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大豆抗氧化肽的制备及对大蒜根尖过氧化的保护作用

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邵阳学院学报（自然科学版） 2024年第1期21卷 66-74页

作者：邹文广尹乐斌贺超刘聪龙盼李敏娟邵阳学院食品与化学工程学院湖南邵阳422000 豆制品加工与安全控制湖南省重点实验室湖南邵阳422000

为探究不同蛋白酶酶解大豆分离蛋白(soybean isolate protein,SPI)对多肽得率及体外抗氧化活性的影响,采用6种蛋白酶(碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶)进行筛选,测定酶解产物多肽得率、光谱特性及... 详细信息

为探究不同蛋白酶酶解大豆分离蛋白(soybean isolate protein,SPI)对多肽得率及体外抗氧化活性的影响,采用6种蛋白酶(碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶)进行筛选,测定酶解产物多肽得率、光谱特性及体外抗氧化能力,分析其对过氧化氢诱导的大蒜根尖氧化损伤的保护作用。结果表明,碱性蛋白酶酶解条件下,多肽得率最高为67.78%;多肽在200~230 nm处有最大吸收峰;6种多肽在酰胺A、B、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ带均有吸收峰;所有多肽均具有较好地清除自由基能力,且随着多肽浓度的增加而增加。综合其抗氧化活性评价,碱性蛋白酶制备的多肽清除能力均优于其他蛋白酶;经多肽处理后大蒜根尖细胞凋亡程度下降45.90%。

关键词：蛋白酶酶解多肽体外抗氧化活性细胞凋亡

功能性产业政策能否促进企业生产率增长——基于《中国制造2025》的准自然实验

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南开经济研究 2024年第2期 43-63页

作者：戴魁早陈阿丽杨新宇湖南科技大学商学院、湖南省战略性新兴产业研究基地、湖南省新型工业化研究基地 411201 湖南科技大学商学院 411201

本文在政府与市场关系分析框架下,理论分析制造强国战略这一功能性产业政策对企业全要素生产率的影响机制,并以《中国制造2025》为准自然实验,结合2010—2019年沪深A股上市公司数据,运用双重差分法对理论预期进行验证。研究发现,制造强... 详细信息

本文在政府与市场关系分析框架下,理论分析制造强国战略这一功能性产业政策对企业全要素生产率的影响机制,并以《中国制造2025》为准自然实验,结合2010—2019年沪深A股上市公司数据,运用双重差分法对理论预期进行验证。研究发现,制造强国战略这一功能性产业政策显著地促进了制造业企业全要素生产率增长,这一结论在安慰剂检验、PSM-DID、工具变量法等一系列稳健性检验后仍然成立。制造强国战略的这种影响是通过协同创新、关键核心技术突破等技术创新机制,以及专业技术人才、经营管理人才等人才支撑机制实现的。政府治理效能提升显著增强了制造强国战略的实施效果,而且这种影响对于政府效率和营商环境排名前50的城市更显著。政府治理效能提升强化了制造强国战略的协同创新、关键核心技术突破、专业技术人才支撑和经营管理人才支撑等机制,但未明显改善创新溢出机制和技能人才支撑机制。此外,异质性分析表明,制造强国战略对试点地区、配套政策完善地区、融资约束程度较低、智能化水平较高、技术差距较大行业的企业生产率提升效果更为显著。本文的研究验证了制造强国战略在制造业生产率增长方面的重要作用,为功能性产业政策实施与制造业高质量发展提供了有益的参考依据。

关键词：产业政策中国制造2025 政府治理效能高质量发展

直推督脉对孤独症谱系障碍模型鼠PVN区催产素神经元及认知功能的影响

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湖南中医药大学学报 2024年第6期44卷 1034-1041页

作者：智慧冯祥张宇星李武艾坤黄文韬李江山湖南中医药大学针灸推拿与康复学院湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005

目的观察直推督脉对孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)模型鼠室旁核(paraventricular nucleus,PVN)区催产素(oxytocin,OXT)神经元活性及认知功能的影响,探讨直推督脉对ASD的作用及潜在机制。方法采用腹腔注射丙戊酸钠的方... 详细信息

