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血清miR-155、miR-24检测对宫颈癌同步放化疗后肿瘤残留的早期预测价值

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全科医学临床与教育 2024年第10期22卷 870-873,877页

作者：刘翼胡春秀童月芳达彬浙江省医疗健康集团衢州医院(浙江衢化医院)肿瘤放疗科浙江衢州324000

目的分析血清miR-155、miR-24表达水平对宫颈癌同步放化疗(CCRT)后肿瘤残留的早期预测价值。方法回顾性选取行CCRT治疗的宫颈癌患者300例为研究对象,按照7∶3的分配比例分为建模组210例和验证组90例。建模组患者根据术后MRI结果分为残留... 详细信息

目的分析血清miR-155、miR-24表达水平对宫颈癌同步放化疗(CCRT)后肿瘤残留的早期预测价值。方法回顾性选取行CCRT治疗的宫颈癌患者300例为研究对象,按照7∶3的分配比例分为建模组210例和验证组90例。建模组患者根据术后MRI结果分为残留组81例与非残留组129例。收集建模组患者CCRT前临床基线资料与实验室检验指标,筛选独立影响因素,构建宫颈癌CCRT后早期肿瘤残留列线图预测模型,并通过验证组资料收集配合完成预测模型的验证与价值分析。结果宫颈癌患者血清miR-155、宫旁浸润、FIGO分期是影响患者CCRT后早期肿瘤残留的独立危险因素,血清miR-24是影响患者CCRT后早期肿瘤残留的独立保护因素(OR分别=1.77、3.22、8.55、0.18,P均<0.05)。基于以上独立影响因素构建了宫颈癌CCRT后早期肿瘤残留预测模型。建模组ROC曲线下面积(AUC)为0.84(95%CI:0.79~0.89),区分度良好;验证组ROC曲线AUC为0.90(95%CI:0.81~0.98)。内、外部校准曲线与标准曲线均有较好贴合度。内、外部决策曲线显示模型能提供显著的临床净收益。结论血清miR-155、miR-24表达水平对宫颈癌CCRT后早期肿瘤残留具有良好的预测价值,结合宫旁浸润、FIGO分期等临床特征构建列线图预测模型可为早期肿瘤残留高风险患者的有效筛选提供数据支持。

关键词： miR-155 miR-24 宫颈癌同步放化疗肿瘤残留列线图

元宝枫油对衰老果蝇生理指标及肠道菌群的影响

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食品科学 2024年第3期45卷 76-83页

作者：李秀娟魏晶晶柴学军刘亚飞黄俊朗刘伟陈树林朱晓岩赵善廷西北农林科技大学动物医学院神经生物学实验室陕西杨凌712100 西安医学院基础医学部基础医学研究所陕西西安710021 西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

探究元宝枫油对衰老果蝇生理指标及肠道菌群的影响。在基础培养基中分别添加10、20 g/kg和40 g/kg的元宝枫油对野生黑腹果蝇进行干预,观察果蝇寿命、爬行能力、嗅觉记忆能力和热耐受能力等行为学变化情况;检测超氧化物歧化酶(superoxide... 详细信息

探究元宝枫油对衰老果蝇生理指标及肠道菌群的影响。在基础培养基中分别添加10、20 g/kg和40 g/kg的元宝枫油对野生黑腹果蝇进行干预,观察果蝇寿命、爬行能力、嗅觉记忆能力和热耐受能力等行为学变化情况;检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力;收集果蝇中肠,进行16S rRNA基因扩增子测序,检测肠道微生物组的变化。结果表明,与对照组相比,不同含量的元宝枫油干预均能显著延长果蝇的寿命(P<0.000 1),其中,20 g/kg元宝枫籽油抗衰老效果最佳,平均延长寿命31%。另外,20 g/kg元宝枫油干预可明显改善衰老果蝇的爬行能力、嗅觉记忆能力和热耐受能力,提高SOD和GSH-Px活力。衰老改变了果蝇肠道微生物的组成和结构,线性判别分析结果显示衰老果蝇中Enterobacteriaceae、Gluconobacter和Morganella morganii 3类细菌相对丰度增加,而元宝枫油抑制了衰老过程中以上3类细菌相对丰度的增加。综上,元宝枫油具有抗衰老作用,可改善果蝇的生理功能衰退,延长寿命,其机制可能与改变衰老果蝇肠道微生物的丰富度、均匀度和菌群结构,从而调节肠道菌群和提高抗氧化能力有关。

