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基于中药大分子探讨芍药甘草汤镇痛的物质基础及作用机制

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药学学报 2023年第5期58卷 1138-1148页

作者：高源郭琴王欢欢董莹莹赵宁阎政燊杨玉琴柏冬中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700

为了研究芍药甘草汤的镇痛作用,本文从中药大分子角度探讨其物质基础及作用机制。本实验从中药复方煎煮后汤液浑浊的现象出发,以芍药甘草汤为研究对象,研究其煎煮时沉淀物的形成过程,结果表明汤剂在煎煮过程中会形成具有一定形貌的聚集... 详细信息

为了研究芍药甘草汤的镇痛作用,本文从中药大分子角度探讨其物质基础及作用机制。本实验从中药复方煎煮后汤液浑浊的现象出发,以芍药甘草汤为研究对象,研究其煎煮时沉淀物的形成过程,结果表明汤剂在煎煮过程中会形成具有一定形貌的聚集体,通过静置离心得到沉淀物。定性、定量分析发现沉淀物主要由芍药苷、芍药内酯苷、甘草酸、甘草苷、异甘草苷和没食子酸6种小分子和蛋白质、多糖类大分子组成,虽然其成分与芍药甘草汤组成一致,但去除沉淀物的芍药甘草汤镇痛药效显著降低。在此基础上,本研究从芍药甘草汤中分离得到小分子化合物、多糖及蛋白质部位,各部位的含量分别为60.4、700.7和207.2 mg·g^(-1),大分子蛋白质、多糖含量较小分子含量高,按照多糖∶小分子=11.6∶1、蛋白质∶小分子=3.4∶1的比例在模拟煎煮的状态下制备沉淀物。粒径表征结果表明共同加热后两种沉淀物的粒径会发生明显变化,含量测定结果表明形成沉淀物后游离的小分子化合物芍药苷、芍药内酯苷、甘草酸、甘草苷、异甘草苷和没食子酸含量均明显降低,因此推测小分子成分分别与蛋白质、多糖发生了相互作用。醋酸扭体实验证明模拟制备的沉淀物具有很好的镇痛作用,并能有效降低炎症因子前列腺素E2和一氧化氮的水平,提高抗炎因子白介素-10水平。以上结果证明芍药甘草汤中的沉淀物是其发挥镇痛作用的重要物质基础,而大分子如蛋白质、多糖是构成沉淀物的主要成分,沉淀物发挥镇痛作用的化学机制是大分子与小分子间发生了相互作用。对于芍药甘草汤沉淀物中大分子的研究,不仅为阐明芍药甘草汤的药效物质基础提供新的思路和方法,也为解析传统汤剂起效的科学性提供了参考。

关键词：芍药甘草汤沉淀物蛋白质多糖镇痛

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基于“甘能缓”理论探讨甘草在经方中的作用

环球中医药 2023年第10期16卷 2068-2073页

作者：王惠敏吴晓霞冯梅柏冬陕西中医药大学基础医学院咸阳712046 中国中医科学院医学实验中心中国中医科学院中医基础理论研究所

本研究从阴阳五行学说为切入点,根据五行之间的相生、相克、相乘、相侮传变规律说明甘味药如何从五脏、六气以及药之偏性展示生克制化关系,阐释阴阳五行之间相互资生、相互制约的联系。“甘者缓也”,甘味药具有缓和、缓急的作用,通过药... 详细信息

本研究从阴阳五行学说为切入点,根据五行之间的相生、相克、相乘、相侮传变规律说明甘味药如何从五脏、六气以及药之偏性展示生克制化关系,阐释阴阳五行之间相互资生、相互制约的联系。“甘者缓也”,甘味药具有缓和、缓急的作用,通过药物本身具有的特性或者药对配伍起到缓和药物的偏性,达到减毒增效以及缓解以急迫、紧张为主要表现的病证等目的。而甘草,是甘味药物最具有代表性的药物,不管在组方中是君药还是佐使药,其发挥甘缓之性的作用是一致的。甘草“甘缓”的特性可以总结为缓病之急、缓药、解毒三种作用,并且不同的炮制方法对甘草发挥甘缓的作用也有所不同,体现出炮制后功效的差异性、独特性,这也展示了古代医家用药的缜密。最后,甘草虽然应用广泛,但亦有病情急迫、邪实等使用禁忌,要熟知甘草甘缓的实质及在其组方中的配伍规律、禁忌,通过辨证施治,真正发挥“国老”的作用。

关键词：甘草甘缓国老缓急缓药解毒

两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清对其抗炎作用影响差异的研究

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中国中医基础医学杂志 2024年第5期30卷 828-835页

