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中性蛋白酶高温酶解条件下猪粪资源化利用中养分的变化规律

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安徽农业科学 2024年第4期52卷 51-56页

作者：戴鹏飞孙权解昊郡王锐蒋鹏宁夏大学农学院宁夏银川750021

以酶工程及酶动力学为技术依托及科学依据,将猪粪加玉米秸秆组合作为底物,添加2%中性蛋白酶,在生化反应釜中80℃酶解3 h,底物含水量降低至56.01%,同比下降2.34%;大分子有机质含量降低至63.79%,酶解后,A、B处理的底物有机质含量分别降低... 详细信息

以酶工程及酶动力学为技术依托及科学依据,将猪粪加玉米秸秆组合作为底物,添加2%中性蛋白酶,在生化反应釜中80℃酶解3 h,底物含水量降低至56.01%,同比下降2.34%;大分子有机质含量降低至63.79%,酶解后,A、B处理的底物有机质含量分别降低了14.19%、15.06%;植物可利用大量元素提高至6.87%,符合NY 525—2012有机肥标准;速效磷、速效钾、全盐、总腐殖酸呈下降趋势;蛔虫卵死亡率达到92%,种子发芽指数达到54%,达到有机肥腐熟标准。

关键词：猪粪中性蛋白酶高温酶解有机肥养分变化规律

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中性蛋白酶辅助提取天麻淀粉的工艺优化

粮食与油脂 2023年第2期36卷 101-105页

作者：刘庆庆吴育勤杨馥祯邓飞铜仁学院贵州铜仁554300

以新鲜天麻为原料、中性蛋白酶为酶解剂,通过单因素和正交试验研究料液比、酶解时间、酶解pH、酶添加量和酶解温度对天麻淀粉中蛋白质残留率和天麻淀粉得率的影响,并确定最佳提取工艺。结果表明:天麻淀粉提取最佳工艺为料液比1∶7(g/mL... 详细信息

以新鲜天麻为原料、中性蛋白酶为酶解剂,通过单因素和正交试验研究料液比、酶解时间、酶解pH、酶添加量和酶解温度对天麻淀粉中蛋白质残留率和天麻淀粉得率的影响,并确定最佳提取工艺。结果表明:天麻淀粉提取最佳工艺为料液比1∶7(g/mL)、酶解时间2.5 h、酶解温度35℃、酶添加量0.8 mg/g、酶解pH 7.0,在此条件下天麻淀粉得率为12.49%,蛋白质残留率为0.0068%。

关键词：天麻淀粉中性蛋白酶提取工艺蛋白质残留率淀粉得率

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一株高产中性蛋白酶菌株的筛选与诱变

中国饲料 2022年第11期 30-35页

作者：卢超陈景鲜王国霞李春阁林展苏芳谊张苗郑州师范学院生命科学学院河南郑州450000 福建医科大学药学院福建福州350004

通过牛奶平板初筛、摇瓶复筛,从土壤中筛选出产中性蛋白酶菌株L01,以紫外线和亚硝酸钠为诱变条件,分别利用单因素和复合诱变方法提高菌株的产酶能力,最后对遗传稳定性良好的菌株L01F进行鉴定。结果表明:菌株L01分别经过紫外线照射60 s... 详细信息

通过牛奶平板初筛、摇瓶复筛,从土壤中筛选出产中性蛋白酶菌株L01,以紫外线和亚硝酸钠为诱变条件,分别利用单因素和复合诱变方法提高菌株的产酶能力,最后对遗传稳定性良好的菌株L01F进行鉴定。结果表明:菌株L01分别经过紫外线照射60 s和亚硝酸钠处理12 min时,其中性蛋白酶酶活力最高,为459.13 U/mL,是原始菌株的2.07倍。在先亚硝酸钠处理12 min后紫外线照射48 s的最适复合诱变条件下,筛选得到的高产中性蛋白酶菌株L01F,酶活力达到577.87 U/mL,是原始菌株L01的2.61倍,且该菌株传代10次后仍具有良好的遗传稳定性。最后经过形态学和分子生物学鉴定,确定筛选出的菌株L01F为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