关键词：元宝枫油果蝇生理肠道菌群

基于网络药理学及体外实验探讨过氧麦角甾醇对乳腺癌MCF-7细胞的作用机制

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中国中药杂志 2024年第13期49卷 3627-3635页

作者：罗然邓思琦赵音旭王璐任文康邹宇林宇卜明齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006

基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇(EP)抗乳腺癌的靶点及作用机制,并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选,构建靶点网络及蛋白-蛋白互作(PPI)网络,对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP... 详细信息

基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇(EP)抗乳腺癌的靶点及作用机制,并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选,构建靶点网络及蛋白-蛋白互作(PPI)网络,对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制活性,克隆形成实验检测EP对MCF-7细胞增殖影响;采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞的凋亡情况、线粒体膜电位及活性氧水平的变化情况;通过Western blot法检测EP对B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶蛋白(caspase)-7、活化的caspase-7(cleaved caspase-7)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸激酶B(AKT)蛋白表达水平的影响情况。结果显示,经网络药理学预测,得出EP与乳腺癌有173个共同靶点;KEGG富集分析结果显示EP治疗乳腺癌结果主要在癌症通路、PI3K-AKT信号通路、细胞衰老信号通路、病毒致癌作用等信号通路;MTT结果显示,与对照组相比,EP组MCF-7细胞的活性明显降低,呈时间-浓度依赖趋势;EP能够抑制乳腺癌细胞MCF-7集落形成;采用10、20、40μmol·L^(-1)的EP作用MCF-7细胞24 h后,MCF-7细胞总凋亡率均显著升高,线粒体膜电位均显著降低,活性氧水平均显著升高;此外,MCF-7细胞经过EP处理后,细胞内Cyt C、Bax、cleaved caspase-7蛋白的表达水平上升,p-PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达水平下降。研究表明,EP可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,减少集落形成,其机制可能与PI3K-AKT通路介导线粒体凋亡途径有关。

关键词：过氧麦角甾醇乳腺癌 MCF-7细胞网络药理学细胞凋亡线粒体膜电位活性氧

膈肌浅快呼吸指数联合最大吸气压力对机械通气患者撤机结局的预测价值

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浙江医学 2024年第12期46卷 1275-1279页

作者：钟林姜建平盛菊萍平湖市第一人民医院(杭州医学院附属平湖医院)重症医学科 314200

目的探讨膈肌浅快呼吸指数(D-RSBI)联合最大吸气压力(MIP)在机械通气患者撤机结局中的预测价值。方法回顾性选取2022年9月至2023年9月平湖市第一人民医院重症医学科收治的通过自主呼吸试验(SBT)计划撤机的气管插管机械通气患者68例为研... 详细信息

目的探讨膈肌浅快呼吸指数(D-RSBI)联合最大吸气压力(MIP)在机械通气患者撤机结局中的预测价值。方法回顾性选取2022年9月至2023年9月平湖市第一人民医院重症医学科收治的通过自主呼吸试验(SBT)计划撤机的气管插管机械通气患者68例为研究对象。所有患者在SBT 30 min后撤机前测量膈肌移动度和MIP,同时记录呼吸频率,计算D-RSBI。根据撤机结局分为撤机成功组和撤机失败组。采用ROC曲线评估D-RSBI、MIP单独和两者联合对撤机结局的预测效能。结果68例患者中,撤机失败18例(26.47%),撤机成功50例(72.53%)。撤机失败组患者呼吸频率、D-RSBI均高于撤机成功组,膈肌移动度、MIP均低于撤机成功组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,D-RSBI联合MIP预测撤机成功的AUC为0.933,优于D-RSBI(0.759)和MIP(0.899)单独预测,且两者联合预测的特异度高于单一指标。结论D-RSBI和MIP对机械通气患者撤机结局均有较好的预测价值,且两者联合预测效果更佳。