目的观察直推督脉对孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)模型鼠室旁核(paraventricular nucleus,PVN)区催产素(oxytocin,OXT)神经元活性及认知功能的影响,探讨直推督脉对ASD的作用及潜在机制。方法采用腹腔注射丙戊酸钠的方法构建ASD模型。随机取7只孕12.5 d的SD大鼠腹腔注射丙戊酸钠,3只腹腔注射生理盐水。孕鼠产仔后第21天,剔除雌性幼鼠,将剩余雄性幼鼠分为空白组、模型组、直推督脉组、药物注射组,每组5只。空白组、模型组给予腹腔注射同等剂量生理盐水;直推督脉组予以直推督脉的干预方式,20 min/次,一日2次,并予以腹腔注射同等剂量生理盐水;药物注射组以每日0.1 mg/kg的剂量腹腔注射OXT,以上干预均连续14 d。第35天进行高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验以判断其焦虑情绪和认知能力;通过免疫荧光染色法标记PVN区OXT与c-Fos蛋白、海马区OXT与催产素受体(oxytocin receptor,OXTR);Western blot法检测海马区OXTR蛋白表达水平;ELISA法检测幼鼠海马区与下丘脑中的OXT含量。结果与空白组相比,模型组开放臂活动时间缩短、开放臂进入次数减少(P<0.01);逃避潜伏期增加、平台所在区域活动路程减少(P<0.05,P<0.01);PVN区OXT神经元与c-Fos阳性表达、海马区OXT与OXTR结合的阳性表达、海马区OXTR蛋白表达均减少(P<0.01);下丘脑与海马区OXT含量下降(P<0.01)。与模型组相比,直推督脉组、药物注射组的开放臂活动时间增长、开放臂进入次数增加(P<0.05,P<0.01);逃避潜伏期缩短、平台所在区域活动路程增加(P<0.05,P<0.01);PVN区OXT神经元与c-Fos阳性表达、海马区OXT与OXTR结合的阳性表达、海马区OXTR的蛋白表达水平均增加(P<0.01);下丘脑、海马区OXT含量上升(P<0.01)。结论直推督脉可以改善ASD模型鼠的认知功能,其机制可能与PVN区OXT神经元被激活,OXT水平升高,从而增加其与海马区OXTR结合相关。

关键词：孤独症谱系障碍推拿督脉认知功能催产素神经元

女贞叶中一条糖基转移酶的基因克隆、生物信息学分析及原核表达

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化学与生物工程 2024年第4期41卷 31-39页

作者：周洛兵申甲一曾碧容袁希伟谭朝阳蒋情徐德宏湖南中医药大学药学院生物工程实验室湖南长沙410208 邵阳市中心医院药学部湖南邵阳422000

女贞叶化学成分复杂,糖苷类物质是其发挥药理活性的关键成分,糖苷的形成离不开糖基转移酶。利用cDNA末端快速扩增技术,对女贞叶中一条糖基转移酶编码基因LlUGT3进行了克隆;根据基因和蛋白质序列进行了生物信息学分析;通过基因工程技术使... 详细信息

女贞叶化学成分复杂,糖苷类物质是其发挥药理活性的关键成分,糖苷的形成离不开糖基转移酶。利用cDNA末端快速扩增技术,对女贞叶中一条糖基转移酶编码基因LlUGT3进行了克隆;根据基因和蛋白质序列进行了生物信息学分析;通过基因工程技术使LlUGT3基因在大肠杆菌体内进行了异源表达。结果表明,LlUGT3基因cDNA全长1684 bp,由85 bp 5′-UTR、159 bp 3′-UTR、1440 bp ORF组成,其中ORF编码一条含479个氨基酸残基的酶蛋白,其相对分子质量、理论等电点和亲水性平均系数分别为54.8 kDa、5.86和-0.381;在LlUGT3酶蛋白一级结构中含有一段糖基转移酶高度保守的PSPG盒,但不含信号肽且无跨膜片段,在二级结构中含有α螺旋(42.59%)、β折叠(12.73%)和无规卷曲(44.68%),在三级结构中由肽链折叠形成α/β/α类Rossmann折叠区域,并且两者之间夹着一个底物结合腔;同源建模结果显示,LlUGT3酶蛋白与模板分子PaGT3序列相似度很高,而且系统发育树分析也表明两者亲缘关系最近;分子对接分析表明,LlUGT3酶蛋白的His17-Asp116对发挥催化功能,PSPG盒主要涉及结合UDPG,而LIUGT酶与辣椒素的结合方式与PaGT3相似;通过基因工程技术,实现了LlUGT3基因在大肠杆菌体内的异源表达。该研究为进一步深入研究LlUGT3酶蛋白的结构与功能奠定了基础。

关键词：糖基转移酶女贞叶基因克隆生物信息学分析原核表达

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基于网络药理学研究金龙补肾合剂防治代谢综合征的作用机制

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国际中医中药杂志 2024年第8期46卷 1023-1031页

