检索结果-南通市图书馆

中国番茄黄化曲叶病毒在云南的发生分布及其遗传多样性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

云南大学学报（自然科学版） 2008年第S1期30卷 57-62页

作者：岳宁丁铭董家红罗延青张仲凯云南大学云南昆明650091 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南昆明650223

对云南普遍发生的中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)进行分子鉴定.结果发现中国番茄黄化曲叶病毒在云南的发生非常广泛,其发生、分布与地理生态、气候类型有关,主要集中在滇中南的热带、亚热带气候类... 详细信息

对云南普遍发生的中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)进行分子鉴定.结果发现中国番茄黄化曲叶病毒在云南的发生非常广泛,其发生、分布与地理生态、气候类型有关,主要集中在滇中南的热带、亚热带气候类型地区.共获得20个TYLCCNV分离物的病毒全基因组DNA-A,和已报道的中国番茄黄化曲叶病毒云南分离物进行同源性比较,它们之间的同源性在89.2%~97.4%之间.同源性比较发现中国番茄黄化曲叶病毒DNA-A具有明显的地理分布差异,地理和气候接近的地区同源性越接近.

关键词：中国番茄黄化曲叶病毒 DNA-A 多样性

中国番茄黄化曲叶病毒和烟草曲茎病毒AC2和AC4蛋白为RNA沉默的抑制子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

科学通报 2004年第23期49卷 2431-2436页

作者：崔晓峰周雪平浙江大学生物技术研究所杭州310029

中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)能系统侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana) 等寄主植物,但不诱导明显的症状,而烟草曲茎病毒Y35分离物(TbCSV-Y35)单独侵染则诱导曲叶等症状.对表达GFP基因的转基因本氏烟接种实验表明,TYLCCN... 详细信息

中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)能系统侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana) 等寄主植物,但不诱导明显的症状,而烟草曲茎病毒Y35分离物(TbCSV-Y35)单独侵染则诱导曲叶等症状.对表达GFP基因的转基因本氏烟接种实验表明,TYLCCNV-Y10不回复已建立的GFP沉默,也不抑制GFP沉默的建立;而TbCSV-Y35能部分回复已建立的沉默,且能在新叶抑制沉默的建立.农杆菌共浸润实验结果表明,TYLCCNV-Y10和TbCSV-Y35的AC2和AC4蛋白都能抑制GFP的局部沉默,并延迟GFP的系统沉默,为RNA沉默的抑制子.比较共浸润区GFP mRNA的积累结果表明,Y10 AC2与Y 35AC2蛋白具有相近的RNA沉默抑制能力,而Y35 AC4蛋白是一个比Y10 AC4蛋白更强的抑制子.因而,TbCSV-Y35和TYLCCNV-Y10致病性差异的原因可能与二者AC4蛋白的功能差异有关.

关键词：中国番茄黄化曲叶病毒烟草曲茎病毒 AC2蛋白 AC4蛋白 RNA沉默抑制子

中国番茄黄化曲叶病毒编码的RNA沉默抑制子AC4蛋白的核酸结合特性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南京农业大学学报 2011年第2期34卷 85-90页

作者：张馨月章颉邓凤林吴建祥浙江大学农业与生物技术学院/生物技术研究所浙江杭州310029

农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的... 详细信息

农杆菌共浸润试验结果表明:中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)Y10分离物编码AC4蛋白是RNA沉默抑制子。为了研究RNA沉默抑制子AC4蛋白的作用机制,将TYLCCNV-Y10的AC4基因插入到原核表达载体pET-32a的多克隆位点上,构建重组原核表达载体pET32a-Y10AC4。将重组载体导入BL21(DE3)pLysS进行AC4蛋白表达,并在自然条件下纯化蛋白。利用原核表达的AC4蛋白进行电泳迁移率变动试验(electrophoretic mobilityshift assay,EMSA),分析AC4蛋白分别与单、双链siRNA和单、双链长RNA的结合情况。试验结果表明:TYLCCNV-Y10编码的AC4蛋白具有结合单链siRNA和单链长RNA特性,而不与双链siRNA和双链长RNA结合。

