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短链酰基辅酶A脱氢酶在人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

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中华危重病急救医学 2019年第6期31卷 756-761页

作者：李忠洪舒朝辉廖英勤刘培庆路静王平王桂香臧林泉周四桂广东药科大学临床药学系广东广州510006 中山大学药学院药理与毒理学实验室广东广州510006 深圳市药品检验研究院广东深圳518029

目的观察短链酰基辅酶A脱氢酶(SCAD)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡中的变化,探讨其与细胞凋亡的关系.方法取正常培养2~3 d的HUVEC,采用叔丁基过氧化氢(tBHP)刺激HUVEC建立细胞凋亡模型,分别用0、10、20、30、40、50μmol/L的tBHP干预HU... 详细信息

目的观察短链酰基辅酶A脱氢酶(SCAD)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡中的变化,探讨其与细胞凋亡的关系.方法取正常培养2~3 d的HUVEC,采用叔丁基过氧化氢(tBHP)刺激HUVEC建立细胞凋亡模型,分别用0、10、20、30、40、50μmol/L的tBHP干预HUVEC 12 h,用50μmol/L的tBHP干预HUVEC 0、3、6、9、12 h,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)分别检测SCAD的mRNA及蛋白表达,以筛选tBHP干预HUVEC的最佳浓度和时间.用小干扰RNA(siRNA)干扰HUVEC的SCAD基因(siRNA274、siRNA414、siRNA679),通过检测SCAD mRNA和蛋白表达及SCAD酶活性,以筛选siRNA最佳干扰序列.然后以最佳干扰序列及tBHP同时干预HUVEC,通过检测细胞活性、细胞凋亡率、SCAD酶活性、SCAD mRNA和蛋白表达、活性氧(ROS)含量、三磷酸腺苷(ATP)含量和游离脂肪酸(FFA)含量,观察SCAD对HUVEC细胞凋亡的影响.结果①随tBHP浓度增加及干预时间延长,细胞活性及SCAD mRNA和蛋白表达均逐渐降低,呈浓度和时间依赖性,以50μmol/L tBHP干预HUVEC 12 h各指标下降最为显著.②在siRNA274、siRNA414、siRNA679 3条干扰序列中,siRNA679转染在降低SCAD mRNA和蛋白表达及酶活性方面最为显著.③与空白对照组相比,siRNA679干扰后细胞活性明显下降(A值:0.48±0.09比1.00±0.09,P<0.01),细胞凋亡率明显增加〔(29.96±2.09)%比(2.90±1.90)%,P<0.01〕,HUVEC中SCAD mRNA和蛋白表达、SCAD酶活性及ATP含量均显著下降〔SCAD mRNA(2-ΔΔCt):0.50±0.16比1.34±0.12,SCAD/α-Tubulin:0.67±0.11比1.00±0.06,SCAD酶活性(kU/g):0.38±0.04比0.53±0.04,ATP含量(μmol/g):0.14±0.02比0.19±0.01,均P<0.05〕,FFA及ROS含量显著增加〔FFA(nmol/g):0.84±0.07比0.47±0.04,ROS(平均荧光强度):647.5±23.7比434.2±46.5,均P<0.01〕.siRNA转染组各指标与tBHP诱导的HUVEC凋亡趋势一致.结论SCAD表达失调可能参与HUVEC细胞凋亡过程,上调SCAD可能成为干预细胞凋亡的重要环节之一.

关键词：短链酰基辅酶A脱氢酶人脐静脉内皮细胞细胞凋亡叔丁基过氧化氢活性氧游离脂肪酸

SCAD重组腺病毒治疗大鼠心肌梗死后心力衰竭的实验研究

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中国药理学通报 2020年第5期36卷 608-615页

作者：苏永少廖英勤钟小艺马智超刘培庆路静臧林泉周四桂广东药科大学药学院临床药学系中山大学药学院药理与毒理学实验室广东广州510006

目的研究短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-CoA dehydrogenase, SCAD)重组腺病毒对大鼠心肌梗死后心力衰竭的影响,探究SCAD对心力衰竭的作用。方法采用冠状动脉左前降支结扎术(left anterior descending coronary artery, LAD)构... 详细信息

目的研究短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-CoA dehydrogenase, SCAD)重组腺病毒对大鼠心肌梗死后心力衰竭的影响,探究SCAD对心力衰竭的作用。方法采用冠状动脉左前降支结扎术(left anterior descending coronary artery, LAD)构建大鼠心肌梗死后心力衰竭模型,将SCAD重组腺病毒注射到心尖室壁方向。实验共分6组:Sham+NS组、LAD+NS组、Sham+Ad-GFP组、Sham+Ad-SCAD组、LAD+Ad-GFP组、LAD+Ad-SCAD组。检测各组大鼠收缩压(systolic blood pressure,SBP)、观察心脏形态变化。检测SCAD mRNA、蛋白表达、酶活性、ATP含量、游离脂肪酸含量等变化。结果与Sham组相比,LAD+NS组出现明显的心力衰竭。与LAD+NS组相比,LAD+Ad-SCAD组术后SBP明显升高;胶原沉积明显减少,心肌纤维化明显改善。与Sham+NS组相比,LAD+NS组SCAD mRNA、蛋白表达、酶活性以及ATP含量明显降低,游离脂肪酸含量明显升高。LAD组大鼠经过SCAD重组腺病毒治疗后,上述变化均得到明显逆转。结论 SCAD重组腺病毒在心脏过表达,能显著改善由于LAD术后引起的心力衰竭。

