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丹参农药残留研究现状

特产研究 2024年第1期46卷 136-141页

作者：付育臣周季欣田盈盈张小波郭兰萍张亚玉成都大学食品与生物工程学院四川成都610106 中国中医科学院中药资源中心北京100700

丹参是最常用的大宗中药材之一,历史悠久,在临床应用中具有重要地位。随着种植年限的增长和连作面积的增加,病虫害的发生也随之增多,栽培过程中不可避免使用农药进行病害防控,农药残留种类也从过去有机氯类等农药转变为吡虫啉、多菌灵... 详细信息

丹参是最常用的大宗中药材之一,历史悠久,在临床应用中具有重要地位。随着种植年限的增长和连作面积的增加,病虫害的发生也随之增多,栽培过程中不可避免使用农药进行病害防控,农药残留种类也从过去有机氯类等农药转变为吡虫啉、多菌灵和多效唑等新型农药,农药的使用不当导致丹参中农药的残留时有发生,严重的影响了丹参的质量和用药安全。本文通过对种植户进行走访调查,并结合近年来国内外丹参的农药残留及其检测技术相关文献进行整理,以明确丹参的农药使用现状,为丹参的绿色种植和安全生产提供参考。

关键词：丹参病虫害农药残留检测

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评价水痘-带状疱疹病毒抗体的新型酶联免疫吸附方法

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中国药事 2024年第8期38卷 899-905页

作者：权娅茹陈震邱平任晋楷万文妍李长贵陈国庆中国食品药品检定研究院北京102629 北京万泰生物药业股份有限公司北京102206

目的:水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白已被证明是高度准确的VZV特异性免疫指标。本研究以重组蛋白作为包被抗原建立了酶联免疫吸附方法(ELISA),用于评价水痘疫苗接种后的血清抗体水平。方法:筛选ELISA包被抗原,以重组蛋白gE和gB作为包被抗... 详细信息

目的:水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白已被证明是高度准确的VZV特异性免疫指标。本研究以重组蛋白作为包被抗原建立了酶联免疫吸附方法(ELISA),用于评价水痘疫苗接种后的血清抗体水平。方法:筛选ELISA包被抗原,以重组蛋白gE和gB作为包被抗原,W1044国际参考品作为标准品,初步建立VZV抗体的ELISA法并对其进行验证。将建立的ELISA法与膜抗原荧光抗体(FAMA)法进行比对。结果:以gE和gB作为包被抗原,成功建立了ELISA方法,采用线性拟合,标准曲线在抗体浓度0.25~4 mIU·mL^(-1)范围内具有良好的线性关系,R^(2)>0.990,回收率为85%~120%,定量限为0.25mIU·mL^(-1),精密度CV<15%,特异性良好。与FAMA法相比,ELISA法的灵敏度为89%,特异性为93%,总符合率为90%。结论:本课题成功建立了VZV抗体ELISA检测方法,可作为一种灵敏、特异的水痘疫苗临床血清评价方法。

关键词：水痘糖蛋白酶联免疫吸附方法血清学评价

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宋金元时期心悸病证治特点探析

天津中医药 2024年第5期41卷 575-581页

作者：王哲高利东徐存王保和天津中医药大学第一附属医院天津300381 国家中医针灸临床医学研究中心天津300381 天津中医药大学天津301617

宋金元时期心悸病的证治理论得到极大的丰富和完善。北宋时期,心悸病的发展多承晋唐“类分”思想之遗风,医家们注重对前朝医药理论的整理和继承,但又有所发挥。北宋医者新提出时气热毒、热邪两种病因,补入心实热、心中风和肾虚3种脏腑证... 详细信息

