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关岭猪和从江香猪肌肉中挥发性风味物质差异研究

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中国畜牧杂志 2024年

作者：向进吴燕王春源丁义杰赵永付红梅张依裕贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州大学香猪研究所

本研究以8月龄关岭猪、从江香猪阉公猪背最长肌为材料，采用二维气相色谱-飞行时间质谱（GC×GC-TOF-MS）分析技术对2种猪背最长肌中的挥发性风味物质进行检测。结果表明：2种地方猪的各项肉品质指标无显著差异；2种猪肌肉的风味物质主... 详细信息

本研究以8月龄关岭猪、从江香猪阉公猪背最长肌为材料，采用二维气相色谱-飞行时间质谱（GC×GC-TOF-MS）分析技术对2种猪背最长肌中的挥发性风味物质进行检测。结果表明：2种地方猪的各项肉品质指标无显著差异；2种猪肌肉的风味物质主要包含烃类化合物、苯环型化合物、酯类化合物、醛类化合物、醇类化合物、酮类化合物、杂环化合物以及其他挥发性化合物，这些化合物主要产生了果香味、甜味和青草香味等10种气味；在P1，FC>2或FC<0.5条件下，2种猪肉中共鉴定到265种挥发性物质，其中39种挥发性化合物的相对含量存在显著差异；关岭猪背最长肌中癸酸乙酯、十五烷酸乙酯、棕榈酸乙酯、壬酸乙酯和十四烷等12种风味化合物的相对含量显著高于从江香猪，关岭猪背最长肌中的一氧化二氮和3，5-二叔丁基-2-羟基苯甲醛的相对含量极显著高于从江香猪；关岭猪背最长肌中的1，3-辛二烯、1-戊醇、2-丁基四氢呋喃、6-甲基庚烷-2-酮和庚醛等18种化合物的相对含量显著低于从江香猪，关岭猪被最长肌中的3-氧代四环[5.***.2.01，6.02，4]十一烷、2-丁基四氢呋喃、2-戊烯醛、1-丁醇、2-庚醇、2-甲基吡啶、苯甲醚的相对含量极显著低于从江香猪。本研究揭示了关岭猪和从江香猪独特的风味成分，进一步证实了挥发性化合物差异可能是导致地方猪种独特猪肉风味产生的主要来源，为猪肉品质改良提供了理论参考。

关键词：关岭猪从江香猪 GC×GC-TOF-MS技术风味物质相对含量

柯乐猪METTL23基因多态性与繁殖性能的关联性分析

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农业生物技术学报 2024年第7期32卷 1577-1586页

作者：向进王春源罗华伦吴燕杨酸谭元成张依裕贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州大学香猪研究所黔西南州农产品质量安全检测中心

甲基转移酶23 (methyltransferase like 23, METTL23)对于猪(Sus scrofa)早期胚胎及组织器官发育过程具有重要促进作用，为了分析METTL23基因SNP位点的遗传效应对繁殖性状的影响，本研究以240头健康的经产柯乐猪母猪为研究对象，采用San... 详细信息

甲基转移酶23 (methyltransferase like 23, METTL23)对于猪(Sus scrofa)早期胚胎及组织器官发育过程具有重要促进作用，为了分析METTL23基因SNP位点的遗传效应对繁殖性状的影响，本研究以240头健康的经产柯乐猪母猪为研究对象，采用Sanger测序法对METTL23基因的SNP位点进行筛选鉴定，并利用SPSS 22.0软件分析SNP位点与柯乐猪的繁殖性状指标的关联性。结果表明，在柯乐猪METTL23基因共发现g.4804958G>T (第1内含子)、g.4805082C>T (第2外显子)和g.4806821A>G (第4外显子) 3个SNPs位点，均存在3种基因型，其中GT、CC和AA分别为对应突变位点的优势基因型，G、C和A分别为对应突变位点的优势等位基因，多态信息含量均表现为中度多态(0.25T位点对产活仔猪数、初生窝重和断奶仔猪数有显著影响(PG位点对初生窝重、初生平均重和断奶仔猪数有显著影响(PT和g.4806821A>G对柯乐猪繁殖性能有显著影响，双倍型H4H4 (GGCCGG)对繁殖性能有极显著影响，METTL23可以作为分子育种辅助标记。本研究为猪的遗传育种提供了理论参考。