关键词：中性蛋白酶诱变稳定性研究枯草芽孢杆菌

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中性蛋白酶高产菌株的诱变选育

现代食品科技 2013年第11期29卷 2686-2691页

作者：朱明军区健发陈鸿图华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510006

对产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） SHB 2010-1进行物理和化学诱变以筛选高产菌株。考察了6种筛选培养基在分辨中性蛋白酶高产菌株上的效率，菌株在脱脂牛奶培养基上生长状态最佳，水解圈易于观察。以紫外线、硫酸二... 详细信息

对产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） SHB 2010-1进行物理和化学诱变以筛选高产菌株。考察了6种筛选培养基在分辨中性蛋白酶高产菌株上的效率，菌株在脱脂牛奶培养基上生长状态最佳，水解圈易于观察。以紫外线、硫酸二乙酯为诱变剂，研究了两者的致死率曲线，选择致死率为90~95%的剂量进行两轮复合诱变，诱变菌的发酵液酶活依次较出发菌提高1.49%、10.99%、38.77%和59.68%，复合诱变表现出较单一诱变更强的效应，并能利用弱诱变剂紫外线积累的隐性突变。最终筛选得到的菌株命名为DES-59，在50 mL发酵培养基中培养60 h酶活达到7307 U/mL，相应的生物量为2.205×1010 CFU/mL，表现出典型的生长偶联型。突变菌的nprE基因经克隆及测序与数据库上的序列一致，酶活性的提高并非由中性蛋白酶A结构改变引起，突变出现在生产蛋白酶的其他位点上，有利于潜在性能的提高。

关键词：中性蛋白酶枯草芽孢杆菌诱变选育

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中性蛋白酶发酵过程动力学

高校化学工程学报 1995年第4期9卷 404-408页

作者：李永泉胡荷斌杭州大学生命科学学院黄岩生物化学制药厂

中性蛋白酶发酵过程动力学李永泉，胡荷斌（杭州大学生命科学学院，杭州３１００２８）（黄岩生物化学制药厂，台州３１７４００）关键词中性蛋白酶，发酵过程，生长因子，动力学模型１前言在中性蛋白酶发酵工艺研究的基础上，对发酵过... 详细信息

中性蛋白酶发酵过程动力学李永泉，胡荷斌（杭州大学生命科学学院，杭州３１００２８）（黄岩生物化学制药厂，台州３１７４００）关键词中性蛋白酶，发酵过程，生长因子，动力学模型１前言在中性蛋白酶发酵工艺研究的基础上，对发酵过程进行较深入的分析，提出了生长因子...

关键词：中性蛋白酶发酵生长因子动力学模型

中性蛋白酶有限水解小麦蛋白动力学模型的研究

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食品科学 2006年第5期27卷 27-30页

作者：潘丽军韩卓钟昔阳姜绍通合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009

采用中性蛋白酶在pH6.5和温度40℃条件下对小麦面筋蛋白的水解动力学机制进行了研究。结果表明:酶催化水解速率随水解进程呈指数递减。根据水解度及酶活力的变化规律,在大量实验研究的基础上,建立起描述中性蛋白酶催化水解小麦蛋白的动... 详细信息

采用中性蛋白酶在pH6.5和温度40℃条件下对小麦面筋蛋白的水解动力学机制进行了研究。结果表明:酶催化水解速率随水解进程呈指数递减。根据水解度及酶活力的变化规律,在大量实验研究的基础上,建立起描述中性蛋白酶催化水解小麦蛋白的动力学方程,为合理确定酶解反应实验的各种参数提供了理论依据。

关键词：小麦蛋白中性蛋白酶动力学模型

中性蛋白酶分步酶解花生分离蛋白制备花生短肽的研究

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中国农业科学 2013年第24期46卷 5237-5247页

作者：李宁刘红芝刘丽王强中国农业科学院农产品加工研究所/农业部农产品加工与质量控制重点开放实验室

【目的】为了充分利用花生榨油之后的副产物,提高产品附加值,建立花生短肽制备工艺,研发功能性花生短肽产品。【方法】通过比较酶种类、底物浓度、酶解温度、酶解时间对水解度与短肽得率的影响,采用二次回归正交旋转组合设计优化分步酶... 详细信息

