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慢病毒沉默Piezo1蛋白与人骨髓间充质干细胞成骨分化及TAZ的表达

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中国组织工程研究 2024年第1期28卷 12-19页

作者：韦雨柔田佳庆何宪顺詹芝玮魏腾飞林天烨何伟魏秋实广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510378 广东省中医骨伤研究院广东省广州市510378 广州中医药大学第三附属医院关节中心广东省广州市510378

背景:Piezo1作为机械敏感蛋白与成骨分化密切相关,TAZ也被证明参与调节成骨分化,但Piezo1调控人骨髓间充质干细胞成骨分化时TAZ是否参与其中目前尚不明确,故研究其具体机制对防治股骨头坏死具有重要意义。目的:探讨Piezo1对人骨髓间充... 详细信息

背景:Piezo1作为机械敏感蛋白与成骨分化密切相关,TAZ也被证明参与调节成骨分化,但Piezo1调控人骨髓间充质干细胞成骨分化时TAZ是否参与其中目前尚不明确,故研究其具体机制对防治股骨头坏死具有重要意义。目的:探讨Piezo1对人骨髓间充质干细胞成骨分化及TAZ表达的影响。方法:构建靶向Piezo1的siRNA,转染至293T细胞,通过RT-qPCR检测其沉默效率并筛选出Piezo1-Homo-2337进行包装,使用荧光染色检测其最佳感染复数值。Piezo1沉默重组慢病毒进一步被转染至人骨髓间充质干细胞中,通过RT-qPCR、Western blot检测其沉默效果;通过茜素红染色、碱性磷酸酶活性分析、免疫荧光染色、RT-qPCR及Western blot检测分析沉默Piezo1对人骨髓间充质干细胞成骨分化能力及TAZ表达的影响。结果与结论:①与正常组、阴性对照组比较,转染si-Piezo1后人骨髓间充质干细胞中Piezo1的mRNA及蛋白水平明显降低;②与阴性对照组比较,si-Piezo1组碱性磷酸酶活性明显降低,钙沉积明显减少;③与阴性对照组比较,si-Piezo1组成骨相关基因Runx2、OPN、DLX5、osteocalcin、β-catenin及TAZ的mRNA水平明显降低。si-Piezo1组TAZ、β-catenin的蛋白表达明显降低;相反,si-Piezo1组p-TAZ、p-β-catenin的蛋白表达明显增加;④与阴性对照组比较,免疫荧光染色结果提示si-Piezo1组人骨髓间充质干细胞中TAZ、β-catenin的表达较少;⑤结果表明Piezo1可促进人骨髓间充质干细胞的成骨分化,沉默Piezo1后人骨髓间充质干细胞的成骨能力明显降低,同时TAZ的表达也同样降低。

关键词：股骨头坏死人骨髓间充质干细胞 Piezo1 TAZ 成骨分化

补气活血合剂干预脑缺血再灌注模型大鼠相关因子及自噬蛋白的表达

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中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1152-1158页

作者：陈玉宁蒋颖廖翔宇陈琼君熊亮刘悦刘通广州中医药大学第五临床医学院广东省广州市510095 广东省第二中医院针灸康复科广东省广州市510095

背景:补气活血合剂治疗气虚痰瘀型缺血性脑卒中有显著的临床疗效,然而其具体起效机制尚不明确。目的:观察补气活血合剂对脑缺血再灌注模型大鼠血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、脑源性神经营养因子及自噬蛋白Beclin1、p6... 详细信息