关键词：中国番茄黄化曲叶病毒 AC4蛋白原核表达电泳迁移率变动试验

中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNAβ在心叶烟中的遗传结构及种群变异

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物保护学报 2010年第1期37卷 31-36页

作者：任芳青玲熊艳谭万忠西南大学植物保护学院植物病害生物学重庆市高校级重点实验室重庆400716

为明确中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)伴随的卫星DNAβ分子在寄主体内的遗传结构特点及种群变异水平,将TYLCCNV分离物Y10(Y10)和伴随的DNAβ(Y10β)的全长侵染性克隆经农杆菌介导共同接种心叶烟,从... 详细信息

为明确中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)伴随的卫星DNAβ分子在寄主体内的遗传结构特点及种群变异水平,将TYLCCNV分离物Y10(Y10)和伴随的DNAβ(Y10β)的全长侵染性克隆经农杆菌介导共同接种心叶烟,从Y10β的分子克隆出发,对心叶烟中Y10β的种群结构、变异水平、突变分布及碱基变异类型进行分析。结果表明,Y10β种群具有丰富的遗传多样性及较高的变异水平,所获得的43个Y10β全长克隆在核苷酸水平均发生不同程度的变异,接种后60天的Y10β种群60-1和种群60-2的突变频率分别为2.7×10-3和3.0×10-3,另一个接种后120天的种群120-1的突变频率为3.0×10-3;此卫星DNAβ的变异位点在整个基因组内均有分布,但在A-rich区碱基变异位点数最多,且主要为碱基A的缺失和插入,特别是在889～901核苷酸位点,所得43个克隆中有19个克隆在这一区段发生碱基A的缺失或插入;此外,Y10β的碱基替换突变类型以A突变为G及T突变为C的比例较高。

关键词：中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNAβ 遗传结构种群变并

中国番茄黄化曲叶病毒DNAβA-Rich区的功能鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

科学通报 2004年第14期49卷 1386-1389页

作者：陶小荣青玲周雪平浙江大学生物技术研究所杭州310029

DNAb是近年来在一些单组分双生病毒中发现的一类新型卫星DNA分子, DNAb对于这些病毒诱导典型的病害症状是必需的. DNAb上含有3个相对保守的区域: 共同区、bC1基因和A-Rich区(A含量 > 60%). 在对中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y... 详细信息

DNAb是近年来在一些单组分双生病毒中发现的一类新型卫星DNA分子, DNAb对于这些病毒诱导典型的病害症状是必需的. DNAb上含有3个相对保守的区域: 共同区、bC1基因和A-Rich区(A含量 > 60%). 在对中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)DNAb bC1基因的功能突变研究的基础上, 对TYLCCNV-Y10 DNAb上的A-Rich区进行了功能鉴定. 对TYLCCNV-Y10 DNAb A-Rich区进行缺失突变后发现, A-Rich缺失突变体依然能够在植物中稳定复制和系统移动, 因此A-Rich区对于DNAb的复制并不是必需的. 免疫捕获PCR检测发现, A-Rich缺失突变体能够包裹在TYLCCNV-Y10 DNA-A编码的外壳蛋白之中, 表明它并不能决定DNAb的包裹, 但是A-Rich区的缺失使病毒症状减弱.

关键词：双生病毒中国番茄黄化曲叶病毒 DNAβ A-Rich区双生病毒突变体

中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

自然科学进展（国家重点实验室通讯） 2001年第2期11卷 142-146页

作者：张玉满王寰宇刘玉乐中国科学院微生物研究所北京100080

经PCR获得了中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白(CP)基因,并克隆到pGEM-7Zf(+)载体上.序列分析表明,TYLCV-CHI感染番茄或烟草时,CP基因的核苷酸序列发生变化,并且在烟草上随感染时间的延长,突变频率增高.连接到含有编码tRNAarg4基... 详细信息

经PCR获得了中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白(CP)基因,并克隆到pGEM-7Zf(+)载体上.序列分析表明,TYLCV-CHI感染番茄或烟草时,CP基因的核苷酸序列发生变化,并且在烟草上随感染时间的延长,突变频率增高.连接到含有编码tRNAarg4基因argU的表达载体pSBET后,TYLCV-CHI CP基因在大肠杆菌中以包含体形式得到大量表达(约33 ku).以表达的蛋白作抗原免疫家兔,制备了抗TYLCV-CHI CP的抗血清.ELISA实验表明,该血清与抗原特异反应,血清效价为1:***印迹实验还表明,该血清除了与感染TYLCV-CHI的番茄、烟草有特异免疫反应外,还与感染南瓜曲叶病、烟草曲叶病的叶片有免疫反应,表明这些病毒之间有明显的血清学关系.

