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三七总皂苷通过激活Nrf2/GCLC信号通路抑制槟榔碱诱导的HaCaT细胞氧化应激而缓解口腔黏膜下纤维化

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 908-916页

作者：邹红祁硕邓芳萍张馨月符舒欣郭梦琪肖雨锋唐群湖南中医药大学医学院湖南长沙410208

目的:探讨三七总皂苷(PNS)在槟榔碱(ANE)诱导的口腔黏膜下纤维化中的抗纤维化作用,并分析PNS对核因子E2相关因子2(Nrf2)∕谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)信号通路的影响。方法:采用CCK-8法评估不同浓度的PNS和ANE对人永生化角质... 详细信息

目的:探讨三七总皂苷(PNS)在槟榔碱(ANE)诱导的口腔黏膜下纤维化中的抗纤维化作用,并分析PNS对核因子E2相关因子2(Nrf2)∕谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)信号通路的影响。方法:采用CCK-8法评估不同浓度的PNS和ANE对人永生化角质形成细胞系HaCaT活力的影响,根据CCK-8结果选择75 mg/L的ANE及25、50和100 mg/L的PNS作为后续实验浓度;细胞设为空白对照组、模型组和PNS低、中、高剂量(25、50和100 mg/L)组,采用Western blot和RT-qPCR法检测各组细胞中I型胶原(COL-I)、上皮钙黏素(E-cadherin)、Nrf2、GCLC和谷胱甘肽还原酶(GR)的蛋白及mRNA表达情况;采用免疫荧光法检测Nrf2入核情况;采用生化试剂盒检测各组细胞中谷胱甘肽(GSH)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果:与空白对照组相比,模型组细胞中COL-I蛋白及mRNA表达上调,E-cadherin、Nrf2、GCLC、核Nrf2和GR的蛋白及mRNA表达下调,细胞中NADPH、MDA和ROS含量升高,GSH含量和SOD活性明显减弱;与模型组相比,PNS 50和100 mg/L组细胞中COL-I蛋白及mRNA表达下调,E-cadherin、Nrf2、GCLC、核Nrf2和GR的蛋白及mRNA表达上调,细胞中NADPH、MDA和ROS含量下降,GSH含量和SOD活性明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论:PNS具有抗HaCaT细胞纤维化作用,其作用机制可能与激活Nrf2/GCLC信号通路,进而抗氧化应激改善口腔黏膜下纤维化有关。

关键词：口腔黏膜下纤维化 Nrf2/GCLC信号通路氧化应激三七总皂苷槟榔碱

血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证模型大鼠血管新生因子的影响

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时珍国医国药 2024年第4期35卷 822-826页

作者：李静郭志华刘建和钟森杰匡慧芳刘祎王明韵张秋雁湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学慢病中医智能诊断与治未病湖南省普通高等学校重点实验室湖南长沙410208 互联网+慢病中医诊治与养生智能化应用研究生联合培养基地湖南长沙>410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405

目的研究血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证模型大鼠血管新生因子的影响,揭示疗效机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血府逐瘀汤组(14.04 g·kg^(-1))、曲美他嗪组(5.4 mg·kg^(-1)),采用冠状动脉左前降支结扎法制备模型... 详细信息

目的研究血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证模型大鼠血管新生因子的影响,揭示疗效机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血府逐瘀汤组(14.04 g·kg^(-1))、曲美他嗪组(5.4 mg·kg^(-1)),采用冠状动脉左前降支结扎法制备模型,假手术组只穿线不结扎,造模成功后进行药物干预,给药14d。给药结束后,心电图检测大鼠心率及ST段变化,心脏彩超检测大鼠心功能,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、前列环素(PGI2)含量表达,HE和Masson染色观察心肌组织病理变化,免疫组化法(IHC)检测心肌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)的蛋白表达水平。结果与正常组、假手术组比较,模型组大鼠心电图心率、ST段明显升高(P<0.01);LVEF、LVFS明显下降(P<0.01),LVIDd、LVIDs明显升高(P<0.01);血清NO、PGI2含量明显下降(P<0.01),ET-1含量明显升高(P<0.01);心肌组织病理形态学显示心肌细胞排列紊乱、炎症细胞浸润、组织细胞坏死,胶原纤维明显增多;心肌组织HIF-1α、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,血府逐瘀汤组大鼠心电图心率、ST段明显下降(P<0.01);LVIDd、LVIDs明显下降(P<0.01),LVEF、LVFS明显升高(P<0.01);血清NO、PGI2含量明显上升(P<0.01),ET-1含量明显下降(P<0.01);心肌组织病理形态学显示排列较整齐,细胞炎症浸润、肿胀、坏死减少,胶原纤维明显减少;心肌组织HIF-1α、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达进一步升高(P<0.01)。结论血府逐瘀汤能够有效改善冠心病心血瘀阻证模型大鼠的心肌损伤,调节血管内皮功能,促进血管新生,其作用机制与促进心肌组织HIF-1α、VEGF-A、VEGFR-2蛋白表达有关。

