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青海柯柯盐湖16株细菌的ARDRA筛选及系统发育初步分析

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云南大学学报（自然科学版） 2003年第6期25卷 541-544页

作者：柴丽红王涛崔晓龙彭谦徐丽华姜成林云南大学云南省微生物研究所教育部微生物资源开放重点实验室

从青海柯柯盐湖泥样中分离的16株细菌,用2种限制性内切酶酶切进行ARDRA分析,其中12株菌的酶切带谱有较大差异.根据这12株菌的16SrDNA序列进行系统发育分析结果表明,12株菌有11株分布于芽孢杆菌科中的Halobacillus,Gracibacillus,Amphiba... 详细信息

从青海柯柯盐湖泥样中分离的16株细菌,用2种限制性内切酶酶切进行ARDRA分析,其中12株菌的酶切带谱有较大差异.根据这12株菌的16SrDNA序列进行系统发育分析结果表明,12株菌有11株分布于芽孢杆菌科中的Halobacillus,Gracibacillus,Amphibacillus,Virgibacillus,Bacillus,Salibacillus和1个潜在的新属中,另1株属于Proteobacteria的Gamma亚群Halomonadaceae科,Halomonas属.而且16SrDNA系统发育分析提示这些菌株中存在3个新种和1个新属的可能.本研究得出的结论为:应用ARDRA来初步筛选菌株是可行的;青海柯柯盐湖这一极端环境中存在较丰富的新的芽孢菌种类.

关键词：青海柯柯盐湖 ARDRA 细菌系统发育分析芽孢菌

青海柯柯盐湖、茶卡盐湖细菌富集培养后DGGE带谱比较

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云南大学学报（自然科学版） 2003年第S1期25卷 18-21页

作者：柴丽红王涛李沁元崔晓龙彭谦徐丽华姜成林云南大学云南省微生物研究所教育部微生物资源开放重点实验室云南昆明650091

分别将采自青海柯柯盐湖和茶卡盐湖的土样、泥样富集培养后,提取DNA,用细菌通用引物扩增得到含16SrDNA的V9高变区的DNA片断,进行DGGE(变性梯度凝胶电泳)分析.结果表明这2个相邻的盐湖中细菌多样性差异较大,同一盐湖中土样和泥样的细菌... 详细信息

分别将采自青海柯柯盐湖和茶卡盐湖的土样、泥样富集培养后,提取DNA,用细菌通用引物扩增得到含16SrDNA的V9高变区的DNA片断,进行DGGE(变性梯度凝胶电泳)分析.结果表明这2个相邻的盐湖中细菌多样性差异较大,同一盐湖中土样和泥样的细菌多样性也有较大的差异而且泥样中的多样性较土样的稍丰富些.

关键词：变性梯度凝胶电泳(DGGE) 柯柯盐湖茶卡盐湖细菌多样性

叶下珠有效部位的溶栓作用及其对PAI-1和tPA活性的影响

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天然产物研究与开发 2003年第5期15卷 441-445页

作者：沈志强陈蓬沈建群董泽军刘吉开云南省天然药物药理重点实验室昆明医学院昆明650031 昆明圣火制药有限责任公司昆明650217 安徽省青阳县杨田医院青阳242800 中国科学院昆明植物研究所昆明650204

采用改良的Charlton和Tomihisa等方法评价叶下珠植物(Phyllanthus urinaria)含corilagin的水溶性有效部位(代号PUW)对电刺激大鼠颈动脉血栓的溶栓作用;应用发色底物方法测定PUW在体内外对血浆tPA、血浆或血小板释放的PAI-1活性的影响。... 详细信息

