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下调XBP1s通过抑制ITPR介导的线粒体功能障碍改善肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤

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器官移植 2024年第2期15卷 220-228页

作者：倪海强彭宣顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所、器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会、器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)对小鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其作用机制。方法将小鼠肾小管上皮细胞分为腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R... 详细信息

目的探讨剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)对小鼠肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其作用机制。方法将小鼠肾小管上皮细胞分为腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组。检测各组细胞凋亡水平、线粒体活性氧活性、线粒体膜电位及线粒体钙离子水平。使用染色质免疫共沉淀测序(ChIP-seq)分析XBP1s调控肌醇1,4,5-三磷酸受体(ITPR)家族的结合位点。检测各组XBP1s和ITPR家族信使RNA(mRNA)和蛋白表达水平。结果与AdshNC组比较,Ad-shNC+H/R组细胞凋亡水平更高,线粒体活性氧水平升高,线粒体膜电位降低,线粒体钙离子水平升高;与Ad-shNC+H/R组比较,Ad-shXBP1s+H/R组细胞凋亡水平较低,线粒体活性氧水平下降,线粒体膜电位升高,线粒体钙离子水平降低(均为P<0.05)。与Ad-shNC组比较,Ad-shXBP1s组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3 mRNA和蛋白相对表达量降低(均为P<0.05)。与Ad-shNC组相比,Ad-shNC+H/R组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3蛋白相对表达量升高;与Ad-shNC+H/R组相比,Ad-shXBP1s+H/R组XBP1s、ITPR1、ITPR2和ITPR3蛋白相对表达量下降(均为P<0.05)。ChIP-seq结果显示,XBP1s能够结合ITPR1的启动子和外显子、ITPR2外显子和ITPR3外显子。结论 XBP1s可能通过直接调控ITPR转录和翻译而影响线粒体相关的内质网膜结构功能,下调XBP1s能够抑制ITPR表达,改善线粒体损伤。

关键词：器官移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 肌醇1,4,5-三磷酸受体线粒体损伤内质网应激线粒体相关的内质网膜钙超载

下调GSK3β通过抑制ITPR1-GRP75-VDAC1复合体功能减轻衰老肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤

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器官移植 2024年第3期15卷 406-414页

作者：倪海强顾世琦彭宣宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室国家卫生健康委员会器官移植重点实验室中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposid... 详细信息

目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)对衰老小鼠原代肾小管上皮细胞(RTEC)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其调控机制。方法将RTEC分成为Young组即正常生长的年轻RTEC、Old组即使用Etoposide诱导的衰老RTEC、Old+Ad-shNC+H/R组即使用Etoposide诱导衰老再转染腺病毒阴性对照(AdshNC)后进行H/R处理,Old+Ad-shGSK3β+H/R组即使用Etoposide诱导衰老后再转染靶向沉默GSK3β的短发夹RNA腺病毒(Ad-shGSK3β)后进行H/R处理。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平和线粒体活性氧水平,采用免疫荧光染色法检测各组钙离子水平,采用蛋白质印迹法检测各组GSK3β、线粒体相关的内质网膜(MAM)相关蛋白肌醇1,4,5-三磷酸受体1(ITPR1)、电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)、葡萄糖调节蛋白75(GRP75)表达及磷酸化水平,采用免疫共沉淀分析GSK3β与MAM相关蛋白的相互作用。结果与Young组比较,Old组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old组比较,Old+AdshNC+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较高;与Old+Ad-shNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组细胞凋亡水平、线粒体活性氧水平及线粒体钙离子水平均较低,差异均有统计学意义(均为P平升高,而VDAC1总蛋白和磷酸化水平均下降;与Old组比较,Old+Ad-shNC+H/R组GSK3β蛋白表达不变,ITPR1和GRP75总蛋白和磷酸化水平升高,VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平增高;与Old+AdshNC+H/R组比较,Old+Ad-shGSK3β+H/R组GSK3β蛋白表达减少,ITPR1、GRP75和VDAC1总蛋白表达不变,磷酸化水平均下降。免疫共沉淀结果显示,GSK3β能够与ITPR1、GRP75和VDAC1蛋白发生相互作用。结论GSK3β在衰老RTEC中表达升高,抑制GSK3β表达能够降低ITPR1-GRP75-VDAC1复合体磷酸化水平,限制线粒体钙离子超负荷,保护线粒体功能,减少再灌注时细胞损伤。