作者：阎政燊张立石高焕郭琴宋剑南高源柏冬中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 陕西中医药大学陕西咸阳712046

目的基于两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清,探讨其抗炎作用差异。方法取雄性SD大鼠按10倍临床剂量给药(桂枝汤汤剂生药1 g/mL),取门静脉血、外周血含药血清,采用快速液相-三重四级杆质谱联用仪(rapid resolution liquid chromatograp... 详细信息

目的基于两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清,探讨其抗炎作用差异。方法取雄性SD大鼠按10倍临床剂量给药(桂枝汤汤剂生药1 g/mL),取门静脉血、外周血含药血清,采用快速液相-三重四级杆质谱联用仪(rapid resolution liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry,RRLc-QQQ-MS/MS),建立桂枝汤汤剂、含药血清中8种化学成分含量测定方法,并对含量进行测定。取对数生长期小鼠脑微血管内皮细胞(brain-derived endothelial cells.3,bEnd.3)模型,用白细胞介素(interleukin,IL)-1β刺激,建立细胞炎症模型,使用bEnd.3细胞作为正常组。除正常组、模型组外,设置桂枝汤汤剂高、中、低剂量组(分别含5%、2.5%、1.25%桂枝汤汤剂),门静脉含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%门静脉含药血清)和外周血含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%外周血含药血清),ELISA法测定细胞外液中的前列腺素(prostaglandin,PG)E_(2)含量。结果含量测定结果显示汤剂中芍药苷、芍药内酯、甘草苷、甘草酸比例相对较高,血清中肉桂酸、6-姜酚含量相对较高,较汤剂中新出现甘草次酸等代谢物。门静脉血清中以上8种化合物含量均高于外周血血清。5%桂枝汤汤剂中甘草酸含量为798.13 ng/mL,20%门静脉含药血清中甘草酸含量为316.22 ng/mL,20%外周血中甘草酸含量为481.17 ng/mL,药物中成分的含量在同一数量级。与模型组比较,将高、中、低剂量桂枝汤汤剂添加到bEnd.3细胞培养体系中,高、中、低剂量桂枝汤组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显高于模型组(P<0.05),而门静脉或外周血含药血清组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显低于模型组(P<0.05),且门静脉血清的药效作用显著强于相同浓度的外周血血清(P<0.05)。结论桂枝汤汤剂经胃肠道给药后,门静脉含药血清相较外周血含药血清显示出更高的成分含量与抗炎作用。这一发现提示采用门静脉含药血清而非传统的外周血含药血清在中药方剂研究中的重要性。

关键词：桂枝汤门静脉含药血清外周血含药血清含量测定药效实验

基于网络药理学和分子对接技术探讨黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变和类风湿性关节炎“异病同治”的作用机制

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环球中医药 2024年第3期17卷 426-438页

作者：王惠敏王欢欢冯梅高源董莹莹柏冬陕西中医药大学基础医学院咸阳712046 中国中医科学院中医基础理论研究所

目的运用网络药理学方法和分子对接技术,从益气活血的角度探讨黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)和类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)“异病同治”的作用机制。方法本研究运用网络... 详细信息

目的运用网络药理学方法和分子对接技术,从益气活血的角度探讨黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)和类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)“异病同治”的作用机制。方法本研究运用网络药理学,从中医“同治异病”的角度探讨黄芪桂枝五物汤治疗DPN、RA的作用机制。结果黄芪桂枝五物汤治疗DPN、RA都采用了益气温经、和血通痹的治疗方法,证实了DPN、RA在其证候特点的相同点,也推出了两者“异病同治”的客观存在性。黄芪桂枝五物汤对DPN和RA的治疗作用主要是通过整体调控晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products, AGEs)—糖基化终末产物受体(receptor of AGEs, RAGE)信号通路实现的,但对不同病变有不同的侧重点。DPN的治疗主要通过抑制神经元凋亡和刺激突触再生来保护神经。RA的治疗往往依赖于对肿瘤坏死因子(transforming necrosis factor, TNF)信号通路、Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)信号通路、白介素17(interleukin 17,IL-17)信号通路等炎症相关通路的调节,以减少炎性因子,调节免疫。结论黄芪桂枝五物汤可通过相同途径和不同途径治疗DPN、RA,两者虽有相通之处和内在联系,但也有不同之处,故应着眼于不同的方向,为研究提供新的启示。

关键词：黄芪桂枝五物汤网络药理学分子对接异病同治糖尿病周围神经病变类风湿性关节炎