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表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺研究

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中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 49-57页

作者：陈晓李伟国宋欢欢苏晓蕊王同燕谭菲菲田克恭国家兽用药品工程技术研究中心洛阳471000 普莱柯生物工程股份有限公司洛阳471000

为建立一套表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺,提高反应器上猪瘟病毒E2蛋白的表达量,以商业化培养基为基础,通过对关键营养组分添加量的DOE试验设计优化,获得一种组合补料配方,并在3 L反应器上对补料方式进行优化,以最大限度... 详细信息

为建立一套表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺,提高反应器上猪瘟病毒E2蛋白的表达量,以商业化培养基为基础,通过对关键营养组分添加量的DOE试验设计优化,获得一种组合补料配方,并在3 L反应器上对补料方式进行优化,以最大限度提高细胞密度。进一步在反应器上摸索了通气策略,以精确调控猪瘟E2重组杆状病毒培养过程的营养代谢平衡,解决副产物乳酸和氨过度积累导致细胞活力下降的问题。首次使用半连续补料工艺与渗透压动态平衡相结合的补料策略以及定向调节通气的工艺模式,使猪瘟病毒E2蛋白的表达量由130 mg/L增加至520 mg/L,提高了3倍。将3 L反应器工艺在100 L反应器上进行了连续3个批次的验证,结果猪瘟病毒E2蛋白的表达量均大于500 mg/L,收获猪瘟E2蛋白制备的疫苗抗体均在2周后转阳,且抗体水平持续上升,接种后8周抗体阻断率仍维持在80%左右。综上,3 L反应器工艺能够稳定放大至100 L反应器,建立了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒100 L反应器工艺,且100 L反应器上重组蛋白的表达量稳定、免疫原性良好。

关键词：猪瘟病毒 E2蛋白重组杆状病毒关键营养单元半连续补料定向调节

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猪轮状病毒胶体金检测试纸条的研制及应用

中国畜牧兽医 2024年第3期51卷 1223-1231页

作者：李妍花周兵强康笃利郝丽影汪志艳赵少若黄甜庞杏豪刘俊阳楚园园张云静高晓静邓均华田克恭洛阳普泰生物技术有限公司洛阳471000 国家兽用药品工程技术研究中心洛阳471000

【目的】利用2株猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)单克隆抗体,研制胶体金检测试纸条,用于PoRV的临床快速检测。【方法】制备40 nm粒径的胶体金溶液标记单克隆抗体4G5,将单克隆抗体5G4和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测... 详细信息

【目的】利用2株猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)单克隆抗体,研制胶体金检测试纸条,用于PoRV的临床快速检测。【方法】制备40 nm粒径的胶体金溶液标记单克隆抗体4G5,将单克隆抗体5G4和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测线和质控线。通过优化胶体金溶液最适pH、标记抗体和检测抗体的最佳使用量,制备PoRV胶体金检测试纸条;对试纸条的灵敏度、敏感性、特异性、重复性和稳定性进行评价。通过检测50份猪粪便样品,计算试纸条与RT-PCR方法的符合率,最后采用试纸条进行1249份临床样品的测定。【结果】经优化后试纸条的最佳参数如下:胶体金溶液最佳pH为8.0,标记抗体4G5和检测抗体5G4最佳使用量分别为14.4μg/mL和1 mg/mL。试纸条能检测出1∶2000稀释的PoRV OSU株(G5型)病毒液,灵敏度为104.5TCID50/mL,且检测PoRV G9、G3和G4型毒株均为阳性。检测猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)、猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)和猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)均为阴性。批内和批间重复性、稳定性良好。检测50份猪粪便样品,与RT-PCR方法的阳性符合率为97.5%(39/40),阴性符合率为100%(10/10),总体符合率为98%(49/50)。检测2022年在河南、山西省猪场收集的临床样品1249份,阳性检出率为5.2%。【结论】本研究制备的PoRV胶体金检测试纸条具有良好的敏感性、特异性和重复性等优点,与RT-PCR方法的符合率较高,可用于规模化猪场PoRV的快速检测。