采用改良的Charlton和Tomihisa等方法评价叶下珠植物(Phyllanthus urinaria)含corilagin的水溶性有效部位(代号PUW)对电刺激大鼠颈动脉血栓的溶栓作用;应用发色底物方法测定PUW在体内外对血浆tPA、血浆或血小板释放的PAI-1活性的影响。结果显示,5 mg/kg的PUW,其再通率为50％,再栓率为60％;10 mg/kg PUW的血管再通率为60％,其再栓率为33.3％,低于2万U/kg尿激酶42.9％的再栓率。再通后1 h内,血管开放状态表现为,2万U/kg尿激酶组的血管开放状态与5mg/kg PUW组的相似;10mg/kg PUW组,其持续再通率高于2万U/kg的尿激酶组。PUW在体外或静脉注射均明显降低血浆PAI-1活性,同时提高血浆tPA的活性;PUW静注还明显抑制血小板释放的PAI-1活性。本实验结果提示,PUW静脉注射显著提高闭塞颈动脉的再通率,同时降低再通后颈动脉的再栓率;抑制。PAI-1活性,同时提高tPA的活性可能是PUW具有较好溶栓作用的分子机制。

关键词：大戟科叶下珠有效部位血栓溶栓作用组织型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制物

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1株嗜碱放线菌的生理学特性研究及其鉴定

云南大学学报（自然科学版） 2003年第6期25卷 549-552页

作者：张永光唐蜀昆李文均徐丽华姜成林云南大学云南省微生物研究所教育部微生物资源开放研究重点实验室云南昆明650091

对从青海茶卡盐湖岸土样中分离到的1株生理较特殊的嗜碱放线菌YIM80305的生长pH范围,不同碱性物质KOH,K2CO3,NaOH,Na2CO3对其生长的影响,耐NaCl,KCl特性进行了研究.同时从形态,细胞壁类型,16SrDNA等方面进行了鉴定.结果发现YIM80305对Na... 详细信息

对从青海茶卡盐湖岸土样中分离到的1株生理较特殊的嗜碱放线菌YIM80305的生长pH范围,不同碱性物质KOH,K2CO3,NaOH,Na2CO3对其生长的影响,耐NaCl,KCl特性进行了研究.同时从形态,细胞壁类型,16SrDNA等方面进行了鉴定.结果发现YIM80305对Na+碱性物质有一定依赖性,对K+敏感,YIM80305可能是Streptomyces属的1个新种.

关键词：嗜碱放线菌生理学特性钠离子依赖性碱性物质 16SrDNA 放线菌

从腾冲热海免培养获得的5个16 S rDNA克隆分析

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云南大学学报（自然科学版） 2003年第1期25卷 73-76页

作者：王涛柴丽红崔晓龙徐丽华彭谦姜成林云南大学云南省微生物研究所教育部微生物资源开放研究重点实验室云南昆明650091

用免培养法(culture-independentapproach)从腾冲大滚锅高温热泉中获得的16SrDNA,经克隆筛选,测定了其中5个克隆的16SrDNA插入片段的近全序列.构建的系统发育树分析结果表明,5个克隆中有2个是Bacillus属,1个是Hydrogenobacter属,1个是Ps... 详细信息

用免培养法(culture-independentapproach)从腾冲大滚锅高温热泉中获得的16SrDNA,经克隆筛选,测定了其中5个克隆的16SrDNA插入片段的近全序列.构建的系统发育树分析结果表明,5个克隆中有2个是Bacillus属,1个是Hydrogenobacter属,1个是Pseudomonas属,还有1个在Thermodesulfobacteriaceae科,介于Geothermbacterium属和Thermodesulfobacteria属之间.

关键词：腾冲热海热泉免培养法 16S rDNA 基因克隆序列分析微生物种群生态学

产生芳香环聚酮类天然产物放线菌的分子筛选研究

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中国抗生素杂志 2005年第3期30卷 134-137页

作者：徐平李文均高慧英孙玉民张华徐丽华贺建功姜成林云南大学教育部微生物资源开放研究重点实验室华北制药集团新药研究开发有限责任公司石家庄050015

目的建立一套简便、快速、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台;认识PKS-II基因在不同环境放线菌群中的分布规律,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法通过对芳香环聚酮类化... 详细信息