关键词：中国番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白克隆抗血清制

中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNA编码的βC1蛋白的磷酸化对其抑制转录水平基因沉默的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国番茄黄化曲叶病毒卫星DNA编码的βC1蛋白的磷酸化对其抑制转...

作者：曹琳鸽浙江大学

学位级别：硕士

中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus, TYLCCNV)是单组份的双生病毒,其伴随的卫星DNA (Tomato yellow leaf curl China Betasatellite, TYLCCNB)编码的pC1蛋白是一个致病因子和RNA沉默抑制子,不仅能够诱导严重的病毒症状而且能够抑制甲基化介导的转录水平基因沉默(Transcriptional gene silencing, TGS)。为了抵御双生病毒的侵染,番茄中具有激酶活性的SlSnRK1[Snf (sucrose non-fermenting)-1-related protein kinasesl]蛋白可以通过磷酸化βC1从而减轻病毒诱导的症状。但是,目前尚不清楚pCl的磷酸化如何进一步影响其相关功能。因此,本文围绕pCl蛋白的磷酸化修饰对其抑制TGS能力的影响开展了相关研究。前期的研究表明,将pCl蛋白两个潜在的磷酸化位点—第33位的丝氨酸(Serine, Ser)和78位的苏氨酸(Threonine, Thr),分别或者同时突变为组成型磷酸化的天冬氨酸(Aspartic acid, Asp),突变体的侵染性克隆在本氏烟上的发病时间延迟,侵染效率下降;而将Ser33和Thr7s分别或者同时突变为不能被磷酸化的丙氨酸(Alanine, Ala)后,突变体侵染性克隆在本氏烟上的发病时间和侵染效率与野生型pC1的侵染性克隆相似。为了明确pCl磷酸化是否影响pC1蛋白的表达水平,首先将构建于马铃薯X病毒(Potato virus X, PVX)表达载体上的6个βCl磷酸化突变体pGR106-βC1S33A, pGR106-βC1S33D、pGR106-βC1T78A、pGR106-βC1T78D、pGR106-βC1S33A/T78A和pGR106-βC1S33D/T78D分别接种本氏烟,以pC1的单克隆抗体进行Western blot分析,发现βC1突变后其蛋白表达量无明显差异。进一步将PVX相关重组载体接种GFP转录水平沉默的16-TGS本氏烟,发现pCl的非组成型磷酸化突变体pGR106-βC1S33A、pGR106-βC1T78A和pGR106-βC1S33A/T78A与野生型PGR106-βC1一样可以回复GFP荧光,但是其组成型磷酸化的突变体PGR106-βC1S33D、pGR106-βC1T78D和pGR106-βC1S33D/T78D不能回复GFP荧光,表明pC1的组成型磷酸化突变体不能抑制GFP的转录水平基因沉默。利用Chop-PCR实验发现,pC1非组成型磷酸化突变体侵染性克隆TYLCCNBS33A、 TYLCCNBT78A和TYLCCNBS33A/T78A与野生型TYLCCNB一样可以降低其辅助病毒TYLCCNV基因组的甲基化水平,但是pCl组成型磷酸化突变体的侵染性克隆TYLCCNBS33D、TYLCCNBT78D和TYLCCNBS33D/T78D不能降低辅助病毒TYLCCNV基因组的甲基化水平,表明pC1的组成型磷酸化突变体减弱了其抑制辅助病毒TYLCCNV基因组甲基化的能力。以上结果表明,pC1蛋白的组成型磷酸化突变体可能通过减弱其抑制辅助病毒甲基化的能力,从而失去了抑制甲基化介导的TGS的能力。

关键词：中国番茄黄化曲叶病毒 βC1 磷酸化甲基化 TGS

中国番茄黄化曲叶病毒与烟草曲茎病毒卫星DNA β分子上症状决定因子的定位

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国番茄黄化曲叶病毒与烟草曲茎病毒卫星DNA β分子上症状决定因...