关键词：膈肌超声膈肌浅快呼吸指数最大吸气压力机械通气撤机

基于超声评估的膈肌指标在重症肺炎机械通气患者脱机中的应用

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医学影像学杂志 2024年第3期34卷 35-38页

作者：钟林汪敏张洁杭州医学院附属平湖医院平湖市第一人民医院ICU浙江嘉兴314200

目的评价基于超声评估的膈肌及其衍生指标在重症肺炎机械通气患者脱机拔管中的预测价值。方法选取收治的重症肺炎接受有创机械通气治疗的72例患者。所有患者均达到脱机标准,在通过自主呼吸试验(SBT)后给予脱机拔管,观察脱机48 h内患者... 详细信息

目的评价基于超声评估的膈肌及其衍生指标在重症肺炎机械通气患者脱机拔管中的预测价值。方法选取收治的重症肺炎接受有创机械通气治疗的72例患者。所有患者均达到脱机标准,在通过自主呼吸试验(SBT)后给予脱机拔管,观察脱机48 h内患者的呼吸、氧合等状态,并根据脱机结局分为脱机成功组和脱机失败组。比较两组患者的基本资料和脱机前的监测指标;与RSBI作对比,利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价DD、DTF、D-RSBI三个指标对患者脱机成功的预测价值。结果脱机成功组机械通气时间(210.40±92.28)h、RR(15.62±3.34)次/min、DD(16.41±3.23)mm、DTF(32.98±7.03)%、D-RSBI(1.19±0.26)次/min·mm,脱机失败组机械通气时间(339.90±126.13)h、RR(18.43±4.86)次/min、DD(14.14±3.10)mm、DTF(24.00±5.53)%、D-RSBI(1.69±0.34)次/min·mm,差异有统计学意义(P<0.05)。利用ROC曲线,将尤登指数最大者作为最佳临界值,RSBI最佳临界值为60.69次(/min·L),AUCROC为0.79;DD最佳临界值为12.60 mm,AUCROC为0.70;DTF最佳临界值为30.00%,AUCROC为0.84;D-RSBI最佳临界值为1.36次/min·mm,AUCROC为0.87。其中D-RSB预测脱机成功ROC曲线下面积最大,预测价值最优。结论DD、DTF、DRSBI对重症肺炎机械通气脱机均有较好的预测价值,其中D-RSBI预测效果最佳。

关键词：超声检查膈肌重症肺炎机械通气脱机

超声联合呼吸力学指标对重症肺炎患者撤机结局的预测价值

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中国医药导报 2024年第14期21卷 18-21页

作者：钟林汪敏浙江医院平湖分院浙江省平湖市第一人民医院重症医学科浙江平湖314200

目的评价超声联合呼吸力学指标对重症肺炎患者撤机结局的预测价值。方法选取2022年5月至2023年5月浙江省平湖市第一人民医院重症监护病房收治的重症肺炎计划撤机的72例患者作为研究对象。所有患者在通过30 min自主呼吸试验后拔除气管... 详细信息