关键词：糖原合成酶激酶3β 肾移植中老年供者缺血-再灌注损伤线粒体损伤衰老线粒体相关的内质网膜钙超载凋亡

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下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老

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器官移植 2024年第1期15卷 46-54页

作者：彭宣倪海强顾世琦宫念樵华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所器官移植教育部重点实验室、国家卫生健康委员会器官移植重点实验室、中国医学科学院器官移植重点实验室武汉430030

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)... 详细信息

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。

关键词：肾移植缺血-再灌注损伤剪接型X盒结合蛋白1 细胞衰老氧化应激沉默信息调节因子3 线粒体活性氧簇超氧化物歧化酶

中国儿童PAX2基因突变的临床表型和基因型分析

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中华肾脏病杂志 2024年第1期40卷 24-35页

作者：马雪晴何永华杨静徐荣荣杨思莹梁文沛周建华袁惠卿仇丽茹华中科技大学同济医学院附属同济医院儿童肾脏专科武汉430030 武汉市中心医院儿科武汉430030

目的总结和分析中国儿童PAX2基因突变的临床表型和基因型特征,为该疾病的监测、治疗和预后提供信息。方法该研究为病例系列分析研究。收集2014年1月至2022年12月华中科技大学同济医学院附属同济医院儿童肾脏专科PAX2基因突变患儿的临床... 详细信息

目的总结和分析中国儿童PAX2基因突变的临床表型和基因型特征,为该疾病的监测、治疗和预后提供信息。方法该研究为病例系列分析研究。收集2014年1月至2022年12月华中科技大学同济医学院附属同济医院儿童肾脏专科PAX2基因突变患儿的临床资料,提取患儿外周血基因组DNA并进行全外显子组测序。检索PubMed、Medline、中国知网和万方数据库,归纳和总结中国PAX2基因突变患儿的临床、病理及基因型改变特征,并与该中心病例进行比较。结果该研究纳入13例PAX2基因突变患儿,男9例,女4例,其中尿检查异常12例,影像学检查双肾体积偏小7例,肾囊肿5例。临床表型为先天性肾脏和尿路畸形8例,肾-视神经乳头缺损综合征1例,血尿或蛋白尿3例。5例患儿接受了肾活检,表现为局灶节段性肾小球硬化C3肾小球病1例,局灶节段性肾小球硬化1例,薄基底膜病变1例,IgA肾病2例。13例患儿基因检测结果显示9例为新生突变,其中4种为新突变类型:c.321G>A、c.213-8C>G、c.63C>A、c.449C>T。76dupG(p.V26Gfs*28)突变型2例。文献检索到中国儿童PAX2基因突变病例51例,男32例,女19例。影像学检查示双肾体积偏小8例,肾囊肿13例。临床表型为先天性肾脏和尿路畸形28例,肾-视神经乳头缺损综合征17例,血尿或蛋白尿6例。7例接受过肾活检,局灶节段性肾小球硬化2例,微小病变1例,系膜增生性肾小球肾炎1例,IgA肾病1例,膜性肾病1例,局灶增生硬化性紫癜性肾炎伴肾小球肥大1例。34例为新生突变,12例突变来自父亲或母亲,其中5例父亲或母亲无临床表现,肾功能正常。76dupG(p.V26Gfs*28)突变型11例。结论中国儿童PAX2基因突变的临床表型和基因型具有多样性,PAX2基因突变最常见的临床表型为先天性肾脏和尿路畸形,c.76dupG(p.V26Gfs*28)为最常见的PAX2基因突变型。

关键词：儿童突变基因型 PAX2基因肾-视神经乳头缺损综合征遗传性肾脏病

布托啡诺调节cGAS/STING信号通路对脊髓损伤大鼠神经细胞炎症的影响

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现代药物与临床 2024年第5期39卷 1085-1091页

作者：邵恳黄杨袁振武郭小丽荆门市中心医院、荆楚理工学院附属荆门市中心医院麻醉科湖北荆门448001

目的探讨布托啡诺对脊髓损伤大鼠神经细胞炎症的影响及其机制。方法复制脊髓损伤大鼠模型,将大鼠分为假手术组、模型组、布托啡诺(100μg/kg)组、布托啡诺+2',3'-cGAMP(100μg/kg布托啡诺+500μg/kg 2',3'-cGAMP)组,对大鼠进行运动功能... 详细信息