关键词：甲基转移酶23(METTL23) 柯乐猪多态性关联性分析繁殖性能

干扰SOCS1基因表达对猪乳腺上皮细胞凋亡的调控效应

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中国畜牧杂志 2024年

作者：赵永杨酸杨齐心杨红文王春源吴燕向进付红梅丁义杰张依裕贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室/贵州大学香猪研究所贵州省畜禽遗传资源管理站

细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）是一种调节细胞内信号通路活性的负调控因子，参与调控机体细胞的多种生理功能。为探索SOCS1基因沉默对猪乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响，试验通过构建猪SOCS1基因shRNA干扰载体，转染猪乳腺上皮细胞... 详细信息

细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）是一种调节细胞内信号通路活性的负调控因子，参与调控机体细胞的多种生理功能。为探索SOCS1基因沉默对猪乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响，试验通过构建猪SOCS1基因shRNA干扰载体，转染猪乳腺上皮细胞，TMT定量蛋白组学筛选差异蛋白，Annexin V/PI、CCK-8和流式细胞术检测细胞周期、细胞增殖和细胞凋亡。结果显示，干扰组（shRNA-SOCS1-138）与空白组相比，共筛选到差异表达蛋白52个，其中上调蛋白26个，下调蛋白26个。GO富集发现，差异蛋白主要富集在病毒防御响应、EB病毒遗传缺陷反应后的免疫缺陷和对其他生物的免疫反应几个方面。KEGG通路富集发现，差异蛋白主要富集在坏死性凋亡、丙型肝炎和全身性红斑狼疮信号通路。干扰SOCS1后，乳腺上皮细胞450 nm的OD值在12、24、48 h和72 h的细胞量显著或极显著高于空白组；G1期和G2期细胞占比均极显著高于空白组，S期细胞百分比极显著低于空白组；干扰组与空白组之间细胞凋亡率差异达到显著水平。综合研究结果揭示，SOCS1基因沉默可促进细胞增殖和降低细胞的凋亡，引起G1/S期阻滞，并受多个信号通路的调控作用。

关键词： SOCS1 猪乳腺上皮细胞蛋白组学细胞增殖细胞凋亡

柯乐猪KRT10基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

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中国畜牧兽医 2024年第6期51卷 2508-2516页

作者：赵永杨齐心李维熊力杨红文王春源吴燕向进张依裕贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州大学香猪研究所贵阳550025 贵州省畜禽遗传资源管理站贵阳550001 贵州省动物疫病预防控制中心贵阳550001

【目的】研究角蛋白10(keratin 10,KRT10)基因多态性对柯乐猪繁殖性状的影响,以提高柯乐猪的繁殖力。【方法】以255头柯乐猪为研究对象,采用PCR产物测序、DANMAN序列比对软件及人工校对相结合的方法鉴定KRT10基因单核苷酸多态性(single ... 详细信息

【目的】研究角蛋白10(keratin 10,KRT10)基因多态性对柯乐猪繁殖性状的影响,以提高柯乐猪的繁殖力。【方法】以255头柯乐猪为研究对象,采用PCR产物测序、DANMAN序列比对软件及人工校对相结合的方法鉴定KRT10基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点,利用SHEsis在线软件分析SNP位点的群体遗传特性,通过RNAfold在线工具对SNP位点进行生物信息学分析,使用SPSS 22.0软件中的一般线性模型分析KRT10基因SNP位点与柯乐猪繁殖性状的关联性。【结果】在柯乐猪KRT10基因中共鉴定到3个SNPs位点:第4内含子的g.21643703 C>T和g.21643714 G>A;第5外显子的g.21643741 G>A。g.21643741 G>A突变导致密码子由AAG突变为AAA,编码氨基酸均为赖氨酸(K),为同义突变,引起编码的mRNA二级结构发生改变。3个SNPs位点均检测到3种基因型,g.21643703 C>T和g.21643741 G>A属于中度多态位点(0.25A)属于低度多态位点(PICT和g.21643741 G>A位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),g.21643714 G>A位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(PT位点对柯乐猪初生窝重、断奶仔数和断奶窝重的影响均达到显著水平(PA位点对柯乐猪总产仔数和断奶窝重的影响均达到显著水平(PA位点对柯乐猪总产仔数、产活仔数、断奶仔数和断奶窝重的影响均达到显著水平(P<0.05)。双倍型H3H3对柯乐猪总产仔数、产活仔数、断奶仔数和断奶窝重的影响最明显。【结论】KRT10基因中存在的3个SNPs位点对柯乐猪繁殖性状有显著影响,其中H3H3为有利双倍型,可作为柯乐猪繁殖性状选择的遗传标记。