关键词：猪轮状病毒(PoRV) 胶体金检测试纸条快速检测

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TA2工业纯钛激光焊接的数值模拟分析

激光与光电子学进展 2022年第17期59卷 274-281页

作者：季齐宝王文焱张帅锋吕逸帆谢敬佩王爱琴柳培河南科技大学材料科学与工程学院河南洛阳471023 有色金属新材料加工与先进加工技术省部共建协同创新中心河南洛阳471023 中国船舶集团有限公司第七二五研究所(洛阳船舶材料研究所) 河南洛阳471023

为优化TA2工业纯钛的激光焊接工艺,以ABAQUS软件为平台,采用有限元分析法建立了非线性瞬态热力耦合模型。分析厚度为6 mm的TA2工业纯钛激光焊接过程的热应力场。考虑了材料热物理性能参量的温度依存性,利用FORTRAN编程实现了移动高斯面... 详细信息

为优化TA2工业纯钛的激光焊接工艺,以ABAQUS软件为平台,采用有限元分析法建立了非线性瞬态热力耦合模型。分析厚度为6 mm的TA2工业纯钛激光焊接过程的热应力场。考虑了材料热物理性能参量的温度依存性,利用FORTRAN编程实现了移动高斯面热源和圆锥体热源复合的加载。通过实验验证了复合热源的可靠性,并对比分析了不同工艺参数下熔池内不同位置的最高温度及不同温度区间内的冷却速度。结果表明,激光功率和焊接速度对熔池的最高温度和不同温度区间的冷却速度均有较大影响,且熔池受焊接速度的影响更大。

关键词：激光光学激光焊接工业纯钛数值模拟工艺参数温度场

BN微粉加入量对Si_(3)N_(4)-BN复合材料高温抗氧化性的影响

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耐火材料 2022年第6期56卷 495-498,504页

作者：牛世程吴吉光梁鹏鹏相宇博郑翰卜相娟罗天中钢集团洛阳耐火材料研究院有限公司先进耐火材料国家重点实验室河南洛阳471039

为探究BN微粉加入量对Si_(3)N_(4)-BN复合材料高温抗氧化性的影响,以Si粉、Si_(3)N_(4)粉、h-BN微粉为主要原料,采用反应烧结技术制备了BN微粉加入量(w)分别为0、12%、26%、41%的Si_(3)N_(4)-BN复合材料。在1 200℃、静态空气气氛下进行... 详细信息

为探究BN微粉加入量对Si_(3)N_(4)-BN复合材料高温抗氧化性的影响,以Si粉、Si_(3)N_(4)粉、h-BN微粉为主要原料,采用反应烧结技术制备了BN微粉加入量(w)分别为0、12%、26%、41%的Si_(3)N_(4)-BN复合材料。在1 200℃、静态空气气氛下进行2~20 h的氧化试验,检测了试样氧化前后的显气孔率、常温抗折强度、常温耐压强度,并进行XRD和SEM分析。结果表明:当BN微粉加入量为41%(w)时,反应烧结Si_(3)N_(4)-BN试样的抗氧化性能最优,显著优于反应烧结Si_(3)N_(4)试样;氧化产物形成的含B玻璃相在试样表面形成的致密保护层是复合材料具有优良抗氧化性能的关键因素。