目的探讨布托啡诺对脊髓损伤大鼠神经细胞炎症的影响及其机制。方法复制脊髓损伤大鼠模型,将大鼠分为假手术组、模型组、布托啡诺(100μg/kg)组、布托啡诺+2',3'-cGAMP(100μg/kg布托啡诺+500μg/kg 2',3'-cGAMP)组,对大鼠进行运动功能评分,苏木精–伊红(HE)染色检测脊髓组织病理变化,TUNEL染色检测细胞凋亡,ELISA检测脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平,免疫荧光染色检测小胶质细胞,Western blotting检测脊髓组织环磷酸鸟苷-磷酸腺苷酸合成酶(c GAS)、干扰素基因刺激因子(STING)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、IL-1β蛋白表达。结果与模型组比较,布托啡诺组脊髓组织损伤减轻,炎症细胞减少,坏死细胞减少,Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分显著升高,脊髓组织细胞凋亡率、小胶质细胞及TNF-α、IL-1β、IL-18水平,c GAS、STING、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平显著降低(P平,c GAS、STING、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论布托啡诺通过抑制c GAS/STING信号通路激活,抑制小胶质细胞激活及炎症反应,改善大鼠脊髓损伤。

关键词：布托啡诺脊髓损伤神经炎症环磷酸鸟苷-磷酸腺苷酸合成酶/干扰素基因刺激因子信号通路肿瘤坏死因子-α Nod样受体蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1

基于CiteSpace分析我国中医药领域乳腺癌治疗的研究热点及趋势

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实用中医内科杂志 2024年第4期38卷 80-83,I0009-I0011页

作者：穆玉晶孔健达汪唐顺北京中医药大学东直门医院北京100700 曲阜师范大学体育科学学院山东曲阜273100

目的利用CiteSpace 5.8软件分析中国中医药领域乳腺癌治疗近20年来的研究热点和趋势,探究其未来发展方向。方法在中国期刊网数据库(CNKI)中对2000年1月—2022年4月的中医药领域乳腺癌治疗文献进行检索,以“乳腺癌”和“中医药”为主题,... 详细信息

目的利用CiteSpace 5.8软件分析中国中医药领域乳腺癌治疗近20年来的研究热点和趋势,探究其未来发展方向。方法在中国期刊网数据库(CNKI)中对2000年1月—2022年4月的中医药领域乳腺癌治疗文献进行检索,以“乳腺癌”和“中医药”为主题,导入NoteExpress软件,然后根据纳入和排除标准进行人工检索,以Refworks格式导入CiteSpace 5.8软件,以该软件来可视化分析纳入文献的作者、机构、关键词及其他信息。结果共收录2207篇论文,文献数量总体呈现出上升趋势,核心作者58人,发文最多的作者为刘胜,作者团队内部合作较稳定,但团队之间合作较少。研究机构主要在中医药类高校,各机构间联系相对紧密,呈现出一定地域性。相关关键词主要为化疗、生活质量、中药、凋亡等,关键词聚类共有95个,前十个聚类涵盖临床试验、动物实验和机制研究以及药物实验,关键词凸现前18个关键词表明,最近的研究热点集中在“免疫功能”“疗效”“自噬”方面。结论中医药领域乳腺癌治疗的相关研究成果丰富而广泛,研究热点主要集中在中医药应用提高乳腺癌患者的生活质量、提高免疫功能、辅助化疗和细胞凋亡机制。而细胞自噬和免疫功能的研究为近年来的研究前沿,这为该领域未来研究提供了方向,但仍需要更多高质量研究支持。

关键词：乳腺癌中医药可视化分析 CiteSpace 知识图谱

乳腺癌干细胞相关信号通路和生物标志物的研究进展

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现代肿瘤医学 2024年第5期32卷 941-947页

作者：穆玉晶孔健达汪唐顺史晓光北京中医药大学东直门医院北京100007 曲阜师范大学体育科学学院山东济宁273100

乳腺癌患者死亡率较高的主要原因为放化疗耐药导致癌症复发与转移,研究发现,乳腺癌复发转移与乳腺癌干细胞的存在相关,肿瘤内的乳腺癌干细胞具有自我更新和分化能力,且对传统放化疗具有一定抵抗性。而乳腺癌干细胞相关的信号通路和生物... 详细信息