作者：谢婧语吴彬才朱建平王凯丽许勇张磊湖南中医药大学中医学院长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院王行宽全国名中医传承工作室长沙410000 黑龙江中医药大学研究生院哈尔滨150000 湖南省中西医结合医院心血管内科长沙410000 湖南省湘中制药有限公司邵阳422000

目的结合网络药理学和实验验证探讨金龙补肾合剂防治高糖高脂饮食诱导代谢综合征大鼠脂质代谢紊乱的作用及机制。方法检索TCMSP和相关文献获得金龙补肾合剂中枸杞子、金樱子、龙眼肉、大枣、绞股蓝、罗汉果、母丁香药物的活性成分和作... 详细信息

目的结合网络药理学和实验验证探讨金龙补肾合剂防治高糖高脂饮食诱导代谢综合征大鼠脂质代谢紊乱的作用及机制。方法检索TCMSP和相关文献获得金龙补肾合剂中枸杞子、金樱子、龙眼肉、大枣、绞股蓝、罗汉果、母丁香药物的活性成分和作用靶点,检索GeneCards在线数据库获得代谢综合征相关靶点,利用Venny 2.1.0获得金龙补肾合剂和代谢综合征的交集靶点,采用STRING在线数据库构建交集靶点PPI网络。使用Cytoscape 3.9.0中Cyto NCA插件筛选度值前50位的核心靶点。利用DAVID Bioinformatics Resources 6.8在线分析平台进行GO功能富集与KEGG通路富集分析。采用高糖高盐高脂饲料喂养20周建立代谢综合征大鼠模型。将造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组、阳性对照组和金龙补肾合剂组,另设空白对照组,每组8只。金龙补肾合剂组灌胃金龙补肾合剂1.8 ml/kg,阳性对照组灌胃二甲双胍溶液90 mg/kg,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续干预4周。观察大鼠体重、腹围及空腹血糖变化,检测大鼠血脂水平,采用HE染色观察肝组织病理变化,采用ELISA法测定肝组织中三磷酸腺苷(ATP)、IL-1β、IL-6水平,采用qRT-PCR检测肝组织肝激酶B1(LKB1)、AMPK、Akt1、肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)、下调乳酸脱氢酶A(LDH-A)mRNA水平,采用Western blot测定肝组织p-LKB1、LKB1、p-AMPK、AMPK、p-Akt1、Akt1蛋白表达。结果获得金龙补肾合剂主要活性成分141个,841个作用靶点,代谢综合征靶点18763个,得到药物和疾病交集靶点820个。KEGG通路富集分析得到173条通路,主要涉及PI3K-Akt、HIF-1信号通路等。实验结果显示,金龙补肾合剂组大鼠体重、空腹血糖及血脂水平降低,大鼠肝脏糖脂质代谢紊乱改善;血清ATP水平升高(P<0.05),IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05);肝组织LKB1、AMPK、Akt1、CPT1A mRNA水平升高(P<0.05),LDH-A mRNA水平降低(P<0.05),p-LKB1/LKB1、p-AMPK/AMPK及p-Akt1/Akt1比值升高(P<0.05)。结论金龙补肾合剂可通过多靶点、多通路改善代谢综合征脂质代谢紊乱,其机制可能通过调节LKB1/AMPK/Akt信号通路发挥作用。

关键词：代谢综合征金龙补肾合剂脂质代谢能量网络药理学

碳排放权交易制度对减污降碳协同治理的影响研究

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湖南工业大学学报 2024年第2期38卷 65-74页

作者：刘亦文邓楠湖南工商大学资源环境学院湖南长沙410205 湖南工商大学经济与贸易学院湖南长沙410205

实现减污降碳协同增效是我国实现双碳目标的前提,碳市场的建立则是实现双碳目标的重要手段,因此,研究碳市场对减污降碳的影响极具现实意义。故以碳排放权交易制度作为一项准自然实验,基于2005—2021年中国30个省市自治区的面板数据,运... 详细信息

实现减污降碳协同增效是我国实现双碳目标的前提,碳市场的建立则是实现双碳目标的重要手段,因此,研究碳市场对减污降碳的影响极具现实意义。故以碳排放权交易制度作为一项准自然实验,基于2005—2021年中国30个省市自治区的面板数据,运用双重差分法考察碳排放权交易制度实施对减污降碳协同治理的影响效果。结果表明,碳排放权交易制度实施能有效促进减污降碳协同治理;该促进作用主要通过降低能源消费规模、提高绿色技术创新水平和优化产业结构实现;在行政干预力度和市场化程度越高的地区,该政策对减污降碳协同治理促进作用越强。基于此,建议结合实际需要,完善全国碳排放交易市场建设,加大科技研发投入和治污投入,正确处理政府和碳市场的关系,最大化政府干预在碳市场机制中的作用。