背景:补气活血合剂治疗气虚痰瘀型缺血性脑卒中有显著的临床疗效,然而其具体起效机制尚不明确。目的:观察补气活血合剂对脑缺血再灌注模型大鼠血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、脑源性神经营养因子及自噬蛋白Beclin1、p62表达的影响。方法:取40只雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、补气活血合剂组与自噬抑制剂组,每组10只。模型组、补气活血合剂组与自噬抑制剂组建立大脑缺血再灌注损伤模型,补气活血合剂组大鼠再灌注2 h后灌胃给予补气活血合剂(6.49 g/kg,每天分3次给药),自噬抑制剂组大鼠再灌注2 h后灌胃给予补气活血合剂(6.49 g/kg,每天分3次给药)+腹腔注射自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(灌胃前2 h注射,灌胃第1-3天注射),假手术组、模型组灌胃给予等量生理盐水,连续灌胃给药7 d。末次给药24 h后,进行大鼠神经功能、脑梗死体积、脑组织形态及大脑缺血皮质区血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、脑源性神经营养因子及自噬蛋白Beclin1、p62表达检测。结果与结论:①Zea-Longa评分结果显示,造模后大鼠神经功能受到严重损伤,补气活血合剂组大鼠神经功能损伤轻于模型组、自噬抑制剂组(P0.05);⑤Western blot检测结果显示,与假手术组相比,模型组Beclin1蛋白表达降低(P<0.05),p62蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,补气活血合剂组Beclin1蛋白表达升高(P<0.05),p62蛋白表达降低(P<0.05);与补气活血合剂组相比,自噬抑制剂Beclin1蛋白表达降低(P<0.05),p62蛋白表达升高(P<0.05);⑥结果表明,补气活血合剂可通过促进自噬来减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。

关键词：补气活血合剂缺血再灌注神经功能缺损自噬血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子脑源性神经营养因子 Beclin1 p62

血浆中Nesfatin-1水平变化与股骨头坏死的关系

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中国组织工程研究 2020年第20期24卷 3117-3121页

作者：沈莹姗陈哓俊庞凤祥黄俊远陈镇秋周迎春何伟魏秋实广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510407 广州中医药大学第一附属医院医学检验科广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院三骨科保髋区广东省广州市510405 广州中医药大学髋关节研究中心广东省广州市510405

背景:Nesfatin-1作为一种新摄食调节因子,近年来发现与骨科疾病有密切联系。关于Nesfatin-1与股骨头坏死的相关性尚未明确。目的:通过分析股骨头坏死患者血浆中Nesfatin-1水平变化,探讨Nesfatin-1与股骨头坏死发展进程的相关性。方法:2... 详细信息

背景:Nesfatin-1作为一种新摄食调节因子,近年来发现与骨科疾病有密切联系。关于Nesfatin-1与股骨头坏死的相关性尚未明确。目的:通过分析股骨头坏死患者血浆中Nesfatin-1水平变化,探讨Nesfatin-1与股骨头坏死发展进程的相关性。方法:2016年5至12月在广州中医药大学第一附属医院三骨科住院治疗的股骨头坏死患者86例和健康体检者86例,分别入选股骨头坏死组和对照组。股骨头坏死患者中ARCO分期Ⅱ期13例、Ⅲ期26例、Ⅳ期47例;激素性26例,酒精性40例,创伤性12例,特发性8例。使用酶联免疫吸附法检测外周静脉血血浆Nesfatin-1水平,分析比较不同ARCO分期、不同病因及塌陷前后患者Nesfatin-1水平的差异。该研究经广州中医药大学第一附属医院伦理委员会批准(编号:20140307),每位患者在纳入研究前均已签署知情同意书。结果与结论:①股骨头坏死组患者血浆Nesfatin-1水平高于对照组(P=0.000);②不同股骨头坏死病因之间Nesfatin-1水平差异无显著性意义(P=0.956);③不同ARCO分期之间血浆Nesfatin-1水平差异有显著性意义(P=0.011),呈正相关关系;④股骨头塌陷后血浆Nesfatin-1水平高于塌陷前,差异有显著性意义(P=0.003),呈正相关关系;⑤ROC曲线分析提示Nesfatin-1水平在诊断股骨头坏死塌陷时具有一定的敏感性和特异性(分别为52.05%,92.31%);⑥结果表明,血浆Nesfatin-1水平变化与股骨头坏死的发展过程关系密切,Nesfatin-1水平可以反映其坏死程度,对股骨头坏死的临床诊治具有一定的指导意义。