宋金元时期心悸病的证治理论得到极大的丰富和完善。北宋时期,心悸病的发展多承晋唐“类分”思想之遗风,医家们注重对前朝医药理论的整理和继承,但又有所发挥。北宋医者新提出时气热毒、热邪两种病因,补入心实热、心中风和肾虚3种脏腑证型,扩充了他病致悸的种类,心悸的通用药物被首次提出,历代效验方在方书中也得到全面的总结和整理。南宋时期,医家们受理学影响本经典、重求理,对心悸的病名和分类方式进行规范,发挥火热、脾胃气虚、血虚、气郁、痰浊等病机,并对心悸方剂进行精简,创立诸多名方,同时注重用药的次第问题,丰富了心悸的治法治则。纵观宋金元时期,心悸病的部分用药存在古今变迁,需要给予足够的重视;对病机的理解及治法用药亦与当代不同,值得学习与借鉴。

关键词：宋金元时期心悸中医证治特点

组分百日咳抗原中间品中内毒素含量动态显色定量检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2024年第2期37卷 209-214页

作者：赵明刘婷马昱吴丽洁付慧李世慧北京生物制品研究所有限责任公司北京100176

目的建立组分百日咳抗原中间品中内毒素含量的动态显色定量检测方法,并对方法进行验证,以期更好地对组分百白破疫苗进行质量控制。方法建立动态显色法(美洲鲎试剂)检测百日咳各抗原中间品脱毒后的内毒素含量,对方法的线性、专属性、... 详细信息

目的建立组分百日咳抗原中间品中内毒素含量的动态显色定量检测方法,并对方法进行验证,以期更好地对组分百白破疫苗进行质量控制。方法建立动态显色法(美洲鲎试剂)检测百日咳各抗原中间品脱毒后的内毒素含量,对方法的线性、专属性、准确性、重复性、中间精密度进行验证,并对动态显色法定量检测结果与凝胶法检测结果进行对比。结果动态显色法线性相关系数的绝对值(|r|)大于0.99;最大有效稀释倍数下中间品的干扰试验回收率在50%~200%之间,脱毒后百日咳类毒素(pertussis toxin,PT)稀释至10、100、1 000倍,丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)稀释至3 000、5 000、10 000倍,百日咳黏附素(pertussis adhesin,PRN)稀释至50、75、100倍对试验均无干扰作用;PT、FHA和PRN的准确性验证回收率分别为125%、110%和99%,重复性验证变异系数(CV)分别为7.21%、8.31%和5.84%,中间精密度验证CV分别为6.04%、16.29%和12.23%。动态显色法检测3批百日咳抗原中间品细菌内毒素含量与凝胶法检测结果一致,均小于脱毒后百日咳抗原中间品中细菌内毒素限值。结论建立的动态显色法具有良好的线性、专属性、准确性及精密性,检测结果准确,可用于脱毒后组分百日咳抗原中间品中内毒素含量的检测。

关键词：内毒素动态显色法百日咳抗原中间品鲎试剂

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从气虚毒滞论治慢性溃疡

辽宁中医药大学学报 2024年

作者：张秉睿苏文全王可彬杜雅薇吴圣贤北京中医药大学东直门医院北京中医医院顺义医院

慢性溃疡既包括体表皮肤溃疡，又包括消化道内的慢性胃溃疡、慢性十二指肠溃疡、溃疡性结肠炎和血管内的动脉粥样硬化斑块溃疡等。气虚毒滞证是慢性溃疡特有的核心证候，“气虚”为慢性溃疡发病之本，包括热盛耗气、脾胃气虚、肾气亏虚... 详细信息

慢性溃疡既包括体表皮肤溃疡，又包括消化道内的慢性胃溃疡、慢性十二指肠溃疡、溃疡性结肠炎和血管内的动脉粥样硬化斑块溃疡等。气虚毒滞证是慢性溃疡特有的核心证候，“气虚”为慢性溃疡发病之本，包括热盛耗气、脾胃气虚、肾气亏虚，“毒滞”为慢性溃疡发病之标，包括热毒、痰毒、瘀毒之滞。临床见神疲、乏力等气虚的全身表现以及溃疡久不愈合、平坦塌陷的局部表现。治疗慢性溃疡气虚毒滞证以补气解毒为主，又根据脏腑归属、溃疡部位、溃疡形色的不同有所差异，其内服、外用方药各具特色。本课题组提出以补气解毒作为治疗大法，自拟补气解毒汤为主方治疗，以期为临床治疗慢性溃疡气虚毒滞证提供系统思路和有效方法。

