细胞内自由基动态平衡,改善氧化损伤,延缓细胞衰老。（2）本文通过体内的线虫模型实验,进一步验证LTGYAP的抗衰老活性,以秀丽隐杆线虫为模式生物,LTGYPA为研究对象,完成线虫寿命和生理指标的测定,实验结果表明,LTGYAP可以显著的延长秀丽隐杆线虫的寿命,不干扰线虫正常生理活动的同时改善了线虫健康状况,增强线虫移动速度和产卵量,与CTRL组相比,脂肪、ROS和脂褐素的积累减少。LTGYAP提高了线虫对不利环境的抗性。且突变体的实验结果表明,LTGYAP可以通过胰岛素通路中daf-2和daf-16基因提高线虫抗逆性,延缓线虫衰老。（3）本文通过网络药理学的方法,进一步探究LTGYAP抗衰老作用的潜在机制。LTGYAP与衰老共找到140个交集靶点,这些靶点主要富集在胰岛素信号通路、细胞信号传导等相关通路,其中ALB、AKT1、CASP3为核心靶点。分子对接结果表明LTGYAP主要通过非共价键与核心靶点结合,说明LTGYAP能够与核心靶点ALB、AKT1、CASP3作用,进而通过胰岛素信号通路等发挥抗衰老作用。综上所述,本研究在细胞水平上验证LTGYAP的抗氧化作用,以线虫为模式生物探究LTGYAP的抗衰老活性,通过网络药理学研究推断LTGYAP的作用靶点,为抗衰老新药的研究提供了新思路。

关键词：抗衰老人参肽氧化应激秀丽隐杆线虫

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人参肽的分离纯化及活性分析

中国食品添加剂 2022年第8期33卷 50-57页

作者：孔箫亭毛肇洁胡宁刘玉娟薛鹏林冰洁韩彩静张丰香潍坊医学院公共卫生学院潍坊261053 潍坊市食品营养与安全重点实验室潍坊261053 青岛妇女儿童医院青岛266034

以粗人参肽为原料,80%乙醇为洗脱溶液,用DA201-C大孔树脂进行纯化,测定纯化前后多肽的抗氧化活性(DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、还原力)、酪氨酸酶抑制能力、α-葡萄糖苷酶抑制能力等生物活性及分子量分布、氨基酸组成、滋味等指... 详细信息

以粗人参肽为原料,80%乙醇为洗脱溶液,用DA201-C大孔树脂进行纯化,测定纯化前后多肽的抗氧化活性(DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、还原力)、酪氨酸酶抑制能力、α-葡萄糖苷酶抑制能力等生物活性及分子量分布、氨基酸组成、滋味等指标。在活性方面,粗人参肽具有一定的抗氧化活性,酪氨酸酶抑制活性,α-葡萄糖苷酶抑制活性,纯化后抗氧化活性提高不明显,酪氨酸酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性均有较大提高,尤其是α-葡萄糖苷酶抑制活性提高较显著,在10mg/mL时是纯化前的13.29倍。在分子量方面,粗人参肽中1500Da以上的占比25.37%,纯化后分子量减小,1000Da以下占比85%以上;在氨基酸组成方面,纯化前后人参肽中甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸和谷氨酸含量均较高,分别为73.2%和75.4%;纯化后疏水性氨基酸显著增加,增幅为12.15%。在滋味方面,纯化后苦味较突出,苦味值为8.00。实验结果表明,人参肽的抗氧化活性可能与甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸和谷氨酸含量较高有关;酪氨酸酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性可能与丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、脯氨酸等疏水性氨基酸含量增加且纯化后分子量变小有关;人参肽的活性与滋味也有一定关联;本文研究为后续筛选肽段明确的人参活性肽奠定了基础。

关键词：人参肽分离纯化活性分子量氨基酸组成滋味

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基于Nrf2/Keap1信号通路探讨人参肽对D-半乳糖联合AlCl_(3)衰老模型小鼠的作用

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中华中医药杂志 2023年第8期38卷 3594-3599页

作者：李祯刘雅鑫刘健林嘉楠曹占鸿房星宇白浩楠安昱杨擎李娜长春中医药大学人参科学研究院分子药理实验室长春130117

目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)信号通路探讨人参肽对D-半乳糖(D-gal)联合AlCl_(3)衰老模型小鼠的影响及分子机制。方法:将50只KM小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组、人参肽低剂量组、人参... 详细信息

目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)信号通路探讨人参肽对D-半乳糖(D-gal)联合AlCl_(3)衰老模型小鼠的影响及分子机制。方法:将50只KM小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组、人参肽低剂量组、人参肽高剂量组,每组10只,阳性药组给予参茸片286.3mg·kg^(-1)·d^(-1);人参肽低、高剂量组分别给予人参肽17.5mg·kg^(-1)·d^(-1)、35mg·kg^(-1)·d^(-1),预给药7d后,除对照组外,其余各组小鼠均给予500mg·kg^(-1)·d^(-1)D-gal皮下注射与70mg·kg^(-1)·d^(-1)-AlCl_(3)灌胃30d联合给药制备衰老模型,应用PCR检测各组小鼠鼠尾组织早老素-1(PS1)的基因表达水平验证模型是否制备成功;通过爬杆实验、负重游泳实验测试小鼠协调能力、抗疲劳能力;应用生化法检测小鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,丙二醛(MDA)含量;HE染色观察小鼠脑海马组织病理形态,计算小鼠脾脏系数,自然杀伤细胞(NK)实验检测小鼠免疫能力;WesternBlot法检测小鼠脑组织中Nrf2、Keapl、氧化蛋白水解酶(AARE)蛋白表达水平。结果:衰老小鼠PS1的基因表达显著升高(P人参肽能改善D-gal联合AlCl_(3)诱导衰老小鼠的协调性、增强抗疲劳和免疫能力,其分子机制可能与激活Nrf2/Keap1信号通路抗氧化相关。

关键词：人参肽衰老 D-半乳糖 AlCl_(3) Nrf2/Keapl

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人参小分子肽研究进展

吉林中医药 2023年第7期43卷 865-868页

作者：兰梦吴楠李春楠李晶峰吕经纬高晓晨张辉孙佳明长春中医药大学长春130117 吉林省东北亚生物科技有限公司长春130119

人参是我国传统名贵中草药,具有大补元气、复脉固脱等功效。人参中富含皂苷类、多糖类、氨基酸及多肽等多种化学成分。小分子肽是多肽的一种,具有分子量小、易于吸收等优点。目前小分子肽在功能食品中的应用已经成为研究热点。经过大量... 详细信息

人参是我国传统名贵中草药,具有大补元气、复脉固脱等功效。人参中富含皂苷类、多糖类、氨基酸及多肽等多种化学成分。小分子肽是多肽的一种,具有分子量小、易于吸收等优点。目前小分子肽在功能食品中的应用已经成为研究热点。经过大量文献检索汇总后,对人参中小分子肽的分离纯化方法、化学结构鉴定、药理作用等内容进行了综述。为其研发有关的食品、保健品和临床营养科膳食提供一定参考及理论依据,并对其将来研究发展方向进行了展望。

关键词：人参肽分离纯化结构鉴定药理作用研究进展

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