关键词：柯乐猪 KRT10基因单核苷酸多态性(SNP) 繁殖性状

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柯乐猪异常乳腺组织的TMT蛋白组学分析

福建农林大学学报（自然科学版） 2024年第1期53卷 69-78页

作者：王春源熊力杨红文郭小江张依裕谭元成杨酸贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省农业农村厅贵州贵阳550001

【目的】基于串联体量标记(TMT)定量蛋白组学技术探讨柯乐猪母猪乳腺发育的调控机制,为选育工作提供依据。【方法】选取乳腺发育正常和异常的柯乐猪母猪各3头,采集乳腺组织,利用TMT定量蛋白组学技术探究正常和异常乳腺组织的差异表达蛋... 详细信息

【目的】基于串联体量标记(TMT)定量蛋白组学技术探讨柯乐猪母猪乳腺发育的调控机制,为选育工作提供依据。【方法】选取乳腺发育正常和异常的柯乐猪母猪各3头,采集乳腺组织,利用TMT定量蛋白组学技术探究正常和异常乳腺组织的差异表达蛋白,筛选与乳腺发育相关的差异关键蛋白,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。【结果】从柯乐猪乳腺组织中共筛选出474个差异表达蛋白,包括245个上调蛋白、229个下调蛋白;基因本体(GO)功能注释和富集分析显示,差异表达蛋白主要富集在上皮细胞分化、皮肤形成和肾小管上皮细胞分化等生物学过程中,主要分布在胞外区和细胞外空隙中,参与调节肽酶抑制剂活性和肽链内切酶活性;京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析显示,差异表达蛋白主要富集在补体系统、过氧化物酶体增殖物激活受体和金黄色葡萄球菌感染等信号通路上;结合差异表达蛋白互作网络分析,筛选出10个核心差异表达蛋白[上调蛋白有P14287(骨桥蛋白)、F1RXF9(角蛋白25)、I3LDS3(角蛋白10)、Q75QW1(上皮细胞黏附分子)、A0A5S8KLN1(丛生蛋白)、F1RW75(桥粒素),下调蛋白有A0A286ZT13(白蛋白)、P06867(血纤维蛋白溶酶原)、F1SCC9(含丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域的蛋白)、P50447(α-1-抗胰蛋白酶)]。【结论】采用TMT定量蛋白组学技术能有效筛选出母猪正常和异常乳腺组织中的差异表达蛋白。

关键词：柯乐猪串联体量标记(TMT)技术乳腺组织差异表达蛋白

柯乐猪PAEP基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

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中国畜牧兽医 2024年第4期51卷 1593-1602页

作者：赵永郭小江李维熊力杨红文王春源吴燕向进张依裕贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州大学香猪研究所贵阳550025 贵州省畜禽遗传资源管理站贵阳550001 贵州省草地技术试验推广站贵阳550001 贵州省动物疫病预防控制中心贵阳550001

【目的】研究孕激素相关子宫内膜蛋白(progestogen associated endometrial protein,PAEP)基因多态性对柯乐猪繁殖性状的影响,以挖掘柯乐猪的高繁殖力基因,用于提升柯乐猪的繁殖力。【方法】以189头经产柯乐猪为试验动物,采用PCR产物测... 详细信息