关键词：血府逐瘀汤心血瘀阻证缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) 血管内皮生长因子A(VEGF-A) 血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2) 血管新生

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二氢杨梅素结构修饰及生物活性研究进展

天然产物研究与开发 2024年第3期36卷 540-553页

作者：吴聪王文茂彭彩云盛文兵湖南中医药大学药学院湖南中医药大学中医药民族医药创新发展国际实验室长沙410208 湖南乾坤生物科技有限公司张家界莓茶工程技术研究中心张家界427000

二氢杨梅素是一种二氢黄酮醇,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤以及保肝护肝等多种生物活性。由于其结构中的6个羟基导致其脂溶性差及生物利用度低,因此对其进行结构修饰以期提高生物利用度和生物活性。本文综述了二氢杨梅素的化学法结构修饰及... 详细信息

二氢杨梅素是一种二氢黄酮醇,具有抗菌、抗炎、抗肿瘤以及保肝护肝等多种生物活性。由于其结构中的6个羟基导致其脂溶性差及生物利用度低,因此对其进行结构修饰以期提高生物利用度和生物活性。本文综述了二氢杨梅素的化学法结构修饰及其生物活性等研究工作,化学修饰方法涉及醚化反应、酯化反应和金属配合物等方法,合成的衍生物具有抗病毒、抗菌、抗氧化、神经保护以及抑制肿瘤细胞增殖等活性,并且提出二氢杨梅素结构修饰过程中存在的挑战及发展方向,为更好地开发二氢杨梅素衍生物提供技术服务。

关键词：黄酮二氢杨梅素结构修饰生物活性

2-苯氨基喹啉衍生物的设计、合成及其抗肿瘤活性研究

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湖南中医药大学学报 2024年第5期44卷 802-810页

作者：宁虎林郭易华李凤凤李荣东湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南九典制药股份有限公司湖南长沙410000

目的在喹啉环的C-2位引入亲脂性苯胺基团,C-7位引入亲水性基团,得到新型2-苯氨基喹啉衍生物,探究其抗肿瘤细胞增殖活性。方法以DL-苯丙氨酸、L-苯丙氨酸和D-苯丙氨酸为原料合成关键中间体,与喹啉母核连接合成一系列2-苯氨基喹啉衍生... 详细信息

目的在喹啉环的C-2位引入亲脂性苯胺基团,C-7位引入亲水性基团,得到新型2-苯氨基喹啉衍生物,探究其抗肿瘤细胞增殖活性。方法以DL-苯丙氨酸、L-苯丙氨酸和D-苯丙氨酸为原料合成关键中间体,与喹啉母核连接合成一系列2-苯氨基喹啉衍生物。采用CCK-8法测试目标化合物对人肝癌细胞(HepG2)和非小细胞肺癌细胞(A549)的抗增殖活性。通过Autodock软件测试目标化合物与血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor,EGFR)蛋白的结合效果。结果合成了16个新型2-苯氨基喹啉衍生物,经1H NMR、LC-MS确证其结构。体外抗肿瘤实验结果表明,目标化合物T-7与T-8的抗肿瘤活性与阳性对照药吉非替尼以及乐伐替尼相当。Autodock软件预测结果与体外抗肿瘤实验结果一致。结论新型2-苯氨基喹啉衍生物具有抗肝癌和非小细胞肺癌的作用,为进一步探究喹啉衍生物类抗肿瘤药物打下基础。

关键词： 2-苯氨基喹啉肝癌肺癌细胞增殖化学合成

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复方ANBP通过调控TCA循环相关酶促进糖尿病创面愈合

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中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1283-1291页

作者：王巍侯倩黄新灵王君邹梅林丁雅容郭乐天谢晨磊黄新宇陈丽周忠志湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院烧伤疮疡整形科湖南长沙410007 湖南中医药大学血管生物学重点实验室湖南长沙410208 中国人民解放军总医院北京海淀100853 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 海南省人民医院海南海口570311