关键词：碳排放权交易制度减污降碳协同治理双重差分法

基于降阶龙伯格观测器的PMSM模型预测控制

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电气传动自动化 2024年第3期46卷 1-5页

作者：董小斌林立周建华窦威龙吴悦王智琦邵阳学院多电源地区电网运行与控制湖南省重点实验室湖南邵阳422000 邵阳学院电气工程学院湖南邵阳422000 邵阳学院信息科学与工程学院湖南邵阳422000

针对永磁同步电机常规模型预测控制在建立预测模型时比较依赖准确的电机数学模型,负载扰动时会对其控制性能造成影响。提出一种基于降阶龙伯格观测器的模型预测控制方法,在电流环采用PI控制器,速度环采用基于负载扰动补偿的模型预测控制... 详细信息

针对永磁同步电机常规模型预测控制在建立预测模型时比较依赖准确的电机数学模型,负载扰动时会对其控制性能造成影响。提出一种基于降阶龙伯格观测器的模型预测控制方法,在电流环采用PI控制器,速度环采用基于负载扰动补偿的模型预测控制器,构建降阶龙伯格观测器对负载扰动进行估算,将估算值补偿到速度环的输出值中来起到抑制扰动的作用。由仿真及实验结果可知,所提算法相比于常规模型预测控制具有更快的动态响应,控制精度更高,有效提高了系统的抗负载干扰性能。

关键词：永磁同步电机模型预测控制降阶龙伯格观测器负载扰动

健脑解郁方对脑小血管病并发抑郁症模型大鼠不同脑区类淋巴系统功能的保护效应

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中药药理与临床 2024年第10期 2-10页

作者：向韵骆妍陈桑妮刘彤彤邱峰钟紫艳侯光菡孟盼湖南中医药大学科技创新中心长沙市四医院湖南中医药大学中西医结合学院

目的：探讨健脑解郁方改善脑小血管病并发抑郁症（cerebral small vessel disease related depression，CSVDD）大鼠前额叶皮质和海马类淋巴系统（glymphatic system，GS）功能障碍的潜在作用机制。方法：将6只WKY大鼠分为对照组，30只... 详细信息

目的：探讨健脑解郁方改善脑小血管病并发抑郁症（cerebral small vessel disease related depression，CSVDD）大鼠前额叶皮质和海马类淋巴系统（glymphatic system，GS）功能障碍的潜在作用机制。方法：将6只WKY大鼠分为对照组，30只SHR大鼠随机分为：模型对照组、阳性药对照组尼莫地平（21.6 mg/kg）＋丁苯酞（54 mg/kg）＋氟西汀（5.4 mg/kg））、健脑解郁方7.02、14.04、28.08 g/kg组，每组6只；大鼠背部sc D-半乳糖（400 mg/kg）连续8周联合双侧颈总动脉狭窄（bilateral common carotid artery stenosis，BCAS）4 周，再用慢性不可预见性温和应激（chronic unpredicted mild stress，CUMS）加孤笼饲养4周，建立CSVDD大鼠模型。采用Morris水迷宫实验评价大鼠认知记忆能力；激光散斑成像监测大鼠脑血流量；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血脑屏障（BBB）情况；苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织病理情况，小脑延髓池注射观测类淋巴系统流入功能；免疫荧光技术检测脑组织中留存的淀粉样前体蛋白（Amyloid Precursor Protein，APP）含量评估类淋巴系统流出功能；免疫荧光技术检测脑组织中水通道蛋白-4（aquaporin 4，AQP4）水平。结果：与正常对照组比较，模型对照组大鼠逃避潜伏期明显延长，目标象限游动时间显著缩短，目标象限潜伏期显著升高，大鼠脑血流量显著降低，脑脊液/血清白蛋白商值（CALB/SALB）显著升高，大鼠出现明显的血管周围间隙扩大（P＜0.01），第三脑室背侧出血及轻微脑出血，大鼠前额叶皮质及海马冠状面全脑荧光面积分数降低（P<0.05或P<0.01），大鼠前额叶皮质、海马CA1、CA2、CA3、DG中APP的荧光强度显著升高（P<0.01），大鼠前额叶皮质、海马CA1、CA2、CA3、DG中AQP4蛋白显著降低（P<0.01）；与模型对照组比较，健脑解郁方组大鼠逃避潜伏期和目标象限潜伏期均明显缩短（P＜0.05或P＜0.01），目标象限游动时间明显延长（P＜0.01），脑血流量显著升高（P＜0.01），CALB/SALB比值显著降低（P<0.01），脑区血管周围间隙扩大情况明显减少（P＜0.01），第三脑室背侧出血降低（P＜0.01），前额叶皮质和海马的全脑荧光面积分数显著升高（P＜0.01），APP荧光强度降低（P＜0.05或P＜0.01），AQP4含量显著升高（P＜0.01）。结论：健脑解郁方可能通过降低血脑屏障损伤和出血情况，促进脑血流量，加强脑区代谢物流入功能和脑内代谢废物的排除，以降低脑组织淋巴系统免疫炎症反应，改善 CSVDD 模型大鼠的认知功能和类淋巴系统功能障碍。