关键词：股骨头坏死 Nesfatin-1 成骨分化炎性反应股骨头塌陷

文献计量学与可视化分析法评估Perthes病的研究现状与发展趋势

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中国组织工程研究 2019年第28期23卷 4503-4509页

作者：沈莹姗龚水帝何晓铭庞凤祥陈哓俊李伟峰陈立新杨帆杨鹏陈镇秋何伟魏秋实广州中医药大学广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院三骨科广东省广州市510405 广州中医药大学髋关节研究中心广东省广州市510405

背景:小儿股骨头坏死又称为Perthes 病,自从被发现以来受到人们的广泛关注,对该病的研究与探索也在不断深入。目的:旨在探讨Perthes 病在全球的研究现状与发展趋势。方法:通过Wed of Science 核心合集的科学引文索引扩展数据库检索1994... 详细信息

背景:小儿股骨头坏死又称为Perthes 病,自从被发现以来受到人们的广泛关注,对该病的研究与探索也在不断深入。目的:旨在探讨Perthes 病在全球的研究现状与发展趋势。方法:通过Wed of Science 核心合集的科学引文索引扩展数据库检索1994 年至2018 年7 月30 日关于Perthes 病的相关文献出版物,用文献计量学的方法对所收集数据进行数据统计及研究。使用Vos viewer软件进行文献耦合分析及共现分析等,分析Perthes 病在全球范围内的研究现状及发展趋势。结果与结论:①共纳入1 106 篇研究,全球的研究发表物呈波动式逐年递增,而其中美国在该领域的研究保持领先地位,研究文献被引用次数及H 指数均远超排名第2 位的国家;②《JOURNAL OF PEDIATRICORTHOPAEDICS》杂志的出版物发表量排名榜首,达到125 篇;③“TEXAS SCOTTISH RITE HOSPCHILDREN”是文献发表物数量贡献最大的机构;④而研究方向可以分为5 大集群:“治疗方法、疾病特征、临床诊断、发病机制和骨代谢疾病”,其中“评分”的研究是近年来新提出的关注点;⑤由目前的全球趋势可以预测,关于Perthes 病的研究还有很大的探索空间,对应的文献出版物数量将不断增加,其中美国在这一领域保持着明显的领先地位。目前的研究集中于Perthes 病中的“疾病特征”,而“评分”是该领领域新的关注点。

关键词：文献计量学可视化 Perthes病文献耦合分析共现分析骨代谢疾病国家自然科学基金

应用文献计量学与可视化分析探讨骨与关节结核的全球研究现状及发展趋势

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中国组织工程研究 2020年第20期24卷 3234-3239页

作者：何晓铭龚水帝郑小龙沈莹姗庞凤祥陈立新李伟峰杨帆刘少军何伟魏秋实广州中医药大学广东省广州市510405 广州中医药大学髋关节研究中心广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院三骨科保髋区广东省广州市510405

背景:探讨近年来骨与关节结核的研究现状及发展趋势,有利于更加深入地认识骨与关节结核,把握好研究方向,可能会给骨与关节结核的早期诊断、及时治疗提供线索。目的:分析骨与关节结核的全球研究现状及发展趋势。方法:以骨与关节结核为主... 详细信息