目的:制备糖尿病大鼠背部全层皮肤缺损模型,观察复方ANBP对大鼠糖尿病创面愈合的影响和作用,从线粒体功能探讨复方ANBP对大鼠糖尿病创面的促愈机制。方法:将90只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、复方ANBP组、贝复新组和烟酰胺单核苷... 详细信息

目的:制备糖尿病大鼠背部全层皮肤缺损模型,观察复方ANBP对大鼠糖尿病创面愈合的影响和作用,从线粒体功能探讨复方ANBP对大鼠糖尿病创面的促愈机制。方法:将90只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、复方ANBP组、贝复新组和烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)组5组,每组16只。于3、7和14 d观察各组创面愈合情况后取材,分析创面愈合率,用HE和Masson染色观察局部组织病理变化,多重免疫荧光和Western blot检测三羧酸(tricarboxylic acid,TCA)循环相关酶丙酮酸脱氢酶E1α1亚基(pyruvate dehydrogenase E1 subunit alpha 1,PDHA1)、柠檬酸合酶(citrate synthase,CS)、异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH1)和α-酮戊二酸脱氢酶(oxoglutarate dehydrogenase,OGDH)蛋白的表达情况,透射电镜观察创面组织线粒体数量和形态。结果:在糖尿病创面愈合进程中,空白组、复方ANBP组的组织形态学较模型组显著改善,在3、7和14 d空白组、复方ANBP组、贝复新组、NMN组创面愈合率显著升高(P<0.01)。与模型组相比,其余各组创面肉芽组织新生填补创面缺损,生成丰富的胶原纤维。在干预后3、7和14 d,与模型组对比,空白组、复方ANBP组、贝复新组、NMN组TCA循环相关酶PDHA1、CS、IDH1和OGDH荧光强度显著增强,表达数量增多。3、7和14 d模型组TCA循环相关酶水平显著降低(P<0.01),复方ANBP组、贝复新组、NMN组水平均显著升高(P<0.01)。复方ANBP干预后,复方ANBP组线粒体数量增多密度增加、线粒体形态改善空泡化率降低(P<0.05)。结论:复方ANBP可能是通过增加线粒体数量、改善线粒体形态,上调PDHA1、CS、IDH1和OGDH蛋白表达水平,改善线粒体功能,加速创面肉芽组织新生,从而达到促进大鼠糖尿病创面愈合的目的。

关键词：糖尿病创面愈合三羧酸循环线粒体

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桃红四物汤联合肝素钠对股骨粗隆间骨折患者术后下肢深静脉血栓形成的预防效果

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临床合理用药杂志 2024年第6期17卷 81-84页

作者：李昂王健湖南中医药大学长沙市410208 湖南省常德市第一中医医院 415000

目的观察桃红四物汤联合肝素钠对股骨粗隆间骨折患者术后下肢深静脉血栓形成的预防效果。方法选取2021年1月—2023年5月于常德市第一中医医院行手术治疗的股骨粗隆间骨折患者60例,按照随机抽签分组法分为对照组与观察组,各30例。术后对... 详细信息

目的观察桃红四物汤联合肝素钠对股骨粗隆间骨折患者术后下肢深静脉血栓形成的预防效果。方法选取2021年1月—2023年5月于常德市第一中医医院行手术治疗的股骨粗隆间骨折患者60例,按照随机抽签分组法分为对照组与观察组,各30例。术后对照组给予肝素钠注射液,观察组在对照组基础上联合桃红四物汤治疗,2组均用药14 d。比较2组用药前、用药14 d后视觉模拟评分法(VAS)评分、下肢肿胀程度、凝血功能指标(血浆D-二聚体、纤维蛋白原)、血清炎性指标(C反应蛋白、降钙素原)、血液流变学指标(血浆黏度、全血高切黏度、全血中切黏度),下肢深静脉血栓形成发生率。结果用药14 d后,2组VAS评分、下肢肿胀程度评分低于用药前,且观察组低于对照组(P<0.01);2组血浆D-二聚体、纤维蛋白原及血清C反应蛋白、降钙素原水平低于用药前,且观察组低于对照组(P<0.01);2组血浆黏度、全血高切黏度、全血中切黏度低于用药前,且观察组低于对照组(P<0.01)。观察组下肢深静脉血栓形成发生率低于对照组(0 vs.20.00%,χ^(2)=4.630,P=0.031)。结论桃红四物汤联合肝素钠对股骨粗隆间骨折患者术后下肢深静脉血栓的预防效果确切,能有效降低患者血浆黏度,缓解疼痛及患处肿胀程度,减轻机体炎性反应,降低术后下肢深静脉血栓形成发生风险。