关键词：慢性溃疡气虚毒滞证动脉粥样硬化皮肤溃疡补气解毒汤

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食蟹猴CCl给药前后的血清差异蛋白鉴定

生物技术 2024年

作者：苗玉发李伟中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心药物非临床安全评价研究北京市重点实验室

[目的]比较雌性和雄性食蟹猴CCl4给药前后及性别间的血清差异蛋白。[方法]12只食蟹猴CCl4给药前以及给药后48 h,取血制备血清。部分血清用于肝酶测定,部分血清用于蛋白质提取。采用i TRAQ和LC-MS/MS技术,对蛋白质进行鉴定。[结果]CCl4... 详细信息

[目的]比较雌性和雄性食蟹猴CCl4给药前后及性别间的血清差异蛋白。[方法]12只食蟹猴CCl4给药前以及给药后48 h,取血制备血清。部分血清用于肝酶测定,部分血清用于蛋白质提取。采用i TRAQ和LC-MS/MS技术,对蛋白质进行鉴定。[结果]CCl4给药前,异性间的显著性差异指标有碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）;CCl4给药后,异性间的显著性差异指标有ALP、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）和磷酸肌酸激酶（creatine kinase,CK）。对于雌性,给药前后谷氨酸转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、CK和LDH的差异显著（P<0.01）。对于雄性,给药前后ALT的差异显著（P<0.01）。CCl4给药前、后雌雄异性间的差异蛋白分别为79个和258个。雌性在CCl4给药前后的差异蛋白为374个,雄性在CCl4给药前后的差异蛋白为376个。[结论]鉴定出的CCl4给药前、后雌雄异性间的79个和258个差异蛋白是对外源毒物或药物的免疫反应和毒性反应产生性别间差异的部分原因。CCl4给药前及给药后的750个差异蛋白参与CCl4的毒性机制。

关键词：食蟹猴蛋白质组学 iTRAQ技术液相色谱质谱串联性别差异基因本体京都基因和基因组百科全书蛋白质互相作用网络

GC-MS法测定4-(2，4-二氟苯甲酰基)-哌啶盐酸盐中14种基因毒性杂质

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沈阳药科大学学报 2024年

作者：孙灵敏邢倩斌刘芳茹董玥王雪菲梁敏石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司河北医科大学药学院

目的建立气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定4-(2，4-二氟苯甲酰基)-哌啶盐酸盐(SM1)中14种卤代苯类基因毒性杂质。方法以TRACETR-FFAP(30 m×0.25 mm×0.25 μm)毛细管柱为固定相，程序升温，高纯氦气为载气；进样口温度为260℃；分流比... 详细信息

目的建立气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定4-(2，4-二氟苯甲酰基)-哌啶盐酸盐(SM1)中14种卤代苯类基因毒性杂质。方法以TRACETR-FFAP(30 m×0.25 mm×0.25 μm)毛细管柱为固定相，程序升温，高纯氦气为载气；进样口温度为260℃；分流比为5：1；离子源为电子轰击源(EI)；离子源温度为250℃；数据采集条件为选择离子监测模式(SIM)。结果 14种卤代苯类杂质得到较好的分离，且在各自测定范围内其浓度与响应值具有良好的线性关系(r2＞0.9988)；精密度试验RSD均小于5%，样品平均加样回收率均在93.2%～102.2%内。结论本方法专属性强，灵敏度高，准确性好，可用于SM1中14种卤代苯类基因毒性杂质的检测。