背景:探讨近年来骨与关节结核的研究现状及发展趋势,有利于更加深入地认识骨与关节结核,把握好研究方向,可能会给骨与关节结核的早期诊断、及时治疗提供线索。目的:分析骨与关节结核的全球研究现状及发展趋势。方法:以骨与关节结核为主题,通过科学引文索引扩展数据库Wed of Science检索1994至2018年关于骨与关节结核的文献出版物,并使用文献计量学的方法对进行数据统计及研究。使用Vos viewer软件进行共现分析及合著分析等可视化转化,分析近年骨与关节结核的研究现状及热点转变。结果与结论:①引文研究共纳入2761篇文献,全球文献发表呈逐年上升趋势,其中美国发表的文献数量、被引用次数及H指数均最高,中国在全球文献发表量排行第3,文献被引用总次数排行第12,H指数排在第13;②《PloS One》《Journal of immunology》和《Infection and immunity》杂志的出版物发表量分列前三,中南大学、开普敦大学和伦敦大学学院是文献发表物数量前三的机构;③该领域的研究目前可分为6大类:早期诊断与治疗、脊柱结核的治疗与并发症、骨与关节结核的发病特点、分子生物学检测、细胞学和免疫学研究,GeneXpert MTB/RIF在骨与关节结核的应用可能是当前的研究热点;④骨与关节结核的研究在不断深化,对应的文献出版物数量将不断增加,其中美国是这一领域的较大贡献者;目前的研究主要集中于骨与关节结核的诊断与治疗,GeneXpert MTB/RIF与骨关节结核的关系可能是当前的研究热点。

关键词：骨与关节结核文献计量学可视化分析共现分析合著分析国家自然科学基金广东省自然科学基金

老年性骨质疏松症中医证型与脂代谢中细胞外信号调节激酶的相关性

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中国组织工程研究 2022年第29期26卷 4704-4708页

作者：廖荣臻陈德骏何敏聪黄幸儒方坚朱根福广州中医药大学第三附属医院(广东省中医骨伤研究院) 广东省广州市510378 广州中医药大学第三临床医学院广东省广州市510006

背景:既往研究发现脂肪细胞的增加伴随着骨密度和骨量的减少,而脂肪细胞的分化受细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)1/2信号通路的影响。目前骨质疏松患者不同证型脂代谢中ERK1/2的表达特点及其相关性研... 详细信息

背景:既往研究发现脂肪细胞的增加伴随着骨密度和骨量的减少,而脂肪细胞的分化受细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)1/2信号通路的影响。目前骨质疏松患者不同证型脂代谢中ERK1/2的表达特点及其相关性研究较少,因此设计此试验研究其中内在联系。目的:探讨老年性骨质疏松症中医证型与ERK的相关性及特点。方法:对符合要求的94例老年骨质疏松症患者进行中医证型分组,其中肝肾亏虚型39例、脾肾阳虚型30例、气滞血瘀型25例。患者入院第2天,采集晨起空腹外周静脉血,检测总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A1、载脂蛋白B水平。一般患者入院第3天行人工髋关节置换术留取股骨颈开路挖出的松质骨标本,置于冻存管-80℃保存,采用Western blot检测股骨颈髓腔松质骨中ERK1/2及p-ERK1/2的蛋白表达量。结果与结论:①3种证候类型骨质疏松症患者的血清三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇水平相比,差异有显著性意义(P<0.05)。脾肾阳虚型骨质疏松症患者血清三酰甘油水平高于肝肾亏虚型及气滞血瘀型(P=0.009,P=0.035);肝肾亏虚型骨质疏松症患者血清高密度脂蛋白胆固醇水平高于脾肾阳虚型及气滞血瘀型(P=0.004,P=0.017);气滞血瘀型骨质疏松症患者血清低密度脂蛋白胆固醇水平低于脾肾阳虚型及肝肾亏虚型(P=0.009,P=0.003)。②气滞血瘀型骨质疏松症患者松质骨p-ERK1及p-ERK2水平高于脾肾阳虚型及肝肾亏虚型(p-ERK1:P=0.000,P=0.000;p-ERK2:P=0.024,P=0.000),肝肾亏虚型骨质疏松症患者p-ERK2水平高于脾肾阳虚型(P=0.006)。③脾肾阳虚型与三酰甘油值呈正相关(r=0.124,P=0.006),与p-ERK1/2值呈负相关(r=-0.512,P=0.013);气滞血瘀型与p-ERK1/2值呈正相关(r=0.331,P=0.000);④结果表明,脾肾阳虚型骨质疏松症患者脂代谢与其他2种类型存在较大差异,且与p-ERK1/2呈负相关。