关键词：股骨粗隆间骨折桃红四物汤肝素钠凝血功能血液流变学炎性因子

不同氧浓度下髓核细胞中PI3K/Akt/HIF-1α信号通路表达对延缓椎间盘退变的意义

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中国组织工程研究 2024年第28期28卷 4491-4497页

作者：周明瀚张慧郑先波徐无忌湖南中医药大学第二附属医院骨伤二科湖南省长沙市410208

背景:椎间盘退变是一种由于细胞凋亡、氧化应激、炎症反应等多种因素共同作用导致的疾病,目前认为其核心在于髓核细胞退变与凋亡,然而具体病理机制尚不明确。目的:通过探究不同氧浓度下髓核细胞中磷脂酰激醇-3-激酶(phosphatidylinosito... 详细信息

背景:椎间盘退变是一种由于细胞凋亡、氧化应激、炎症反应等多种因素共同作用导致的疾病,目前认为其核心在于髓核细胞退变与凋亡,然而具体病理机制尚不明确。目的:通过探究不同氧浓度下髓核细胞中磷脂酰激醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF-1α)信号通路的表达及髓核细胞凋亡情况,明确不同氧浓度下髓核细胞的生物学特性,探讨椎间盘退变的机制。方法:取人正常及退变髓核细胞,取第2代细胞用于影像学鉴定,取第3代细胞分别采用37℃、空气、100%湿度环境,100μmol/L CoCl_(2)浓度的Leibovitz’s培养基、100μmol/L H_(2)O_(2)浓度的10%胎牛血清培养基构建常氧、低氧及氧化应激环境,将细胞分为正常髓核细胞+低氧环境、正常髓核细胞+常氧环境、正常髓核细胞+氧化应激环境、退变髓核细胞+低氧环境、退变髓核细胞+常氧环境、退变髓核细胞+氧化应激环境6组;采用CCK-8法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR、Western-blot检测PI3K、AKT、HIF-1α的蛋白及mRNA表达情况。结果与结论:①在不同的氧浓度下,正常及退变髓核细胞的增殖率随氧浓度升高而下降,凋亡率随氧浓度升高而上升(P<0.05),以正常髓核细胞+低氧环境为对照组,细胞正常与否对凋亡率影响极为显著(P<0.001),氧浓度对髓核细胞增殖率与凋亡率影响极为显著(P<0.001),细胞是否退变与氧浓度二者交互作用对髓核细胞增殖率与凋亡率影响显著(P<0.05)。②在不同的氧浓度下,正常髓核细胞中低氧环境下PI3K、AKT、HIF-1α的蛋白及mRNA表达最高,氧化应激环境下其次,常氧环境下最低;退变髓核细胞中3项指标的蛋白和mRNA表达随氧浓度升高而下降;正常髓核细胞中PI3K、Akt的蛋白、mRNA表达均显著高于退变髓核细胞(P<0.05)。以正常髓核细胞+低氧环境为对照组,髓核细胞正常或退变及氧浓度对上述3项指标的蛋白和mRNA表达影响均极为显著,二者交互作用对3项指标的蛋白和mRNA表达影响极为显著(P<0.001)。③结果表明,髓核细胞的增殖、凋亡与氧浓度和细胞自身功能状态密切相关,PI3K/Akt/HIF-1α信号通路在不同细胞功能状态及不同氧浓度环境下具有拮抗调节作用,其机制可能与PI3K/Akt信号通路被激活,并翻译转录HIF-1α,从而维持活性氧自由基代谢平衡有关。该通路对于抑制氧化应激,拮抗髓核细胞凋亡,进而延缓椎间盘退变具有重要意义。

关键词：氧浓度髓核细胞细胞凋亡氧化应激生物学特性信号通路

桃红四物汤加减联合低分子肝素钙对股骨粗隆间骨折患者PFN-A术后下肢深静脉血栓形成的预防效果

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临床合理用药杂志 2024年第9期17卷 134-137页