【目的】为了充分利用花生榨油之后的副产物,提高产品附加值,建立花生短肽制备工艺,研发功能性花生短肽产品。【方法】通过比较酶种类、底物浓度、酶解温度、酶解时间对水解度与短肽得率的影响,采用二次回归正交旋转组合设计优化分步酶解制备花生短肽的最佳工艺。【结果】中性蛋白酶分步酶解花生分离蛋白制备短肽的最佳工艺参数为:Neutrase水解花生分离蛋白2.04 h后加入Protamex继续酶解1.96 h,Neutrase添加量为5 200 U·g-1底物,Protamex添加量为422.32 U·g-1底物,水解温度44.83℃,底物浓度8%,在此条件下,短肽得率为83.93%,水解度为38.25%,花生短肽纯度为93.85%±0.44%。经高效液相色谱测定,分子量小于1 000 D的水解产物占98.88%。【结论】采用Neutrase与Protamex分步酶解花生分离蛋白制备花生短肽,与现有碱性蛋白酶酶解制备花生短肽方法相比,避免了后续脱盐步骤,简化了工艺,且具有制备条件温和,DH和TCA-NSI高,纯度高,分子量集中分布于1 000 D以下等特点。

关键词：中性蛋白酶花生分离蛋白分步酶解花生短肽

中性蛋白酶及碱性蛋白酶制备玉米粗肽的醒酒活性比较

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中国粮油学报 2006年第3期21卷 102-106页

作者：隋玉杰何慧王进贺菊萍胡筱波华中农业大学食品科技学院武汉430070

本文旨在使玉米蛋白增值,为工业化生产玉米醒酒肽提供依据。采用气相色谱、氨基酸自动分析仪等仪器,研究了玉米蛋白水解物——粗肽的醒酒活性。结果表明:中性蛋白酶的低水解度粗肽(2h、酶底比0．5％、料液比1:25)能使小鼠血醇浓度降低54... 详细信息

本文旨在使玉米蛋白增值,为工业化生产玉米醒酒肽提供依据。采用气相色谱、氨基酸自动分析仪等仪器,研究了玉米蛋白水解物——粗肽的醒酒活性。结果表明:中性蛋白酶的低水解度粗肽(2h、酶底比0．5％、料液比1:25)能使小鼠血醇浓度降低54．06％,但该粗肽的蛋白回收率太低。碱性蛋白酶的中水解度粗肽(4h、酶底比0．5％、料液比1:20)的醒酒活性高,并存在剂量效应关系,其剂量为800 mg／***时,小鼠血醇浓度降低了62．80％,且该粗肽的蛋白回收率高,具有开发价值。

关键词：玉米蛋白粗肽醒酒中性蛋白酶碱性蛋白酶

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中性蛋白酶的单甲氧基聚乙二醇修饰

中国生物制品学杂志 2010年第1期23卷 79-82页

作者：张琛张瑛郭峰李春如应明白杨王龙飞安徽农业大学生命科学学院合肥230036 安徽省水稻遗传育种重点实验室合肥230036 安徽农业大学微生物防治省重点实验室合肥230036

目的利用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰中性蛋白酶,并考察修饰酶的酶学性质。方法采用氰脲酰氯对mPEG5000进行活化,再对中性蛋白酶进行化学修饰,制得mPEG-中性蛋白酶,并比较中性蛋白酶在修饰前后的红外光谱和酶学性质。结果中性蛋白... 详细信息

目的利用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰中性蛋白酶,并考察修饰酶的酶学性质。方法采用氰脲酰氯对mPEG5000进行活化,再对中性蛋白酶进行化学修饰,制得mPEG-中性蛋白酶,并比较中性蛋白酶在修饰前后的红外光谱和酶学性质。结果中性蛋白酶的修饰率为41.7%;红外光谱分析表明,修饰酶红外光谱图的多处特征峰有较大的改变;其最适温度和最适pH值未发生变化,但修饰酶的热稳定性显著提高。结论确定了经mPEG化学修饰中性蛋白酶的最适温度和最适pH值,获得的修饰酶热稳定性高于天然酶。

关键词：中性蛋白酶单甲氧基聚乙二醇化学修饰