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外源几丁质酶对致倦库蚊的毒杀作用及其与二元毒素的协同杀蚊作用

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热带医学杂志 2010年第11期10卷 1270-1273页

作者：蔡亚君袁志明蔡全信杨艳坤魏素珍武汉纺织大学环境科学研究所武汉430073 中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

目的研究几丁质酶对蚊幼虫的毒力、后致死作用及对二元毒素的协同杀蚊作用。方法提取粘质沙雷氏菌S3菌株的几丁质酶和球形芽胞杆菌C3-41菌株的二元毒素,通过浸渍法处理致倦库蚊2～3龄幼虫48 h。结果几丁质酶对致倦库蚊幼虫具有低毒,其L... 详细信息

目的研究几丁质酶对蚊幼虫的毒力、后致死作用及对二元毒素的协同杀蚊作用。方法提取粘质沙雷氏菌S3菌株的几丁质酶和球形芽胞杆菌C3-41菌株的二元毒素,通过浸渍法处理致倦库蚊2～3龄幼虫48 h。结果几丁质酶对致倦库蚊幼虫具有低毒,其LC50和LC90分别为8.99和28.5μg/ml;且对抗性库蚊的毒力与敏感幼蚊相当,其LC50和LC90分别为11.9、168μg/ml。几丁质酶对致倦库蚊幼虫还具有一定程度的后致死作用,不同亚致死浓度的几丁质酶处理后的存活幼虫均出现不同程度的延续死亡。几丁质酶与二元毒素共同作用于敏感致倦库蚊幼虫时,几丁质酶表现出明显的对二元毒素的增效作用,LC2、LC10、LC30剂量(1.59、2.84和5.61μg/ml)的几丁质酶分别能使二元毒素的毒力增强1.98、3.53和8.11倍,其增效作用随几丁质酶剂量的增加而增强。结论几丁质酶对致倦库蚊幼虫具有低毒及一定的后致死作用,其与二元毒素合用具有增效作用,在蚊虫防治方面具有较大的开发前景。

关键词：几丁质酶致倦库蚊毒力后致死作用二元毒素增效作用

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艰难梭菌二元毒素B的克隆及其免疫原性分析

热带医学杂志 2019年第5期19卷 568-572页

作者：黄颖凤林雪霏黄欢欢邓颖珊吴爱武广州医科大学金域检验学院，广东广州510182

目的将艰难梭菌二元毒素B(cdtB)克隆到pET-28b载体,探索重组His-CdtB蛋白可溶性表达的最佳条件并纯化相应蛋白,分析其免疫原性。方法为了分析艰难梭菌二元毒素B的免疫原性,先以艰难梭菌标准菌株ATCC BAA-1870为模板,PCR扩增cdtB全长基... 详细信息

目的将艰难梭菌二元毒素B(cdtB)克隆到pET-28b载体,探索重组His-CdtB蛋白可溶性表达的最佳条件并纯化相应蛋白,分析其免疫原性。方法为了分析艰难梭菌二元毒素B的免疫原性,先以艰难梭菌标准菌株ATCC BAA-1870为模板,PCR扩增cdtB全长基因序列,克隆到质粒pET-28b,转入*** BL21(DE3)感受态细胞以构建pET-28b-cdtB的原核表达载体,诱导***-pET-28b-cdtB大量表达可溶性重组His-CdtB蛋白并利用镍柱亲和层析法纯化,纯化后的His-CdtB蛋白免疫Balb/c小鼠,分析小鼠血清抗体抗CdtB滴度。结果成功构建了pET-28bcdtB原核表达载体,目的蛋白为可溶性表达的最近诱导条件是培养温度为25℃、IPTG浓度为1.5 mmol/L、160 r/min振荡增菌12 h,最佳纯化条件为20 mmol/L的咪唑洗脱杂蛋白后用200 mmol/L的咪唑洗脱目的蛋白,纯化后的HisCdtB蛋白经质谱鉴定成功,该蛋白免疫Balb/c小鼠后产生的抗CdtB抗体滴度达到1∶105。结论纯化后的HisCdtB重组蛋白免疫Balb/c小鼠后产生了高效价抗CdtB抗体,说明其具有免疫原性,为今后进一步进行二元毒素B的诊断及疫苗等研究奠定了实验基础。

关键词：艰难梭菌二元毒素克隆免疫原性

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艰难梭菌菌血症1例并文献复习

中国感染与化疗杂志 2016年第6期16卷 742-746页

作者：杨靖魏宏莲尹凯歌强翠欣李志荣崔庆庆徐凯悦李茹鑫赵建宏河北医科大学第二医院河北省临床检验中心石家庄050000 河北医科大学第二医院检验科河北医科大学第二医院消化内科

目的了解艰难梭菌菌血症的临床特征。方法对1例艰难梭菌菌血症患者的临床表现、实验室检查结果、治疗及转归进行分析,并结合相关文献复习艰难梭菌菌血症的特征。结果该例39岁男性患者脑外伤后出现发热,血培养中检测出艰难梭菌,其毒素A、... 详细信息