关键词：短链酰基辅酶A脱氢酶重组腺病毒心力衰竭脂肪酸β氧化线粒体能量代谢

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分子药理学课程的教学改革与探索

中国教育技术装备 2015年第12期 141-142页

作者：徐立朋周四桂暨南大学药学院新药研究所 510632 广东药学院

对分子药理学课程建设进行探索,可以使研究生更全面地掌握分子药理学的基本理论,培养研究生的科学精神和科研能力,激发其兴趣、求知欲和创新意识,为他们今后进行科研工作奠定良好、扎实的专业基础。

关键词：分子药理学课程建设研究生教学

PBL结合LBL教学法在研究生分子药理学课程教学中的应用探索

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中国教育技术装备 2020年第18期 86-88页

作者：苏永少冯冰虹周四桂广东药科大学药学院 510006

在分子药理学教学中,以教师为中心的LBL教学模式已不能满足医药类研究生的培养需求。为解决LBL教学模式存在的问题,引入PBL教学法,并与LBL教学法相互结合,明显改善了分子药理学课程的教学效果。阐述PBL结合LBL教学法在研究生分子药理学... 详细信息

在分子药理学教学中,以教师为中心的LBL教学模式已不能满足医药类研究生的培养需求。为解决LBL教学模式存在的问题,引入PBL教学法,并与LBL教学法相互结合,明显改善了分子药理学课程的教学效果。阐述PBL结合LBL教学法在研究生分子药理学课程教学中的初步探索。

关键词： PBL教学法 LBL教学法分子药理学教学改革

SCAD重组腺病毒对自发性高血压大鼠血管重构的影响

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中国动脉硬化杂志 2020年第6期28卷 475-482页

作者：钟小艺李忠洪廖英勤苏永少马智超刘培庆路静臧林泉周四桂广东药科大学临床药学系广东省广州市510006 中山大学药学院药理与毒理学实验室广东省广州市510006

目的探究尾静脉注射短链酰基辅酶A脱氢酶(SCAD)重组腺病毒能否改善自发性高血压大鼠(SHR)血管重构。方法实验分为6组:Wistar+NS组、Wistar+GFP组、Wistar+Ad-SCAD组、SHR+NS组、SHR+GFP组和SHR+Ad-SCAD组。腺病毒包装的SCAD和GFP纯化后... 详细信息

目的探究尾静脉注射短链酰基辅酶A脱氢酶(SCAD)重组腺病毒能否改善自发性高血压大鼠(SHR)血管重构。方法实验分为6组:Wistar+NS组、Wistar+GFP组、Wistar+Ad-SCAD组、SHR+NS组、SHR+GFP组和SHR+Ad-SCAD组。腺病毒包装的SCAD和GFP纯化后,以尾静脉方式注射给药8周。采用超声心动图检测大鼠心功能情况;采用无创血压仪检测大鼠的血压变化;主动脉HE染色、天狼星红染色、DHE染色、TUNEL染色、EVG染色,观察血管重构。采用实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA表达变化、Western blot检测相关蛋白表达变化,观察游离脂肪酸、一氧化氮(NO)和ATP含量变化。结果 (1)尾静脉注射SCAD重组腺病毒,大鼠主动脉中SCAD蛋白出现过表达,mRNA水平增高,SCAD酶活性增加;(2)在病理状态下,增加主动脉中SCAD表达,可以降低血压,改善心功能,改善血管管腔大小,减少胶原沉积,减少血管活性氧(ROS)的生成和细胞凋亡;(3)在病理状态下,SCAD的表达增加可减少血清和主动脉中游离脂肪酸的含量,增加组织中的ATP水平,激活内皮型一氧化氮合酶(eNOS)磷酸化,增加主动脉NO的生成。结论自发性高血压大鼠主动脉SCAD的表达增加能逆转高血压血管重构,可能与其减少血清中游离脂肪酸的含量、增加NO水平、减少活性氧生成、消除氧化应激有关。

关键词：短链酰基辅酶A脱氢酶重组腺病毒高血压血管重构

药学拔尖创新人才培养的改革成果分析——以广州医科大学药学院为例

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中国科技期刊数据库科研 2023年第5期 1-4页

作者：王敏余细勇吴晓倩张灵敏梁璐广州医科大学药学院广东广州511436

随着社会对拔尖创新人才综合素质要求的不断提高,采取个性化的人才培养模式,依托学科优势打造培养平台,使一部分优秀学生脱颖而出,进而实现培养拔尖创新人才高水平目标,已成为高校药学专业人才培养的重要研究课题。该文以广州医科大学... 详细信息

随着社会对拔尖创新人才综合素质要求的不断提高,采取个性化的人才培养模式,依托学科优势打造培养平台,使一部分优秀学生脱颖而出,进而实现培养拔尖创新人才高水平目标,已成为高校药学专业人才培养的重要研究课题。该文以广州医科大学药学院为例,从创新教材、教改论文及项目、虚拟仿真实验教学、社会实践及人才培养的质量分析等方面,分析了药学院拔尖创新人才培养成果的实施与应用。并从更新传统教学理念、“双师型”教师队伍建设、构建特色课程体系、“前期趋同、后期分流”的特色“导师负责制”教育及多元化创新人才评价机制等方面,突出了广州医科大学药学院拔尖创新人才培养的主要特色创新。

关键词：药学拔尖创新人才成果实施及应用