关键词：基因毒性杂质 GC-MS 卤代苯类分析方法的开发

紫外可见光谱法测定抗体偶联药物药物-抗体偶联比的方法建立和验证

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中国医药生物技术 2024年第1期19卷 22-29页

作者：白露陈苗苗王远芝黄铭蕊赵永新杭州多禧生物科技有限公司分析开发部浙江310018

目的建立基于紫外可见光谱检测抗体偶联药物(ADC)药物-抗体偶联比(DAR)的检测方法并进行验证。方法使用盐酸胍作为变性剂,修正基于氨基酸组成推算的抗体在280 nm处消光系数。利用比尔-朗伯定律测定抗体和小分子药物在252nm处的消光系... 详细信息

目的建立基于紫外可见光谱检测抗体偶联药物(ADC)药物-抗体偶联比(DAR)的检测方法并进行验证。方法使用盐酸胍作为变性剂,修正基于氨基酸组成推算的抗体在280 nm处消光系数。利用比尔-朗伯定律测定抗体和小分子药物在252nm处的消光系数及小分子药物在280nm处的消光系数。确定基于紫外可见光谱检测ADC的DAR公式参数和检测方法。根据《中华人民共和国药典》(2020)指导原则,对方法进行验证。结果抗体在252nm和280nm处的摩尔消光系数分别为91258和228913L/(mol·cm);tubulysin衍生物小分子药物在252和280nm处的摩尔消光系数分别为12798和3186 L/(mol·cm)。DAR=(A280-ADC×91258–A252-ADC×228913)/(A252-ADC×3186–A280-ADC×12798)。方法专属性符合要求。模拟DAR值为1.881~15.045的ADC药物进行准确性验证,回收率为79.38%~99.13%。重复性相对标准偏差(RSD%)为1.93%,中间精密度RSD%为2.36%。以252 nm处吸光值与280 nm处吸光值的比值为纵坐标,以模拟DAR值为横坐标进行线性回归的方程为y=0.0408x+0.414,相关系数r2为0.9954。根据DAR测定公式推算该方法的检测范围为0.60~82.56。不同检测波长[(280±1)或(252±1)nm]、不同放置时间(0~60 min)、不同批次的比色皿条件下,DAR值检测结果的RSD%均<5.0%。结论基于紫外可见光谱法进行抗体偶联药物DAR测定的方法简单、可操作性强,专属性、准确度、精密度、耐用性满足检测需求,该方法可以用于抗体偶联药物的质量分析和质量控制。

关键词：抗体偶联药物药物-抗体偶联比紫外可见光谱法

百日咳毒素、丝状血凝素和百日咳黏附素精制抗原纯度的SDS-PAGE检测方法的验证

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微生物学免疫学进展 2024年第4期52卷 23-29页

作者：陈丝丝夏芙蓉於洋何鹏王玲张娜赵芳圆范天一李世慧北京生物制品研究所有限责任公司研究开发室北京100176

目的采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)方法检测百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)和百日咳黏附素(pertactin,PRN)精制抗原纯度,并进行验证。方法对样品进行SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝染色后,使用凝胶成像系统拍照并用Image Lab软件进行分析,获得样品各蛋白条带的光密度值。对建立的方法进行系统适用性、线性、准确度、重复性、中间精密度、灵敏度和耐用性验证。结果对应2套分子量标准蛋白,PT、FHA和PRN精制抗原分别在10.00~50.00μg/mL的低质量浓度范围和50.00~600.00μg/mL的高质量浓度范围内,蛋白浓度和对应条带光密度值之间具有良好的线性关系,相关系数(coefficient of correlation,r)≥0.99。3种精制抗原杂质水平准确度和重复性回收率均在80%~120%,且重复性验证相对标准差(relative standard deviation,RSD)≤10%;抗原水平准确度和重复性回收率均在90%~110%,重复性验证RSD≤10%;灵敏度12.50μg/mL的回收率均在80%~120%,RSD≤10%;中间精密度验证RSD≤10%。结论建立的测定PT、FHA和PRN精制抗原纯度的SDS-PAGE法,其系统适用性、准确度、重复性、中间精密度和灵敏度均良好,可用于以上精制抗原的纯度检测。

关键词：百日咳毒素丝状血凝素百日咳黏附素 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证