目的了解艰难梭菌菌血症的临床特征。方法对1例艰难梭菌菌血症患者的临床表现、实验室检查结果、治疗及转归进行分析,并结合相关文献复习艰难梭菌菌血症的特征。结果该例39岁男性患者脑外伤后出现发热,血培养中检测出艰难梭菌,其毒素A、B及ニ元毒素基因均阳性。使用头孢曲松-他唑巴坦和去甲万古霉素联合抗感染治疗14d后,患者康复出院。通过文献复习发现艰难梭菌菌血症患者大多数有慢性肝炎、肝硬化等消化道基础疾病,主要症状为发热、腹痛、血便、恶心呕吐等。使用过甲硝唑或万古霉素治疗的患者死亡2例(2/13)未使用的患者死亡4例(4/6)。结论艰难梭菌菌血症患者大多数都有慢性基础疾病、消化道疾病或有手术及外伤史。早期应用万古霉素和甲硝唑治疗,其预后相对较好。

关键词：艰难梭菌菌血症二元毒素万古霉素甲硝唑

103株艰难梭菌毒素基因检测及其流行病学意义

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中国卫生检验杂志 2022年第7期32卷 815-817页

作者：秦巧莲侯佳妤舒春晖杜秋儿胡丽庆宁海县中医医院检验科浙江宁波315000 温州医科大学浙江温州325030 浙江大学明州医院浙江宁波315010 宁波市第一医院检验科浙江宁波315000

目的通过对本院住院患者粪便标本艰难梭菌培养和毒素分型,了解其感染情况及毒素型别。方法收集2021年1月—6月1000份患者粪便标本,对培养阳性并经质谱确认菌株应用PCR扩增法检测毒素A基因、B基因以及二元毒素基因。结果艰难梭菌培养阳... 详细信息

目的通过对本院住院患者粪便标本艰难梭菌培养和毒素分型,了解其感染情况及毒素型别。方法收集2021年1月—6月1000份患者粪便标本,对培养阳性并经质谱确认菌株应用PCR扩增法检测毒素A基因、B基因以及二元毒素基因。结果艰难梭菌培养阳性标本103份,阳性率为10.3%;患者平均年龄为60.3岁,平均住院天数为26.6 d。PCR检测产毒素tcd(A+B+)型67例(占65.1%);tcd(A-B+)型16例(占15.5%);tcd(A-B-)型20例(占19.4%),二元毒素(CDT)均为阴性。tcd(A+B+)型、tcd(A-B+)型、tcd(A-B-)型血液科分别有18例、4例、4例;消化科分别有16例、3例、2例。产毒素A+B+型粪便隐血试验结果≥1+的阳性率为27.3%,患者使用喹诺酮占比35.4%。结论本院艰难梭菌及毒素阳性者以老年患者居多,对有高危因素患者应加强检测和预防。同时临床抗感染应合理使用广谱抗生素,减少艰难梭菌的发病率。

关键词：艰难梭菌毒素A/B 二元毒素

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临床分离艰难梭菌毒素携带特征研究

疾病监测 2009年第3期24卷 193-195页

作者：程颖卢金星鄢盛恺贾红兵李文革中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 卫生部中日友好医院检验科

目的对医院细菌室送检粪便标本中分离出的艰难梭菌,进行毒素基因以及耐药基因的初步分析。方法将细菌室收集到的112份粪便标本,经选择性厌氧培养,谷氨酸脱氢酶(GDH)以及API 20A生化条鉴定后,分离出12株艰难梭菌,分别采用PCR的方法检测t... 详细信息

目的对医院细菌室送检粪便标本中分离出的艰难梭菌,进行毒素基因以及耐药基因的初步分析。方法将细菌室收集到的112份粪便标本,经选择性厌氧培养,谷氨酸脱氢酶(GDH)以及API 20A生化条鉴定后,分离出12株艰难梭菌,分别采用PCR的方法检测tcdA和tcdB基因、二元毒素基因,克林霉素抗性基因(ermB)。结果12株艰难梭菌中8株为毒素基因阳性,其中tcdA+tcdB+为5株,占62.5%;tcdA-tcdB+为3株,占37.5%;二元毒素基因均为阴性;耐药基因ermB阳性为4株,占50%。结论艰难梭菌tcdA-tcdB+毒株所占比例增加,临床单独检测A毒素易造成漏检;艰难梭菌耐药现象值得关注。

关键词：艰难梭菌 tcdA tcdB 二元毒素 ermB

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艰难梭菌毒素研究进展

中国卫生检验杂志 2023年第23期33卷 2941-2944页

作者：毛莉莉叶建东吕火烊李小四吴晓燕浙江新安国际医院检验科浙江嘉兴314031 嘉兴市秀洲区妇幼保健院检验科浙江省人民医院检验科嘉兴市第二医院检验科

艰难梭菌是一种条件致病菌,在正常情况下肠道的益生菌可抑制其过度的繁殖,同时对其产生的毒素进行降解,所以即使在肠道定植,一般也不会致病。长期或者不规范使用抗生素会破坏肠道微生态平衡,导致肠道内耐药的艰难梭菌异常增殖并产毒素... 详细信息