目的建立一套简便、快速、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台;认识PKS-II基因在不同环境放线菌群中的分布规律,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法通过对芳香环聚酮类化合物生物合成途径所用的II型聚酮合酶氨基酸和核苷酸序列的同源性比较分析,设计一对简并引物且以微波炉法提取的基因组DNA为模板扩增KS/CLF功能域约0.8kb目的基因片段,依据放线菌基因组中II型PKS合酶基因的存在与否标定可能的芳香环聚酮类天然产物产生菌。结果利用建立的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系对99株嗜碱放线菌、100株链霉菌、47株嗜盐放线菌和776株一般放线菌进行了筛选,研究表明链霉菌、嗜碱放线菌、嗜盐放线菌和一般放线菌II型聚酮合酶基因的阳性率分别为54%、29.3%、25.5%和24.1%。结论组合放线菌基因组DNA快速提取技术和PKSII基因简并引物PCR扩增技术建立了快速、简便、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系并对不同环境条件的放线菌菌群的PKSII基因分布进行了研究。结果表明放线菌PKSII聚酮合酶分布具有广泛性;而且同时表明链霉菌是芳香环聚酮类化合物的最丰富来源;在极端环境放线菌中,嗜盐放线菌的PKSII基因在中度嗜盐放线菌分布的频率远高?

关键词：聚酮合酶芳香环聚酮类化合物聚合酶链反应极端环境分子筛选放线菌

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未培养微生物资源

微生物学通报 2005年第3期32卷 144-146页

作者：崔晓龙徐丽华文孟良李铭刚李一青李文均彭谦姜成林云南大学省微生物研究所教育部微生物资源重点实验室昆明650091

简要介绍未培养微生物的概念、多样性、研究的理论基础和方法,并就未培养微生物资源的存在形式、开发利用途径和应用前景进行了讨论。

关键词：未培养微生物资源多样性开发利用存在形式

1株具抑制一氧化氮合成酶活性放线菌菌株的分离和鉴定

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云南大学学报（自然科学版） 2004年第3期26卷 256-260页

作者：李文均姜怡王栋 Reiner M Kroppenstedt 徐丽华姜成林云南大学云南省微生物研究所教育部微生物资源开放研究重点实验室云南昆明650091 Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH

从云南河口采集的土壤中分离到1株稀有放线菌YIM30243T.该菌株具有很强的抑制一氧化氮(NO)合成酶活性.通过对其进行的包括形态、生理生化特性、细胞壁化学组分以及16SrDNA序列等方面的多相分类研究,确定其为诺卡氏菌属的1个新种,我们将... 详细信息

从云南河口采集的土壤中分离到1株稀有放线菌YIM30243T.该菌株具有很强的抑制一氧化氮(NO)合成酶活性.通过对其进行的包括形态、生理生化特性、细胞壁化学组分以及16SrDNA序列等方面的多相分类研究,确定其为诺卡氏菌属的1个新种,我们将其命名为白色诺卡氏菌(***.).该菌株在大多数培养基上生长良好,气生菌丝呈黄白色至粉红白色,基内菌丝黄白至黄褐色.气生菌丝、基内菌丝均呈不规则断裂.

关键词：一氧化氮合成酶诺卡氏菌稀有放线菌 16S rDNA NOS 药物

一株具抗菌活性放线菌菌株YIM31249~T的分离和鉴定

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云南大学学报（自然科学版） 2003年第S1期25卷 5-9页

作者：李勇李文均徐丽华姜成林教育部微生物资源开放研究重点实验室云南大学微生物研究所云南昆明650091

从云南洱源采集的土壤样品中分离到1株链霉菌YIM31249TT.该菌株具有很强的抗菌活性.通过对其进行的包括形态、生理生化特性、细胞壁化学组份以及16SrDNA序列等方面的研究,确定其为链霉菌属的一个亚种,我们将其命名为生黑孢链霉菌洱源亚... 详细信息

从云南洱源采集的土壤样品中分离到1株链霉菌YIM31249TT.该菌株具有很强的抗菌活性.通过对其进行的包括形态、生理生化特性、细胞壁化学组份以及16SrDNA序列等方面的研究,确定其为链霉菌属的一个亚种,我们将其命名为生黑孢链霉菌洱源亚种(Streptomycesmelanosporofacienssubsperyuanensis).菌株YIM31249T气生菌丝和基内菌丝均很丰富,孢子链较长且为螺旋状,部分孢子链螺旋成假孢囊,孢子表面粗糙不带刺,基丝不断裂.

关键词：生黑孢链霉菌 16SrDNA 多相分类