【目的】研究孕激素相关子宫内膜蛋白(progestogen associated endometrial protein,PAEP)基因多态性对柯乐猪繁殖性状的影响,以挖掘柯乐猪的高繁殖力基因,用于提升柯乐猪的繁殖力。【方法】以189头经产柯乐猪为试验动物,采用PCR产物测序和序列比对鉴定单核苷酸多态性(SNP)位点,利用SHEsis在线软件分析SNP位点的群体遗传特性,通过RNAfold、SOPMA、SWISS-MODEL和SWISS-PdbViewer程序对SNP位点进行生物信息学分析,利用SPSS 22.0软件分析PAEP基因SNP位点与柯乐猪繁殖性状的相关性。【结果】在柯乐猪PAEP基因中共鉴定到3个SNPs位点:外显子4的g.1884992 T>C位点,为错义突变,导致第135位缬氨酸(V)变成丙氨酸(A);内含子4的g.1885152 G>C和g.1887834 G>A位点。3个突变位点均检测到3种基因型;g.1884992 T>C位点属于低度多态(PICC、g.1887834 G>A位点属于中度多态(0.25C位点产生的基因型分布未偏离Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);g.1885152 G>C和g.1887834 G>A位点产生的基因型分布均极显著偏离Hardy-Weinberg平衡(PC和g.1887834 G>A位点完全连锁,共产生3种单倍型和6种双倍型。g.1884992 T>C位点引起PAEP基因mRNA及蛋白的二级结构发生改变。关联分析结果表明,g.1884992 T>C位点对柯乐猪总产仔数和产活仔数的影响均达到显著水平(PC、g.1887834 G>A位点对柯乐猪总产仔数、产活仔数、断奶仔数和断奶窝重的影响均达到显著水平(P<0.05);双倍型H3H3个体总产仔数、产活仔数、断奶仔数和断奶窝重均显著高于其他5种双倍型(P<0.05),初生窝重显著高于双倍型H1H1、H2H2和H2H3(P<0.05);双倍型H1H3个体的总产仔数和断奶仔数显著高于双倍型H1H1、H1H2、H2H2和H2H3(P<0.05),产活仔数显著高于双倍型H2H3(P<0.05)。【结论】PAEP基因中存在的3个SNPs对柯乐猪繁殖性状有显著影响,其中H3H3为有利双倍型,可作为柯乐猪繁殖性状选择的遗传标记。

关键词：柯乐猪 PAEP基因单核苷酸多态性繁殖性状

柯乐猪MMP2基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

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中国畜牧兽医 2024年第3期51卷 1142-1150页

作者：向进杨齐心罗华伦洪亚婷郭小江杨红文李维王春源吴燕张依裕贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室贵州大学香猪研究所贵阳550025 贵州省畜禽遗传资源管理站贵阳550001 贵州省草地技术试验推广站贵阳550001 黔西南州农业农村局兴义562400

【目的】探究基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)及其与繁殖性状的相关性,筛选与柯乐猪繁殖性状相关的遗传标记。【方法】试验选择212头健康的经产柯乐母猪,采... 详细信息

【目的】探究基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)及其与繁殖性状的相关性,筛选与柯乐猪繁殖性状相关的遗传标记。【方法】试验选择212头健康的经产柯乐母猪,采用直接测序法筛选柯乐猪MMP2基因SNP位点,利用RNAfold在线软件预测MMP2基因不同单倍型mRNA二级结构,并通过SPSS 22.0软件分析MMP2基因SNP位点与柯乐猪繁殖性状的相关性。【结果】在柯乐猪MMP2基因第2外显子中检测到1个SNP位点(g.30062403 C>T),在第4外显子中检测到2个SNPs位点(g.30065309 C>T和g.30065312 C>T),均存在3种基因型(CC、CT和CT)。遗传特性分析结果显示,g.30062403 C>T位点为低度多态,g.30065309 C>T和g.30065312 C>T位点属于中度多态。卡方适合性检验结果显示,g.30062403 C>T位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡(P0.05)。连锁不平衡分析结果显示,g.30065309 C>T和g.30065312 C>T位点之间存在强连锁不平衡。单倍型mRNA二级结构分析显示,单倍型H1的mRNA二级结构与原序列相同,其他3种单倍型均导致mRNA二级结构和最小自由能发生变化。关联分析结果显示,g.30062403 C>T位点TT基因型个体的窝产活仔数显著高于CC基因型,断奶窝重显著高于CT基因型(PT位点CC基因型个体的断奶仔数显著高于TT基因型(PT位点TT基因型个体的窝产活仔数、断奶仔数均显著高于CT基因型(P<0.05)。双倍型H2H2为窝产仔数、窝产活仔数、断奶仔数、断奶窝重的优势双倍型,H1H4为初生窝重的优势双倍型。【结论】柯乐猪MMP2基因3个SNPs位点与其窝产仔数、窝产活仔数、初生窝重、断奶仔数及断奶窝重均存在显著关联性,可作为分子育种遗传标记。