目的评价超声联合呼吸力学指标对重症肺炎患者撤机结局的预测价值。方法选取2022年5月至2023年5月浙江省平湖市第一人民医院重症监护病房收治的重症肺炎计划撤机的72例患者作为研究对象。所有患者在通过30 min自主呼吸试验后拔除气管插管。拔管前使用超声评估肺功能和膈肌功能,记录呼吸力学参数。根据撤机结局将患者分为失败组(20例)和成功组(52例),比较两组临床指标,利用受试者操作特征曲线评价肺部超声积分(LUS)、膈肌移动度(DD)、膈肌增厚分数(DTF)、浅快呼吸指数(RSBI)、气道闭合压(P0.1)对患者撤机结局的预测价值。结果成功组DD、DTF大于失败组,机械通气时间,呼吸频率、LUS、RSBI、P0.1小于失败组(P<0.05)。logistic多因素分析显示,机械通气时间、呼吸频率、LUS、DD、DTF、RSBI、P0.1是撤机结局的影响因素(P<0.05)。LUS、DD、DTF、RSBI、P0.1预测撤机成功的曲线下面积分别是0.85、0.70、0.84、0.78、0.75,灵敏度分别是75.0%、63.5%、86.5%、65.0%、80.0%,特异度分别是84.6%、65.0%、75.0%、84.6%、61.5%。根据最佳临界值对各指标赋值0或1分,计算出5个指标积分之和得出综合积分,其预测撤机成功的曲线下面积为0.94,临界值为2.5分,灵敏度为85.0%,特异度为88.5%。结论对于重症肺炎患者,撤机过程中通过超声评估肺功能和膈肌功能,并结合呼吸力学参数,可能更利于临床撤机决策。

关键词：重症肺炎肺超声膈肌超声呼吸力学撤机

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浙江省全科医生对未分化疾病诊治的观点研究

中华全科医学 2024年第2期22卷 321-325页

作者：娄铮刘颖任菁菁杭州医学院附属天台医院全科医学科浙江台州317200 浙江大学医学院附属第一医院全科医学科浙江杭州310003

目的了解全科医生对未分化疾病(MUD)诊治现状的观点,为MUD的综合管理提供建议。方法于2019年6—8月在浙江省11个地级市采用分层整群抽样的方式抽取全科医生425名,自行设计调查问卷对全科医生进行调查,问卷内容包括全科医师的基本信息和... 详细信息

目的了解全科医生对未分化疾病(MUD)诊治现状的观点,为MUD的综合管理提供建议。方法于2019年6—8月在浙江省11个地级市采用分层整群抽样的方式抽取全科医生425名,自行设计调查问卷对全科医生进行调查,问卷内容包括全科医师的基本信息和全科医师对MUD诊治的观点,采用“李克特量表”评分法进行评分,并对问卷结果进行统计分析。结果共发放问卷425份,回收有效问卷325份。男性127人(39.1%),女性198人(60.9%),年龄为(38.41±7.74)岁。调查发现54.1%的全科医生在接诊MUD患者时感到有压力,41.6%不知该如何处置MUD,绝大部分全科医生(72.0%)认为值得尝试去帮助这些患者,70.5%的全科医生认为MUD在诊断上具有挑战性,而68.3%的全科医生则认同MUD在治疗上具有挑战性。综合医院工龄越高的男性全科医生,接诊MUD的意愿越高。全科医生普遍认为MUD给患者带来巨大压力。年龄、工龄、职称、学历、工作所在地、医院级别对全科医生诊治MUD患者的能力均存在影响。结论目前全科医生对MUD诊治信心不足,需建设以综合医院全科医学科为主导、多学科及社区医院联合的MUD诊疗中心,制定规范化MUD诊疗处置流程,实施早期培训计划,培养全科医生的全科思维,提升沟通、诊疗能力,建立和谐的医患关系及医患共同决策个体化方案。