乳腺癌患者死亡率较高的主要原因为放化疗耐药导致癌症复发与转移,研究发现,乳腺癌复发转移与乳腺癌干细胞的存在相关,肿瘤内的乳腺癌干细胞具有自我更新和分化能力,且对传统放化疗具有一定抵抗性。而乳腺癌干细胞相关的信号通路和生物标志物可为乳腺癌靶向治疗提供有力依据。目前已知乳腺癌干细胞与Wnt/β-catenin、Notch、NRF2、PI3K/AKT/mTOR和Hedgehog/Sonic Hedgehog等信号通路相关并有CD24、CD44、CD49、钙黏蛋白3、CD133、EpCAM、Erbb2/HER-2、CXCR1等标志物,这些标志物及信号通路有望用作生物标记,作为乳腺癌诊疗、复发进展及转移倾向性等方面的标志,但在未来研究中仍存在一定挑战。因此,综述与乳腺癌干细胞相关信号通路和生物标志物并进行展望,以期为乳腺癌治疗药物研究提供理论支持。

关键词：乳腺癌乳腺癌干细胞信号通路细胞标志物靶向治疗综述

重组人血小板生成素对多发性骨髓瘤患者化疗后血小板恢复的影响

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哈尔滨医科大学学报 2024年第1期58卷 10-14页

作者：李可芯赵薇薇刘瑶高新宇王连杰周芳卉常玉莹刘娟陈丽艳王巍哈尔滨医科大学附属第二医院血液内科黑龙江哈尔滨150081

目的分析重组人血小板生成素(recombinant human thrombopoietin,rhTPO)促进多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者化疗后血小板(platelet,PLT)恢复的疗效及安全性。方法收集2021年6月~2022年12月62例接受化疗后30 d内发生肿瘤化疗相关性血小板减少症(chemotherapy-associated thrombocytopenia,CIT)的MM患者进行回顾性分析。根据化疗后重组人血小板生成素使用情况将62例患者分为rhTPO组(30例)和对照组(32例),rhTPO组PLT0.05),PLT≥25×10^(9)/L的恢复时间差异亦无统计学意义(P>0.05);但rhTPO组的PLT≥50×10^(9)/L的恢复时间、PLT≥100×10^(9)/L的恢复时间均较对照组短,治疗后PLT明显高于对照组,血小板输注量低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。rhTPO组疗效为83.3%,所有患者PLT均恢复至25×10^(9)/L以上,未达到PLT≥50×10^(9)/L的患者2例;对照组疗效为78.1%,所有患者PLT均恢复至25×10^(9)/L以上,未达到PLT≥50×10^(9)/L的患者3例。rhTPO组未见明显不良反应。结论rhTPO可促进MM患者化疗后血小板恢复、减少血小板输注量,并且安全性较好。

关键词：多发性骨髓瘤重组人血小板生成素化疗血小板输注化疗相关性血小板减少症

槐耳颗粒治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎的临床疗效与安全性观察

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江西中医药 2024年第4期55卷 49-53页

作者：周瑶刘舒雷赵丹龚婕刘清刘丽芳湖南中医药大学第一附属医院长沙410021

目的:探究槐耳颗粒(HR)治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎(GLM)的临床疗效、安全性。方法:选取2019年12月—2022年2月在湖南中医药大学第一附属医院乳腺科门诊就诊的60例符合纳入标准的GLM患者,治疗方案为槐耳颗粒(20 g/次,3次/d)冲服,治疗时间... 详细信息

目的:探究槐耳颗粒(HR)治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎(GLM)的临床疗效、安全性。方法:选取2019年12月—2022年2月在湖南中医药大学第一附属医院乳腺科门诊就诊的60例符合纳入标准的GLM患者,治疗方案为槐耳颗粒(20 g/次,3次/d)冲服,治疗时间为6个月。比较患者治疗前及治疗3、6个月后的肿块大小、乳房疼痛评分、脓肿范围、皮色改变范围,比较患者血液标本中白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)、C反应蛋白(CRP)、白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)等免疫炎症指标的变化,评估临床疗效;记录治疗过程中的不良反应,评估安全性;6个月后,统计复发率。结果:纳入的60例患者中,脱落2例,剔除1例。与治疗前比较,槐耳颗粒治疗3个月后及治疗6个月后彩超下测量的乳腺肿块直径、体表肿块体积缩小,乳腺疼痛评分、症状总积分减少,患者血液标本中的WBC、NEUT、CRP、IL-2的水平明显降低,差异具有统计学意义(P平上升,差异具有统计学意义(P平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:槐耳颗粒治疗GLM临床疗效确切,用药安全性较高。

关键词：槐耳颗粒肉芽肿性小叶性乳腺炎临床观察