关键词： Si_(3)N_(4) BN Si_(3)N_(4)-BN复合材料反应烧结抗氧化性

几种碳化硅耐火材料在高温水蒸气中的抗氧化性能比较

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耐火材料 2022年第4期56卷 351-355页

作者：王佳平朱冲吴吉光黄志刚吕春江中钢集团洛阳耐火材料研究院有限公司河南洛阳471039

对Si_(3)N_(4)-SiC砖、国产Si_(3)N_(4)-Si_(2)N_(2)O-SiC砖、国外Si_(3)N_(4)-Si_(2)N_(2)O-SiC砖、SiAlON-SiC砖、氧化物结合SiC砖、自结合SiC砖、SiC浇注料等碳化硅耐火材料在1000℃、32 kg·m^(-3)·h^(-1)水蒸气条件下分别保持100、200、300、400和500 h进行氧化试验,检测试样氧化前后的质量、体积、体积密度和显气孔率,并进行XRD和SEM分析。结果表明:1)在1000℃、32 kg·m^(-3)·h^(-1)水蒸气条件下,随着氧化时间从0增加至500 h,几种碳化硅耐火材料的体积和质量均呈增大趋势,体积密度呈减小趋势;氧化物结合SiC砖和SiC浇注料的显气孔率呈增大趋势,Si_(3)N_(4)-SiC砖、SiAlON-SiC砖和自结合SiC砖的显气孔率呈先减小后增大的变化趋势,Si_(3)N_(4)-Si_(2)N_(2)O-SiC砖的显气孔率呈减小趋势或呈先减小后增大的变化趋势。2)就化学-物相组成基本上相同的国产Si_(3)N_(4)-Si_(2)N_(2)O-SiC砖(SNO-1)和国外Si_(3)N_(4)-Si_(2)N_(2)O-SiC砖(SNO-2)而言,在200~500 h段氧化相同时间后,SNO-2的质量变化率均小于SNO-1的,表明SNO-2的抗高温水蒸气氧化性能优于SNO-1的。

关键词：碳化硅耐火材料水蒸气抗氧化性

β-SiAlON结合氧化铝空心球隔热制品的制备及应用

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耐火材料 2023年第4期57卷 356-359页

作者：朱冲吴吉光张新华相宇博王文武中钢集团洛阳耐火材料研究院有限公司、先进耐火材料国家重点实验室河南洛阳471039

为提高氮化炉的使用寿命,以氧化铝空心球、Si粉、Al粉、Al_(2)O_(3)细粉和微粉等为主要原料,经1450℃保温10 h氮化反应制备了结合相β-SiAlON含量约30%(w)的氧化铝空心球隔热制品,测试了理化性能,分析了物相组成和显微结构。分析表明,β... 详细信息

为提高氮化炉的使用寿命,以氧化铝空心球、Si粉、Al粉、Al_(2)O_(3)细粉和微粉等为主要原料,经1450℃保温10 h氮化反应制备了结合相β-SiAlON含量约30%(w)的氧化铝空心球隔热制品,测试了理化性能,分析了物相组成和显微结构。分析表明,β-SiAlON结合氧化铝空心球材料中的β-SiAlON主要为细长的纤维状晶体,1350℃时的高温抗折强度显著高于常温抗折强度,荷重软化温度高,抗热震性优良。将该材料用于5 m^(3)间歇式电加热氮化炉工作衬,使用寿命超过2.5 a,使用炉次超过130炉,明显高于莫来石结合氧化铝空心球制品的100炉。

关键词：氧化铝空心球隔热制品 β-SiAlON 莫来石氮化炉抗折强度

碳化硅浇注料在1000℃空气和水蒸气中的高温氧化行为

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耐火材料 2022年第1期56卷 16-19页

作者：曹会彦王文武张新华许海洋李杰中钢集团洛阳耐火材料研究院有限公司先进耐火材料国家重点实验室河南洛阳471039

利用扫描电镜、X射线衍射仪等对碳化硅浇注料在1000℃静态空气和纯水蒸气(参照ASTM C863—2000)中分别保温50、100、150 h的高温氧化行为进行了研究。结果表明:1)纯水蒸气氧化条件下,碳化硅浇注料的质量变化率和体积变化率均明显大于静... 详细信息