关键词：柯乐猪 MMP2基因多态性繁殖性状关联分析

柯乐猪CRISP 3基因SNP鉴定及其对繁殖性状的影响

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浙江农业学报 2024年第6期36卷 1270-1278页

作者：向进王春源吴燕谭元成杨酸张依裕贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室香猪研究所贵州贵阳550025

为分析富半胱氨酸的分泌蛋白3(cysteine rich secretory protein 3,CRISP3)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点对柯乐猪繁殖性状的影响,采用Sanger测序法检测250头健康经产柯乐猪母猪CRISP 3基因的SNP突变位点,利用SPSS 22.0软件分析SNP位点与柯乐猪产活仔猪数、初生窝重、初生均重、断奶窝重、断奶仔猪数和断奶均重6个指标的关联性。结果显示,在柯乐猪CRISP 3基因第4内含子共发现3个SNP突变位点,即g.43796318T>C、g.43796424T>A和g.43796425G>T,均存在3种基因型。g.43796318T>C和g.43796424T>A位点的优势基因型为TT,优势等位基因为T;g.43796425G>T位点的优势基因型为GG,优势等位基因为G。χ^(2)检验显示,g.43796318T>C位点基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);g.43796424T>A和g.43796425G>T位点基因型分布均极显著(PA与g.43796425G>T之间存在强连锁不平衡。关联分析显示,g.43796318T>C位点TT和CC基因型个体的初生窝重和初生均重均显著(PA位点TA基因型个体的产活仔猪数、初生窝重和断奶仔猪数均显著(PT位点GT基因型个体的产活仔猪数、初生窝重和断奶仔猪数均显著(P<0.05)高于GG和TT基因型。双倍型关联分析显示,双倍型H2H4(CCTAGT)个体的产活仔猪数、初生窝重、断奶仔猪数和断奶窝重显著(P<0.05)高于H1H2(TCTAGT)个体和H2H2(CCAATT)个体;双倍型H2H2(CCAATT)个体的初生均重显著(P<0.05)高于除H4H4(CCTTGG)个体外的其他个体,且其断奶均重显著(P<0.05)高于其他双倍型个体。CRISP 3基因第4内含子上的3个突变位点与柯乐猪的6个繁殖性状均存在显著关联,可作为柯乐猪繁殖性状选择的候选分子标记。

关键词：柯乐猪 CRISP 3基因单核苷酸多态性繁殖性状

宫内发育迟缓猪胎盘SLC7A2基因过表达对滋养层细胞增殖和迁移的影响

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南方农业学报 2024年

作者：胡光玲伍治敏张才在杨振清张依裕敖政贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室

【目的】探究溶质载体家族7成员2(SCL7A2)在正常初生重(NBW)和宫内发育迟缓(IUGR)仔猪胎盘中的表达水平差异及其对猪滋养层细胞(PTr2)增殖和迁移的影响，为挖掘猪IUGR的发生发展机制提供参考依据。【方法】通过实时荧光定量PCR检测NBW和... 详细信息

【目的】探究溶质载体家族7成员2(SCL7A2)在正常初生重(NBW)和宫内发育迟缓(IUGR)仔猪胎盘中的表达水平差异及其对猪滋养层细胞(PTr2)增殖和迁移的影响，为挖掘猪IUGR的发生发展机制提供参考依据。【方法】通过实时荧光定量PCR检测NBW和IUGR胎盘中SLC7A2 基因表达水平；采用免疫组织化学方法分析NBW和IUGR胎盘组织中SLC7A2蛋白的定位分布和表达水平；将Vector-SLC7A2和Vector-NC转染进PTr2细胞中，构建SLC7A2基因过表达载体；利用CCK8法检测过表达SLC7A2对PTr2细胞增殖能力的影响；利用细胞划痕法检测SLC7A2过表达对PTr2细胞迁移能力的影响。【结果】荧光定量PCR结果显示，IUGR仔猪胎盘中SLC7A2的转录水平显著高于NBW胎盘(P发展。

关键词：猪 SLC7A2基因胎盘宫内发育迟缓营养转运