作者：李昂王健湖南中医药大学长沙市410208 湖南省常德市第一中医医院骨伤科 415000

目的观察桃红四物汤加减联合低分子肝素钙对股骨粗隆间骨折防旋股骨近端髓内钉术(PFN-A)术后下肢深静脉血栓形成的预防效果。方法选取2021年1月—2023年3月常德市第一中医医院收治的股骨粗隆间骨折患者60例,均行PFN-A治疗。根据随机数... 详细信息

目的观察桃红四物汤加减联合低分子肝素钙对股骨粗隆间骨折防旋股骨近端髓内钉术(PFN-A)术后下肢深静脉血栓形成的预防效果。方法选取2021年1月—2023年3月常德市第一中医医院收治的股骨粗隆间骨折患者60例,均行PFN-A治疗。根据随机数字表法分为西医用药组(n=30)和中西医结合组(n=30)。术后西医用药组予低分子肝素钙注射液治疗14 d,中西医结合组在西医用药组基础上联合桃红四物汤加减治疗14 d。比较2组患者用药前及用药14 d后视觉模拟评分法(VAS)评分、髋关节功能评分(Harris评分)、凝血功能指标(凝血酶原时间及血浆纤维蛋白原、D-二聚体)、骨代谢指标(血清总碱性磷酸酶、骨碱性磷酸酶),术后肿胀消失时间、术后卧床时间、骨折愈合时间、术后下肢深静脉血栓形成发生情况及不良反应。结果用药14 d后,2组VAS评分、血浆纤维蛋白原、D-二聚体水平低于用药前,Harris评分及血清总碱性磷酸酶、骨碱性磷酸酶水平高于用药前,凝血酶原时间长于用药前,且中西医结合组变化幅度大于西医用药组(P<0.01)。中西医结合组术后肿胀消失时间、术后卧床时间、骨折愈合时间均短于西医用药组(P<0.01)。中西医结合组术后下肢深静脉血栓形成发生率低于西医用药组(0 vs.20.00%,χ^(2)=4.630,P=0.031)。中西医结合组与西医用药组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(10.00%vs.3.33%,χ^(2)=0.268,P=0.605)。结论股骨粗隆间骨折患者PFN-A术后应用桃红四物汤加减联合低分子肝素钙治疗,可有效预防下肢深静脉血栓形成,改善患者凝血功能及髋关节功能,缓解术后疼痛,促进骨折愈合。

关键词：股骨粗隆间骨折防旋股骨近端髓内钉术下肢深静脉血栓形成桃红四物汤低分子肝素钙髋关节功能

四磨汤对肝脾气滞型功能性消化不良大鼠胃肠动力的影响

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中国中医药信息杂志 2024年第6期31卷 117-122页

作者：周赛男罗倩刘琴张海月蔺晓源湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208

目的观察四磨汤对肝脾气滞型功能性消化不良(FD)大鼠血管活性肠肽(VIP)及其受体2(VIPR2)表达的影响,探讨其调节胃肠动力的作用机制。方法60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.305mg/kg)和四磨汤高、中、低剂量组(5.62、2.81... 详细信息

目的观察四磨汤对肝脾气滞型功能性消化不良(FD)大鼠血管活性肠肽(VIP)及其受体2(VIPR2)表达的影响,探讨其调节胃肠动力的作用机制。方法60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.305mg/kg)和四磨汤高、中、低剂量组(5.62、2.81、1.40g/kg),采用多因素造模法制备肝脾气滞型FD大鼠模型,各给药组分别予相应药物灌胃14d。观察大鼠一般情况,测定体质量、胃排空率和小肠推进率,HE染色观察胃窦和十二指肠组织形态,免疫组化染色检测十二指肠组织VIP、VIPR2阳性表达,Westernblot、RT-PCR分别检测十二指肠组织VIP、VIPR2蛋白和mRNA表达。结果与空白组比较,模型组大鼠一般状况较差,体质量、胃排空率和小肠推进率均显著降低(P<0.01),十二指肠组织VIP、VIPR2蛋白和mRNA表达均显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,四磨汤高、中剂量组和莫沙必利组大鼠体质量、胃排空率和小肠推进率均显著升高(P<0.05,P<0.01),十二指肠组织VIP、VIPR2蛋白和mRNA表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。HE染色显示,胃窦和十二指肠组织形态未发生明显改变。结论四磨汤可能通过抑制肝脾气滞型FD大鼠十二指肠组织VIP、VIPR2表达促进胃肠动力,从而改善FD。

关键词：四磨汤功能性消化不良肝脾气滞胃肠动力血管活性肠肽血管活性肠肽受体2 大鼠