关键词：健脑解郁方脑小血管病并发抑郁症类淋巴系统血脑屏障

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异鼠李素通过调控P38 MAPK和AKT/MTOR通路改善大鼠类风湿关节炎

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中药药理与临床 2024年

作者：刘笑蓉李硕夫刘湘丹龙雨青周日宝湖南中医药大学药学院湖南中医药大学第一附属医院

目的：探讨异鼠李素对类风湿关节炎（RA）进展的影响及其机制。方法：采用牛II型胶原蛋白（CII）诱导胶原性关节炎（CIA）大鼠模型，采用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）作为 RA的细胞模型。以雷公藤多苷作为... 详细信息

目的：探讨异鼠李素对类风湿关节炎（RA）进展的影响及其机制。方法：采用牛II型胶原蛋白（CII）诱导胶原性关节炎（CIA）大鼠模型，采用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）作为 RA的细胞模型。以雷公藤多苷作为阳性对照药物，加入异鼠李素研究其作用及机制。根据关节红肿程度进行关节炎指数的评定;采用HE染色观察大鼠滑膜组织病理形态;细胞增殖毒性检测法（CCK-8）检测细胞活力;细胞体外迁移实验（Transwell）检测细胞迁移; ELISA法检测细胞上清液中炎症因子白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-10、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、巨噬细胞炎症蛋白-1α（MIP-1α）的含量;实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测基质金属蛋白酶2（Mmp2）、Mmp3、Mmp8、Mmp9、P38、蛋白激酶B（Akt）、雷帕霉素靶蛋白（Mtor）、P65的mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹（Western blot）检测P38、AKT、MTOR、P65的磷酸化水平。结果：动物实验显示，与正常对照组比较，模型对照组大鼠足关节出现明显的肿胀，关节炎指数显著升高（P生，滑膜组织中P38、AKT、MTOR和P65的磷酸化水平显著升高（P生症状明显改善，P38、AKT、MTOR和P65的磷酸化表达显著下调（P<0.01）。细胞实验显示，与正常对照组比较，模型对照组RA-FLS增殖活性和迁移能力显著增强（P<0.05或P<0.01），IL-1β、IL-6、MCP-1和MIP-1α的含量显著升高（P<0.01），IL-10含量显著降低（P<0.01），Mmp2、Mmp3、Mmp8和Mmp9的mRNA表达显著上调（P<0.01），P38、Akt、Mtor和P65的mRNA表达和P38、AKT、MTOR、P65的磷酸化表达显著上调（P<0.01）；与模型对照组比较，雷公藤多苷0.030 mg/mL组和异鼠李素0.094、0.188、0.375 mmol/L组RA-FLS的增殖活性和迁移能力显著降低（P<0.05或P<0.01），且雷公藤多苷0.030 mg/mL组和异鼠李素0.375 mmol/L组RA-FLS中IL-1β、IL-6、MCP-1和MIP-1α的含量显著降低（P<0.01），IL-10的含量显著升高（P<0.01），Mmp2、Mmp3、Mmp8和Mmp9表达显著下调（P<0.01），P38、Akt、Mtor和P65的mRNA表达和P38、AKT、MTOR、P65的磷酸化表达明显下调（P<0.05或P<0.01）。结论：异鼠李素能抑制RA-FLS增殖、迁移以及炎症因子等的变化，从而缓解CIA大鼠的RA症状，作用涉及P38有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）和AKT/MTOR信号通路的调节。

关键词：异鼠李素类风湿关节炎 P38丝裂原活化蛋白激酶蛋白激酶B-雷帕霉素靶蛋白增殖和迁移