作者：刘怡浙江大学

学位级别：硕士

双生病毒是一类具有孪生颗粒形态的植物单链DNA病毒，目前双生病毒病害已在多个国家和地区的作物上造成严重危害。近年来，我国华南各省作物上双生病毒病害的发生有逐年加重的趋势，并且在华东的浙江和上海等地也已陆续发现这类病毒。... 详细信息

双生病毒是一类具有孪生颗粒形态的植物单链DNA病毒，目前双生病毒病害已在多个国家和地区的作物上造成严重危害。近年来，我国华南各省作物上双生病毒病害的发生有逐年加重的趋势，并且在华东的浙江和上海等地也已陆续发现这类病毒。中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)和烟草曲茎病毒(TbCSV)病害复合体在烟属寄主上能诱导不同的症状表型：TbCSV病害复合体诱导产生叶片下卷和植株矮化等表型;而TYLCCNV病害复合体则除能诱导以上症状，还能诱导叶背面沿着叶脉形成耳突的特有症状。假重组实验发现，耳突的表型是与TYLCCNV DNAβ相伴随的。本文对中国番茄黄化曲叶病毒Y10分离物(TYLCCNV-Y10)以及烟草曲茎病毒Y35分离物(TbCSV-Y35)的DNAβ分子的症状决定因子进行了研究。本文利用Overlap Extension PCR的方法对两个卫星的启动子与A富含区这一段约430nt的片段进行了互换，构建了嵌合体卫星分子Y10-35AP(Y10β上置换了Y35β的启动子和A富含区)和Y35-10AP(Y35β上置换了Y10β的启动子和A富含区。嵌合体卫星分子Y10-35AP与TbCSV-Y35或TYLCCNV-Y10共同接种均能产生耳突的表型;而嵌合体卫星分子Y35-10AP与TbCSV-Y35或TYLCCNV-Y10共同接种只能产生与TbCSV-Y35及其DNAβ类似的叶片皱缩、曲叶和植株矮化等双生病毒的典型症状。嵌合体卫星分子Y10-35AP与TbCSV-Y35和TYLCCNV-Y10共同接种后，还出现脉间肿表型。以上结果表明，耳突与双生病毒卫星分子DNAβ的βC1的相伴随，βC1的启动子类型也能影响诱导症状的形成和表型。

关键词：中国番茄黄化曲叶病毒烟草曲茎病毒 DNAβ 启动子 A富含区耳突症状决定因子

中国番茄黄化曲叶病毒卫星和烟草曲茎病毒卫星的嵌合体种群遗传变异分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国番茄黄化曲叶病毒卫星和烟草曲茎病毒卫星的嵌合体种群遗传变...

作者：曹刘素西南大学

学位级别：硕士

已有研究表明,中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)和烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)及其伴随的β卫星分子(TYLCCNB和TbCSB)具有类似于植物RNA病毒的遗传变异特点,其种群结构表现“准... 详细信息