关键词：骨质疏松症骨痿骨代谢中医证型脂代谢血脂 ERK1/2 蛋白髋关节置换

本体感觉和平衡训练对全膝关节置换后膝关节功能恢复影响的Meta分析

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中国组织工程研究 2019年第16期23卷 2601-2607页

作者：卢岩岩许学猛刘文刚杜建平陈国材陈国茜邱博凡郑乙吴祖贵广州中医药大学第五临床医学院广东省广州市510095 广东省第二中医院广东省广州市510095

背景:近年来有关本体感觉和平衡训练对全膝关节置换后膝关节康复影响方面的临床报道越来越多,其在改善术后平衡和姿势控制能力、降低跌倒风险方面的疗效得到肯定,但由于各研究水平、质量不一,其有效性尚缺乏循证学依据。目的:系统评价... 详细信息

背景:近年来有关本体感觉和平衡训练对全膝关节置换后膝关节康复影响方面的临床报道越来越多,其在改善术后平衡和姿势控制能力、降低跌倒风险方面的疗效得到肯定,但由于各研究水平、质量不一,其有效性尚缺乏循证学依据。目的:系统评价本体感觉和平衡训练对全膝关节置换后早期膝关节的影响。方法:计算机检索中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普(VIP)、万方数据库(Wanfang Data)、Pub Med、web of science、Cochrane Library、Embase等数据库资源,检索关于本体感觉和平衡训练对全膝关节置换后膝关节影响的临床随机对照试验。应用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果与结论:①共纳入12篇文献,688例患者;②Meta分析结果显示,本体感觉和平衡训练组在起立-行走计时测试(WMD=-1.94,95%CI:-3.47至-0.41,P=0.01)、Berg平衡量表(WMD=6.48,95%CI:4.49-8.48,P <0.000 01)、单腿站立平衡试验(WMD=2.47,95%CI:2.07-2.87,P <0.000 01)、Biodex稳定系统指数(WMD=-0.42,95%CI:-0.68至-0.15,P=0.002)、美国纽约特种外科医院膝关节功能评分(WMD=3.65,95%CI:1.72-5.58,P=0.000 2)、美国纽约特种外科医院膝关节稳定性评分(WMD=1.35,95%CI:0.71-2.00,P <0.000 1)、欧洲五维健康量表评分(WMD=7.83,95%CI:1.11-14.54,P=0.02)方面优于常规治疗组;③而在角度复位差(WMD=-3.23,95%CI:-7.55-1.10,P=0.14)、美国纽约特种外科医院膝关节疼痛(WMD=2.22,95%CI:-0.43-4.86,P=0.10)、屈曲畸形(WMD=0.40,95%CI:-0.69-1.49,P=0.47)、关节活动度(WMD=1.06,95%CI:-0.86-2.98,P=0.28)、肌力(WMD=1.27,95%CI:-0.03-2.57,P=0.05)评分改善方面2组间差异无显著性意义;④基于有限的临床文献研究,此Meta分析认为,与常规训练相比,本体感觉和平衡训练可以有效改善全膝关节置换后早期患者平衡能力、膝关节功能和生存质量,在疼痛、屈曲畸形、关节活动度、肌力改善方面的结果需慎重解读,未来仍需要更大样本、更远期随访的高质量随机对照试验来进一步证实其疗效。

关键词：本体感觉训练平衡训练全膝关节置换膝关节 Meta分析

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股骨头坏死动物模型的特点

中国组织工程研究 2019年第35期23卷 5690-5696页

作者：葛颖杰蔡淼鑫李林鹏陈浩彦庞智晖樊粤光广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院全国中医髋关节病重点专科广东省广州市510405 樊粤光广东省名中医传承工作室广东省广州市510405

背景:股骨头坏死的发病机制尚未完全明确,由于缺乏能够可靠地模拟人股骨头坏死各阶段的实验动物模型,阻碍了该疾病预防和治疗的研究进展。目的:总结归纳近年股骨头坏死动物模型建模方法、建模动物的进展和存在的不足,为模型改进提供依... 详细信息