关键词：未分化疾病全科医生诊疗中心共同决策

微小染色体维持蛋白2基因诱导性敲除宫颈癌HeLa细胞系的建立及对DNA复制的影响

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实用医学杂志 2024年第2期40卷 133-139页

作者：李萍汤拓郑皑雪张鲁平王涛洪鲜邓志会齐齐哈尔医学院医药科学研究院黑龙江齐齐哈尔161006

目的利用诱导性CRISPR/Cas9技术建立微小染色体维持蛋白2(MCM2)基因敲除的宫颈癌HeLa细胞系,并探究MCM2对DNA复制及复制压力的影响。方法使用诱导性CRISPR/Cas9系统TLCV2,构建MCM2敲除HeLa细胞系;并分为对照组(Control)、敲除1组(KO1)... 详细信息

目的利用诱导性CRISPR/Cas9技术建立微小染色体维持蛋白2(MCM2)基因敲除的宫颈癌HeLa细胞系,并探究MCM2对DNA复制及复制压力的影响。方法使用诱导性CRISPR/Cas9系统TLCV2,构建MCM2敲除HeLa细胞系;并分为对照组(Control)、敲除1组(KO1)和敲除2组(KO2)。通过Western blot、EdU掺入实验、实时定量PCR、免疫荧光、CCK-8等实验,分析MCM2敲除对DNA复制和羟基脲诱导复制压力的影响。结果经过诱导后CRISPR/Cas9系统有效地敲除MCM2基因,并影响MCM2-7复合物的稳定。与对照细胞相比,MCM2敲除细胞DNA复制能力显著下降,同时Cyclin A1、Cyclin E1和CDK4的mRNA表达水平降低。在DNA复制压力下,MCM2敲除降低了细胞的存活能力、DNA损伤修复能力,并增加基因组的不稳定性。结论MCM2基因敲除降低正常条件下HeLa细胞的DNA复制能力,并降低复制压力后细胞的存活能力。本研究成功地构建了诱导性MCM2基因敲除HeLa细胞系,为进一步研究MCM2基因在宫颈癌中的作用及其生物学功能奠定了基础。

关键词：微小染色体维持蛋白2 基因敲除宫颈癌 HeLa细胞 DNA复制

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兔抗人FAM21多克隆抗体的制备与鉴定

中国免疫学杂志 2024年

作者：汤拓卢彦基李文龙王涛洪鲜邓志会齐齐哈尔医学院医学技术学院齐齐哈尔医学院医药科学研究院蛋白质结构与功能研究室

目的：制备兔抗人FAM21多克隆抗体并分析抗体特异性。方法：以编码人FAM21全长基因的表达质粒为模板，PCR扩增其2431-3006碱基的核苷酸序列，连接至pGEX-6p-1原核表达载体，构建表达FAM21第811-1002氨基酸片段的pGEX6p-1-FAM21重组表达... 详细信息

目的：制备兔抗人FAM21多克隆抗体并分析抗体特异性。方法：以编码人FAM21全长基因的表达质粒为模板，PCR扩增其2431-3006碱基的核苷酸序列，连接至pGEX-6p-1原核表达载体，构建表达FAM21第811-1002氨基酸片段的pGEX6p-1-FAM21重组表达质粒。将重组质粒转化至BL21（DE3）感受态大肠杆菌中并进行诱导表达，用GST融合蛋白纯化磁珠纯化蛋白。将纯化后的GST融合蛋白作为抗原免疫新西兰兔，收集的抗血清经过含GST蛋白的琼脂糖柱进行纯化。在FAM21基因沉默的HeLa细胞中，通过Western blot和免疫荧光实验检测抗体的特异性。结果：成功构建pGEX-6p-1-FAM21原核表达质粒，并在BL21（DE3）大肠杆菌中成功诱导表达，纯化后的GST融合蛋白分子量约为50kDa，免疫新西兰兔后纯化的抗体滴度大于1：128 000，并且具有较高的特异性。结论：成功构建了pGEX-6p-1-FAM21原核表达质粒，并制备了可用于Western blot和免疫荧光检测的兔抗人FAM21多克隆抗体。

关键词： FAM21 原核表达蛋白表达与纯化多克隆抗体