已有研究表明,中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)和烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)及其伴随的β卫星分子(TYLCCNB和TbCSB)具有类似于植物RNA病毒的遗传变异特点,其种群结构表现“准种”特性。本实验室前期研究表明,TYLCCNB和TbCSB比其辅助病毒具有更丰富的种群遗传结构,突变频率更高。TYLCCNB突变克隆百分率和突变频率均高于TbCSB,且伴随异源辅助病毒时β卫星具有更高的突变克隆百分率和突变频率。βC1是β卫星分子上唯一一个功能基因,其编码的pC1蛋白非卫星复制所必需,但对辅助病毒诱导寄主症状具有关键作用。TbCSB-10C1和TYLCCNB-35C1是两个p卫星TbCSB和TYLCCNB互换βC1基因所得的嵌合体。本研究以TbCSV Y35分离物(Y35A),以及卫星TbCSB Y35分离物(Y35β)和TYLCCNB Y10分离物(Y10β)的嵌合体Y35β-10C1、Y10β-35C1为实验材料,将辅助病毒Y35A分别伴随两个卫星嵌合体的侵染性克隆接种本氏烟和心叶烟,从接种植株中共获得4个Y35β-10C1和4个Y10β-35C1卫星嵌合体种群,并对这些卫星嵌合体种群的遗传结构及变异特点进行了分析。对卫星嵌合体种群遗传结构的分析表明,Y10β-35C1和Y35β-10C1所有种群均具有丰富的遗传多样性,符合“准种”结构特征。其中Y10β-35C1和Y35β-10C1种群的平均突变克隆百分率分别为100%和37.68%;平均突变频率分别为6.31×10-3和3.55×10一,二者相差了一个数量级,且无论是在本氏烟还是心叶烟中Y35β-10C1种群的变异水平均低于Y10β-35C1种群;表明Y10β-35C1种群的遗传结构更丰富,突变频率比Y35β-10C1种群更高。本研究比较了卫星嵌合体Y10β-35C1和Y35β-10C1种群在不同植株中的变异水平,结果表明Y35β-10C1和Y10β-35C1的致病性都很强,接种本氏烟和心叶烟9-12d即可观察到严重的双生病毒典型症状,但在两种寄主中其种群的变异水平不同。Y35β-10C1在本氏烟和心叶烟中平均突变克隆百分率分别为12.5%和20.09%,平均突变频率分别为2.07×104和5.03×10-4,表明Y35β-10C1在心叶烟中的变异水平高于本氏烟;Y10β-35C1在本氏烟和心叶烟中平均突变克隆百分率均为100%,平均突变频率分别为6.12×104和7.71×10一,表明Y10β-35C1在心叶烟中的变异水平略高于本氏烟。从不同的接种时间来看,Y35β-10C1-60d和Y35β-10C1-120d种群的平均突变克隆百分率分别为23.96%和8.48%,平均突变频率分别为2.38×104和4.73×10-,可见120d的Y35p-10C1种群较60d种群变异水平高。而Y10β-35C1-60d和Y10β-35C1-120d种群的平均突变克隆百分率均为100%,平均突变频率分别为6.51×10-3和7.32×10-3,表明120d的Y10β3-35C1种群较60d种群变异水平高。对卫星嵌合体种群内突变分布的分析表明,Y35β-10C1种群和Y10β3-35C1种群的突变分布规律类似,Y35β-10Cl和Y10β3-35C1种群的碱基突变主要发生在A-rich区,在该区域内的突变频率分别为3.46×10-4和4.79×10-3;其中Y10β-35C1种群在A-rich区的突变位点又主要集中在950-964核苷酸位点这一区段,Y35β3-10C1在A-rich区则无明显的突变区段。卫星嵌合体在SCR区和βC1区少有发生,Y35β3-10C1和Y10β-35C1种群在SCR区的突变频率分别为1.73×10-5和1.62×10-,在βC1区的突变频率分别为8.66×10-6和2.43×10-5,显著低于A-rich区的突变频率。对卫星嵌合体种群内突变类型的分析表明,Y35β3-10C1种群的碱基突变类型包括碱基替换和碱基插入,其中在本氏烟中没有明显的突变类型倾向,突变较为随机,但在心叶烟中有明显的G→T和G→A的突变倾向。Y10β-35C1种群的碱基突变类型为碱基替换、碱基插入和碱基缺失,其中在碱基替换突变类型中,本氏烟中有明显的G→A、T→G、T→C、C→T、C→A的突变趋势,在心叶烟中T→G、 T→C、C→T则为优势突变类型,但无论在本氏烟还是心叶烟中碱基A的插入和缺失均占了很大比例,在本氏烟中碱基A的插入占了整个突变的26.17%,碱基A的缺失占了整个突变的18.91%,在心叶烟中碱基A的插入占了整个突变的41.45%,碱基A的缺失占了

关键词：烟草曲茎病毒中国番茄黄化曲叶病毒卫星嵌合体种群遗传结构变异