背景:股骨头坏死的发病机制尚未完全明确,由于缺乏能够可靠地模拟人股骨头坏死各阶段的实验动物模型,阻碍了该疾病预防和治疗的研究进展。目的:总结归纳近年股骨头坏死动物模型建模方法、建模动物的进展和存在的不足,为模型改进提供依据和方向。方法:以"股骨头坏死;动物模型"或"femoral head necrosis;animal model或osteonecrosis of femoral head;animal model"为检索词检索CNKI中国知网数据库和PubMed数据库中2000年1月至2019年4月关于建立股骨头坏死动物模型的相关文献。结果与结论:根据纳入标准共获得51篇文章。近年来有关研究建立股骨头坏死动物模型的文献不多,而且建立的模型大多处在模拟股骨头坏死早期阶段,无法进展到股骨头坏死的主要塌陷阶段,目前尚缺一个理想的高度模拟人股骨头坏死病理过程的动物模型来评价当前的防治方法,故股骨头坏死动物模型仍然是一个需要我们不断完善和改进的难点。

关键词：股骨头坏死动物模型四足动物二足动物模型特点造模方法研究进展理想模型

以3D图形观察不同中医证型股骨头坏死髋关节形态差异:评价非手术保髋的可行性

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中国组织工程研究 2020年第24期24卷 3773-3779页

作者：林天烨杨鹏魏秋实徐景利邹启昭熊冰朗赖启忠赵赫然陈镇秋何伟张庆文广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510405 广州中医药大学第一附属医院关节骨科广东省广州市510000

背景:有研究发现中医证型分布与股骨头坏死的形态差异表现之间存在一定的联系。目的:通过3D图形观察不同中医证型股骨头坏死髋关节的形态差异,同时评价规范化综合非手术保髋治疗股骨头坏死的疗效。方法:选择2016年12月至2017年2月广州... 详细信息

背景:有研究发现中医证型分布与股骨头坏死的形态差异表现之间存在一定的联系。目的:通过3D图形观察不同中医证型股骨头坏死髋关节的形态差异,同时评价规范化综合非手术保髋治疗股骨头坏死的疗效。方法:选择2016年12月至2017年2月广州中医药大学第一附属医院行非手术保髋治疗的股骨头坏死患者73例(108髋),按中医证型分为肾虚血瘀组47髋、痰瘀蕴结组30髋、气滞血瘀组31髋,拍摄双髋正蛙位X射线片与CT螺旋扫描,测量患髋中心边缘角、Sharp角、髋臼上下径、髋臼前后径、髋臼深度、髋臼外展角、髋臼前倾角。纳入2016年12月至2017年2月广州中医药大学第一附属医院接受中医药、物理治疗、功能锻炼等规范化综合保髋治疗股骨头坏死患者88例(131髋),治疗前及治疗后2年采用目测类比评分与Harris评分患髋临床功能,并通过X射线片评估治疗区坏死情况。试验已通过广州中医药大学第一附属医院伦理委员会批准,批准号:NO.Y[2019]118。结果与结论:①X射线显示,不同中医证型组间Sharp角、中心边缘角存在明显差异(P中医证型组间外展角存在差异(P<0.001),其中肾虚血瘀型组最大;肾虚血瘀型组髋臼深度小于气滞血瘀型组(P<0.05);3组间髋臼上下径、髋臼前后径、髋臼前倾角无明显差异;③综合保髋治疗2年后,88例患者的疼痛与髋关节功能得到明显改善,影像学评估显示改善89髋、不变21髋,改善率为67.9%;④结果表明,不同证型之间的髋关节形态存在差异,肾虚血瘀型髋臼发育情况较气滞血瘀型、痰瘀蕴结型差,规范化综合非手术保髋治疗早、中期股骨头坏死在短期内能够明显改善患者症状。

关键词：股骨头坏死可视化形态证型保守治疗中医差异可行性