艰难梭菌是一种条件致病菌,在正常情况下肠道的益生菌可抑制其过度的繁殖,同时对其产生的毒素进行降解,所以即使在肠道定植,一般也不会致病。长期或者不规范使用抗生素会破坏肠道微生态平衡,导致肠道内耐药的艰难梭菌异常增殖并产毒素引起艰难梭菌相关性腹泻,临床表现为发热、腹痛、水样便腹泻等,严重者可出现全身中毒症状,危及生命。

关键词：艰难梭菌毒素A 毒素B 二元毒素毒素基因

苏云金杆菌vip1A/vip2A基因的鉴定及其与cry1基因的联系

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华北农学报 2008年第5期23卷 131-135页

作者：申建茹郭巍张霞李晶河北农业大学生命科学学院河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心河北保定071001

利用PCR方法检测vip1A/vip2A基因在野生型Bt菌株中的分布,进行基因片段的克隆和序列分析。结合cry1基因的PCR-RFLP基因型鉴定体系,分析与vip1A/vip2A基因有联系的cry1类基因。结果表明,分离保存的171株野生型Bt菌株中,有20株菌株含有vip... 详细信息

利用PCR方法检测vip1A/vip2A基因在野生型Bt菌株中的分布,进行基因片段的克隆和序列分析。结合cry1基因的PCR-RFLP基因型鉴定体系,分析与vip1A/vip2A基因有联系的cry1类基因。结果表明,分离保存的171株野生型Bt菌株中,有20株菌株含有vip1A/vip2A基因,分布率为11.69%。成功克隆了菌株Bt16的vip1A/vip2A基因片段,命名为vip1A/vip2A-16,GenBank登录号为EU594327。cry1基因的PCR-RFLP鉴定结果表明,该20株菌株均含有cry1Fa基因,说明vip1A/vip2A基因与cry1Fa可能具有某种联系。

关键词：二元毒素 vip1A/vip2A vip1A/vip2A-16 PCR-RFLP cry1Fa

苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白Vips研究进展

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植物保护 2008年第5期34卷 1-5页

作者：申建茹郭巍河北农业大学生命科学学院河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心保定071001

苏云金芽孢杆菌Bt营养期杀虫蛋白Vips主要分为Vip1、Vip2和Vip33种。Vip1和Vip2构成二元毒素,对叶甲科昆虫具有特异杀虫活性。Vip3对鳞翅目昆虫具有广谱杀虫活性,该蛋白广泛存在于Bt中,与已知杀虫晶体蛋白ICPs没有序列相似性。Vip3通过... 详细信息

苏云金芽孢杆菌Bt营养期杀虫蛋白Vips主要分为Vip1、Vip2和Vip33种。Vip1和Vip2构成二元毒素,对叶甲科昆虫具有特异杀虫活性。Vip3对鳞翅目昆虫具有广谱杀虫活性,该蛋白广泛存在于Bt中,与已知杀虫晶体蛋白ICPs没有序列相似性。Vip3通过诱发细胞凋亡,最终导致昆虫死亡,这与Btδ-内毒素的作用机理完全不同,Vips的发现对于Bt的进一步开发利用具有重要意义。本文主要对营养期杀虫蛋白Vips的分布、特性、作用机制及应用等进行报道。

关键词：营养期杀虫蛋白二元毒素 Vip3A 蛋白特性作用机制

艰难梭菌引起抗感染免疫的主要致病因子及其基因功能的研究进展

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免疫学杂志 2013年第4期29卷 357-360页

作者：曹波李先平程颖中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室医院感染室北京102206

艰难梭菌是医院感染性腹泻中最常见的病原菌之一,在过去10年中,由于ribotyping 027型等高毒菌株的出现,全球艰难梭菌感染相关性疾病发病率显著上升,已经成为欧美许多国家法定传染病必报的监测病原。致病艰难梭菌的毒力因子主要包括A毒素... 详细信息

艰难梭菌是医院感染性腹泻中最常见的病原菌之一,在过去10年中,由于ribotyping 027型等高毒菌株的出现,全球艰难梭菌感染相关性疾病发病率显著上升,已经成为欧美许多国家法定传染病必报的监测病原。致病艰难梭菌的毒力因子主要包括A毒素和B毒素,刺激机体发生免疫应答。除外A、B毒素,少数艰难梭菌还产生二元毒素。本文对近年来艰难梭菌引起机体抗感染免疫的相关致病因子及其基因功能的最新研究进展进行了回顾和总结,并重点探讨了主要致病因子A毒素和B毒素结构功能及基因表达调控特征,包括构建A、B毒素分子模型,致病基因编码区多态性特征,以及负向调控因子tcdC的变异及影响,对未来疫苗靶位点的筛选以及艰难梭菌致病机制中信号转导研究具有指导意义。

关键词：艰难梭菌抗感染免疫 A毒素 B毒素 tcdA tcdB 二元毒素