利用扫描电镜、X射线衍射仪等对碳化硅浇注料在1000℃静态空气和纯水蒸气(参照ASTM C863—2000)中分别保温50、100、150 h的高温氧化行为进行了研究。结果表明:1)纯水蒸气氧化条件下,碳化硅浇注料的质量变化率和体积变化率均明显大于静态空气条件下的。2)和空气相比,水蒸气氧化对碳化硅浇注料的结构破坏更严重,可能是由于随时间的延长不能形成有效的保护膜,导致氧化反应持续进行;体积膨胀到一定程度,内部结构被破坏,最终导致材料开裂、剥落,失效。3)不同条件下碳化硅浇注料抗氧化性能差异可能和氢键对氧化膜的破坏有关。

关键词： SiC浇注料静态空气氧化水蒸气氧化物相组成显微结构

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新城疫基因Ⅶ型多联灭活疫苗的研究

中国动物传染病学报 2022年第5期30卷 183-188页

作者：洪素梅田辉张盼涛王婉冰薛景景杜东颖胡小飞刘武杰田克恭国家兽用药品工程技术研究中心洛阳471000 普莱柯生物工程股份有限公司洛阳471000

本研究旨在研制鸡新城疫(NDV)基因Ⅶ型多联灭活疫苗。利用基因Ⅶ型N7a株病毒液浓缩适当倍数后灭活制备抗原,与浓缩的鸡传染性支气管炎(IB)等抗原等比混合,制备新流二联、新支流三联和新支流法四联苗,免疫SPF鸡评价其近期免疫效力和免疫... 详细信息

本研究旨在研制鸡新城疫(NDV)基因Ⅶ型多联灭活疫苗。利用基因Ⅶ型N7a株病毒液浓缩适当倍数后灭活制备抗原,与浓缩的鸡传染性支气管炎(IB)等抗原等比混合,制备新流二联、新支流三联和新支流法四联苗,免疫SPF鸡评价其近期免疫效力和免疫持续期。结果显示:用浓缩N7a抗原制备的联苗ND HI为8.1~8.4log2,高于未浓缩N7a抗原制备的新支流法四联苗(ND HI为7.4log2);浓缩与未浓缩N7a抗原制备的四联苗IB、AI和IBD抗体无明显差异,浓缩N7a抗原制备的新支流法四联苗免后6个月各组分抗体水平依然达到保护标准。综上,基因Ⅶ型NDV N7a株可用于制备新流二联苗、新支流三联苗和新支流法四联苗,不同组分之间抗原相容性好,且新支流法四联苗的免疫持续期可达6个月。

关键词：鸡新城疫浓缩四联灭活疫苗免疫持续期

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基于动态滑动摩擦因数齿轮副啮合效率研究

机械传动 2023年第8期47卷 24-29页

作者：付景博乔明明郭志丽陈江义郑州大学机械与动力工程学院河南郑州450001 洛阳雷斯达传动有限公司河南洛阳471026

为了研究齿轮副在实际工况下的啮合效率,对齿轮副接触面进行受力和运动学分析,结合弹流润滑理论对齿轮副的润滑状态进行判断,建立了在弹流润滑和混合润滑状态下的动态摩擦因数数学模型,得到齿轮副沿啮合线不同啮合位置的摩擦因数;从受... 详细信息

为了研究齿轮副在实际工况下的啮合效率,对齿轮副接触面进行受力和运动学分析,结合弹流润滑理论对齿轮副的润滑状态进行判断,建立了在弹流润滑和混合润滑状态下的动态摩擦因数数学模型,得到齿轮副沿啮合线不同啮合位置的摩擦因数;从受力的角度出发,推导出齿轮副啮合效率计算式,引入动态滑动摩擦因数,得到符合实际工况的齿轮副啮合效率;结合Matlab仿真分析软件,分析了传动比和小齿轮齿数对滑动摩擦因数及齿轮副啮合效率的影响。结果表明,基于动态滑动摩擦因数的齿轮副啮合效率计算方法与实际工况具有良好的一致性,对齿轮传动设计具有一定的指导意义。

关键词：摩擦因数齿轮传动传动比啮合效率

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